华东理工大学微生物学考研复习资料 微生物学问答题.docx
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华东理工大学微生物学考研复习资料微生物学问答题
问答题
绪论:
1.什么是微生物?
它包括哪些类群?
答:
微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称.
包括①原核类的细菌`放线菌`蓝细菌’支原体`立克次氏体和衣原体;②真核类的真菌`原生动物`和显微藻类,以及属于非细胞类的病毒和亚病毒.
2.微生物有哪五大共性?
其中最基本的是哪一个?
为什么?
答:
①.体积小,面积大;②.吸收多,转化快;③.生长旺,繁殖快;④.适应强,易变异;⑤.分布广,种类多。
其中,体积小面积大最基本,因为一个小体积大面积系统,必然有一个巨大的营养物质吸收面、代谢废物的排泄面和环境信息的交换面,并由此而产生其余4个共性。
第1章:
1、简单说明革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌在细胞壁的化学组成和结构方面的主要不同点。
答:
化学组成:
革兰氏阳性菌细胞壁肽聚糖含量高,含有垣酸,不含脂质;革兰氏阴性菌细胞壁肽聚糖含量很低,不含垣酸,脂质和蛋白质含量较高。
结构方面:
G+菌细胞壁厚度大(20-80nm)均匀,化学组分简单,革兰氏阴性菌细胞壁薄,层次较多,分为外膜和内膜,成分较复杂,肽聚糖层很薄(2-3nm),故机械强度较革兰氏阳性菌弱。
2、比较青霉素和溶菌酶在制备细菌原生质体中的作用机理。
(对细胞壁的作用机理)
答:
溶酶菌广泛存在于卵清、人的眼泪和鼻涕、部分细菌和噬菌体中,它能有效的水解细菌的肽聚糖,其作用部位是N-乙酰胞壁酸和N-乙酰葡糖胺之间的β-1,4-糖苷键,从而导致细菌细胞壁肽聚糖散架,它对生长期和休止期的细胞均有作用。
青霉素是肽聚糖单体末端的D-丙氨酰-D-丙氨酸的结构类似物,它们相互竞争转肽酶的活性中心。
当转肽酶与青霉素结合后,因前后两个肽聚糖单体间的肽桥无法交联,因而只能合成缺乏正常机械强度的缺损肽聚糖,从而形成细胞壁缺损的细胞。
因为它是抑制肽聚糖的合成,因此对生长旺盛的微生物具有明显的抑制作用,而对生长休止状态的细胞,则无作用。
3、什么是伴胞晶体?
它在何种细菌中产生?
有何实践意义?
答:
伴孢晶体意义:
。
。
。
。
。
。
何种细菌中产生:
主要存在于芽孢杆菌中。
实践意义:
伴孢晶体对鳞翅目、双翅目和鞘翅目等200多种昆虫和动植物线虫具有毒杀作用,因此可将这类细菌制成对人畜安全、对害虫的天敌和植物无害,有利于环境保护的生物农药。
4、何为“拴菌试验”?
它何以能说明鞭毛的运动机制?
答:
“拴菌”试验的做法是:
设法把单毛菌鞭毛的游离端用相应抗体牢牢“拴”在载玻片上,然后在光学显微镜下观察细胞的行为。
因实验结果发现,该菌是在载玻片上不断打转(而非伸缩挥动),故肯定了“旋转论”是正确的。
6.试述染色法的机制并说明此法的重要性。
答:
革兰氏染色的机制为:
通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。
G+由于其细胞壁较厚、肽聚糖层次多和交联致密,故遇脱色剂乙醇处理时,因失水而使网孔缩小,在加上它不含类脂,故乙醇的处理不会溶出缝隙,因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内,使其保持紫色。
反之,G-细菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄和交联度差,遇脱色剂乙醇后,以类脂为主的外膜迅速溶解,这时薄而松散的肽聚糖不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此细胞退成无色。
这时,在经品红等红色染料复染,就使G-细菌呈红色,而G+细菌则仍保留最初的紫色。
此法证明了G+和G-主要由于起细胞壁化学成分的差异而引起了物理特性的不同而使染色反应不同,是一种积极重要的鉴别染色法,不仅可以用与鉴别真细菌,也可鉴别古生菌。
7、芽孢在微生物学的研究上有何意义?
渗透调节皮层膨胀学说是如何解释芽孢耐热机制的?
答:
①芽孢的有无、形态、大小和着生位置是细菌分类和鉴定的重要形态学指标。
②芽孢有利于提高菌种的筛选效率,有利于菌种的长期保藏,有利于对各种消毒、杀菌措施的优劣的判断。
渗透调节皮层膨胀学说认为:
芽孢的耐热性在于芽孢衣对多价阳离子和水分的透性很差皮层的离子强度很高,从而使皮层产生极高的渗透压夺取芽孢核心的水分,结果造成皮层的充分膨胀。
而核心部分的细胞质却变得高度失水,因此,具极强的耐热性。
第二章:
1、什么是单细胞蛋白?
为什么酵母菌是一种优良的单细胞蛋白?
答:
主要指富含蛋白质的藻类、酵母、细菌、真菌等微生物进行大规模培养,并从中提炼出蛋白质资源。
因为酵母菌的维生素、蛋白质含量高,个体一般以单细胞状态存在,能发酵糖产生能量常生活在含糖较高,酸度较大的水生环境中。
2、霉菌的营养菌丝体和气生菌丝体各有何特点?
它们分别可分化出哪些特化构造。
答:
营养菌丝体:
生长在固体培养基内,颜色较浅,较细,分枝丝状,具有吸收营养和排泄代谢废物功能。
气生菌丝体:
颜色较深,直径较粗,可产生孢子丝。
营养菌丝体特化构造:
吸器、匍匐枝、假根、菌环、菌网、菌核、菌索、附着胞、附着枝。
气生菌丝体特化构造:
无性:
分生孢子头、孢子囊
简单:
有性:
担子
无性:
分生孢子座、分生孢子器
复杂:
子囊壳
有性:
子囊果子囊盘
闭囊壳
3、试比较细菌,放线菌,酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同,并讨论它们的原生质体制备方法。
答:
细菌:
分为G+、G-具体讲。
。
原生质体的制备:
G+溶菌酶、青霉素;G-溶菌酶、脱色剂
酵母菌:
细胞壁主要成分甘露聚糖(外层);葡聚糖(内层);蛋白质;
原生质体的制备:
蜗牛消化酶水解。
放线菌:
即G+菌。
。
霉菌:
细胞壁主要成分纤维素、几丁质、蛋白质。
原生质体的制备:
纤维素酶。
4、什么叫锁状联合?
其生理意义如何?
答:
锁状联合即形成状突起而连合两个细胞的方式不断使双核细胞分裂,从而使菌丝尖端向前延伸。
生理意义:
①保证了双核菌丝在进行细胞分裂时,每个细胞都能含有两个遗传型不同的核,为形成担子打下基础。
②锁状联合是双核菌丝的鉴定标准,凡是产生锁状联合的菌丝均可断定为双核。
③锁状联合也是担子菌亚门的明显特征之一。
第3章:
1、什么是一步生长曲线?
它分几期?
各期有何特点?
答:
定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线,称为一步生长曲线。
它包括
①潜伏期:
细胞内已经开始装配噬菌体粒子并可用电镜观察到。
②裂解期:
宿主细胞迅速裂解,溶液中噬菌体粒子急剧增多。
③平稳期:
感染后的宿主细胞已全部裂解,溶液中的噬菌体效价达到最高点。
2、什么是效价?
测定方法有几?
试简述噬菌体效价的双层平板法。
答:
效价表示每毫升试样中所含有的具有侵染性的噬菌体粒子数。
测定方法:
双层平板法、单层平板法、液体稀释法、玻片快速测定法
双层平板法主要步骤:
分别配制含2%和1%琼脂的底层培养基和上层培养基。
先用底层培养基在培养皿上浇一层平板,待凝固后,再把预先融化并冷却到45℃以下,加有宿主菌悬液和噬菌体试样上层培养基,在试管中摇匀后,立即倒在底层培养基上铺平待凝,然后在37℃下保温。
一般经10余h后即可对噬菌斑计数。
3、什么的病毒多角体?
它有何实际应用?
答:
昆虫病毒可在宿主细胞内形成光镜下成多角形的包含体,称为多角体。
可以制作生物杀虫剂
第四章:
1、什么是选择培养基?
试举一例并分析其原理。
答:
选择培养基是一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基,具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能,广泛用于菌种筛选等领域。
如酵母富集培养基中的孟加拉红抑制细菌的生长而对酵母菌无影响。
2、什么是鉴别培养基?
试以EMB为例,分析其鉴别作用原理。
答:
鉴别培养基是一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而用肉眼可鉴别近似菌落中的目的菌菌落的培养基。
EMB培养基中的伊红和美蓝可抑制革兰氏阳性菌和一些难养的革兰氏阴性菌。
产酸菌由于产酸能力不同,菌体表面带质子,与伊红美蓝结合从而有不同的颜色反应,可用肉眼直接判断。
3、什么叫基团位移?
试述其分子机制。
答:
指一类既需特异性载体蛋白的参与,又需耗能的一种物质运送方式,特点是溶质在运输前后发生分子结构的变化。
其机制分两步:
(1)HPr被PEP激活,
(2)糖经磷酸化而进入细胞内。
4、什么叫水活度?
它对微生物生命活动有何影响?
对人类的生产实践的日常生活有何意义?
答:
水活度表示在天然或人为环境中,微生物可实际利用的自由水或游离水的含量。
其定量含义为:
某溶液的蒸气压与纯水蒸气压之比。
生长繁殖在水活度高的微生物代谢旺盛,在水活度低的范围内生长的微生物抗逆性强。
了解各类微生物生长的水活度,有利于设计培养基,有利于防止食物的霉腐。
5、微生物与生长因子有哪几类关系?
举例并加以说明。
(1)生长因子自养型微生物,它们不需要从外界吸收任何生长因子,多数真菌、放线菌和不少细菌,如E.coli等。
(2)生长因子异养型微生物,它们需要从外界吸收多种生长因子才能维持正常生长,如各种乳酸菌、动物致病菌、支原体和原生动物等。
(3)生长因子过量合成型微生物,能大量合成并分泌某些维生素等生长因子的微生物,如各种生产维生素的菌种。
第五章:
1、什么是生物固氮?
能固氮的微生物有哪几类?
答:
生物固氮指大气中的分子氮通过微生物固氮酶的催化而还原成氨的过程。
可分成:
自生固氮酶、共生固氮酶、联合固氮酶。
2、固氮过程需要满足哪些条件?
好氧自身固氮菌如何克服氧气对固氮酶的抑制的?
(即固氮生化机制/抗氧保护机制)
答:
条件:
ATP的供应;还原力[H]及其传递载体(铁氧还蛋白、黄素氧还蛋白);固氮酶;还原底物N2;镁离子;严格的厌氧微环境。
抗氧保护机制:
①呼吸保护:
固氮菌科的菌种以极强的呼吸作用迅速将周围环境中的氧气消耗掉,使细胞周围微环境处于低氧状态,借此保护固氮酶。
②构象保护:
在高氧分压条件下,维涅兰德固氮菌和褐球固氮菌等的固氮酶形成一种无固氮活性但能防止氧害特殊构象。
3、什么是固氮酶?
它含有哪两种化学组分?
各组分的功能如何?
答:
固氮酶是一种复合蛋白,由固二氮酶和固二氨酶还原酶两种相互分离的蛋白构成 。
功能:
固二氮酶是一种含铁和钼的蛋白,铁和钼组成一个称为Femoco的辅助因子,它是还原N2的活性中心。
而固二氮酶还原酶则是一种含铁的蛋白,具有适应在极度缺钼环境下还能正常进行生物固氮的功能。
4、什么叫乙醛酸循环?
(即试述它在微生物生命活动中的重要功能 )由哪些酶组成?
答:
乙醛酸循环:
是TCA循环的一条回补途径,可使TCA循环不仅仅具有高效产能功能,而且还兼有可为许多重要生物合成反应提供有关中间代谢物的功能。
乙醛酸循环利用TCA循环八个酶中的5个,再加上两个新出现的酶——苹果酸合酶和异柠檬酸裂解酶。
5、青霉素为何只能抑制代谢旺盛的细菌?
其抑制机制如何?
答:
青霉素抑制肽聚糖的合成过程,形成破裂的细胞壁,代谢旺盛的细菌才存在肽聚糖的合成,因此此时有青霉素作用时细胞易死亡。
作用机制:
青霉素破坏肽聚糖合成过程中肽尾与胎桥间的转肽作用。
6、试述EMP途经在微生物生命活动中的重要性。
答:
EMP途经又称糖酵解途径,是多种微生物所具有的代谢途径。
(1) 供应ATP形式的能量和NADH2形式的还原力。
(2) 是连接其他几个重要代谢途径的桥梁,包括TCA循环、HMP途径和ED途径等。
(3) 微生物合成提供多种中间代谢物。
(4) 通过逆向反应可进行多糖合成。
7、试述HMP途经在微生物生命活动中的重要性。
答:
(1)供应合成原料:
为核酸、核苷酸等生物合成提供戊糖-磷酸;途径中的赤藓糖-4-磷酸是合成芳香族的原料。
(2)产还原力:
产生大量NADPH2形式的还原力,不仅可供脂肪酸、固醇等生物合成之需,还可供通过呼吸链产生大量能量。
(3)作为固定CO2的中介:
HMP途径中的核酮糖-5-磷酸在羧化酶的催化下可固定CO2并形成核酮糖-1,5-二磷酸。
(4)扩大碳源利用范围:
为微生物利用C3~C7多种碳源提供了必要的代谢途径。
(5)连接EMP途径,可为生物合成提供更多的戊糖。
8、试述TCA循环在微生物产能和发酵生产中的重要性。
答:
TCA循环位于一切分解代谢和合成代谢中的枢纽地位,产能效率极高,不仅可为微生物的生物合成提供各种碳架原料,而且还与人类的发酵生产密切相关。
9、什么叫呼吸?
什么是呼吸链(电子传递链)?
呼吸链有哪些组分?
答:
呼吸:
。
。
。
呼吸链:
。
。
。
呼吸链组分:
醌类、铁硫蛋白和一些含有辅酶或辅基的酶。
10、什么是氧化磷酸化作用?
什么是P/O比?
答:
氧化磷酸化:
指呼吸链的递氢和受氢过程与磷酸化反应相偶联并产生ATP的作用。
P/O比:
每消耗1mol氧原子所产生的ATPmol数,表示呼吸链氧化磷酸化效率的高低。
11、细菌酒精发酵与酵母菌的酒精发酵有何异同?
细菌的酒精发酵有何优缺点?
答:
共同点:
葡萄糖降解为丙酮酸,丙酮酸脱羧为乙醛,乙醛再还原成乙醇。
不同点:
①产生丙酮酸的途径不同:
酵母型酒精发酵是通过EMP途径,而细菌酒精发酵是通过ED途径。
②净产ATP不同。
③菌种不同:
参与酵母型酒精发酵的是酿酒酵母,细菌酒精发酵是运动发酵单胞菌等微好氧菌。
优点:
代谢速率高;产物转化率高;菌体副产物少;细菌为原核生物,易于用基因工程改造菌种;厌氧发酵,设备简单。
缺点:
生长pH为5,较易染菌;细菌耐乙醇力较酵母菌低;底物范围窄(葡萄糖,果糖)
第6章:
1、什么叫典型生长曲线?
它可分几期?
划分的依据是什么?
答:
定量描述液体培养基中,微生物群体生长规律的实验曲线,称为典型生长曲线。
分为延滞期、指数期、稳定期和衰亡期。
根据它们每小时分裂次数的不同划分。
2、延滞期有何特点?
如何缩短延滞期?
答:
①生长速率常数R为0;
②细胞形态变大或增长,部分杆菌长成丝状;
③细胞内的RNA尤其是rRNA含量增高,原生质呈嗜碱性;
④合成代谢旺盛;
⑤对外界不良条件反应敏感。
用对数期的菌种接种;增大接种量;发酵培养基成分和种子培养基的成分尽量接近且丰富些
3、指数期有何特点?
处于此期的微生物有何应用?
答:
①生长速率常数R最大;
②细胞进行平衡成长,菌体各部分成分均匀;
③酶系活跃,代谢旺盛。
应用:
是用作代谢、生理等研究的良好材料,是增殖噬菌体的最适宿主,也是发酵工业中用作种子的最佳材料。
4、稳定期为何会到来?
有何特点?
答:
因为
1营养物尤其是生长限制因子的耗尽;
2营养物的比例失调,如C/N比不适宜;
3酸、醇或H2O2等有害代谢产物的积累;
4pH、氧化还原电势等物理化学条件越来越不适宜。
特点是生长速率常数等于0,这时菌体产量达到最高点,而且菌体产量与营养物的消耗间呈现出有规律的比例关系。
5、衰亡期特点?
答:
①细菌代谢活性降低,死亡速率超过新生速率,群体呈负增长;
②菌体衰老并产生自溶,释放出抗生素等产物;
(负增长、菌体自溶、芽孢释放、进一步合成、释放次生代谢产物)
6、测定微生物的生长有哪些方法?
有何优缺点?
答:
测生长量:
测体积法、称干重法、比浊法、测含氮量法
计繁殖数:
液体稀释法、血球计数法、平板菌落计数法
称干重法:
优点:
适用于一切微生物
缺点:
无法区别死菌和活菌
比浊法:
优点:
比较准确
血球计数法:
优点:
简便、直观缺点:
无法区别死菌和活菌
液体稀释法:
优点:
可计算活菌数缺点:
比较繁琐
平板菌落计数法:
优点:
可计算活菌数
缺点:
操作繁琐,需要培养一定时间才能获得,测定结果受多种因素影响。
7、微生物培养过程中PH变化的原因,怎么使微生物处于较稳定的PH环境中?
答:
微生物的生命活动会引起环境PH改变。
变酸:
糖类发酵、氧化形成有机酸;脂肪水解形成有机酸;铵根离子的选择性吸收作用。
变碱:
蛋白质脱羧形成胺类;硝酸根离子的选择性吸收作用。
方法:
“治标”:
过酸时,加NaOH、Na2CO3等碱液中和
过碱时,加H2SO4、HCl等酸液中和
“治本”:
过酸时:
加适当氮源(蛋白质、硝酸盐、铵盐),提高通气量
过碱时:
加适量碳源(糖、乳酸),降低通气量。
8、生物体内有毒的氧的形式有几种?
好氧微生物通过什么机制避免氧害?
答:
氧气受到辐射可被还原为超氧化物自由基、过氧化氢、羟基自由基等,它们是强氧化剂,能迅速破坏细胞组分。
专性好氧和兼性厌氧微生物的细胞中含有超氧化物歧化酶和过氧化氢酶,能破坏超氧化物自由基和过氧化氢。
另外,细胞中的过氧化物酶也能降解过氧化氢。
9、什么是抗代谢物?
简述磺胺药的作用机制和TMP(磺胺增效剂)的作用机理。
答:
抗代谢物:
是指一类在化学结构上与细胞内必要代谢物结构相似,并可干扰正常代谢活动的化学物质。
磺胺的结构与细菌的一种生长因子对氨基苯甲酸(PABA)高度相似,两者会发生竞争性拮抗作用。
二氢蝶酸合成酶会错把磺胺作底物,结果合成了无功能的“假二氢叶酸”,无法合成叶酸,于是生长受到抑制。
磺胺增效剂(TMP):
TMP能抑制二氢叶酸还原酶,使二氢叶酸无法还原成四氢叶酸,从而增强了磺胺的抑制作用。
10、什么叫微生物的耐药性(抗药性)?
产生途径有哪些?
试述细菌对青霉素的耐药性机制及如何克服青霉素的耐药性?
答:
微生物通过遗传途径等的改变产生对药物的抗性。
即微生物由于与药物长期接触,而变得对它们不敏感,作用效果越来越差。
途径:
基因突变,遗传重组,质粒转移
机制:
①细菌能产生使青霉素失去活性的β内酰胺酶,从而使青霉素的核心结构中的内酰胺键断裂而丧失活性。
②青霉素结合蛋白发生改变
③细胞壁对青霉素类的渗透性减低
方法:
第一次使用的青霉素剂量要足,避免在一个时期或长期多次使用青霉素,不同的抗生素混合使用,对青霉素进行改造,并合成半合成抗生素以及开发生物药物素。
11、微生物产生耐药性的方式?
答:
微生物通过遗传途径等的改变产生对药物的抗性。
即微生物由于与药物长期接触,而变得对它们不敏感,作用效果越来越差。
途径:
基因突变,遗传重组,质粒转移
方式:
①产生能使药物失活的酶或合成了修饰抗生素的酶;
②修饰和改变药物作用的靶位点;
③形成“救护途径”;
④使药物不能透过细胞膜;
⑤抗性菌株发生遗传变异;
⑥通过主动外排系统把药物排出体外。
12、控制有害微生物生长繁殖的措施及原理。
答:
灭菌;消毒;防腐;化疗
防腐措施:
低温、干燥、缺氧、高渗、高酸度、加防腐剂。
13、什么是高密度培养,如何保证好氧菌的高密度培养?
是指微生物在液体培养中细胞群体密度超过常规培养10倍以上的生长状态或培养技术。
方法主要有:
1选取最佳培养基成分和各成分含量
2补料
3提高溶解氧的浓度
4防止有害代谢产物的生成
14、影响湿热灭菌效果的主要因素有哪些?
在实践中应如何正确对待?
1.灭菌物体含菌量越高需要灭菌的时间越
2各类空气排出程度,空气要全部排尽
3灭菌对象PH,PH<6.0微生物已死亡PH在6.0-8.0之间微生物不会死亡
4灭菌对象的体积,大容积培养基灭菌时必须延长灭菌时间
5加热与散热速度,会影响培养基成分的破坏程度,应适当控制。
15、设计一个实验,从自然界中分离到以苯为碳源的微生物。
答:
①从苯含量较高环境中采集土样或水样;
②配制培养基,制备平板,一种仅以苯作为唯一碳源(A),另一种不含任何碳源作为对照(B);
③将样品适当稀释,涂布A平板;
④将平板置于适当温度条件下培养,观察是否有菌落产生;
⑤将A平板上的菌落编号并分别转接至B平板,置于相同温度条件下培养;
⑥挑取在A平板上生长而不在B平板上生长的菌落,在一个新的A平板上划线、培养,获得单菌落,初步确定可利用苯作为碳源和能源的微生物纯培养物;
⑦将初步确定的菌株转接至以苯作为唯一碳源的液体培养基中进行药瓶发酵实验,利用相应化学分析方法定量分析该菌株分解利用苯的情况。
16、在大肠杆菌高密度培养过程中,如何克服其代谢过程中产生的乙酸对生长的抑制?
答:
乙酸是大肠杆菌产生的对自身的生长代谢有抑制作用的产物。
为防止它的生成可采用以下方法:
①选择天然培养基
②降低培养基的pH
③以甘油代替葡萄糖作碳源
④加入甘氨酸,甲硫氨酸
⑤降低培养温度(从37度降至26-30度)
⑥采用透析培养法。
17、现牛奶中含有的大肠杆菌的浓度为1/100ml,其繁殖一代所需时间为15min,规定牛奶中大肠杆菌数不得超过30000个/ml,问此牛奶最多可保持多久?
(lg2=0.3010;lg3=0.4771)
答:
18、说明温度对微生物生长的影响。
答:
微生物的生长具有相当高的温度依赖性,有最低、最高、最适生长温度。
温度对微生物升长的影响具体表现为:
①影响酶活性,温度变化会影响酶促反应速率,最终影响物质合成。
②影响细胞质膜的流动性,温度高则流动性高,有利于物质的传输;温度低则流动性低,不利于物质的传输。
③影响物质的溶解度,温度上升,物质的溶解度上升,温度降低,溶解度下降,影响对物质的吸收和分泌作用。
④温度过高,酶和蛋白质变性,细胞受损;温度过低,细胞质膜冻结,酶也不能迅速工作。
所以,温度高于或低于最适生长温度时生长速度会降低。
第7章:
1、什么叫Ames实验法,其主要原理是什么?
请简单叙述其实验步骤。
答:
艾姆斯试验是一种利用细菌营养缺陷型的回复突变来检测环境或食品中是否存在化学致癌剂的简便有效方法。
原理:
鼠伤寒沙门氏菌的组氨酸营养缺陷型(his-)菌株在基本培养基[-]的平板上不能生长,如发生回复突变变成原养型(his+)后则能生长。
方法:
在含待可疑“三致”(如黄曲霉毒素)的试样中,加入鼠肝匀浆液,经一段时间保温后,吸入滤纸片中,然后将滤纸片放置于上述平板中央,经培养后,出现3种情况;在平板上无大量菌落产生,说明试样中不含诱变剂;在纸片周围有一抑制圈,其外周出现大量菌落,说明试样中有某种高浓度诱变剂存在;在纸片周围长有大量菌落,说明试样中有浓度适当的诱变剂存在。
2、产生营养缺陷型突变株的原理是什么?
简述筛选营养缺陷型突变株的方法。
并各举一例说明在生产实践上和理论研究中的应用情况。
答:
营养缺陷型:
。
。
。
原理是基因突变。
方法:
①诱变处理:
选择简单有效的诱变剂,处理单细胞或孢子悬液。
②淘汰野生型:
由于在诱变处理后存活的个体中,营养缺陷型的比例较低,因此可通过抗生素法和菌丝过滤法淘汰野生型菌株,“浓缩”营养缺陷型。
③检出缺陷型:
用一个培养皿即可检出的,有夹层培养法、限量补充培养法、逐个检出法、影印平板法。
④鉴定缺陷型:
可借生长谱法进行。
即在混有供试菌的平板表面点加微量营养物,观察营养物周围是否长菌来确定该供试菌的营养要求的一种快速、直观的方法。
在生产实践上的应用:
谷氨酸棒状杆菌的高丝氨酸缺陷型菌株作为赖氨酸的发酵菌种。
在理论研究中的应用:
利用鼠伤寒沙门氏菌的组氨酸营养缺陷型的回复突变来检测环境或食品中是否存在化学致癌剂。
3、菌种退化的原因?
常用菌种保藏方法有哪几种?
答:
主要原因:
基因突变
加速退化的原因:
连续传代、不适宜的培养和保藏条件。
常用菌种保藏方法:
斜面传代法、冷冻干燥保藏法、液氮保藏法、砂土保藏法、冰箱保存法(斜面)、冰箱保存法(半固体)、石蜡油封藏法、甘油悬液保藏法。
4、要使发酵工厂保持产量稳定和不断获得高产菌株,从微生物的遗传变异角度考虑,你觉得应采取什么措施?
答:
要防止菌株因自发突变而衰退,并要定期复壮。
防止菌种衰退的措施:
控制传代次数;利用不易衰退的细胞传代;创造良好的培养条件;采用有效的菌种保藏方法。
菌种复壮的方法:
纯种分离法;淘汰已衰退的个体;通过宿主体复壮;理化因素诱变。
5、试述自发突变的机制。
答:
自发突变指生物体在无人工干预下自然发生的低频率突变。
自发突变的原因有很多:
①由背景辐射和环境因素引起,如天然的宇宙
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