理化检验标准Word文件下载.docx
- 文档编号:6311011
- 上传时间:2023-05-06
- 格式:DOCX
- 页数:22
- 大小:46.31KB
理化检验标准Word文件下载.docx
《理化检验标准Word文件下载.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《理化检验标准Word文件下载.docx(22页珍藏版)》请在冰点文库上搜索。
4.分析步骤
样品处理:
固体0.2g-2g半固体2g-5g液体10g-25g(约含氨30-40mg),精确至0.001g。
移入100ml、250ml、500ml或1000ml定氮瓶中,加入0.2g硫酸铜、6g硫酸钾及20ml硫酸,轻摇匀后于瓶口放一小漏斗,将瓶以45℃角斜支于有小孔的石棉网上。
小火加热,待内容物全部炭化,泡沫完全停止后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至液体呈蓝绿色并澄清透明(消化过程中要不时摇定氮瓶,使瓶壁上未消化的样品消化完全)后再继续加热0.5h-1.0h。
取下放冷,小心加20ml水,放冷后转入100ml容量瓶中,用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,加水至刻度,摇匀。
测定:
水蒸气发生器加水2/3,加数粒玻璃珠及几滴甲基红指示剂和数毫升硫酸,以保持水呈酸性。
向接受瓶内加10.0毫升硼酸吸收液及1、2滴混合指示剂,并使冷凝管下端插入液面下,根据试样中氨的含量,加入2.0-10.0毫升试样处理液由小玻杯注入反应室,以10毫升水冲洗,塞紧玻塞,加10毫升氢氧化钠入小玻杯,提起波塞流入反应室,立即塞紧。
蒸馏10分钟后移动接收瓶,冷凝管下端离开液面,再蒸馏1分钟,少量水冲洗冷凝管下端外部。
取下接收瓶,滴定。
同时做试剂空白。
结果计算:
蛋白质(%)=((V1-V2)×
N×
0.014×
F)×
100/m×
(2~10)/100
V1:
样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积,ml;
V2:
试剂空白消耗硫酸或盐酸标准溶液的体积,ml;
N:
硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度;
m:
样品的质量(体积),g(ml);
0.0140------1.0毫升硫酸或盐酸(1.000mol/L)标准滴定溶液相当的氮的质量,单位为克。
F换算系数:
一般食物为6.25.;
纯乳与纯乳制品为6.38;
面粉为5.70;
玉米、高粱为6.24;
花生为5.46;
大米为5.95;
大豆及其粗加工制品为5.71;
大豆蛋白制品为6.25;
肉与肉制品为6.25;
大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83;
芝麻、向日葵为5.30;
复合配方食品为6.25。
以重复性条件下获得的两次独立测量结果的算术平均值表示,蛋白质含量≥1g/100g时,结果保留三位有效数字;
蛋白质含量<1g/100g时,结果保留两位有效数字;
在重复性条件下获得的两次独立测量结果的绝对差值(︱X1-X2︱)不得超过算术平均值((X1+X)/2)的10%
注:
(1)样品应是均匀的,固体样品应预先研细混匀,液体样品应振摇或搅拌均匀。
(2)样品放入定氮瓶内时,不要沾附颈上,万一沾附可用少量水冲下,以免被检样消化不完全,结果偏低。
(3)消化时如不容易呈透明溶液,可将定氮瓶放冷后,慢慢加入30%过氧化氢2-3ml,促使氧化。
(4)在整个消化过程中,不要用强火,保持和缓的沸腾,使火力集中在凯氏瓶底部,以免附在壁上的蛋白质在无硫酸存在的情况下,使氮有损失。
(5)如硫酸缺少,过多的硫酸钾会引起氨的损失,这样会形成硫酸氢钾,而不与氨作用,因此当硫酸过多的被消耗或样品中脂肪含量过高时,要增加硫酸的量。
(6)加入硫酸钾的作用为增加溶液的沸点,硫酸铜为催化剂,硫酸铜在蒸馏时作碱性反应的指示剂。
(7)混合指示剂在碱性溶液中呈绿色,在中性溶液中呈灰色,在酸性溶液中呈红色。
(8)氨是否完全蒸馏出来,可用精密PH试纸试馏出液是否为碱性。
(9)以硼酸为氨的吸收液,可省去标定碱液的操作,且硼酸的体积要求并不严格,亦可免去用移液管,操作比较简便。
(10)吸收液也可以用0.01当量的酸代表硼酸,过剩的酸液用0.01N碱液滴定,计算时,A为试剂空白消耗碱液数,B为样品消耗碱液数,N为碱液浓度,其余均相同。
(11)向蒸馏瓶中加入浓碱时,往往出现褐色沉淀物,这是由于分解促进碱与加入的硫酸铜反应,生成氢氧化铜,经加热后又分解生成氧化铜的沉淀。
有时铜离子与氨作用,生成深兰色的结合物[Cu(NH3)4]++
(12)热源的强度.消化时热源的强度同迅速消化和完全氨化关系很大,即便盐类K2SO4加得多,如果热源弱,也是没有意义的,热源过强导致H2SO4损失,使氨回收率低,另外K氏瓶的容量大小,颈部的粗细和长短等,也与热源的强度有关。
微量凯氏定氮仪的安装和使用技能训练
1、先选取三个稳固的铁架台,三个铁夹。
2、安装反应管。
取一铁架台和一铁夹,将铁夹紧固在铁架台上,松开夹子,将反应管中上部夹紧在铁夹上,其高度和倾斜度应合适。
3、安装冷凝管。
另取一铁架台和一铁夹,将铁夹紧固在铁架台上,松开夹子,将冷凝管中部夹紧在铁夹上,使其倾斜度与反应管的导气端弯头平行,小心移动至弯头下端,稍稍松开铁夹后上移冷凝管使其与反应管密封连接好。
调节铁架台至合适位置再夹紧铁夹。
4、安装蒸汽发生器。
再取一铁架台和一铁夹,将铁夹紧固在铁架台上,松开夹子,将蒸汽发生瓶颈部夹紧在铁夹上。
导汽管与反应管的进汽管连接好。
5、将所有的夹子打开。
取下样品加入口的磨口塞,从样品加入口加入50mL的蒸馏水,再插回塞好。
并给冷凝管接通冷凝水。
6、往蒸汽发生瓶加入蒸馏水至其体积的三分之二处,加入几粒沸石和4滴甲基橙,再加入3mL浓硫酸,然后置于电炉上加热使水沸腾。
7、产生蒸汽后,夹上夹子1,让蒸汽经导管进入反应管外套,待废液排放口排出蒸汽后,夹上夹子3,使蒸汽进入反应管,蒸馏洗涤10分钟。
打开夹子1,同时夹上夹子2,待反应管内的水全部排出到外套后,打开夹子3,排出废水。
马上从进样口加入蒸馏水约20mL,立即再夹上夹子3,待水排出,反复操作3次,洗涤完毕。
8、打开全部夹子,停止加热,待冷却后按与安装相反的顺序拆除装置并洗涤干净。
食品中挥发性盐基氮的测定GB5009.44-2003.4.1
半微量定氮法
(一)目的意义
挥发性盐基氮属于蛋白质分解产物,这些分解产物的含量与动物性食品的新鲜程度有明显的对应关系。
故此指标可用于评价动物性食品的新鲜度。
(二)原理
挥发性盐基氮是指动物性食品由于酶和细菌的作用,在腐败过程中,使蛋白质分解而产生氨以及胺类等碱性含氮物质。
此类物质具有挥发性,在碱性溶液中蒸出后,用标准酸溶液滴定计算含量。
(三)仪器与试剂
1.微量凯氏定氮器,微量滴定管(最小分度0.01ml)。
2.1%氧化镁混悬液称取1.0g氧化镁,加100ml水,振摇成混悬液。
3.2%硼酸液称取20g硼酸溶解在少量蒸馏水中,再稀释至1000ml。
4.混合指示液0.2%甲基红乙醇溶液与0.1%次甲基蓝溶液,临用时等量混合。
5.0.01mol/L盐酸标准溶液
(四)操作步骤
将样品除去脂肪、骨及腱后,切碎搅匀,称取10g,置于锥形瓶中,加100ml水,不时振摇,浸渍30min后过滤,滤液置冰箱备用。
预先将盛有10ml吸收液并加有5~6滴混合指示液的锥形瓶置于冷凝管下端,并使其下端插入锥形瓶内吸收液的液面下,吸取5.0ml上述样品滤液于蒸馏器反应室内,加5mll%氧化镁混悬液,迅速盖塞,并加水以防漏气,通入蒸气,待蒸气充满蒸馏器内时即关闭蒸气出口管,由冷凝管出现第一滴冷凝水开始计时,蒸馏5min即停止(溶液为蓝色或深蓝色),吸收液用0.01mol/L盐酸标准溶液滴定,终点至蓝紫色(若过量则为紫色)。
同时做试剂空白试验。
(五)结果计算
(V1-V2)×
M×
14×
100/(m×
5/100)
式中:
Xl------样品中挥发性盐基氮的含量,mg/100g
Vl------测定用样液消耗盐酸标准溶液体积,ml
V2------试剂空白消耗盐酸标准溶液体积,ml
M-------盐酸标准溶液的摩尔浓度,mol/L
14-------1mol/L盐酸标准溶液1毫升相当氮的毫克数
m-----样品质量,g
计算结果保留三位有效数字。
在重复性条件下获得的两次独立测量结果的绝对差值(︱X1-X2︱)不得超过算术平均值((X1+X)/2)的10%
(六)注意事项
见食品中蛋白质的测定。
食品中还原糖的测定GB5009.7-2008
直接滴定法
试样经除去蛋白质后,在加热条件下,以亚甲基蓝为指示剂,滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液(用某种还原糖标准溶液标定),根据样品液消耗体积计算还原糖含量。
碱性酒石酸铜溶液甲液:
15g硫酸铜、0.05g亚甲基蓝→1000ml
碱性酒石酸铜溶液乙液:
50g酒石酸钾钠、75g氢氧化钠、4g亚铁氰化钾→1000ml
乙酸锌(219g/L):
21.9g乙酸锌、3ml冰乙酸→100ml
亚铁氰化钾(106g/L):
10.6g亚铁氰化钾→100ml
葡萄糖标准溶液:
称取1g(精确至0.0001g)经过98-100℃干燥2小时的葡萄糖,加水溶解再加5ml盐酸→1000ml。
此溶液每毫升相当于1.0mg葡萄糖
25ml酸式滴定管(不好用,一般用碱式滴定管),可调电炉(带石棉网)
一般食品,固体2.5g-5g液体5g-25g,精确至0.001g。
置250ml容量瓶中,加水50ml,(难溶解的样品要适当水浴,并时时振摇,冷却后)慢慢加入5ml乙酸锌和5ml亚铁氰化钾,加水至刻度。
混匀,静置30分钟,干滤纸过滤,弃去初滤液,取续滤液备用。
含大量淀粉的食品,称取10g-20g,精确至0.001g。
置250ml容量瓶中,加水200ml,45℃水浴1小时,并时时振摇,冷后慢慢加入5ml乙酸锌和5ml亚铁氰化钾,加水至刻度。
5.标定碱性酒石酸铜溶液:
(计算A)
吸取5.0ml碱性酒石酸铜甲液及5.0ml碱性酒石酸铜乙液,置于150ml锥形瓶中,加水10ml,加入玻璃珠两粒,从滴定管中加约9ml葡萄糖标准溶液,控制在2分钟内加热至沸,趁热以2秒一滴速度继续滴加葡萄糖标准溶液,直至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录体积,平行测定3次,取平均值。
也可取2-10ml甲乙液标定来适应试样中还原糖的浓度变化。
6.试样溶液预测
吸取5.0ml碱性酒石酸铜甲液及5.0ml碱性酒石酸铜乙液,置于150ml锥形瓶中,加水10ml,加入玻璃珠两粒,控制在2分钟内加热至沸,保持沸腾以先快后慢的速度滴定,待溶液颜色变浅时,以2秒一滴速度继续滴定,直至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录体积(预测体积)。
当样液中还原糖浓度过高时(滴定样液大大低于10ml),应适当稀释后再滴定,使滴定的样液在10ml左右(或用取2-10ml甲乙液标定来适应试样中还原糖的浓度变化)。
7测定:
吸取5.0ml碱性酒石酸铜甲液及5.0ml碱性酒石酸铜乙液,置于150ml锥形瓶中,加水10ml,加入玻璃珠两粒,从滴定管中加比预测体积少1ml的试样溶液至锥形瓶中,使在2分钟内加热至沸,保持2秒一滴的速度滴定,直至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录样液消耗体积,测定3次,取平均值。
8结果计算:
X=(A×
250/m×
v×
1000)×
100
还原糖含量≥10g/100g时,结果保留三位有效数字;
还原糖含量<10g/100g时,结果保留两位有效数字;
还原糖检测注意事项
1.费林试剂甲液和乙液应分别贮存,用时才混合,否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀,使试剂有效浓度降低。
2.滴定必须是在沸腾条件下进行,其原因一是加快还原糖与Cu2+的反应速度;
二是亚甲基蓝的变色反应是可逆的,还原型的亚甲基蓝遇空气中的氧时会再被氧化为氧化型。
此外,氧化亚铜也极不稳定,易被空气中的氧所氧化。
保持反应液沸腾可防止空气进入,避免亚甲基蓝和氧化亚铜被氧化而增加消耗量。
3.滴定时不能随意摇动锥形瓶,更不能把锥形瓶从热源上取下来滴定,以防止空气进入反应溶液中。
4.本方法测定的是一类具有还原性质的糖,包括葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖等,只是结果用葡萄糖或其他转化糖的方式表示,所以不能误解为还原糖=葡萄糖或其他糖。
但如果已知样品中只含有某一种糖,如乳制品中的乳糖,则可以认为还原糖=某糖。
5.分别用葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖标准品配制标准溶液分别滴定等量已标定的费林氏液,所消耗标准溶液的体积有所不同。
证明即便同是还原糖,在物化性质上仍有所差别,所以还原糖的结果只是反映样品整体情况,并不完全等于各还原糖含量之和。
如果已知样品只含有某种还原糖,则应以该还原糖做标准品,结果为该还原糖的含量。
如果样品中还原糖的成分未知,或为多种还原糖的混合物,则以某种还原糖做标准品,结果以该还原糖计,但不代表该糖的真实含量。
6.乙酸锌可去除蛋白质、鞣质、树脂等,使它们形成沉淀,经过滤除去。
如果钙离子过多时,易与葡萄糖、果糖生成络合物,使滴定速度缓慢;
从而结果偏低,可向样品中加入草酸粉,与钙结合,形成沉淀并过滤。
)A、裵林试剂的最终标定及样品的最终滴定在1min内完成.
7.配制葡萄糖标准溶液应非常准确.一定控制好滴定速度.每班测定一次C标,将浓度值填写在记录表格中。
滴定终点则为兰色褪去出现明亮颜色(如亮红\亮黄色)
8、碱性酒石酸铜甲液中的硫酸铜的铜离子为此化学反应定量的标物,次甲基兰为氧化还原指示剂(氧化型为蓝色、还原型为无色)
9、此实验为什么要在碱性条件下进行,主要是在酸性条件下,还原糖会形成酯(不具有氧化性或氧化性不强的含氧酸如乙酸)、有机酸(如被硝酸氧化),样液中的二糖及多糖与淀粉会水解成还原糖,结果可想而知。
10、碱性酒石酸铜乙液中的酒石酸钾钠的作用:
既然实验得在碱性条件下进行,那么硫酸铜遇碱生成氢氧化铜沉淀后,不能使实验正常进行,必需使其(铜离子)在可溶状态下才行,酒石酸钾钠与铜离子络合就达到了目的。
11、影响实验结果的主要因素为:
a)反应液碱度:
碱度越高,反应速度越快,样液消耗也越多,故样品测定时样液的滴定体积要与标准相近,原理在此,这样误差要小。
b)锥形瓶规格:
不同体积的锥形瓶会致使加热的面积及样液的厚度有变化,同时瓶壁的厚度不同影响传热速率,故有时甚至是同一规格但不同批的锥形瓶也会引起误差。
c)加热功率:
加热的目的一是加快反应速度,二是防止次甲基兰与滴定过程中形成的氧化亚铜被氧气氧化,使结果偏高。
加热功率不同,样液沸腾时间不同,时间短样液消耗多,同时反应液蒸发速度不同,即时碱度的变化也就不同,故实验的平行性也就受影响。
d)滴定速度:
滴定速度越快,样液消耗也越多,结果会偏低。
12、滴定终点有时不显无色而显暗红色,是由于样液中亚铁氰化钾量不够,不能有效络合氧化亚铜成无色的原故。
故可在反应液中适量添加亚铁氰化钾,标准与样液添加量一样。
13.滴定点是在静止加热沸腾中的颜色瞬间变化,如果人为摇晃会造成额外氧化反应的叠加,造成滴定量加大,结果漂高。
用同一型号的滴定锥形瓶作空白,即可避免加热不均造成的热量差异。
14、碱性酒石酸铜甲液中的硫酸铜的铜离子为此化学反应定量的标物,次甲基兰为氧化还原指示剂(氧化型为蓝色、还原型为无色)1。
②、滴定速度要保持均衡一致,速度每1~2秒一滴为好(速度不要受滴定时间的长短而改变)
③、空白滴定和样品滴定一定要保证预加标准糖液量与最终数值差0.5~0.7mL(最好0.5mL)比如空白测定是22mL,再滴空白时标准糖液预加入到21.5mL。
如果这个空白又滴成了22.3mL,则下次空白滴定就预加到21.8mL,样品检测也依此类推。
④、电炉的温度对检测结果也有影响,所以要保证电炉充分预热,同时三角瓶在电炉上的放置位置要保持一致。
⑤、测定时液体沸腾后的开始滴定的时间也要保持一致,一般等液体充分沸腾后开始滴定。
⑥、滴定终点的判断也要保持一致。
一般等液面半边变透明为滴定终点。
⑦、糖液稀释及取样也要注意精确,注意吸管正确使用方法。
⑧、折光糖度精心检测,依此数据辅导还原糖的检测。
⑨、注意输液胶管漏液、变形,滴定管尖端气泡等对检测数值的影响。
⑩、三角瓶使用后清洗干净。
样品检测注意加水体积,加水量为滴定数与空白数之差,使样品检测总体积与空白滴定总体积大致相等
食品中蔗糖的测定GB5009.8-2008
酸水解法
试样经除去蛋白质后,其中蔗糖经盐酸水解转化为还原糖,再在按还原糖测定。
水解前后还原糖的差值为蔗糖含量。
氢氧化钠(200g/L):
20g氢氧化钠→100ml
盐酸(1+1):
50ml→100ml
甲基红指示剂(1g/L):
含蛋白质食品,固体2.5g-5g液体5g-25g,精确至0.001g。
置250ml容量瓶中,加水50ml,(难溶解样品要适当水浴,并时时振摇,冷却后)慢慢加入5ml乙酸锌和5ml亚铁氰化钾,加水至刻度。
5.酸水解:
吸取2份50ml上述处理液,分别置于100ml容量瓶中,其中一份加5ml盐酸(1+1),在68-70℃水浴中加热15分钟,冷后加2滴甲基红指示剂,用氢氧化钠(200g/L)中和至中性,加水至刻度,摇匀。
另一份直接加水稀释至刻度,摇匀。
6.标定碱性酒石酸铜溶液:
(计算A)吸取5.0ml碱性酒石酸铜甲液及5.0ml碱性酒石酸铜乙液,置于150ml锥形瓶中,加水10ml,加入玻璃珠两粒,从滴定管中加约9ml葡萄糖标准溶液,控制在2分钟内加热至沸,趁热以2秒一滴速度继续滴加葡萄糖标准溶液,直至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录体积,平行测定3次,取平均值。
7.试样溶液预测吸取5.0ml碱性酒石酸铜甲液及5.0ml碱性酒石酸铜乙液,置于150ml锥形瓶中,加水10ml,加入玻璃珠两粒,控制在2分钟内加热至沸,保持沸腾以先快后慢的速度滴定,待溶液颜色变浅时,以2秒一滴速度继续滴定,直至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录体积(预测体积)。
8测定:
9结果计算:
X=(R1-R2)*0.95
R1=水解前还原糖含量(g/100g)
R2=水解前还原糖含量(g/100g)
蔗糖含量≥10g/100g时,结果保留三位有效数字;
蔗糖含量<10g/100g时,结果保留两位有效数字;
食品中总糖的测定GB5009.7、8-2008
试样经除去蛋白质后,其中蔗糖经盐酸水解转化为还原糖,按还原糖测定。
水解后总还原糖的含量即为总糖含量(以某种还原糖计)。
吸取50ml上述处理液,分别置于100ml容量瓶中,加5ml盐酸(1+1),在68-70℃水浴中加热15分钟,冷后加2滴甲基红指示剂,用氢氧化钠(200g/L)中和至中性,加水至刻度,摇匀。
当样
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 理化 检验 标准