1嘉禾县CDC实验室活动生物安全标准操作规程.docx
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1嘉禾县CDC实验室活动生物安全标准操作规程
一.实验室中样品的安全操作规程
1.盛放样品的容器最好使用塑料制品,应当坚固无泄漏。
容器外部不能有残留物,容器上应当正确粘贴标签便于识别。
样品送检单要放在防水的塑料袋内。
2.样品在实验室传递时,为避免意外泄漏或溢出,应当使用盒子等二级容器,并将其固定在架子上使装有样品的容器保持直立。
二级容器可以是金属或塑料制品,应可以耐高压灭菌或耐化学消毒剂的作用。
密封口最好有一个垫圈,要定期清除污染。
3.样品接收需要接收大量样品时,应当在专门实验室或空间,接收时做好个人防护。
4.打开样品包装 接收和打开样品的人员,应当了解样品对身体健康的潜在危害,并接受过如何采用标准防护方法的培训,样品内层容器要在生物安全柜内打开,并准备好消毒剂。
二.生物安全柜使用的操作规程
1.每次使用前应检查生物安全柜的正常指标,包括风速、气流量和负压在正常范围。
若出现异常应停止使用,进行检修工作。
2.在使用中不能打开玻璃观察窗。
3.生物安全柜内应尽量少放器材或样品,不能影响后部压力排风系统的气流循环。
4.生物安全柜内不能使用酒精灯,允许使用微型电加热器,最好使用一次性无菌接种环。
5.所有工作必须在工作台面的中后部进行,并能够通过玻璃观察挡板看到。
操作者不要频繁移动手臂及挥动手臂以免破坏定向气流。
6.尽量减少操作者身后的人员走动以及快速开关房间的门,以防止对生物安全柜的气流造成影响。
7.操作时废物袋以及盛放废弃吸管的容器等必须放在安全柜内而不应放在安全柜之外。
污染的吸管、容器等应先在放于安全柜内的装有消毒液的容器中消毒1h以上,方可转入医疗废物专用垃圾袋中进行高压灭菌等处理。
8.洁净物品和使用过的污染物品要分开放在不同区域,工作台面上的操作应按照从清洁区到污染区的方向进行,以避免交叉污染。
9.工作开始前和结束后,安全柜的风机至少运行5min,工作完成后应使用适当的消毒剂对生物安全柜的表面进行擦拭。
10.生物安全柜内不能进行文字工作。
生物安全柜操作卡
[仪器型号]
FX1200-Ⅱ-B2
[产地]
上海瑞仰装备技术有限公司
[适用范围]
用于微生物操作和实验
[目的]
保护操作人员的安全,防止环境污染。
[原理]
环境空气→进入工作台→过滤→样本→高效过滤→排出室外
[操作]
开机程序:
开启电源—排风与送风—灭菌30分钟后关闭—照明—开始工作
关机程序:
关闭送风—照明—开启灭菌30分钟后关闭—排风—关闭电源
【报警装置】
1操作窗高度:
正常操作低于0.2m,超过0.2m时,仪器自动报警
2负压报警装置:
当安全柜的负压不能达到要求时,自动报警
3过滤器报警:
当过滤差大于160Pa时自动报警
三.离心机使用的操作规程
1.所有离心机应处于正常的工作状态并具有合格的机械性能,以避免伤害事故的发生。
2.离心机应放在适宜的位置和高度,以便于工作人员的各项操作。
3.离心管和盛放样品的容器应当由厚壁玻璃制成,最好为塑料制品,并在使用前应检查是否破损。
用于离心和离心管和标本容器应始终盖严。
要尽量用螺旋盖。
操作感染性物质必须在安全柜内打开盖子。
4.操作病原微生物时,离心桶的装载、平衡、密封和打开必须在生物安全柜内进行,离心桶配平,要用蒸馏水或70%乙醇来平衡。
5.当使用固定角离心机转子时,必须小心不能将离心管装得过满,否则会导致漏液。
6.每次使用后,要清除离心桶、转子和离心机腔的污染。
离心机的SOP文件
型号;LXJ—Ⅱ型 上海医用分析仪器厂
用途
对悬浮溶液的样品进行分离。
工作原理
利用高速运所产生的离心力,进行分离,沉淀浓缩精制后提取溶液中各种成份。
所有的转动部件装于机器中心位置,并有吸振系统使运转平稳。
相关技术指标
最高转速:
4000r/min
±10%
最大相对离心力:
3790Kg
最大容量:
4×400ml
转速范围:
200~4000r/min
时间范围:
0~60min
电 源:
交流220V50Hz
操作程序
1先开通电源开关。
2根据离心时间,扳好定时器。
3渐渐开动调速旋钮,到第三档后,要稍定片刻,待转速表指针稳定后,再一档一档上去,达到所需转速。
4到预定时间,定时器能自动断电停机,约6分钟后完成停止。
5打开机盖,拿出离心物。
6将调速旋钮退回“0”处。
注意事项
1.离心前须把离心物放均称,盖机盖,然后再运转。
2.必须等离心机停动后,才能打开机盖。
3.每次使用完毕,应将调速旋钮退回“0”处。
否则下次使用时,电源会通。
4.相对湿度<80%
5.必须接地线
6.工作结束,必需切断电源。
(电刷型号:
DS8)
参考文献
LXJ—Ⅱ型离心沉淀机使用说明书
四.移液器的使用
1、应使用移液辅助器,严禁用口吸取。
2、所有移液管应带有棉塞以减少移液器具的污染。
3、不能向含有感染性物质的溶液中吹入气体。
4、感染性物质不能使用移液管反复吹吸混合。
5、不能将液体从移液管内用力吹出。
6、刻度对应移液管不需要排出最后一滴液体,因此最好使用这种移液管。
7、污染的移液管应该完全浸泡在盛有适当消毒液的防碎容器中。
移液管应当在消毒剂中浸泡适当时间后再进行处理。
8、盛放废弃移液管的容器不能放在外面,应当放在生物安全柜内。
9、有固定皮下注射针头的注射器不能够用于移液。
10、在打开隔膜封口的瓶子时,应使用可以使用移液管的工具,而避免使用皮下注射针头和注射器。
11、为了避免感染性物质从移液管中滴出而扩散,在工作台面应当放置一块浸有消毒液的布或吸有消毒液的纸,使用后将其按感染性
五、避免感染性物质的扩散避免剧烈操作
1、为了避免被接种物洒落,微生物接种环的直径应为2~3mm
并完全封闭,柄的长度应小于6cm
以减小抖动。
2、使用封闭式微型电加热器消毒接种环,能够避免在本生灯的明火上加热所引起的感染性物质爆溅。
最好使用不需要再进行消毒的一次性接种环。
3、干燥痰液标本时要注意避免生成气溶胶。
4、准备高压灭菌和/或将被处理的废弃标本和培养物应当放置在防漏的容器内(如实验室废弃物袋)。
在丢弃到废弃物盛器中以前,顶部要固定好(如采用高压灭菌胶带)。
5、在每一阶段工作结束后,必须采用适当的消毒剂清除工作区的污染。
六、装有冻干感染性物质安瓿的开启及储存
应该小心打开装有冻干物的安瓿,因为其内部可能处于负压,突然冲入的空气可能使一些物质扩散进入空气。
安瓿应该在生物安全柜内打开,建议按下列步骤打开安瓿:
1、首先清除安瓿外表面的污染。
2、如果管内有棉花或纤维塞,可以在管上靠近棉花或纤维塞的中部锉一痕迹。
3、用一团酒精浸泡的棉花将安瓿包起来以保护双手,然后手持安瓿从标记的锉痕处打开。
4、将顶部小心移去并按污染材料处理。
5、如果塞子仍然在安瓿上,用消毒镊子除去。
6、缓慢向安瓿中加入液体来重悬冻干物,避免出现泡沫。
7、装有感染性物质的安瓿不能浸入液氮中,如果需要低温保存,安瓿应当储存在液氮上面的气相中。
8、感染性物质应储存在低温冰箱或干冰中。
当从冷藏处取出安瓿时,实验室工作人员应当进行眼睛和手的防护。
以这种方式储存的安瓿在取出时应对外表面进行消毒。
废弃物处理。
七、洗手操作规程
实验室人员接触和处理感染性或潜性材料后,即使戴有手套,在消毒、摘除并安全处置后也必须洗手。
7.1 洗手设施及用品
7.1.1 实验室的每个房间必须有洗手池,最好安装在出口处,不得用于其它目的。
7.1.2 洗手必须使用流动水。
7.1.3 建议使用脚控、肘控或感应式水龙头。
使用需要用手关闭的水龙头,则应使用纸巾或手巾覆盖水龙头后关闭水龙头,防止污染已洗净的手。
7.1.4 建议使用感应式洗手液容器、杀菌洗手液可肥皂,肥皂应切成小块,肥皂盒应保持打开状态,以便水分蒸发。
7.1.5 建议使用暖风干手器烘干或用纸巾擦干手。
7.1.6 如没有条件彻底洗手或洗手不方便,应用75%医用洒精或有效的免洗手消毒剂擦手清除手部的轻度污染。
7.2 洗手时间
摘除手套后、离开实验室之前、进食或吸烟前、使用卫生间前后、进行交叉污染可能性不同操作前后都应洗手。
7.3 洗手程序及技术规范
7.3.1 打开水龙头,用流动水浸湿双手,关闭水龙头;
7.3.2 取适量洗手液于掌心,双手充分搓擦,使双手过完全抹上洗手液,然后按以下6个步骤搓擦,洗手全过程应不少于15秒钟。
● 双手手指并拢,掌心相对,相互搓擦;
● 一只手手心对另一只手手背,双手沿指缝相互搓擦,两手交替进行;
● 双手掌心相对,十指交叉,沿指缝相互搓擦;
● 弯曲各手指关节,双手相互搓擦;
● 一只手握住另一只手大拇指,旋转搓擦,两手交替进行;
● 一只手指尖先在另一只手掌心旋转搓擦,两手交替进行;
7.3.3 搓擦完毕后,打开水龙头,用流动水冲洗干净,关闭水龙头。
7.3.4 烘干或擦干双手。
八.台式移动洗眼器操作程序
用途
安全与劳动保护的必要设备,是接触酸.碱.有机物及其他有毒.腐蚀性物质场合必要的应急保护设施。
当发生意外事故时,通过迅速冲洗,把伤害程度减轻到最低。
产品性能特点
台面安装方式,平时放置于台面,紧急使用时可随意抽起,使用方便。
洗眼喷头:
采用不助燃PC材质模铸一体成型制作,具有过滤泡棉及防尘功能,上面防尘盖平常可防尘,使用时随时被冲开,并降低突然打开时短暂的高水压,避免冲伤眼睛。
控水阀采用黄铜制作,经涂臬处理,外观美观大方,阀门可自动关闭,密封可靠。
供水软管,采用1500MM长不锈钢软管。
安装说明
将固定托盘安装固定于台面上。
将供水软管锥度母端(内装胶垫)从固定托盘下部穿过,与控水阀G1/2接头部位连接。
将供水软管G1/2锁母端(内装胶垫)与供水管道连接。
使用说明
需要洗眼时,可按需要随意抽出并握紧手柄即为开启,松开手柄自动关闭。
软管弯曲应顺其自然,不应用力扭转或弯曲。
九.手提式压力蒸汽灭菌器操作程序
目的:
保证手提式蒸汽灭菌器的正常使用。
适用范围:
手提式压力蒸汽灭菌器。
使用原理:
压力蒸汽是一种无色、无味、无臭的气体,只要在密闭的容器内加热,水就能产生压力蒸汽。
且蒸汽的温度随着压力的增高上升,最终形成饱和水蒸气。
饱和水蒸气具有良好的穿透性,能使放在容器内的物品迅速潮润和加热。
“湿和热”能迅速杀灭微生物,最终达到灭菌效果。
操作
4.1堆放:
将待灭菌的物品予以包扎好,然后顺序地放在灭菌桶内的 板上,包与包之间应留有适当的空隙,以利于灭菌桶内的冷空气溢出和蒸汽的穿透,提高灭菌效果。
4.2加水:
在灭菌器主内家4升清洁水,水在灭菌过程中会逐渐蒸发,水面会相应降低。
因此,每次灭菌使用前,应向灭菌器主体内补足水量,以免电热管脱水干烧,损坏电热管。
4.3密封:
将灭菌桶放入灭菌器主体内,把气盖上的软管插入灭菌桶内壁上的半圆槽内,合上器盖。
并将器盖上的螺栓槽与主体螺栓槽对齐,然后顺序地将对方位的翼形螺母嵌入槽内予以均匀地旋紧,使器盖与主体密合。
4.4加热:
接通电源。
电源开关至“开”位置,指示灯亮,开始工作。
然后将放汽阀扳手拨至“放汽”位置,待有较急的蒸汽喷出时,将放汽阀扳手拨至“关闭”位置。
显示灭菌器内压力正在逐渐上升,同时温度随之升高。
4.5灭菌:
当灭菌器内压力达到所需范围时,用户可自行开始计算时间。
4.6干燥:
对医疗器械、敷料和器皿等在灭菌结束后需迅速干燥的物品,可在灭菌结束时,将灭菌器内蒸汽通过放汽阀迅速排出,待压力表指针回复至“0”刻度,再稍等1—2分钟后将器盖打开。
打开后继续加热10—15分钟,关闭电源。
4.7冷却:
对于培养基等液体之类的灭菌物品在灭菌结束后,切勿将灭菌器内蒸汽通过放汽阀快速排出,以免液体剧烈沸腾而造成溢出或瓶子破裂等危险事故。
因此该类灭菌物品在灭菌结束后,应先将电源开关转至“关”,停止加热,待其冷却,直到压力表指针回复至“0”刻度,稍等数分钟后再将放汽阀扳手拨至“放汽”位置,然后才能打开器盖。
4.8应该常用留底温度计,灭菌指示剂或细菌培养方法来检验灭菌所需的温度和时间以获得可靠的灭菌效果。
注意事项
5.1每次使用前,应检查主体内要有4升足够的水量,使水位超过电热管。
5.2在开始加热时,应将放汽阀扳手拨至“放汽”位置,使灭菌桶内冷空气随加热逸出,否则蒸汽的穿透会受到空气阻碍而得不到预期的灭菌效果。
放汽阀经过排汽后,放下扳手,如出现大量汽体漏出时,只需将扳手上下反复拉几下即可。
5.3灭菌液体时,应将液体灌装在硬质的耐热玻璃瓶内,液体容积应不超过3/4的玻璃瓶体积。
特别应注意灭菌结束时,切勿立即释放蒸汽。
5.4对不同类型、不同灭菌要求的物品,切勿放在一起灭菌,以免顾此失彼,造成损失。
5.5灭菌结束时,若压力表指针已回复零位而打不开器盖,此时应将放汽阀扳手拨至“放汽”位置,使外界空气进入灭菌器内,即可打开器盖。
5.6压力表使用日久后,若压力表指针不能回复零位,应及时检修。
5.7灭菌器内最好加离子水或蒸馏水,可以减少水中化学溶解物在灭菌加热时析出,沉积在灭菌器底部和电热管表面,影响电热管正常工作。
5.8灭菌结束要打开器盖时,压力表指针必须在零位,切放汽阀扳手应拨至“放汽”位置。
日常维修
6.1灭菌器不使用时,应保持灭菌器清洁和干燥。
6.2橡胶密封圈使用日久后会老化,应定期更换。
6.3平时应定期用标准压力表来校验压力表,若不正常及时更换新表
十、分离血清
1、只有经过适当培训过的人员才可担任此工作。
2、戴手套及配戴眼睛和粘膜保护装置。
3、只有好的实验室技术才能避免溅出和气溶胶产生,或将这种可能性降至最低。
吸血液及血清时要小心,不要倾倒。
严格禁止用嘴吸液。
4、吸管用后应完全浸没在次氯酸盐或其它适当的消毒液里,并且在处理之前,或洗刷及灭菌再利用前至少要浸泡18小时。
5、废弃的带有血点等的标本管,还有换下来的盖子,应当放到适当的、防渗漏的容器中,以备高压和(或)焚烧。
6、每天都应新配制次氯酸盐溶液,用以清除溅出物及溢出物。
十一、混匀仪使用的操作规程
1、所有混匀仪应处于正常的工作状态并具有合格的机械性能,以避免伤害事故的发生。
2、混匀仪应放在适宜的位置和高度,以便于工作人员的各项操作。
3、操作病原微生物时,混匀仪必须在生物安全柜内进行
4、在每一阶段工作结束后,必须采用适当的消毒剂清除工作区的污染
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