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届高考生物热点基因工程
2021届高考生物热点:
基因工程
真题回放
1.(2019·全国卷Ⅰ,38)基因工程中可以通过PCR技术扩增目的基因。
回答下列问题。
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。
基因文库包括_基因组文库__和_cDNA文库__。
(2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是_解旋酶__。
在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是_加热至90~95_℃__。
上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的_氢键__。
(3)目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是_Taq酶热稳定性高,而大肠杆菌DNA聚合酶在高温下会失活__。
[解析]
(1)基因工程中的基因文库包括基因组文库和部分基因文库(cDNA文库)。
(2)生物体细胞内的DNA复制开始时,通过解旋酶解开DNA双链。
在体外利用PCR技术扩增目的基因时,通过高温(90~95℃)使反应体系中的模板DNA解链为单链。
上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的氢键。
(3)大肠杆菌DNA聚合酶不耐高温,在高温下会失活,而PCR反应体系中加入的聚合酶需耐高温,故在PCR反应中要用能耐高温的Taq酶。
2.(2019·天津卷,9)B基因存在于水稻基因组中,其仅在体细胞(2n)和精子中正常表达,但在卵细胞中不转录。
为研究B基因表达对卵细胞的影响,设计了如下实验。
据图回答:
(1)B基因在水稻卵细胞中不转录,推测其可能的原因是卵细胞中_D__(单选)。
A.含B基因的染色体缺失
B.DNA聚合酶失活
C.B基因发生基因突变
D.B基因的启动子无法启动转录
(2)从水稻体细胞或_精子__中提取总RNA,构建_cDNA__文库,进而获得B基因编码蛋白的序列。
将该序列与Luc基因(表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光)连接成融合基因(表达的蛋白质能保留两种蛋白质各自的功能),然后构建重组表达载体。
(3)在过程①、②转化筛选时,过程_②__中T-DNA整合到受体细胞染色体DNA上,过程_①__在培养基中应加入卡那霉素。
(4)获得转基因植株过程中,以下鉴定筛选方式正确的是_BCD__(多选)。
A.将随机断裂的B基因片段制备成探针进行DNA分子杂交
B.以Luc基因为模板设计探针进行DNA分子杂交
C.以B基因编码蛋白的序列为模板设计探针与从卵细胞提取的mRNA杂交
D.检测加入荧光素的卵细胞中是否发出荧光
(5)从转基因植株未成熟种子中分离出胚,观察到细胞内仅含一个染色体组,判定该胚是由未受精的卵细胞发育形成的,而一般情况下水稻卵细胞在未受精时不进行发育,由此表明_B基因表达能使卵细胞不经受精直接发育成胚__。
[解析]
(1)因B基因存在于水稻的基因组中,故水稻卵细胞中也含有B基因,但B基因在水稻卵细胞中不转录,其原因可能是B基因的启动子无法启动转录。
(2)根据题干可知,B基因在水稻的体细胞和精子中正常表达,故若要通过构建cDNA文库获得B基因编码蛋白的序列,则需从水稻的体细胞或精子中提取总RNA,通过反转录法实现。
(3)图示为农杆菌转化法,过程①是筛选导入了重组质粒的农杆菌。
由图示可知,质粒上的卡那霉素抗性基因可作为标记基因,故可在培养基中加入卡那霉素进行筛选。
过程②是用含重组质粒的农杆菌感染水稻愈伤组织,使重组质粒中的T-DNA整合到水稻愈伤组织细胞染色体的DNA上。
(4)A项选用随机断裂的B基因片段制备探针,作为探针的B基因会不完整,与其杂交的DNA片段有可能不是B基因,因此随机断裂的B基因片段制备的探针不能用于筛选转基因植株,A项错误;据图可知,导入的是B-Luc融合基因,故可用DNA分子杂交的方法检测卵细胞中是否含有B基因或者Luc基因,B项正确;也可用核酸分子杂交的方法检测卵细胞中B基因或者Luc基因是否转录产生了相应的mRNA,即可用B基因编码蛋白的序列为模板设计探针与相应mRNA杂交,C项正确;因Luc基因表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光,故还可以检测加入荧光素的卵细胞中是否发出荧光,从而筛选出转基因植株,D项正确。
(5)从转基因植株未成熟种子中分离出的胚细胞内仅含一个染色体组,据此可知该胚由未受精的卵细胞发育形成,而一般情况下水稻卵细胞在未受精时不进行发育,可见卵细胞中B基因的表达可使其不经受精直接发育成胚。
3.(2019·江苏卷,16)下列生物技术操作对遗传物质的改造,不会遗传给子代的是( D )
A.将胰岛素基因表达质粒转入大肠杆菌,筛选获得基因工程菌
B.将花青素代谢基因导入植物体细胞,经组培获得花色变异植株
C.将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵,培育出产低乳糖牛乳的奶牛
D.将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者,进行基因治疗
[解析] 基因工程菌中含目的基因,能通过繁殖遗传给子代,A项不符合题意。
经组培获得的转基因植株的细胞中都含目的基因,能够遗传给子代,B项不符合题意。
培育得到的转基因奶牛的细胞中都含目的基因,故能遗传给子代,C项不符合题意。
由题干信息可知,进行题述基因治疗时只有淋巴细胞含目的基因,生殖细胞不含目的基因,故不能遗传给子代,D项符合题意。
4.(2018·全国卷Ⅰ)回答下列问题:
(1)博耶(H.Boyer)和科恩(S.Cohen)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达。
该研究除证明了质粒可以作为载体外,还证明了_体外重组的质粒可以进入受体细胞;真核生物基因可在原核细胞中表达__(答出两点即可)。
(2)体外重组的质粒可通过Ca2+参与的_转化__方法导入大肠杆菌细胞;而体外重组的噬菌体DNA通常需与_外壳蛋白(或答噬菌体蛋白)__组装成完整噬菌体后,才能通过侵染的方法将重组的噬菌体DNA导入宿主细胞。
在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中,可作为重组噬菌体宿主细胞的是_细菌__。
(3)真核生物基因(目的基因)在大肠杆菌细胞内表达时,表达出的蛋白质可能会被降解。
为防止蛋白质被降解,在实验中应选用_蛋白酶缺陷型__的大肠杆菌作为受体细胞,在蛋白质纯化的过程中应添加_蛋白酶__的抑制剂。
[解析]
(1)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌中,该过程利用的技术是基因工程。
该研究除了证明质粒可作为载体外,还证明了体外重组的质粒可以进入受体细胞,真核生物基因可在原核细胞中表达等。
(2)重组质粒导入大肠杆菌细胞可采用Ca2+参与的转化方法;体外重组噬菌体要通过将体外重组的噬菌体DNA和外壳蛋白(或噬菌体蛋白)进行组装获得;因为噬菌体是专门寄生在细菌中的病毒,所以宿主细胞选用细菌。
(3)为防止蛋白质被降解,在实验中应选用蛋白酶缺陷型的大肠杆菌作为受体细胞;在蛋白质纯化过程中,为防止目的蛋白质被降解,需要添加蛋白酶的抑制剂。
5.(2017·全国卷Ⅰ)真核生物基因中通常有内含子,而原核生物基因中没有,原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。
已知在人体中基因A(有内含子)可以表达出某种特定蛋白(简称蛋白A)。
回答下列问题:
(1)某同学从人的基因组文库中获得了基因A,以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A,其原因是_基因A有内含子,在大肠杆菌中,其初始转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除,无法表达出蛋白A__。
(2)若用家蚕作为表达基因A的受体,在噬菌体和昆虫病毒两种载体中,不选用_噬菌体__作为载体,其原因是_噬菌体的宿主是细菌,而不是家蚕__。
(3)若要高效地获得蛋白A,可选用大肠杆菌作为受体,因为与家蚕相比,大肠杆菌具有_繁殖快、容易培养__(答出两点即可)等优点。
(4)若要检测基因A是否翻译出蛋白A,可用的检测物质是_蛋白A的抗体__(填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”)。
(5)艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献,也可以说是基因工程的先导,如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示,那么,这一启示是_DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体__。
[解析]
(1)人为真核生物,从人的基因组文库中获取的基因A含有内含子,基因A转录出的产物中有与内含子对应的RNA序列。
大肠杆菌为原核生物,没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制,因此以大肠杆菌作为受体细胞,不能切除内含子对应的RNA序列,无法表达出蛋白A。
(2)噬菌体和动物病毒均可作为基因工程的载体,但它们的宿主细胞不同。
题中受体为家蚕,是一种昆虫,因此,选择昆虫病毒作为载体,噬菌体的宿主是细菌,不适合作为该实验的载体。
(3)大肠杆菌具有繁殖快、容易培养、单细胞、遗传物质少等优点,因此,常作为基因工程的受体细胞。
(4)常用抗原——抗体杂交的方法检测目的基因是否表达,故能用于检测蛋白A的物质为蛋白A的抗体。
(5)艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验中,S型菌的DNA转移到了R型菌体内,其对基因工程理论的建立提供的启示是DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体。
6.(2017·全国卷Ⅱ)几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,几丁质酶可催化几丁质水解。
通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内,可增强其抗真菌病的能力。
回答下列问题:
(1)在进行基因工程操作时,若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA,常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料,原因是_嫩叶组织细胞易破碎__。
提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是_防止RNA降解__。
(2)以mRNA为材料可以获得cDNA,其原理是_在逆转录酶的作用下,以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则可以合成cDNA__。
(3)若要使目的基因在受体细胞中表达,需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞,原因是_目的基因无复制原点;目的基因无表达所需启动子__(答出两点即可)。
(4)当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是_磷酸二酯键__。
(5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是_目的基因的转录或翻译异常__。
[解析]
(1)在进行基因工程操作时,若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA,常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料,原因是相对于老叶而言嫩叶组织细胞更容易被破碎。
提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是防止RNA降解。
(2)以mRNA为材料获得cDNA的原理是在逆转录酶的作用下,以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则可以合成cDNA。
(3)若要使目的基因在受体细胞中表达,需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞,原因是目的基因无复制原点且目的基因无表达所需启动子。
(4)DNA连接酶催化形成的化学键是磷酸二酯键。
(5)若获得的转基因植株不具备所期望的性状表现,根据中心法则分析,其可能的原因是目的基因的转录或翻译异常。
7.(2017·全国卷Ⅲ)编码蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五个片段组成,编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成,如图1所示。
回答下列问题:
(1)先要通过基因工程的方法获得蛋白乙,若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA),则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙,原因是_编码乙的DNA序列起始端无ATG,转录出的mRNA无起始密码子__。
(2)某同学在用PCR技术获取DNA片段B或D的过程中,在PCR反应体系中加入了DNA聚合酶、引物等,还加入了序列甲作为_模板__,加入了_dNTP__作为合成DNA的原料。
(3)现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白,要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用,某同学做了如下实验:
将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组,其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一组作为对照,培养并定期检测T淋巴细胞浓度,结果如图2。
①由图2可知,当细胞浓度达到a时,添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加,此时若要使T淋巴细胞继续增殖,可采用的方法是_进行细胞传代培养__。
细胞培养过程中,培养箱中通常要维持一定的CO2浓度,CO2的作用是_维持培养液的pH__。
②仅根据图1、图2可知,上述甲、乙、丙三种蛋白中,若缺少_C__(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所编码的肽段,则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。
[解析]
(1)若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA),则转录出的mRNA上缺少起始密码子,故不能翻译出蛋白乙。
(2)使用PCR技术获取DNA片段时,应在PCR反应体系中添加引物、耐高温的DNA聚合酶、模板、dNTP作为原料。
(3)T淋巴细胞浓度之所以不再增加,是因为细胞间出现接触抑制,因此若要使T淋巴细胞继续增殖,需要对贴满瓶壁的细胞使用胰蛋白酶处理,然后分瓶培养,即细胞传代培养。
细胞培养过程中,培养箱中通常要维持一定的CO2浓度,以维持培养液的pH。
据图分析,蛋白丙与对照接近说明B、D片段对于T淋巴细胞增殖不是非常重要,蛋白甲和乙对T淋巴细胞的增殖都有较大影响,甲、乙两种蛋白中共同的且区别于丙和对照的片段是C,所以缺少C片段会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。
核心拓展
1.理清基因工程3种操作工具的作用与特点
项目
限制酶
DNA连接酶
运载体
作用
切割_目的基因和运载体__
拼接DNA片段,形成_重组DNA分子__
携带目的基因进入_受体细胞__
作用部位
两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键
作用特点(条件)
①识别特定的核苷酸序列;
②在特定位点上切割DNA分子
①_E·coliDNA__连接酶只能连接黏性末端;
②_T4DNA__连接酶能连接黏性末端和平末端
①能在宿主细胞内稳定存在并大量_复制__;
②有一个至多个_限制酶切割位点__;
③具有特殊的_标记基因__
2.掌握获取目的基因的3种途径
(1)直接分离:
从自然界已有的物种中分离,如从_基因文库__中获取。
(2)人工合成目的基因(常用方法如下)
①化学合成法:
已知核苷酸序列的较小基因,直接利用
_DNA合成仪__用化学方法合成,不需要模板。
②人工合成法:
以_RNA__为模板,在_逆转录酶__的作用下人工合成。
(3)利用_PCR__技术扩增。
3.牢记基因表达载体的构建
(1)基因表达载体的组成:
目的基因+启动子+终止子+_标记基因__+复制原点。
(2)启动子和终止子:
启动子是_RNA聚合酶__识别和结合的部位,启动转录;终止子是_终止转录__的位点。
(3)基因表达载体的构建过程
4.将目的基因导入受体细胞
生物种类
植物细胞
动物细胞
微生物细胞
常用方法
_农杆菌转化__法、基因枪法、花粉管通道法等
_显微注射__技术
_感受态细胞__法(Ca2+处理法)
受体细胞
体细胞
受精卵
原核细胞
5.理清目的基因的检测与鉴定
(1)导入检测:
_DNA分子__杂交技术(使用DNA探针)
(2)表达检测
(3)个体生物学水平鉴定:
如对转基因作物进行抗虫或抗病等的接种实验。
题型突破
题型1 基因工程的操作工具、流程和PCR
1.(2019·江苏卷,33)图1是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图,载体质粒P0具有四环素抗性基因(tetr)和氨苄青霉素抗性基因(ampr)。
请回答下列问题:
图1
(1)EcoRV酶切位点为
,EcoRV酶切出来的线性载体P1为_平__末端。
(2)用TaqDNA聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段,其两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸。
载体P1用酶处理,在两端各添加了一个碱基为_胸腺嘧啶(T)__的脱氧核苷酸,形成P2;P2和目的基因片段在_DNA连接__酶作用下,形成重组质粒P3。
(3)为筛选出含有重组质粒P3的菌落,采用含有不同抗生素的平板进行筛选,得到A、B、C三类菌落,其生长情况如下表(“+”代表生长,“-”代表不生长)。
根据表中结果判断,应选择的菌落是_B__(填表中字母)类,另外两类菌落质粒导入情况分别是_A类菌落含有P0__、_C类菌落未转入质粒__。
菌落类型
平板类型
A
B
C
无抗生素
+
+
+
氨苄青霉素
+
+
-
四环素
+
-
-
氨苄青霉素+四环素
+
-
-
(4)为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒,拟设计引物进行PCR鉴定。
图2所示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置,PCR鉴定时应选择的一对引物是_乙丙__。
某学生尝试用图中另外一对引物从某一菌落的质粒中扩增出了400bp片段,原因是_目的基因反向连接__。
图2
[解析]
(1)从图中可以看出,EcoRⅤ酶切出来的载体质粒为平末端。
(2)从图中可以看出,目的基因的两端各有一个游离的腺嘌呤脱氧核苷酸,由于载体P1为平末端,所以载体P1的两端应该各添加一个胸腺嘧啶脱氧核苷酸,这样在DNA连接酶的作用下才能把目的基因和载体P1连接起来。
(3)由题意可知,构建重组质粒时四环素抗性基因被破坏,所以导入目的基因的菌落只能在没有抗生素或含有氨苄青霉素的培养基中存活,应该选B类菌落。
A类菌落能在表中条件下存活,说明导入的是P0质粒。
C类菌落只能在无抗生素的培养基中存活,说明C类菌落没有导入质粒。
(4)据图分析,目的基因的外侧链只能用丙作引物,内侧链可用甲、乙作引物,如果用甲、丙作引物,则无论目的基因是否插入正确,都能通过PCR扩增大量目的基因,如果用乙、丙作为引物,当目的基因插入不正确(反向插入)时,则乙、丙两引物都结合在外侧,PCR不能正常进行,无法进行扩增鉴定,因此只能选用乙、丙作为引物。
若扩增出的DNA片段为400bp,则正好是目的基因反向连接后,外侧链用乙作引物,内侧链用甲作引物扩增出的片段。
2.(2016·全国卷Ⅰ)某一质粒载体如图所示,外源DNA插入到Ampr或Tett中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tett表示四环素抗性基因)。
有人将此质粒载体用BamHI酶切后,与用BamHI酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。
结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。
被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。
回答下列问题:
(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有_能自我复制、具有标记基因__(答出两点即可),而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。
(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是_二者均不含有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均不生长__;并且_含有质粒载体__和_含有插入了目的基因的重组质粒(或答含有重组质粒)__的细胞也是不能区分的,其原因是_二者均含有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均能生长__。
在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落,还需使用含有_四环素__的固体培养基。
(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为运载体,其DNA复制所需的原料来自_受体细胞__。
[解析]
(1)作为运载体的质粒上应有一个至多个限制酶切割位点,在细胞中能够自我复制,并含有特殊的标记基因。
(2)未被转化的大肠杆菌和仅含环状目的基因的大肠杆菌中均未导入质粒载体,而质粒上含有氨苄青霉素抗性基因,因此这样的大肠杆菌在含有氨苄青霉素的培养基中不能生长。
含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌中都含有氨苄青霉素抗性基因,二者在含有氨苄青霉素的培养基中都能生长,因此无法区分二者。
由题图可知,用BamHI切割质粒后将四环素抗性基因破坏,因此可将经氨苄青霉素培养基筛选出的菌落置于含有四环素的培养基上再次筛选,能在含四环素培养基上生存的是含有质粒载体的大肠杆菌,不能生存的是含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。
(3)噬菌体为病毒,经改造后作为载体时,其DNA复制所需原料来自受体细胞。
3.奶酪生产中的凝乳酶是一种分泌蛋白。
研究人员利用PCR技术扩增了目的基因,并培育了能合成凝乳酶的转基因酵母菌。
请结合如图回答:
(1)利用PCR技术扩增目的基因的原理与细胞内DNA复制类似(如图1所示)。
图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。
从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为_15/16__,PCR扩增技术反应体系的主要成分应包含:
扩增缓冲液(含ATP和Mg2+)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、引物和_TaqDNA聚合酶__。
(2)为了食品安全,图2所示的表达载体需用_ApaLI__酶切除抗性基因的部分片段,再用_DNA连接__酶使表达载体重新连接起来。
选用缺失URA3基因的酵母菌作为受体细胞(必须在含有尿嘧啶的培养基中才能存活),为了筛选出成功导入表达载体的酵母菌,所使用的培养基_不需要__(填“需要”或“不需要”)添加尿嘧啶。
(3)测定凝乳酶基因转录的mRNA序列,测得从起始密码子到终止密码子之间的序列为1201个碱基,经判断这段序列的测定是错误的,为什么?
_因为生物决定每个氨基酸的碱基序列为三联密码,所以基因转录的mRNA序列应为3的整倍数__。
[解析]
(1)由图1可以知道,由原来的每条母链为模板合成的两个新DNA分子中,只含有引物A或引物B,而以新合成的子链为模板合成新DNA分子时,两种引物都含有,故第四轮循环共产生16个DNA分子,其中含有引物A的是15个,占15/16。
PCR扩增技术反应体系的主要成分应包含:
扩增缓冲液(含ATP和Mg2+)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、引物和TaqDNA聚合酶。
(2)根据图2显示ApaLI酶切位点在氨苄青霉素抗性基因中,因此可以采用ApaLI酶切除抗性基因的部分片段,再用DNA连接酶使表达载体重新连接起来。
因为缺失URA3基因的酵母菌必须在含有尿嘧啶的培养基中才能存活。
重组质粒中含有URA3基因。
为了筛选出成功导入表达载体的酵母菌,即所使用的培养基不需要添加尿嘧啶,如果能存活,说明导入成功;如果不能存活,说明没有成功。
(3)因为生物决定每个氨基酸的碱基序列为三联密码,所以基因转录的mRNA序列应为3的整倍数。
从起始密码子到终止密码子之间的序列为1201个碱基,不是3的整倍数,因此可以判断这段序列的测定是错误的。
有关基因工程操作过程的4个错混点
(1)基因表达需要启动子与终止子的调控,所以目的基因应插入启动子与终止子之间的部位。
(2)目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为转化。
转化的实质是目的基因整合到受体细胞染色体基因组中。
(3)标记基因的作用——筛选、检测目的基因是否导入受体细胞,常见的有抗生素抗性基因、发光基因(表达产物为带颜色的物质)等。
(4)受体细胞常用植物受精卵或体细胞(经组织培养培养成新个体)、动物受精卵(一般不用体细胞)、微生物(大肠杆菌、酵母菌)等。
要合成糖蛋白、有生物活性的胰岛素则必须用真核生物酵母菌(需内质网、高尔基体的加工、分泌);一般不用支原体,原因是它营寄生生活;一定不能用哺乳动物成熟的红细胞,原因是它无细胞核,不能合成蛋白质。
4.乙肝病毒是一种DNA病毒。
中国的乙肝病毒携带者约占总人口的10%。
我国科学家通过基因工程生产出乙型肝炎病毒疫苗,为预防乙肝提供了有力的保障。
据此回答下列问题:
(1)乙肝病毒专一侵染肝细胞的原因是_肝细胞膜表面有乙肝病毒的受体__。
(2)乙肝病毒的
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