肠球菌溶血性链球菌和粪链球菌检验培养基DOC.docx
- 文档编号:14094131
- 上传时间:2023-06-20
- 格式:DOCX
- 页数:26
- 大小:46.40KB
肠球菌溶血性链球菌和粪链球菌检验培养基DOC.docx
《肠球菌溶血性链球菌和粪链球菌检验培养基DOC.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《肠球菌溶血性链球菌和粪链球菌检验培养基DOC.docx(26页珍藏版)》请在冰点文库上搜索。
肠球菌溶血性链球菌和粪链球菌检验培养基DOC
葡萄糖肉浸液肉汤
DextroseMeatInfusionBroth
用途:
用于溶血性链球菌的增菌培养
配方:
(g/L)
牛肉粉
3.0
氯化钠
5.0
蛋白胨
10.0
磷酸氢二钾
2.0
葡萄糖
10.0
pH值7.5±.1
25C
原理:
蛋白胨、牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钾为缓冲剂;葡
萄糖提供碳源。
用法:
称取本品30.0g,煮沸溶解于1000ml蒸馏水中,121C高压灭菌15分钟,备用。
质量控制:
在36±1C培养24小时。
质控菌株
ATCC
生长情况
容血性链球菌
(10-8)+++
单增李斯特氏菌
27853
(10-8)+++
大肠杆菌
25922
+/-
少门氏菌
14028
+/-
匹克氏肉汤基础A
Pick'sBrothBaseA
用途:
用于溶血性链球菌的增菌培养
配方:
(g/L)
胰蛋白胨
10.0
牛心浸粉
20.0
叠氮钠
0.065
结晶紫
0.002
pH值7.3-7.5
原理:
胰蛋白胨、牛心浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子;脱纤维兔血(或羊血)为溶血性链球菌提供大
量生长因子;结晶紫和叠氮钠为选择性抑菌剂。
用法:
称取本品30.0g,加热溶于1000ml蒸馏水中,分装,121C高压灭菌15分钟,冷至50C左右时,加入脱纤
维羊血,混匀。
质量控制:
质控菌株
ATCC
生长情况
溶血现象
溶血性链球菌
+++
+(大)
单增李斯特氏菌
27853
++
+(小)
大肠杆菌
25922
-
-
沙门氏菌
14028
-
-
在36±1C培养18-24小时。
肉浸液肉汤培养基
MeatInfusionBroth
用途:
用于溶血性链球菌、蜡样芽抱杆菌和金黄色葡萄球菌的增菌培养(
GB标准)
配方:
(g/L)
牛肉粉
氯化钠
蛋白胨
磷酸氢二钾
pH值7.5±.1
原理:
压。
3.0
5.0
12.0
2.0
蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;磷酸氢二钾为缓冲剂;氯化钠可维持均衡的渗透
用法:
称取本品20.0g,溶解于1000ml蒸馏水中,12「C高压灭菌15分钟,备用。
质量控制:
在36±1C培养18-24小时。
质控菌株
菌株编号
生长情况
其它特征1
容血性链球菌
ATCC32210
+++
浑浊
金黄色葡萄球菌
ATCC25923
+++
浑浊
大肠埃希氏菌
ATCC25922
+++
浑浊
少门氏菌
ATCC14028
+++
浑浊
叠氮钠葡萄糖肉汤
AzideDextroseBroth
用途:
用于链球菌的增菌培养
配方:
(g/L)
胰蛋白胨
15.0
牛肉浸粉
4.5
氯化钠
7.5
葡萄糖
7.5
叠氮钠
0.2
pH值7.0-7.4
25C
原理:
胰蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;葡萄糖提供碳源;叠氮化钠可抑制革兰氏阴
性菌。
用法:
称取本品34.7g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,分装,12「C高压灭菌15分钟,备用。
质量控制:
在36±1C培养18-24小时。
质控菌株
菌株编号
生长情况
其它特征
肠球菌
+++
/
大肠埃希氏菌
AtCC25922
-
/
粪肠球菌
ATCC29212
+++
/
金黄色葡萄球菌
ATCC25923
-
/
乙基紫叠氮钠肉汤
用途:
用于链球菌的增菌培养
配方:
(g/L)
酪蛋白胨
13.5
酵母浸粉
6.5
葡萄糖
5.0
氯化钠
5.0
磷酸氢二钠
2.7
磷酸二氢钠
2.7
叠氮钠
0.4
乙基紫
0.00083
pH值7.0±.2
25C
原理:
酪蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供碳源;叠氮化钠可抑制革兰氏阴性菌;
氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠和磷酸二氢钠做缓冲剂;乙基紫作为指示剂。
用法:
取本品35.8g,溶解于1000ml蒸馏水中,121C高压灭菌15分钟,备用。
质量控制:
KF链球菌琼脂
KFStreptococcusAgar
用途:
用于链球菌的选择性分离及计数(GB、SN标准)
配方:
(g/L)
月示蛋白胨
10.0
酵母粉
10.0
甘油磷酸钠
10.0
氯化钠
5.0
麦芽糖
20.0
乳糖
1.0
叠氮钠
0.4
琼脂
13.0
溴甲酚紫
0.015
pH值7.2±.2
25C
原理:
月示胨和酵母粉提供氮源、维生素和生长因子;麦芽糖和乳糖为可发酵糖类;氯化钠维持均衡的渗透压;叠氮化钠可抑制革兰氏阴性菌;琼脂是培养基的凝固剂;溴甲酚紫为指示剂染料。
用法:
称取本品69.4g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121C高压灭菌15分钟,冷却至50-60C时,加入无菌
1%TTC溶液10ml,混匀,倾入无菌平皿,备用。
质量控制:
在36±).5C下培养48h。
菌名
菌号
生长状况
培养特征
粪性链球菌
CMCC(B)32223
良好
红色或粉红色中心
大肠埃希氏菌
ATCC25922
被抑制
肠球菌琼脂(胆盐-七叶苷-叠氮钠琼脂)
EnterococcusAgar(BileEsculinAzideAgar)
用途:
用于食品和水中肠球菌的计数
货号:
HB0133-3
配方:
(g/L)
牛肉浸粉
3.0
胰酪蛋白胨
17.0
酵母粉
5.0
牛胆粉
10.0
氯化钠
5.0
七叶苷
1.0
柠檬酸铁铵
0.5
叠氮化钠
0.25
柠檬酸钠
1.0
琼脂
13.5
pH值7.1±.2
25C
原理:
胰酪蛋白胨和牛肉浸粉、酵母粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;细菌水解
七叶苷与柠檬酸铁铵中铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素;柠檬酸钠、牛胆粉和叠氮化钠为选择性抑菌剂,抑制非链球菌的细菌;琼脂是培养基的凝固剂。
用法:
称取本品56.3g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121C高压灭菌15分钟拎至45±C,倾入含1ml样品
液平皿中约15ml培养基,混匀,凝固。
35+2C倒置培养基培养24±2h。
注:
从保温开始至做成平板时间不要超过4h。
质量控制:
在36±).5C培养24小时。
菌名
菌号
生长状况
培养特征
粪链球菌
CMCC(B)32223
良好
棕黑色,具有棕色晕轮
金黄色葡萄球菌
ATCC6538
被抑制
—
大肠埃希氏菌
ATCC25922
被抑制
—
CATC琼脂
CATCAgar
用途:
用于食品和饮料肠球菌的分离培养
配方:
(g/L)
胰酪蛋白胨
15.0
酵母浸粉
5.0
磷酸二氢钾
5.0
柠檬酸钠
15.0
吐温80
1.0
碳酸钠
2.0
叠氮钠
0.4
红四氮唑(TTC)
0.1
琼脂
15.0
pH值7.0±0.2
25C
原理:
胰酪蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、维生素和矿物质,磷酸二氢钾是缓冲剂。
琼脂是培养基凝固剂。
用法:
称取本品58.5g,加热溶解于
1000ml蒸馏水中,121C高压灭菌15分钟,冷至50~55C时,倾入无菌平皿,
备用。
质量控制:
胆盐七叶苷琼脂
BileEsculinAgar
用途:
用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养
配方:
(g/L)
蛋白胨
8.0
牛胆盐
20.0
柠檬酸铁
0.5
七叶苷
1.0
琼脂
15.0
pH值7.1±.2
25C
原理:
6,7-二羟
蛋白胨提供氮源、维生素和生长因子;细菌水解七叶苷与柠檬酸铁中铁离子反应形成黑色的基香豆素;牛胆盐为选择性抑菌剂,抑制非链球菌的细菌;琼脂是培养基的凝固剂。
用法:
称取本品44.5g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121C高压灭菌15分钟,备用。
质量控制:
在36±1C培养22-24小时。
质控菌株
ATCC
生长情况
黑色
肠球菌
(10-7)+++
+
大肠杆菌
25922
(10-7)+++
-
金黄色葡萄球菌
25923
-
/
哥伦比亚血琼脂基础
ColumbiaBloodAgarBase
用途:
营养非常丰富,用于各种细菌的基础培养基
配方:
(g/L)
酪蛋白胰酶消化物
10.0g
心胰酶消化物
3.0g
玉米淀粉
1.0g
肉胃酶消化物
5.0g
酵母浸出粉
5.0g
氯化钠
5.0g
琼脂
10.0g
PH值
7.3±.2
原理:
酪蛋白胰酶消化物、肉胃酶消化物、心胰酶消化物和酵母浸出粉提供碳氮源、维生素和氨基酸;淀粉
能促进奈瑟氏菌的生长和增强链球菌的溶血特性;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。
用法:
称取本品39克,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121C高压灭菌15分钟,冷至45-50C左右时,加入相当于20mg庆大霉素的无菌硫酸庆大霉素,混匀,倾入无菌平皿。
质量控制:
在30-35C培养18-24小时。
质控菌株
菌株编号
生长情况
其它特征
金黄色葡萄球菌
ATCC25923
良好
有黄色色素
单增李斯特氏菌
ATCC19114
良好
无色透明小菌落
大肠埃希氏菌
ATCC25922
良好
无色透明大菌落
少门氏菌
ATCC14028
良好
无色大菌落
铜绿假单胞菌
CMCC10104
良好
有绿色色素
LIM培养基
LIMMedium
用途:
用于链球菌的分离培养(Japan方法)
配方:
(g/L)
牛肉粉
10.0
胰蛋白胨
20.0
葡萄糖
2.0
碳酸氢钠
2.0
氯化钠
2.0
磷酸氢二钠
0.4
pH值7.8±.1
25C
原理:
胰蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供碳源;氯化钠维持均衡的渗透压磷酸氢二钠作为缓冲剂。
用法:
取本品36.4g,溶解于1000ml蒸馏水中,121C高压灭菌15分钟,待培养基冷至45-50C时,加入多粘
素E10mg和萘啶酮酸15mg,混匀质量控制:
BETA-SSA琼脂
BETA-SSAAgar
用途:
用于链球菌的选择性分离培养
蛋白胨
15.0
大豆蛋白胨
5.0
氯化钠
5.0
麦芽糖
0.25
琼脂
13.0
抑菌剂
0.0262
pH值7.1-7.5
25C
原理:
配方:
(g/L)
蛋白胨和大豆蛋白胨提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基
的凝固剂。
用法:
取本品38.3g,溶解于1000ml蒸馏水中,115C高压灭菌20分钟拎至50C左右时,无菌加入5-10%的脱
纤维羊血,混匀,倾入无菌平皿。
质量控制:
粪肠球菌琼脂
EnterococcusfaecalisAgar
用途:
用于粪肠球菌的选择性分离
配方:
(g/L)
月示胨
麦芽糖
酵母浸粉
甘油磷酸钠
氯化钠
乳糖
溴甲酚紫
叠氮钠
TTC
琼脂
pH值7.2±.2
10.0
20.0
10.0
10.0
5.0
1.0
0.015
0.4
0.1
13.0
25C
原理:
月示胨和酵母浸粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;叠氮化钠可抑制革兰氏阴性菌;溴甲酚紫和TTC作为指示剂;琼脂是培养基的凝固剂。
用法:
取本品70.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,煮沸5分钟拎至50C左右,倾入无菌平皿,备用。
质量控制:
缓冲蛋白胨水
BufferedPeptoneWater
用途:
用于阪崎杆菌前增菌培养(GB2008标准)
配方:
(g/L)
10.0
蛋白胨
氯化钠
磷酸氢二钠(含12个结晶水)
5.0
9.0
1.5
磷酸二氢钾
pH值7.2±.2
原理:
白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾和磷酸氢二钠是
缓冲剂用法:
称取本品20.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,12「C高压灭菌15分钟备用。
质量控制:
在36±1C培养18-24小时。
质控菌株
菌株编号
生长情况
其它特征
单增李斯特氏菌
ATCC19114
+++
浑浊
少门氏菌
ATCC14028
+++
浑浊
胆汁液态培养基
Bilebroth
用途:
用于粪链球菌的胆汁耐受试验。
配方:
(g/L)猪胆粉脑心浸液肉汤
20.0
23.1
pH值7.4±1
称取本品43.1g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装试管,121C高压灭菌15分钟,备用。
质量控制:
在36±1C培养18-24小时。
M-肠道菌琼脂
M-EnterococcusAgar
用途:
用于水中或其它物质中肠球菌分离培养和计数(滤膜法或划线法)
配方:
(g/L)
胰酪蛋白胨
15.0
大豆蛋白胨
5.0
酵母浸粉
5.0
葡萄糖
2.0
磷酸氢二钾
4.0
叠氮化钠
0.4
「TC
0.1
琼脂
10.0
pH值7.2±.2
25C
原理:
胰酪蛋白胨、大豆蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、维生素和矿物质,葡萄糖提供碳源,磷酸盐是缓冲剂,琼脂是培养基凝固剂。
用法:
称取本品42g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,煮沸1分钟,冷至45-50C左右时,倾入无菌平皿。
无需高压
灭困。
质量控制:
THB培养基
THBMedium
用途:
用于链球菌增菌培养
配方:
(g/L)
牛肉粉
10.0
胰蛋白胨
20.0
葡萄糖
2.0
碳酸氢钠
2.0
氯化钠
2.0
磷酸氢二钠
0.4
pH值7.8±.1
25C
原理:
牛肉粉、胰蛋白胨提供氮源、维生素和矿物质,葡萄糖提供碳源,氯化钠维持均衡的渗透压,磷酸盐
是缓冲剂。
用法:
称取本品36.4g,溶解于1000ml蒸馏水中,121C高压灭菌15分钟,待培养基冷至45-50C时,加入多粘
素E10mg和萘啶酮酸15mg,混匀。
PS琼脂
PSAgar
用途:
用于消化球菌的培养
配方:
(g/L)
蛋白胨
10.0
牛肉浸粉
3.0
酵母浸粉
3.0
葡萄糖
2.0
半胱氨酸盐酸盐
0.5
氯化钙
0.008
硫酸镁
0.008
磷酸氢二钾
0.04
磷酸二氢钾
0.04
碳酸氢钠
0.4
氯化钠
0.08
吐温80
1.0
琼脂
13.0
原理:
蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉提供氮源、维生素和矿物质,葡萄糖提供碳源,磷酸氢二钾和磷酸二氢
钾是缓冲剂。
氯化钠维持均衡的渗透压,琼脂是培养基凝固剂。
用法:
称取本品33.1g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121C高压灭菌15分钟,备用。
质量控制:
肠球菌肉汤
EnterococcusBroth
用途:
用于肠球菌增菌培养
配方:
(g/L)
胰蛋白胨
17.0
牛肉浸粉
3.0
酵母浸粉
5.0
牛胆粉
10.0
氯化钠
5.0
柠檬酸钠
1.0
七叶苷
1.0
柠檬酸铁铵
0.5
叠氮化钠
0.25
pH值7.1±.2
25C
原理:
胰蛋白胨和酵母浸粉、牛肉浸粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;细菌水解
七叶苷与柠檬酸铁铵中铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素;柠檬酸钠、牛胆盐和叠氮化钠为选择性抑菌剂,抑制非链球菌的细菌。
用法:
称取本品42.8g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121C高压灭菌15分钟,备用。
质量控制:
在36±).5C培养24小时。
生长状况
培养特征
脑心浸液肉汤(BHI)
BrainHeartInfusionBroth
用途:
用于细菌的增菌培养
配方:
(g/L)
蛋白胨
脱水小牛脑浸粉
脱水牛心浸粉
氯化钠
葡萄糖
磷酸氢二钠
pH值7.4±.2
10.0
12.5
5.0
5.0
2.0
2.5
25C
原理:
蛋白胨、脱水小牛脑浸粉、脱水牛心浸粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖可为多种细菌提供能源;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠为缓冲剂。
用法:
称取本品38.5g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,121C高压灭菌15分钟,备用。
质量控制:
质控菌株接种后于35±).5C培养24h,结果如下:
菌名
菌号
生长状况
培养特征
粪性链球菌CMCC(B)32223
良好
肉汤混浊
乙型溶血性链球菌
CMCC(B)32210良好
肉汤混浊
大肠埃希氏菌
ATCC25922良好
肉汤混浊
脑心浸萃液肉汤
BrainHeartInfusionBroth
用途:
用于营养苛求细菌的增菌培养
配方:
(g/L)
月示蛋白胨
10.0
牛脑浸出粉
10.0
牛心浸出粉
9.0
氯化钠
5.0
葡萄糖
2.0
磷酸氢二钠
2.5
pH值7.4±.2
25C
原理:
月示蛋白胨、牛脑浸出粉、牛心浸出粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖可为多种细菌提供能源;
氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠为缓冲剂。
用法:
称取本品38.5g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,
121C高压灭菌15分钟,备用。
质量控制:
在35±).5C培养24h,
菌名
菌
号
生长状况
培养特征
粪性链球菌
CMCC(B)32223
良好
肉汤混浊
乙型溶血性链球菌
CMCC(B)32210
良好
肉汤混浊
大肠埃希氏菌
ATCC25922
良好
肉汤混浊
脑心浸液琼脂(BHIA)
BrainHeartinfusionAgar
用途:
用于营养苛求细菌的增菌培养
配方:
(g/L)
牛脑浸粉
4.0
牛心浸粉
4.0
蛋白胨
5.0
酪蛋白胨
16.0
氯化钠
5.0
葡萄糖
2.0
磷酸氢二钠
2.5
琼脂
13.5
pH值7.4±.2
25C
原理:
牛脑浸粉、牛心浸粉、蛋白胨、
'酪蛋白胨提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖可为多种细菌提供能
源;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠为缓冲剂,琼脂为凝固剂。
用法:
称取本品52.0g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,121C高压灭菌15分钟,备用。
质量控制:
控菌株接种后于35±).5C培养24h
菌名
菌号
生长状况
粪性链球菌
CMCC(B)32223
1良好
乙型溶血性链球菌
CMCC(B)32210
1良好
大肠埃希氏菌
AtCC25922
良好
Pfizer肠球菌选择性琼脂(PSE琼脂)
PfizerEnterococcusSelectiveAgar
用途:
用于粪链球菌的选择性分离和计数(SN标准)
配方:
(g/L)
蛋白胨
20.0g
酵母浸粉
5.0g
牛胆汁物
10.0g
氯化钠
5.0g
柠檬酸钠
1.0g
柠檬酸铁铵
0.5g
叠氮化钠
0.25g
七叶苷
1.0g
琼脂
15.0g
pH值
7.1±.2
原理:
蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;细菌水解七叶苷与柠檬
酸铁铵中铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素;柠檬酸钠、牛胆汁物和叠氮化钠为选择性抑菌剂,抑制非链球菌的细菌;琼脂是培养基的凝固剂。
用法:
称取本品57.75克,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,12「C高压灭菌15分钟,备用。
质量控制:
质控菌株接种后,于35±).5C培养24h,
金黄色葡萄球菌
ATCC6538
j被抑制
—
大肠埃希氏菌
AtCC25922
被抑制
—-
MEI培养基
MEIMedium
用途:
用于一步滤膜法显色检测或计数水中的肠球菌
配方:
(g/L)
10.0
蛋白胨
15.0
氯化钠
1.0
七叶苷
0.05
放线菌酮
0.15
叠氮化钠
30.0
酵母浸粉
0.75
显色剂
15.0
琼脂
pH值7.1±.2
原理:
用法:
称取本品72.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶每瓶200ml,12「C高压灭菌15分钟,冷
至50C左右时海瓶加入4.8%萘啶酮酸溶液1ml(加入几滴0.1NNaOH溶液溶解)和0.4%TTC溶液1ml,混
匀,倾入无菌平皿,备用。
质量控制:
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 球菌 溶血 链球菌 检验 培养基 DOC