自动细胞计数仪选购指南.docx
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自动细胞计数仪选购指南.docx
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自动细胞计数仪选购指南
自动细胞计数仪选购指南
(一)自动细胞计数仪选购指南——通用篇
除非你像猴哥那般火眼金睛,否则,利用血球计数板来数细胞绝对是一件痛苦的事情。
浪费时间不说,关键是不准确,重复性也不好。
若是有多个样本,那真是让人发疯。
这时,自动细胞计数仪应运而生,带来了更高效更准确的细胞计数。
市场上有多个品牌的细胞计数仪,乍一看,好像都是经典三步曲:
上样-插入-分析。
如何选择一台最理想的细胞计数仪,让你只选对的,不选贵的。
首先,想一想平时主要对哪些细胞计数,它们的大小在什么范围;其次,你需要什么样的细胞信息以及通量水平;你们实验室打算将多大一块地方奉献给细胞计数仪;最后,你打算花多少钱。
市场上大部分细胞计数仪都是基于染料,以台盼蓝为主,也有碘化丙啶(PI)。
正常的健康细胞能够排斥台盼蓝,而当细胞损伤或死亡时,台盼蓝可穿透变性的细胞膜,与DNA结合,使其着色,从而区分出活细胞和死细胞。
有些细胞计数仪是基于电阻抗法,更简便,不需要使用台盼蓝染料,但也无法分辨活细胞与死细胞。
首先为你介绍两款热门的细胞计数仪。
之后,还将介绍一些便携式的细胞计数仪和高通量的仪器,囊括了市场上近期推出的大部分细胞计数仪。
我们将提供详细的参数对比和特性介绍,以便您在选购仪器时能够方便地参考。
TC10自动细胞计数仪(Bio-Rad)
这款细胞计数仪是由Bio-Rad公司去年推出的。
它的计数流程很简单,就是“上样-插入-结果”。
首先将样品上样到计数玻片上,然后将玻片插入TC10细胞计数仪,计数自动开始,30秒内总细胞数和活细胞数就显示在屏幕上。
仪器对细胞浓度的要求为5x104-1x107细胞/ml。
计数只需要10µl悬浮或重悬的细胞,让珍贵样品得以保留。
玻片上有两个室,每次能对2个样品进行计数。
有些细胞计数仪通过单个焦点平面来评估细胞活力,这样得到的结论可能不太准确,而TC10细胞计数仪对多个平面的每个样品进行打分。
独特的自动对焦技术和图像分析算法在30秒内提供了准确且重复性高的细胞数量。
Bio-Rad的产品经理认为这对于评估细胞活性尤为重要,因为焦点的差异可能显著影响结果。
TC10系统所能接受的细胞大小是6-50µm,适合哺乳动物细胞及一些更小的生物,如浮游生物和孢子等。
若你正在使用Bio-Rad的Bio-Plex系统,那么还可以利用TC10对Bio-Plex的磁珠进行计数。
TC10能够提供下列结果:
活细胞和死细胞浓度,总细胞浓度,细胞存活率,细胞的平均大小,细胞图像。
通过USB接口,研究人员能导出带注释的JPEG图像文件,用于进一步的分析,或下载计数的数据。
当然,结果也能够打印出来。
当然,光是一台仪器还不够,你还需要耗材和相关配件。
TC10的耗材有TC10计数玻片、TC10台盼蓝、TC10系统验证试剂盒,另外,你还可以选择TC10热敏打印机。
据Bio-Rad介绍,TC10计数玻片也是很独特的,无论用户的移液习惯如何,它都能让样品均匀分布,带来准确重复的结果。
这一点很重要,试想一下,如果有的地方没有样品,那么就会影响计数准确性。
Countess自动细胞计数仪(LifeTechnologies)
2008年,LifeTechnologies(当时还是Invitrogen)推出了这款细胞计数仪。
它的基本参数与TC10大致相同,也是利用台盼蓝染色和图像分析算法,在30秒内给出准确的细胞和活性计数。
每次的样本量也是2个,每次需要10ul,只是可分辨的细胞大小略有不同,在5-60um。
细胞浓度范围应在1×104-1×107细胞/ml,最好在1×105-4×106细胞/ml。
据LifeTechnologies介绍,Countess细胞计数仪的一个独特之处在于其gating功能,能够根据细胞大小分辨混合群体中的细胞。
在对某一混合群体计数后,用户随后可保存特定的参数组,以便未来计数。
此特征对于干细胞或原代细胞特别有用,让用户能够排除细胞碎片和滋养层细胞。
有时,细胞会成团,使得细胞数量被低估,或细胞大小被高估,Countess细胞计数仪能够准确分辨最多5-6个细胞的细胞团。
至于仪器的清洁和维护,也非常简单。
Countess计数仪已经预先校准过了。
如果你升级了仪器的固件,就需要校准。
另外,如果你换用另一个牌子的台盼蓝或台盼蓝浓度与以前不同,那也应该重新校准。
校准只需要2-3分钟即可。
除此之外,就没有必要校准了。
点评:
这两款自动细胞计数仪在参数上不相伯仲,只有细胞大小方面的微小差异。
TC10的特别之处在于多平面对焦分析,而Countess则有gating功能。
现在唯一未知的就是价格了,用户可根据报价再做打算。
名称
TC10AutomatedCellCounter
CountessCellCounter
制造商
Bio-Rad
LifeTechnologies
细胞浓度
5x104-1x107细胞/ml
1×104-1×107细胞/ml
细胞直径
6-50µm
5-60um
样品体积
10ul
10ul
分析时间
30秒
30秒
分析参数
活细胞和死细胞浓度,总细胞浓度,细胞存活率,细胞的平均大小,细胞图像
活细胞和死细胞浓度,总细胞浓度,细胞存活率,细胞的平均大小,细胞图像
通量
2
2
染料
台盼蓝
台盼蓝
附件
TC10计数玻片、TC10台盼蓝、TC10热敏打印机、TC10系统验证试剂盒
Countess™CellCountingChamberSlides、台盼蓝
独特之处
MultifocalPlaneAnalysis
gatingfunction
尺寸
(宽×深×高)
19×15×25.4cm
27×20×19cm
重量
2.2kg
2.1kg
本参数表是根据厂家资料整理,仅供参考。
(二)自动细胞计数器选购指南——便携篇
也许,你想要把细胞计数仪带到超净工作台里面去。
这时,便携式细胞计数器可能更合你心意。
这两款仪器都采用了电阻抗法细胞计数原理,无需台盼蓝染料。
Scepter手持式细胞计数器(默克密理博)
默克密理博公司在去年3月推出了Scepter手持式细胞计数器,这也是目前市场上唯一一款手持式的自动细胞计数器。
一年后,Scepter升级到2.0版,性能进一步提升。
Scepter的外形看上去像一只移液器,但在顶部有一个显示屏,能指导用户进行细胞计数。
操作者只需轻轻一按,细胞就可被自动吸入计数,结果以图形的形式显示细胞的直径和体积,提供细胞密度和细胞群分布数据,为掌控细胞健康状况提供了便捷的量化手段,整个过程在40秒以内。
Scepter采用了电阻抗法细胞计数工作原理(又名库尔特原理),该核心技术借助精细的微电路设计得以集中体现在Sensor里。
将Sensor插进等渗电解质溶液稀释的细胞悬液中,Sensor内微电路中小孔管两侧的内外电极在接通电源后产生稳定电流,稀释细胞悬液从小孔管外侧通过小孔管向小孔管内侧流动,使小孔感应区内电阻增高,引起瞬间电压变化形成脉冲信号,脉冲振幅越高,细胞体积越大,脉冲数量越多,细胞数量越多,由此得出细胞数量和体积值,细胞直径从细胞体积推导而得。
所以Scepter可以监测细胞数量,细胞体积和直径大小。
当然,由于采用的是电阻抗法,通过小孔的任何颗粒都会被计数,这时,不论是活细胞、死细胞,还是细胞碎片,都会被计算在内。
你可以根据需要设置取值上下限,从而排除细胞碎片。
但是,活细胞和死细胞就没办法精确地区分,你只能根据曲线的变化来比较不同培养批次的细胞形态。
目前Scepter手持式细胞计数器可使用两种sensor:
40μm和60μm。
如果你要计数的细胞比较小,可以选前者,反之选后者。
具体的参数详见下表。
这些sensor是一次性的,需要持续购进。
Moxi™Z迷你细胞计数器(ORFLO)
这款迷你的细胞计数仪是由美国ORFLOTechnologies公司开发的。
虽然该公司名不见经传,但它也是上面那款仪器的开发商。
因此,这两款仪器在原理上大致相同,都是利用库尔特原理,不过,大小形状不同,使用耗材不同,软件也有所不同。
MoxiZ在计数时使用一种小巧的cassette,每个cassette能容纳2个样品。
独特的设计让样品从两端上样。
在cassette插入时,仪器的“智能技术”能自动检测,并检测此cassette是全新的还是用过的。
对于所有样品,均使用相同的cassette。
每次测量仅需8秒,仪器就能带来细胞大小、细胞数量等参数。
ORFLO还开发出一种专利的算法,能计算出活细胞/死细胞的比例(MoxiViabilityIndex),它与公认的染料法有着很好的相关性。
MoxiZ能够对直径2-34μm的细胞进行计数,适用于哺乳动物细胞、血小板、酵母及其他。
由于检测下限为2μm,也就避免了漏掉一些细胞的风险。
每次测量需要75μl样品,其中细胞浓度范围在3,000-500,000个细胞/ml。
测量完之后,显示屏显示如下。
图中不仅包括了细胞数量和平均大小,还有完整的直方图,反映样品中细胞大小的分布。
通过直方图的比较,您可以轻松发现细胞培养间的细胞变化。
仪器本身可储存500个样品的数据。
此外,所有数据也可通过USB接口或蓝牙传输到电脑中。
MoxiZ在美国的目录价大约是3000美元,相对于Countess的7万多来说是便宜得多。
点评:
就便携性而言,Scepter取胜,移液器般的设计,小巧轻便,但其劣势在于细胞浓度的下限较高,且不能分辨活细胞和死细胞。
MoxiZ适用的细胞浓度范围更广,也能提供活细胞/死细胞的比例。
然而,就仪器而言,售后也是相当重要的,我们还要考虑售后服务的便利性。
名称
Scepter手持式细胞计数器
MoxiZ迷你细胞计数器
制造商
默克密理博
ORFLO
细胞浓度
50,000–1,500,000cells/mL
(40μmsensor)
10,000–500,000cells/mL
(60μmsensor)
3,000-500,000cells/ml
细胞直径
3–18μm(40μmsensor)
6–36μm(60μmsensor)
2-34μm
样品体积
50μl
75μl
分析时间
<40秒(40μmsensor)
<60秒(60μmsensor)
8秒
分析参数
细胞数量,细胞体积和直径大小
细胞数量,细胞体积,直径大小,活细胞/死细胞的比例
通量
1
2
染料
无需
无需
附件
ScepterSensors40μm/60μm
Moxicassette
尺寸
长:
29cm;宽:
5.5cm
~19×10.8×7cm
(长×宽×高)
重量
229.5g
~0.65kg
本参数表是根据厂家资料整理,仅供参考。
(三)自动细胞计数器选购指南——高通量篇
对于一些专门从事细胞研究的大型实验室来说,高通量细胞计数仪也许更为实用。
而且,除了通量高之外,今天介绍的这几款仪器也能提供更多的分析参数,为您带来更全面的分析结果。
CedexXSAnzlyzer(罗氏)
1999年,Innovatis公司制造出全球第一台自动化细胞计数仪。
10年来,它一直致力于细胞计数、分析、细胞质量控制的相关技术研发和仪器生产,是国际著名的细胞计数分析仪生产厂商。
罗氏应用科学部于2009年成功收购Innovatis,将其众多特色产品收归旗下。
CedexXS细胞计数分析仪是一款半自动化的细胞计数系统。
它采用手动的样品制备过程,大大降低系统的运行和维护成本。
同时体积小巧,节省实验室的空间。
CedexXS所需的样品量极少,只需5ul样品+5ul台盼蓝,比其它平台更能节省宝贵的样品。
这款细胞计数仪的检测范围非常大,达2-180um,覆盖了所有哺乳动物细胞、植物细胞、血细胞、酵母和藻类等。
这一点恐怕是其他仪器都望尘莫及的。
每个样本的检测时间为20秒,一次最多可检测8个样本。
此外,仪器采用2592x1944的高分辨率CCD,获取更高分辨率图像,确保了后续分析结果的高精确度。
除了可获得细胞浓度/数量/活力等基本信息外,它还可进行多种参数统计和分析,包括细胞直径分布、细胞圆度分析、细胞结团分析、细胞结团与细胞活力、细胞增值曲线、细胞活力动态变化曲线以及细胞浓度动态变化曲线等。
CedexXS细胞计数仪还具有独特的Liveoperator功能,可根据图像获取信息,随时调整图像分析参数设置,获取最佳分析结果,无需重复检测。
Cytorecon全自动细胞计数分析仪(GEHealthcare)
通用电气(GEHealthcare)代理的这一款Cytorecon全自动细胞计数分析仪采用了高分辨率的CCD成像技术及自动软件分析功能,可以快速完成包括贴壁细胞、悬浮细胞、白细胞、培养细胞、酵母细胞等细胞样品的计数和浓度计算,结合台盼蓝染色技术,还可以快速完成细胞存活率的分析。
除了细胞样品以外,它还支持一些细菌和微生物样品的浓度计算。
就通量而言,Cytorecon无疑是相当高的。
它采用了20孔的特制样品盘设计,只需要用移液枪在样品盘上点上样品,即可完成细胞计数和浓度计算。
而且样品需要量非常少,只需要11ul,即使是非常珍贵的样品也不用担心浪费啦。
另外,在手工进行细胞计数时,大部分细胞需要先稀释再计数。
现在有了Cytorecon,即使细胞浓度超过107个/ml,也无需稀释就能完成浓度分析。
它内置了多种细胞分析模型,能准确测定附着在一起的细胞。
仪器可连续对20个样品进行拍摄和计数。
每个样品拍摄6个视野,并自动计算细胞总数和细胞浓度。
样品盘每个孔均为一次性使用,避免样品交叉污染,也避免传统细胞计数仪器的进样针会堵塞的麻烦,无需清洗和维护。
便携的样品盘也易于长期保存,样品少时可以分多次使用,一方面提高了灵活性,而另一方面也大大降低了成本。
Cytorecon内置了方便上手的控制分析软件,通过简单的参数设置就可以设定拍摄的样品数量,以及完成细胞的计数、浓度计算和活力分析。
有了如此方便的帮手,相信细胞计数将会变得无比轻松,您再也无需枯燥地对着显微镜,以损耗视力作为代价一个一个进行细胞计数了。
Vi-CELLXR(贝克曼库尔特)
贝克曼库尔特的细胞活力分析仪——Vi-CELL系列应用目前广泛认可的台盼蓝染料排斥法的原理,结合先进的CCD成像技术,几分钟就能完成细胞计数,并得到具有统计学意义的更多参数。
在使用Vi-CELLXR时,您只需加入0.5ml左右样品到试管,放进试管槽即可,加样时不必绝对准确,仪器会自动准确无误地完成取样过程。
样品的取样、染色自动完成,不再依赖人手,避免人为误差。
若配合12位的全自动的样品输送器,只须将测试的样品试管放入槽内,仪器即可自动依次将样品管连续旋转输送至工作位置,开始分析。
你可以去休息一下,或处理更重要的事情,直到样品分析完毕。
Vi-CELL还可以与培养箱或生物反应器配合,实时监测细胞培养过程。
以往你要人工观察细胞的反应过程,人手收集大量的原始数据,分类、整理、保存、提取、比较等等都要花去许多宝贵的时间。
费时费力,而且容易出错。
Vi-CELL不但能实时监测细胞的状态,还能记录和储存整个生物反应过程的所有数据,并自动描绘生物周期的生长曲线。
通过Vi-CELL简单的软件操作界面,你可以随时调出任意时刻的相关数据和图像,如生长速度、倍增时间、存活率、存活细胞浓度、存活细胞的直径分布等。
Vi-CELLXR检测细胞的下限从原来的5微米降到2微米,可以分析酵母或者更小的细胞。
与Vi-CELLS和Vi-CELLAS相比,在很多功能上都有所改进:
具有自动对焦功能,使用更方便;图像放大6.75倍,你可了解所关心的某一图像的细节之处;环状测量使细胞碎片分离;取样和混匀的过程不再是固定的,可以调节,因为有些细胞系比较脆弱,而有些又很粘稠,这种因细胞而异的做法能改善分析的结果。
点评:
就一般的实验室应用而言,CedexXS更值得推荐,细胞范围广,样品量少,分析参数多,CCD分辨率高,虽说样品制备须手动进行,但也降低了运行和维护的成本。
若是需要真正的高通量自动化分析,Vi-CELL则是不错的选择。
名称
CedexXS
CytoRecon
Vi-CELLXR
制造商
Roche
GE
BeckmanCoulter
细胞浓度
未知
5×105-2×106细胞/ml
5×104-1×107细胞/ml
细胞直径
2-180um
2-60um
2-70um
样品体积
10ul
11ul
0.5ml
分析时间
20秒
10秒(成像时间)
2.5min
分析参数
细胞浓度、细胞数量、细胞活力、细胞直径分布、细胞圆度分析、细胞结团分析、细胞结团与细胞活力、细胞增殖曲线、细胞活力动态变化曲线、细胞浓度动态变化曲线
活细胞数目,活细胞的浓度,死细胞的数目,死细胞的浓度,总细胞的浓度,细胞存活率,总细胞数目
细胞存活率、总细胞数、存活细胞数、总细胞浓度、存活细胞浓度、细胞的直径及分布、细胞的平均直径、细胞圆度及分布、细胞平均圆度、细胞的生长速度、细胞倍增时间、细胞生长曲线
通量
8
20
12
染料
台盼蓝
台盼蓝
台盼蓝
CCD分辨率
2592x1944
1280×1024
1394×1040
本参数表是根据厂家资料整理,仅供参考。
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