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生物选修一专题二精选习题
选修一第2讲 微生物的培养与应用
真题演练
1.(2013江苏卷)某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。
下列叙述正确的是
A.培养基分装到培养皿后进行灭菌
B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线
C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养
D.培养过程中每隔一周观察一次
2.(2011·高考海南卷)野生型大肠杆菌能在基本培养基上生长,用射线照射野生型大肠杆菌得到一突变株,该突变株在基本培养基上培养时必须添加氨基酸甲后才能生长。
对这一实验结果的解释,不合理的是
A.野生型大肠杆菌可以合成氨基酸甲
B.野生型大肠杆菌代谢可能不需要氨基酸甲
C.该突变株可能无法产生氨基酸甲合成所需的酶
D.该突变株中合成氨基酸甲所需酶的功能可能丧失
3.(2010·山东理综)生物柴油是一种可再生的清洁能源,其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗。
科学家发现,在微生物M产生的脂肪酶作用下,植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如下图)
(1)用于生产生物柴油的植物油不易挥发,宜选用____________、____________方法从油料作物中提取。
(2)筛选产脂肪酶的微生物M时,选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供________,培养基灭菌采用的最适方法是________法。
(3)测定培养液中微生物数量,可选用________法直接计数;从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测______________,以确定其应用价值;为除低生物柴油生产成本,可利用________技术使脂肪酶能够重复使用。
(4)若需克隆脂肪酶基因,可应用耐热DNA聚合酶催化的________技术。
能力提升
1.细菌培养过程中,分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理方法,这些方法可依次用于消灭或杀灭哪些部位的杂菌
A.接种针、手、培养基 B.培养基、手、接种针
C.手、接种针、培养基D.培养基、接种针、手
2.稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。
下列相关叙述错误的是
A.操作中需要将菌液进行一系列的梯度稀释B.需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面
C.不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落
D.操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理
3.(2012·北京海淀期中)下列关于微生物的培养和分离的叙述中,不正确的是
A.细菌能在液体培养基中以二分裂方式迅速扩增B.噬菌体或大肠杆菌可在蛋白胨培养基中增殖
C.灭菌的目的是消灭与培养菌竞争的杂菌D.稀释涂布法分散细菌得到单菌落的效果更好
4.(2011·上海普陀调研)下列是关于“微生物接种以及单个菌落观察”实验操作的叙述,其中错误的是
A.配制牛肉膏蛋白胨固体培养基,经高温、高压灭菌后倒入培养皿备用
B.接种前接种环须经酒精灯火焰灼烧C.接种时应用无菌刮铲在培养基表面涂匀
D.倒置培养皿,37℃恒温培养48~72小时后观察
5.如图是微生物平板划线示意图。
划线的顺序为12345。
下列操作方法正确的是
A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌B.划线操作须在火焰上进行
C.在5区域中才可以得到所需菌落D.在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌
6.(2012·山西四校联考)研究分解纤维素的微生物,对于人们在工业生产中的应用有着积极的意义。
请回答:
(1)下面是分离纤维素分解菌的实验流程,请补全所缺内容:
土壤取样→①________→梯度稀释→②__________________→③________________________。
(2)下边的培养基配方是①过程中使用的培养基。
纤维素粉
5g
NaNO3
1g
Na2HPO4·7H2O
1.2g
KH2PO4
0.9g
MgSO4·7H2O
0.5g
KCl
0.5g
酵母膏
0.5g
水解酪素
0.5g
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL
该配方是液体培养基还是固体培养基?
___________________________________。
该培养基对纤维素分解菌怎样进行选择?
_________________________________。
过程①的目的是_______________________________________________________。
(3)过程②用到的培养基中加入了一种染料是_______________________________。
(4)如何证明过程②用到的培养基没有被杂菌污染?
_________________________。
(5)菌落周围出现透明圈说明纤维素分解菌能分泌______________,并最终把纤维素分解成______________。
(6)在用平板计数法对分离的纤维素分解菌数目统计时,统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,这是因为_______________________________________________________________。
7.(2012·济南二模)生产实践中应用的菌种主要来自土壤,从土壤中分离微生物的实验流程如下:
土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。
请回答下列有关问题:
(1)将土壤浸出液接种到特定培养基上,可以将酵母菌从混杂的微生物群体中分离出来,获得纯种酵母菌,这一过程叫做________。
在培养酵母菌的过程中,对培养基、接种环常采用的灭菌方法分别是________。
(2)在使用酵母菌发酵生产酒精的过程中,影响酵母菌酒精发酵的主要因素有________,常使用________的方法从发酵液中提取纯酒精。
(3)从土壤中分离纤维素分解菌,最好选择在________环境中采集土样,所选择的培养基应以________作为唯一碳源。
(4)纤维素分解菌能够合成纤维素酶,为了使纤维素酶反复使用,可以对纤维素酶进行________处理,处理的方法有吸附法、共价键结合法和________法。
8(2013新课标卷II)[生物——选修1:
生物技术实践]
临床试用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。
实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。
回答下列问题:
(1)为了从样本中获取致病菌菌落,可用_______法或_________法将样本借种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。
(2)取该单菌落适当稀释,用______法接种于固体培养基表面,在37℃培养箱中培养24h,使其均匀生长,布满平板。
(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A,B,C,D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A_______;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B_____;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明________;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的________。
(4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选择抗生素_______。
9.某学校打算开辟一块食用菌栽培基地,以丰富学生的劳动技术课内容。
首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理,准备食用菌栽培所需的各种原料和用具,然后从菌种站购来各种食用菌菌种。
请回答下列问题:
(1)对买回来的菌种进行扩大培养,首先制备试管培养基,写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料:
、、、、。
其中提供氮源的是;提供能源的主要物质是。
(2)微生物在生长过程中对各种成分所需量不同,配制培养基时各成分要有合适的。
在烧杯中加入琼脂后要不停地,防止。
(3)将配制好的培养基分装到试管中,加棉塞后将若干个试管捆在一起,包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入高压蒸汽灭菌锅中灭菌,压力kPa,温度,时间。
灭菌完毕拔掉电源,待锅内压力自然降到0时,将试管取出。
如果棉塞上沾有培养基,此试管应。
(4)使用高压蒸汽灭菌锅时应注意,先向锅内倒入适量的水。
把锅内水加热煮沸并将其中原有的彻底排出后再将锅密闭。
10.分析下面培养基的配方:
KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂。
请回答:
(1)在该培养基的配方中,为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是
和。
(2)该培养基为培养基(按物理状态分),因为培养基中含有。
(3)想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用?
如果有,又是如何进行选择的?
。
(4)在以尿素作为唯一氮源的培养基上分离的微生物一定是尿素分解菌吗?
。
为什么?
。
11.某化工厂的污水池中,含有一种有害的、难于降解的有机化合物A。
研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。
实验的主要步骤如下图所示。
请分析完成下列问题:
(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选,这种培养基属于培养基。
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的,实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是。
(3)在上述实验操作过程中,获得纯净“目的菌”的关键是。
(4)转为固体培养时,常采用平板划线的方法进行接种,此过程所用的接种工具是,操作时采用灭菌的方法。
(5)实验结束后,使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉,这样做的目的是。
12.选择培养是微生物学中最强有力的技术手段之一。
主要是指利用不同微生物间生命活动特点的不同,制定环境条件,使仅适应该条件的微生物旺盛生长,从而使其在群落中的数量大大增加,人们能够更容易地从自然界中分离得到所需的特定微生物。
选择条件可根据所需分离的微生物的特点,从物理、化学、生物及多个方面进行综合选择,如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等许多方面。
如图描述了采用选择培养方法从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。
(1)本实验所需培养基为,碳源为。
(2)实验原理是。
(3)①—③重复培养的目的是。
(4)⑤的菌落中大部分是降解的微生物。
(5)⑥为组,⑦为组,设置⑥的目的是。
(6)在接种操作过程中为防止污染应注意的事项是。
13.根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型,利用选择性培养基和鉴别培养基,结合显微镜检以及菌落特征,可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌分离开来。
下面是分离筛选的方法步骤,请根据各个步骤的条件,填写空格中的内容。
首先配制一系列不同性质的固体培养基,然后进行灭菌。
再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上进行培养。
⑴用无氮培养基可以筛选出 。
⑵用不含有机碳源的选择培养基可以筛选出 。
⑶酵母菌的筛选需要在常规培养基另加入 。
⑷用加入了较高浓度的NaCl的选择培养基可以筛选出 ,或者根据菌落的颜色呈现 色,将其挑取单独培养。
⑸利用伊红-美蓝培养基培养混合菌,菌落呈 色,并带有金属光泽的是 ,挑取单个菌落培养。
结合显微镜检和进一步用伊红-美蓝培养基鉴别来确定。
⑹在无氧条件下培养混合菌, 可以生长,加入一定浓度的乳酸,使培养基pH充分降低,可抑制 菌的生长,利用菌落特征,结合显微镜检,选取生长优势的菌落,即可分离出 。
14.在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时,出现如下问题,请给予解答:
(1)一位同学用稀释倍数为106的稀释液在培养基中涂布了3个平板,统计的菌数数为21、212和256,该同学以这3个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。
你认为这一结果是否接近真实值?
如果需要改进,如何改进_________________________________________________________________________________________
(2)A同学筛选出的菌落为150个,其他同学只选择出50个,并且他在设计实验时并没有设置对照。
你认为A同学结果产生的原因可能有哪些?
_________________________。
如何设计对照实验排除可能影响实验结果的因素:
_________________________________。
16.微生物与人类关系密切。
虽然有些微生物能使动植物患病,但多数微生物对人类是有益的。
请回答有关微生物及其应用的试题:
(1)培养微生物的培养基配方中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。
从土壤中分离分解尿素的细菌时,培养基中加的唯一氮源为,这种培养基称为培养基。
(2)在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时,平板冷凝后,为什么要将平板倒置?
___________________________
(3)微生物接种的方法很多,最常用的是平板划线法和法。
在用平板划线法接种时,为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?
在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?
为什么?
。
15.某同学分离纤维素分解菌,如下试验
纤维素粉
5g
NaNO3
1g
KH2PO4
0.9g
MgSO4.7H2O
0.5g
KCL
0.5g
NaHPO4.7H2O
1.2g
酵母膏
0.5g
水解酪素
0.5g
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL
CMC-Na
5~10g
酵母膏
1g
KH2PO4
0.25g
琼脂
15g
土豆汁
100mL
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL
A培养基B培养基
(1)采集土样:
应该到_____________环境中采集
(2)选择培养:
应选择图中______培养基,选择培养的目的是__________________
(3)梯度稀释
(4)接种到鉴别培养基上:
应选图中的_________培养基,接种方法为________________,利用____________与纤维素形成红色复合物来筛选纤维素菌,筛选出纤维素分解菌的这种方法为__________________。
(5)挑选菌落:
挑选出产生____________的菌落。
16.(11年新课标卷)39.【生物——选修1:
生物技术实践】(15分)
有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。
某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。
回答问题:
⑴在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于培养基。
⑵纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即和。
⑶为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力。
⑷通常情况下,在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和。
无菌技术要求试验操作应在酒精灯附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。
17.(11年山东卷)34.(8分)(生物—生物技术实验)
研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用,两者的提取及应用如图所示。
(1)柚皮易焦糊,宜采用_____法提取柚皮精油,该过程得到的糊状液体可通过__除去其中的固体杂质。
(2)筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或__接种。
对新配制的培养基灭菌时所用的设备是_。
实验前需对超净工作台进行_______处理。
(3)培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供_。
电泳法纯化乳酸菌素时,若分离带电荷相同的蛋白质,则其分子量越大,电泳速度____。
(4)抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈。
可通过测定透明圈的__来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。
选修一第2讲 微生物的培养与应用
真题演练
1【解析】在配制培养基的过程中要先灭菌后倒平板,A错误;转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌再进行划线,B正确;接种后放置在恒温培养箱中进行培养,C错误;培养过程中一般要隔天观察一次,D错误。
2解析 野生型大肠杆菌在基本培养基上能生长,突变型大肠杆菌在基本培养基上不能生长,必须添加氨基酸甲后才能生长,说明野生型大肠杆菌能利用基本培养基的成分合成氨基酸甲,突变型大肠杆菌不能合成氨基酸甲,可能是缺少合成氨基酸甲所需要的酶,或者该酶的功能丧失。
答案 B
3解析
(1)因为植物油不易挥发,不能选用蒸馏法,可以用压榨法、萃取法从油料作物中提取。
(2)微生物的生长需要水、碳源、氮源和无机盐等,选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供碳源。
分析灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等实验室常用灭菌方法的特点可知,培养基灭菌采用的最适方法是高压蒸汽灭菌法。
(3)测定培养液中微生物的数量,可选用显微镜直接计数法直接计数。
提取的脂肪酶在应用于实验或生产之前,要先检测其活性,以确定其应用价值。
固定化酶技术可以实现酶的反复利用,降低了生产成本。
(4)在应用PCR技术扩增DNA片段时,DNA合成(延伸)时温度要控制在72℃,需要具有较强的耐热性的DNA聚合酶催化。
答案
(1)压榨 萃取(注:
两空顺序无先后)
(2)碳源 高压蒸汽灭菌
(3)显微镜直接计数 酶活性(或:
酶活力)固定化酶(或:
固定化细胞)
(4)PCR(或:
多聚酶链式反应,聚合酶链式反应)
能力提升
1解析 高压蒸汽、酒精、火焰灼烧的处理方法可依次用于消灭或杀灭培养基、手、接种针等处的杂菌。
答案 B
2解析 考查微生物培养的基本原理。
依据教材中的基本原理,要在培养基的表面形成单个的菌落需将菌液稀释到一定程度,所以C项错。
答案 C
3解析 细菌繁殖方式是二分裂方式,噬菌体是没有细胞结构的病毒,需要在活细胞中才能生活,在蛋白胨培养基中不能增殖;想要得到单个菌落可以用划线法,如果稀释后再划线效果更好;灭菌目的是防止杂菌和培养菌发生竞争。
答案 B
4解析 培养微生物要防止杂菌感染,所以要对培养基及和培养有关仪器都要灭菌;因为是观察单个菌落,应该用划线法;防止培养皿盖上杂菌随水珠落下,要倒置培养基。
答案 C
5解析 本题考查平板划线操作方法。
在每次划线前后都要对接种环进行灭菌,接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧,接种时划线操作是在火焰边进行。
在5个区域中,只要有单个活细菌,通过培养即可获得所需菌落。
答案 D
6答案
(1)选择培养 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落
(2)液体培养基 能分解纤维素的微生物才能大量繁殖,其他则难以生存增加纤维素分解菌的浓度,确保能分离得到所需的菌种 (3)刚果红 (4)选取未接种的培养基与接种了样品的培养基,同时培养。
如果在培养过程中未接种的培养基上没有菌落生长,说明培养基没有被杂菌污染 (5)纤维素酶 葡萄糖 (6)当两个或多个细胞连在一起时;平板上观察到的只是一个菌落
7.解析
(1)在微生物培养过程中,培养基常用高压蒸汽灭菌,接种环常用灼烧灭菌。
(2)温度、pH影响酶的活性,氧气浓度影响发酵产物。
因酒精沸点较低,故可用蒸馏法对酒精进行提纯。
(3)纤维素分解菌生活在富含纤维素的环境中,分离所用的培养基应以纤维素作为唯一碳源,以抑制以其他有机碳为碳源的菌类生长。
(4)对酶进行固定化处理可以使酶重复使用,提高利用率。
答案
(1)纯培养 高压蒸汽灭菌、灼烧
(2)温度、pH、氧气浓度等 蒸馏
(3)富含纤维素的 纤维素
(4)固定化 包埋
8.【答案】:
(1)划线稀释涂布(或涂布)
(2)涂布(3)敏感不敏感该致病菌对C的敏感性比对A弱耐药菌(4)A
9.【解析】:
本题考查微生物的培养和应用。
(1)分离菌落常用稀释涂布平板法或划线涂布法。
(2)取该单菌落适当稀释,用涂布法接种于固体培养基表面,适宜温度培养。
(3)含抗生素的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对该抗生素有敏感性,周围没有透明圈的说明该抗生素不具有敏感性。
透明圈越大的敏感性越强。
(4)实验结果抗生素A对该致病菌的作用最好。
【答案】
(1)牛肉膏蛋白胨水无机盐琼脂蛋白胨、牛肉膏牛肉膏
(2)比例搅拌琼脂糊底引起烧瓶破裂(3)100121℃ 15~30min废弃(4)冷空气
10.【解析】本题考查培养基的类型、作用等知识。
题中所给的KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O为无机盐,葡萄糖作为碳源、尿素作为氮源,琼脂作为凝固剂,因此冷却后的培养基为固体培养基;由于培养基中尿素作为唯一氮源,因此可以作为分解尿素的微生物的选择培养基;但是有些微生物可以利用尿素合成其他代谢产物,因此该培养基上培养的微生物并不一定分解尿素。
【答案】
(1)葡萄糖尿素
(2)固体凝固剂琼脂(3)有选择作用。
此配方中尿素是唯一氮源,因此,只有能够分解尿素的微生物才能生长(4)不一定。
因为有些微生物可以利用尿素分解菌代谢产生的含氮代谢产物生长繁殖。
参考答案:
11.
(1)目的菌选择
(2)化合物A异养需氧型(3)防止外来杂菌的入侵(4)接种环灼烧(5)防止造成环境污染
12.
(1)选择培养基对羟基苯甲酸
(2)利用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基,经选择培养,选择出能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物
(3)增大分解对羟基苯甲酸微生物的浓度
(4)对羟基苯甲酸
(5)对照实验说明通过选择培养确实得到了欲分离的目标微生物(6)操作都在酒精灯火焰的附近进行
13.⑴圆褐固氮菌 ⑵硝化细菌 ⑶青霉素 ⑷金黄色葡萄球菌 金黄 ⑸深紫 大肠杆菌 ⑹乳酸菌和酵母菌 酵母 乳酸菌
14.
(1)不接近真实值,接种前将菌液摇匀后重新实验
(2)可能是土样不同,也可能是培养基污染或操作失误;
方案有二:
一是由其他同学用与A同学一样的土壤进行实验,如果与A同学一致,则证明无误,如果结果不同,则证明A同学存在操作失误或培养基配制有问题。
另一种方案是将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养,作为空白对照,以证明培养基是否受到污染。
15.
(1)尿素选择
(2)皿盖上会凝有水珠,防止水珠落人培养皿造成污染,还可使培养基表面的水分更好挥发
(3)稀释涂布平板
第一步灼烧接种环是防止接种环上有其它微生物而污染培养基。
每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次接种时留下的菌种,使下一次划线时接种环上的菌种直接来自上次划线的末端,以便通过多次划线后,得到单个的菌落划线结束后仍要灼烧接种环,以免菌种对环境造成污染。
16.(11年新课标卷)39.【生物——选修1:
生物技术实践】(15分)
有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。
某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。
回答问题:
⑴在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以原油为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于选择培养基。
⑵纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即平板划线法和稀释涂布平板法。
⑶为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力强。
⑷通常情况下,在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌法和高压蒸汽灭菌法。
无菌技术要求试验操作应在酒精灯火焰附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。
17.(11年山东卷)34.(8分)(生物—生物技术实验)
研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分
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