《动物细胞融合与单克隆抗体》导学案例题练习测试.docx
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《动物细胞融合与单克隆抗体》导学案例题练习测试
专题二细胞工程——动物细胞工程
2.2.2动物细胞融合和单克隆抗体
教学目标
知识目标
⑴掌握动物细胞融合和植物体细胞杂交区别和联系。
⑵简述动物细胞融合和单克隆抗体制备过程。
⑶了解单克隆抗体在实践中应用。
能力目标
让学生掌握获取知识和探索生物科学基本方法,使学生了解生物科学认识模式以发展学生创造性能力。
情感目标
介绍动物细胞融合和单克隆抗体技术发展及一些新研究成果,使学生明确人们对生命奥秘揭示愈加广泛和深入,知识不断更新并向前发展,认识到学无止境,形成终生学习意识。
教学重点单克隆抗体制备
教学难点单克隆抗体制备
教学过程
一、动物细胞融合
自主学习
1、概念:
_______或_______动物细胞结合形一个细胞过程,也称细胞杂交。
2、结果:
形成___________。
3、过程:
两个或多个细胞---灭火病毒、PEG.电激-----____________________________。
4、意义:
克服了___________不亲和性,成为研究___________、___________、肿瘤和
_______________培育重要手段。
合作探究
1、植物体细胞杂交和动物细胞融合区别(学生填下表)
植物体细胞杂交
动物细胞融合
细胞融合原理
细胞膜流动性
融合过程
先使细胞分散开
诱导方法
电激、振动、离心、聚乙二醇
结果
应用
培育植物新品种
意义
相同点
原生质体融合原理相同;原生质体融合方法相似
过程图解
2植物体细胞杂交和动物细胞融合主要区别是什么?
3、为什么可以使用灭活病毒促进动物细胞融合?
4、不灭活病毒能作为诱导剂吗?
病毒在基因工程中有应用于哪方面?
知识阅读:
阅读课本P52中小字,了解一下动物细胞融合技术发展简史。
二、单克隆抗体
自主学习
(一)、抗体
⑴产生细胞:
_________________。
⑵成分:
__________。
⑶特点:
从__________中分离出抗体产量低、纯度低、特异性差。
合作探究
1、传统抗体生产方法及缺陷是什么?
抗体是从何来?
2、体外培养B淋巴细胞有什么特点?
3、若要想获得大量单一抗体,如何做呢?
4、在体外培养条件下,一个B淋巴细胞是不可能无限增殖,那么,怎样解决这一问题呢?
5、小结以下内容:
◆利用________________产生特异性抗体功能。
◆利用_________________无限增殖特性。
◆利用____________________技术将两种细胞融合获得杂交瘤细胞。
◆利用____________________技术大量培养杂交瘤细胞。
(二)、单克隆抗体制备
自主学习
(1)过程
诱导融合
--------------→
选择培养基
⑵杂交瘤细胞特点:
____________________、____________________。
⑶单克隆抗体优点:
____________、____________、____________。
合作探究
1、如何获得B淋巴细胞?
2、如果把B淋巴细胞和骨髓瘤细胞放在一起时,会有几种融合方式(类型)?
3、选择杂交瘤细胞进行几次筛选?
每次筛选目是什么?
4、次过程用到了哪些技术手段?
5、如何理解单克隆抗体?
拓展资料杂交瘤细胞抗体检测及克隆化培养介绍
融合后细胞经选择性培养基培养后,能存活细胞就是杂交瘤细胞,但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体细胞,通常用“有限稀释法”来选择。
将杂交瘤细胞稀释,用多孔细胞培养板培养,使每孔不超过一个细胞,通过培养让其增殖。
然后检测各孔上清液中细胞分泌抗体,那么上清液可和特定抗原结合培养孔为阳性孔。
阳性孔中细胞还不能保证是来自单个细胞,挑选阳性孔细胞继续进行有限稀释,一般需进行3~4次,直至确信每个孔中增殖细胞为单克隆细胞。
该过程即为杂交瘤细胞克隆化培养。
㈢、单克隆抗体应用
自主学习
1、作为诊断试剂,具有__________、__________、__________、__________优点。
2、用于治疗疾病和运载药物:
主要用于治疗_______、可制成___________。
合作探究
生物导弹成分和作用?
和常规癌症治疗方法相比优点有哪些?
例1、如图是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:
①图中A过程,从小鼠脾脏中取得“小鼠细胞”是________细胞,该细胞能够产生__________。
从小鼠体内提取分离该细胞之前,应给小鼠注射特定物质是________。
②图中B过程是细胞融合,该过程需要用灭活________、聚乙二醇或电激等诱导。
③特异性抗体获取方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需抗体。
和这种方法制备抗体相比,单克隆抗体具有
__________________________________________________________________等特点。
(4)动物细胞体外培养需要满足环境条件有__________________________________
________________________________________________________________________。
(5)单克隆抗体技术还有哪些用途?
___________________________________________。
5、右图示细胞融合技术一些过程,据图回答:
(1)从A和B细胞到C细胞过程中,必须用______________处理。
(2)若A、B细胞为植物细胞,那么这样细胞已经用酶降解脱掉了细胞壁,这种酶可能是______________,由此生成A和B细胞称为____________。
由A、B到C过程中,常用物理方法有____________。
融合完成标志是____________,形成D细胞还要应用__________________技术,把其培养成植株。
(3)若A细胞为骨髓瘤细胞,B为淋巴细胞,那么D细胞称为________,由D细胞连续分裂产生大量细胞过程,称为________,这种细胞既能无限繁殖,又能产生________。
(4)若A为人细胞,B为鼠细胞,并分别用红、绿荧光染料标记细胞上蛋白质,在C细胞阶段,细胞一半发红色荧光,一半发绿色荧光,到D细胞阶段,两种颜色荧光均匀分布,原因是_______________________________________________________________。
(5)若A、B细胞为动物细胞,一般取自________________________________________,然后用____________将其分散开。
由A、B到C过程中,采用不同于植物细胞融合手段是________________________________________________________________________。
(6)若该过程为制备单克隆抗体,A和B融合后形成C有几种?
________________。
随堂练习
1.动物细胞融合目中,最重要是( )
A.克服远缘杂交不亲和障碍B.制备单克隆抗体C.培育新物种D.生产杂交细胞
2.(2011年高考江苏卷)关于现代生物技术应用叙述,错误是( )A.蛋白质工程可合成自然界中不存在蛋白质B.体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体
C.植物细胞培养技术可用于植物茎尖脱毒D.动物细胞培养技术可用于转基因动物培育
3.(2011年南京市高二检测)下图是单克隆抗体制备过程示意图,其中1过程注射物质和A细胞名称分别为( )
A.抗体、T淋巴细胞B.抗原、T淋巴细胞C.抗体、B淋巴细胞D.抗原、B淋巴细胞
4.单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛应用。
下列关于单克隆抗体叙述,错误是( )
A.特异性强、灵敏度高B.和抗癌药物结合可制成“生物导弹”C.体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体D.由效应B细胞和骨髓瘤细胞融合而成杂交瘤细胞分泌
例2、(2009年高考山东卷)人类在预防和诊疗传染性疾病过程中,经常使用疫苗和抗体。
已知某传染性疾病病原体为RNA病毒,该病毒表面A蛋白为主要抗原,其疫苗生产和抗体制备流程之一如图:
请回答:
(1)过程①代表是________________。
(2)过程②构建A基因表达载体时,必须使用____________和_______________两种工具酶。
(3)过程③采用实验技术是______,获得X是________。
(4)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产________所制备疫苗。
对该传染病疑似患者确诊时,可从疑似患者体内分离病毒,和已知病毒进行________比较;或用图中________进行特异结合检测。
高二生物作业第9次班级:
姓名:
1.下列不是细胞融合常用方法是( )
A.细胞培养 B.灭活仙台病毒诱导
C.电刺激D.聚乙二醇作为诱导剂
2.下列过程中,没有发生膜融合是( )
A.植物体细胞杂交
B.受精过程
C.氧进入细胞中线粒体
D.效应B细胞产生抗体
3.(2011年陕西咸阳高二检测)关于动物细胞融合说法不正确是( )
A.动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞过程
B.动物细胞融合后形成具有原来两个或多个动物细胞遗传信息单核细胞称为杂交细胞
C.常用诱导动物细胞融合手段有:
聚乙二醇、灭活病毒、电激、紫外线照射
D.细胞融合技术突破了有性杂交方法局限,使远缘杂交成为可能
4.要想获得大量单克隆抗体就必须用单个B淋巴细胞进行无性繁殖,形成细胞群。
其原因是( )
A.在体外培养条件下,B淋巴细胞可以无限增殖
B.在动物体内B淋巴细胞可产生多达百万种以上抗体
C.每一个B淋巴细胞都参和特异性免疫反应
D.每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体
5.单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,在这种培养基上不能存活增殖细胞是( )
①B淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞
A.①②③④ B.①③⑤
C.②④D.②③
6.用a表示骨髓瘤细胞,b表示效应B细胞,则细胞融合过程中两次筛选目分别为( )
A.a、aa、ab、bb、b→a、aa、ab→ab培养
B.a、aa、ab、bb、b→ab、bb、b→ab培养
C.a、aa、ab、bb、b→ab→产生特定抗体ab培养
D.a、aa、ab、bb、b→aa→能无限增殖aa培养
7.(2011年合肥高二检测)科学家用小鼠骨髓瘤细胞和某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量单克隆抗体,和骨髓瘤细胞融合是( )
A.经过免疫B淋巴细胞
B.不经过免疫T淋巴细胞
C.经过免疫T淋巴细胞
D.不经过免疫B淋巴细胞
8.关于单克隆抗体,下列叙述不正确是( )
A.可以制成诊断盒,用于疾病诊断
B.可以和药物结合,用于病变细胞定向治疗
C.可以利用基因工程技术生产
D.可以在生物体内生产,不能体外生产
9.用动物细胞工程获得单克隆抗体,下列实验步骤错误是( )
A.将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体B淋巴细胞
B.用纤维素酶处理B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞
C.用聚乙二醇作诱导剂,使能产生抗体B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合
D.筛选杂交瘤细胞,并从中选出能产生所需抗体细胞群,培养后提取单克隆抗体
10.将小鼠骨髓瘤细胞和一种B淋巴细胞融合,可使融合细胞经培养产生单克隆抗体,下列有关此项技术说法中不正确是( )
A.动物细胞融合和动物细胞培养技术是单克隆抗体技术基础
B.实验中杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖方式是主动运输
C.B淋巴细胞和骨髓瘤细胞直接放入培养液中就能融合为杂交瘤细胞
D.按照培养基用途分类,实验中筛选杂交瘤细胞培养基是选择培养基
11.运用动物体细胞杂交技术可实现基因定位。
研究发现:
用人细胞和小鼠体细胞进行杂交得到杂种细胞含有双方染色体。
杂种细胞在持续分裂过程中仅保留鼠染色体而人类染色体则逐渐丢失,只剩一条或几条。
下图是人缺乏HGPRT酶突变细胞株(HGPRT-)和小鼠缺乏TK酶细胞株(TK-)融合后并在HAT培养液中培养过程,结果表明最终人染色体在融合细胞中仅存有3号染色体或17号染色体或两者都有。
已知只有同时具有HGPRT酶和TK酶融合细胞才可在HAT培养液中长期存活和繁殖。
(1)体细胞杂交克服了________________,过程①常用生物方法是_____________
________________________________________________________________________。
(2)从培养过程看HAT培养液不仅能提供养料,还起________作用。
(3)从图示结果看,可以确定人________基因位于________号染色体上;该方法可以对鼠基因定位吗?
___________________________________________________________。
(4)干扰素是效应T细胞分泌一种淋巴因子,利用动物细胞融合技术,将效应T细胞和骨髓瘤细胞融合并筛选得到杂交瘤细胞。
该细胞应该具有_________________________
________特点。
12.(2011年南充高二检测)近年来,我国死于狂犬病人数有上升之势。
狂犬病病毒核酸是RNA,机体感染病毒后产生特异性IgG抗体,能消除狂犬病病毒,这是接触狂犬病病毒后及时注射疫苗和特异性抗体重要依据。
我国利用地鼠肾细胞培养狂犬病疫苗,已取得良好效果。
请根据上述材料,回答下列问题:
(1)狂犬病病毒毒力可发生变异。
从自然感染动物体内分离病毒株称为野毒株,其致病力强。
将野毒株在家兔脑________内连续传50代后,变成固定毒株。
固定毒株使人及动物致病。
(2)特异性抗体获取方法可用单克隆抗体制备法。
在制备单克隆抗体过程中,应用动物细胞工程技术是
________________________________________________________________________。
13、(2009年高考江苏卷)动物器官体外培养技术对于研究器官生理、病理过程及其机制意义重大。
下图是一个新生小鼠肝脏小块培养装置示意图。
请回答下列问题。
(1)肝脏切成小薄片,这有利于肝脏细胞________________________________。
(2)气室中充入50%CO2气体主要作用是________________________________。
(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长,但要注意选择抗生素_______________,以保证抗生素对肝脏无害。
《动物细胞融合和单克隆抗体》同步检测
一、选择题
1.单克隆抗体制备过程中使用骨髓瘤细胞是一种缺陷型细胞,在含有次黄嘌呤、氨基喋
呤和胸腺嘧啶培养基(HAT)中无法生长;而小鼠脾细胞是正常细胞,在HAT培养基
上可正常存活。
用聚乙二醇诱导细胞融合后,经过数代培养,最终可在HAT培养基上存
活并能产生单克隆抗体细胞是()
A.骨髓瘤细胞之间形成融合细胞B.脾细胞之间形成融合细胞
C.骨髓瘤细胞和脾细胞之间形成融合细胞D.脾细胞
2.研究单克隆抗体治疗癌症思路是()
A.利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞B.以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞
C.抗癌物质在克隆细胞中大量合成D.单克隆抗体携带抗癌药物特异性地和癌细胞结合
3.科学家用小鼠骨髓瘤细胞和某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量单克隆抗体,和骨髓瘤细胞融合是()
A.经过免疫B淋巴细胞B.不经过免疫T淋巴细胞
C.经过免疫T淋巴细胞D.不经过免疫B淋巴细胞
4.用动物细胞工程技术获取单克隆抗体,下列实验步骤中错误是()
A.将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体B淋巴细胞
B.用纤维素酶处理B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞
C.用聚乙二醇作诱导剂,促使能产生抗体B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合
D.筛选杂交资金积累细胞,并从中选出能产生所需抗体细胞群,培养后提取单克隆抗体
5.只能使动物细胞融合常用诱导方法是( )
A.PEG B.灭活病毒 C.电刺激D.离心
6.单克隆抗体是由下列哪种细胞产生( )
A.B淋巴细胞 B.T淋巴细胞C.骨髓瘤细胞D.杂交瘤细胞
7.用于动物细胞培养组织和细胞大都取自胚胎或出生不久幼龄动物器官或组织,其主要原因是这样组织细胞( )
A.容易产生各种变异B.具有更强全能性C.取材十分方便 D.分裂增殖能力强
8.动物细胞融合和植物体细胞杂交比较中,正确是( )
①诱导融合方法完全相同②所用技术手段不相同③所采用原理完全相同④都能形成杂种细胞
A.①②B.①③C.②④D.③④
9.动物细胞融合和植物原生质融合决定于( )
A.细胞膜流动性B.细胞膜选择透过性 C.细胞质流动性 D.细胞质酶活性
10.从母羊甲体细胞中取出细胞核,注入到母羊乙去掉核卵细胞中,融合后细胞经卵裂形成早期胚胎,再植入到另一只母羊丙子宫内,出生小羊大多数性状( )
A.难以预测B.像甲C.像乙D.像丙
11.“生物导弹”是指( )
A.单克隆抗体B.杂交瘤细胞 C.产生特定抗体B淋巴细胞 D.在单抗上连接抗癌药物
12.动物细胞工程技术基础是( )
A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养
13.下列哪—项属于克隆( )
A.将鸡某个DNA片段整合到小鼠DNA分子中
B.将抗药菌某基因引入草履虫细胞内
C.将鼠骨髓瘤细胞和经过免疫脾细胞融合成杂交瘤细胞
D.将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系
14.单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。
在这种培养基上不能存活.增殖细胞是
①B淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞
③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞
A.①②③④B.①③⑤C.②④D.①③
15.关于单克隆抗体,下列叙述不正确是( )
A.可以制成诊断盒.用于疾病诊断B.可以和药物结合,用于病变细胞定向治疗
C.可以利用基因工程技术生产D.可以在生物体内生产,不能体外生产
16.(多选)下列关于单克隆抗体制备和应用叙述中,正确是( )
A.B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合,一般不需要灭活仙台病毒或聚乙二醇诱导
B.融合后形成杂交瘤细胞既能无限增殖,又能产生单克隆抗体
C.体外培养时,一个效应B淋巴细胞可以产生抗体,但不能无限增殖
D.单克隆抗体和常规抗体相比,特异性强,灵敏度高,优越性明显
17.(多选)1975年米尔斯坦和柯勒成功地获得了单克隆抗体。
下列细胞中和单克隆抗体制备有关是( )
A.效应B细胞B.T淋巴细胞 C.骨髓瘤细胞 D.杂交瘤细胞
二、非选择题
1.下图是单克隆抗体制备过程示意图,据图回答:
(1)图中A过程是从小鼠脾脏中取得_____________细胞,该细胞能够产生_____________。
从小鼠体内提取分离该细胞之前,应给小鼠注射_____________类物质。
(2)B过程是一个_____________过程,该过程进行需要灭活_____________或_____________诱导。
(3)单克隆抗体在疾病诊断、治疗和预防方面,和常规抗体相比,其特点是_________________
2.两场筹备了10年“太空结合”首次在神舟八号飞船上举行了,“新人”之一是小白鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,新人在“产房”——电融合仪内孕育新生命。
160min后,中国首批“太空娃娃”终于顺利诞生。
“太空娃娃”诞生和地面实验如图所示。
请回答下列问题:
(1)小白鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞能融合在一起,体现了细胞膜具有__________特点。
(2)若用于SARS预防上,则宜采用_______细胞。
科学工作者正在研究治疗癌症使用生物导弹是_______。
(3)B淋巴细胞和T淋巴细胞都是由________________细胞形成。
这种相同细胞后代,在形态、结构和生理功能上产生稳定差异过程,叫做_____________。
(4)鼠淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,在培养时通过_______________(有丝/减数)分裂方式大量繁殖。
细胞中染色体数目和淋巴细胞相比有何特点?
_____________;要观察融合后细胞中染色体形态、数目,可用一定浓度_______________处理。
(5)融合细胞具有两种细胞特性,即_________________和____________________。
3.1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。
请观察下图,回答问题:
(1)单克隆抗体是指,其特点是。
(2)1984年以来,科学家针对如右图所示单克隆抗体来自,应用于人体,会作为____________产生,加速排斥反应,以及完整抗体分子相对分子质量过大,难以穿透肿瘤组织,达不到有效治疗浓度等问题,制备出可用于肿瘤治疗相对分子质量小单克隆抗体。
(3)制备单克隆抗体B淋巴细胞一般从_______(器官)
培养基特殊成分
主要作用
次黄嘌呤
骨髓瘤细胞不能利用
氨基蝶嘌呤
阻断DNA合成
胸腺嘧啶核苷
脾细胞用于合成DNA
中采集。
从下表看,用于筛选杂交瘤细胞是特定培养基。
(4)大量制备单克隆抗体方法主要有两种:
①体外培养法,可获得10μg/mL抗体;②动物体内诱生法可获得5~20mg/mL抗体。
你选择方法及原因是。
2.右图为某同学根据杂交瘤技术方法,设计生产破伤风杆菌抗体实验方案。
据图回答:
(1)该方案能达到预期效果吗?
。
原因是 。
(2)图中②为 过程,常用 作为诱导剂。
该细胞继承了 ,因此不仅能分泌 ,还有________本领。
(3)该方案目是_________________________________ 。
参考答案:
一、选择题
参考答案:
一、选择题
CDABBDDCABDDDAD(BCD)(ABCD)
二、非选择题
1.
(1)效应B抗体抗原
(2)细胞融合仙台病毒聚乙二醇(3)特异性强、灵敏度高
2.
(1)一定流动性
(2)SARS病毒感染后产生效应B细胞,单克隆抗体+抗癌药物(3)造
血干细胞细胞分化(4)有丝,加倍,龙胆紫(5)无限增值,产生单一抗体39
(1)卵巢和精巢
4×10-3既保证了染色体形态正常,又使细胞分裂处于中期细胞比例最高。
3.
(1)化学性质单一,特异性强抗体特异性强,灵敏度高
(2)鼠异物免疫反应(3)脾选择
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