生工工程王丽媛8000L乳酸工段工艺设计汇编.docx
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生工工程王丽媛8000L乳酸工段工艺设计汇编
毕业设计(论文)手册
课题名称:
8000吨/年L-乳酸工段工艺设计
学院:
生物工程学院
班级:
生物工程1020班
学号:
0909030108
姓名:
王丽媛
指导教师:
姚秀清
8000吨/年L-乳酸发酵工段工艺设计
王丽媛
(辽宁石油化工大学,石油化工学院,生物工程1037)
摘要
L-乳酸是一种重要的食用有机酸,需求量仅次于柠檬酸,可用于食品工业、医药工业和制造生物可降解聚合物等多个领域。
L-乳酸除了具备普通乳酸的性质外,另外还具有独特的生化价值,被广泛的应用于食品、医药、化工等行业。
经过查阅大量的文献资料,首先确定了本设计中的发酵原料、发酵菌种、发酵方法,在此基础上确定了L-乳酸发酵工段工艺流程。
本设计以薯干为原料,以米根霉为发酵菌种,采用乳酸传统发酵方法。
根据年生产量对发酵过程进行了物料、热量衡算。
经过衡算,给出了8000吨/年L-乳酸发酵工段所需要消耗的物料量以及消耗的蒸汽量、冷却水量。
依据衡算结果,在选定高径比(H/D=2)条件下,设计了发酵罐、种子罐的主要尺寸和个数,并给出了发酵罐换热器的传热面积,搅拌器的轴功率、通气量等。
另外又设计了配料罐体积。
最后可根据上述计算得出的数据绘制了工艺流程图、发酵罐三视图及发酵车间发布图。
关键词:
L-乳酸,发酵,工艺设计
ThefermentationprocessdesignofL-lacticacidwithanannualoutputof8000tons
Wangliyuan
(Class1002,SchoolofBio-engineering,LiaoningShihuaUniversity,Fushun,113001,Liaoning)
Abstract
L-lacticacidwasanimportantedibleorganicacidandthedemandwasonlysmallerthanthecitricacid,whichcouldbeusedinvariousfieldsoffoodindustry,pharmaceuticalindustryandbemanufacturedbiodegradablepolymers.L-lacticacidnotonlyhadthenaturewithordinarylacticacid,alsohaduniquebiochemicalvalue.Itwaswidelyusedinfood,medicine,chemicalindustryetc.
Throughaccesstoinformation,rawmaterials,strainproductionandmethodoffermentationinthisdesignwerefirstidentified.Basedonthis,processflowofL-lacticacidwasgiven.Inthisdesign,SweetpotatowasselectedasrawmaterialsandRhizopusoryzaewasstrain.Materials,energyandmajorequipmentstructuresizewerecalculated.Atthesametime,therequiredamountofmaterialconsumption,steamconsumptionandconsumptionofcoolingwaterweregivenfor8000tons/yearanannualoutputof8000tonsofL-lacticacid.Accordingtothecalculationresults,withtheselectedratioofheighttodiameter(H/D=2),themaindimensionandnumberoffermentationtanksandseedtankswerecalculated.Theheattransferareaoffermentationtank,stirrershaftpowerandventilationwerealsogiven.Finally,basedonthecalculateddata,processflowdiagram,threeviewsofthemainequipmentandweredrawnwithCAD.
Keywords:
L-lacticacid,Fermentation,Processdesign
8000吨/年L-乳酸发酵工段工艺设计
1文献综述
1.1L-乳酸的理化性质
1.1.1L-乳酸的物理性质
乳酸(Lactic Acid),学名为α-羟基丙酸(α-Hydroxy-Propanoic-Acid),分子式为C3H6O3,结构式为CH3CHOHCOOH,相对分子质量90.08,是一种常见的天然有机酸。
乳酸分子内含有一个不对称碳原子,具有光学异构现象,有D型和L型两种构型,其中L-乳酸为右旋,D-乳酸为左旋,其结构式见图1。
当L-乳酸和D-乳酸等比例混合时,即成为外消旋的DL-乳酸。
不同分子构型的乳酸有不同的理化性质,如表1所示[2]。
纯净的无水乳酸是白色结晶体,熔点为16.8℃,沸点为122℃(2kPa),相对密度为1.249。
乳酸通常是乳酸和乳酰乳酸的混合物,为无色透明或浅黄色糖浆状的粘稠液,几乎无臭或微带有脂肪酸臭,味酸易与水、乙醇、乙醚、丙二醇、甘油混溶,几乎不溶于氯仿、石油醚、二硫化碳和苯。
浓度达到60%以上的乳酸具有很强的吸湿性。
L-乳酸纯品为无色液体,工业品为无色到浅黄色液体。
无气味,具有吸湿性。
相对密度1.2060(25/4℃)。
熔点18℃。
沸点122℃(2kPa)。
折射率nD(20℃)1.4392。
能与水、乙醇、甘油混溶,不溶于氯仿、二硫化碳和石油醚。
在常压下加热分解,浓缩至50%时,部分变成乳酸酐,因此产品中常含有10%~15%的乳酸酐。
HO
图1.1 乳酸的结构式
Figure1.1Structureoflacticacid
表1.1 :
乳酸的理化性质
Table1.1:
Physicalandchemicalpropertiesoflacticacid
构型
熔点/℃
比旋光度[α]D20
解离常数(25℃)
熔化热/(KJ/mol)
L
D
LD
25-26
25-26
18
﹢3.3°
﹢3.3°
0
1.37×10-4
1.37×10-4
1.37×10-4
16.87
16.87
11.35
1.1.2L-乳酸的化学性质
乳酸分子中既带羟基又带羧基,是自然界中存在的最广泛的一种羟基羧酸,也是最简单的一种羟酸,同时乳酸具有自动酯能力,可以参与氧化、还原、缩合、酯化等反应,从而制备多种乳酸衍生物。
1.2国内外L-乳酸的应用
乳酸,LacticAcid,又名α-羟基丙酸。
乳酸是世界上公认的三大有机酸之一。
其分子中有一个不对称的碳原子,所以有两种旋光异构体,即L-乳酸和D-乳酸。
乳酸广泛存在于自然界中,如在血液、酸奶、泡菜、奶酪、及啤酒中都有发现。
乳酸用途很广,主要用于食品、医药、化工、轻工等行业。
1.2.1L-乳酸在食品行业中的应用
由于L-乳酸对人体无毒无副作用,而且易吸收,可直接参与体内代谢,酸性柔和且稳定,有助于食品的风味,作为酸味剂、乳化剂、杀菌剂、保鲜剂,pH调节剂、啤酒、糕点等广泛的应用于食品行业。
与柠檬酸、苹果酸等食用酸相比具有很强竟争力。
在美国,乳酸用于软饮料方面很大程度取代了柠檬酸、磷酸等;在啤酒制造上,美国禁止使用磷酸调节声,而全部改用乳酸。
朱蓓薇等用保加利亚乳酸杆菌与嗜热链球菌混合发酵板栗水解液,证明了用板栗水解液可以生产乳酸发酵饮料,用加工其它板栗产品时剩下的不成型小块、碎块等下脚料为综合利用板栗资源开发出一条新途径。
乳酸制品的衍生物的研究也纷多繁杂,比如:
海带发酵乳酸饮料,红薯酸奶加工,猕猴桃汁乳酸发酵,南瓜汁乳酸发酵饮料,葡萄酒苹果酸–乳酸发酵等纷纷进入研究。
乳酸菌发酵肉圆可以制得口感好,更营养,保质期长的食品。
乳酸还可以应用于发酵香椿芽,改善传统发酵的高盐分对风味的影响。
1.2.2L-乳酸在医药行业中的应用
医药行业的应用L-乳酸可直接配置成药物或制成乳酸盐使用,由于乳酸对人和畜无害,而且有很强的杀菌作用,因而,乳酸可直接用作室内外环境、饮食、手术室、病房、实验室、车间等场所的消毒剂。
L-乳酸、L-乳酸钠与葡萄糖、氨基酸等复合配置成输液,可治疗酸中毒及高钾血症L-乳酸亚铁、L-乳酸钙、L-乳酸锌是补充金属元素的良好药品。
聚L-乳酸属于无毒的高分子化合物,具有生物相容性,在人体内能被分解成L-乳酸,为人体代谢,不引起变态反应,因此广泛用于生产缓释胶囊制剂,这样可使血液循环中药物浓度相对降低,大大提高疗效,降低副作用。
用于治疗癌症药物方面已取得可喜进展。
由L-乳酸制成的生物降解纤维可用来制成手术缝合线,它随伤口愈合而被机体分解吸收,不需拆线,这特别适合人体深部组织的缝合,减少病人痛苦和提前康复。
另外,还用它作为生物值片,以修复骨折或其他机体损伤,绷带、人造骨骼及药物释放等生物医用材料。
L-乳酸作为可生物降解医用材料,人类对医用高分子材料的需求日益增大,特别是用于人体内的高分子材料要求较高,需具有良好的物理化学性能,还要求与人体组织有良好的相溶性,有相当的机械强度及耐久性,可经受各种消毒处理及良好的加工性能,无毒副作用等。
聚乳酸材料具备了这样的条件,因此正在开发应用于生物医学领域如手术缝合线、骨科固定、组织修复材料、医用外套、个人卫生用品及药物控制释放体系等。
1.2.3L-乳酸在轻工、化工行业的应用
在轻工、化工行业的应用可作为纺织品的助染料剂,在电子、航空和航天及半导体工业中作为精细金属清洁剂。
在化妆品和清洁卫生用品方面可作为添加剂。
在卷烟工业中,可用乳酸除去烟草中杂质,清除辛辣味,改善口味,提高烟草档次。
聚乳酸可以加工成无纺布、纺织纤维等生态纤维材料。
1.2.4L-乳酸在农业上的应用
由发酵获得的阻乳酸氨溶液,可直接作为青贮料添加剂,应用于农业饲料。
另外L一乳酸还可以作为植物生长活力剂,水产用生菌剂等应用于农、渔业上,具有十分诱人的的开发前景。
聚L一乳酸或与其它材料共聚制成的生物降解塑料还可用于生产缓释农药,优点在于延长农药使用时间,对农作物和土壤无毒害作用,提高农药使用效率,国际上正在大力推广应用。
1993年,美国阿尔贡国立实验室已将聚乳酸用于制造能在土壤中完全分解的农用薄膜,现正在推广之中。
由于德、意、奥、美等国相继制定法规限制非降解塑料的应用,因此制造可分解塑料是人们非常关注的间题。
1.2.5L-乳酸在烟草行业的应用
在烟草中加入适量L-乳酸可提高烟草的品质,并能很好的保持烟草的湿度。
1.2.6L-乳酸在皮革制作行业的应用
把L-乳酸作为皮革加工的鞣顺剂,可使皮革柔软细腻,从而提高皮革的品质。
1.2.7L-乳酸在纺织行业的应用
通过L-乳酸处理过的纤维织物,易着色,增加光泽和触感柔软、舒适。
1.2.8L-乳酸的聚合物作为可生物降解塑料的应用
生物工程材料聚L-乳酸是以L-乳酸为原料合成的高分子材料,无毒,具有良好的生物相溶性,可生物降解吸收,强度高,可塑性加工成型。
它易被自然界中的各种微生物或动植物体内的酶分解代替,最终形成二氧化碳和水,不污染环境。
因而被认为是最有前途的可生物降解高分子材料。
可生物降解塑料为解决塑料废弃物对环境造成污染问题,可生物降解塑料已经在许多国家开始研究与应用。
聚乳酸塑料可用作生产农用薄膜、食品包装袋、保鲜膜、餐盒、塑料容器等。
此外聚乳酸有望在不久的将来代替PVC、PP等各种不可降解的塑料,以消除“白色污染”所造成的环境危机。
产品购物袋、食品容器、吸管、包装膜等可生物降解的包装材料。
1.2.9L-乳酸衍生物的应用
表1.2L-乳酸及其衍生物的应用
Table1.2ApplicationofL-lacticacidanditsderivative
名称
用途
L-乳酸
L-乳酸钙
L-乳酸亚铁
L-乳酸钾
L-乳酸钠
硬脂酰乳酸钙
硬脂酰乳酸钠
脂肪酸乳酸酯
甘油混合酯
脂肪酸甘油乳酰酯
L-乳酸酯
酸味剂、防腐剂、啤酒PH调节剂、杀菌剂、保鲜剂
风味增强剂、固化剂膨松剂、营养补充剂、稳定剂、增稠剂
营养补充剂、婴儿配制食品
风味增强剂、调味剂、保湿剂、PH控制剂
调味剂、保湿剂、乳化剂、防腐剂、防冻剂
面团增强剂、蛋制品起泡剂
乳化剂、稳定剂、组织柔软剂
乳化剂、增塑剂、表面活性剂
乳化剂、增塑剂、表面活性剂
乳化剂、增塑剂、表面活性剂
溶剂、香料
1.3国内外的生产和消费状况
国外的生产状况
目前世界上乳酸的主要生产地区为美国、西欧和日本等,近80%的生产厂家采用发酵法进行生产。
发酵法的原料,荷兰一般用甜菜糖,美国用玉米淀粉,巴西用蔗糖。
世界最大的乳酸生产企业是荷兰的PURAO公司,总公司在荷兰,美国、巴西设有分公司,全部采用发酵法生产。
美国有ADM和STERING两家乳酸生产企业。
在美国,约有60%的乳酸应用于食品工业,其中有26%乳酸直接用于食品行业,其他的应用于制备乳酸盐和乳酸酯类以及医药行业。
美国对乳酸的利用已经处于世界先进水平,聚乳酸已经开始大规模推向市场。
西欧的PURAO公司,分别在荷兰和西班牙建设生产装置,均采用发酵法生产,西欧的乳酸的70%用于食品行业。
日本乳酸生产企业有日本武藏化学公司和日本大赛化学公司两家。
日本乳酸的消费结构为:
60%是食品行业,30%用于工业,余下的10%用于医药和化妆品。
国内的生产状况
我国的乳酸工业始建于20世纪40年代,起步发展于20世纪80年代中期到90年代初期,目前,我国正常生产乳酸的厂家有20余家,总生产能力约为2万t/a。
我国乳酸生产和国外先进水平差距很大,乳酸生产规模小,发酵罐仅仅30吨/台到60吨/台,产酸率低;产品仍以DL-乳酸为主,占80%,产品色度质量不高;另外在后提取方面更有较大差距,总体来说,成本很高。
我国乳酸的最大应用领域是香料和香精行业,其用量占乳酸总消费量的40%,主要用于生产乳酸乙酯应用于调制各类酒。
目前全国约有25%的啤酒生产厂在使用乳酸。
2.生产工艺的概述
2.1菌种概述
2.1.1米根霉发酵的特点及目前的研究状况
米根霉能生成淀粉酶和糖化酶,他能直接利用糖,也可以利用淀粉或淀粉质原料直接生成L-乳酸,根霉所产的乳酸光学纯度好,但是产酸量低,需氧,耗能高。
米根霉发酵产生乳酸,但同时伴随乙酸、富马酸、琥珀酸、苹果酸、乙酸等其他产物的产生,它们之间的比例随着菌种和工艺不同而异。
1996年Longacre等通过分析米根霉葡萄糖代谢流分析,将乳酸的产率提高到75%~86%。
Zhou等采用米根霉ATCC52311优化发酵葡萄糖生产L-乳酸工艺研究,使乳酸生产率达88%但是米根霉发酵时间长,需氧耗能高,副产物多,包括乙酸、富马酸、苹果酸、苹酰乙酸对L-乳酸纯化提取带来难度。
通过基因工程技术改变米根霉代谢流,修饰、扩展和构建代谢途径,改变内代谢通量的分配,使米根霉在一定条件下生成更多的乳酸。
白冬梅等通过代谢通量分析优化米根霉R1021发酵生产D(+)-乳酸过程,最大理论L-乳酸产率达98.2%。
另外,可以利用DNA重组技术构建工程菌,Hakki等利用乳酸链球菌,L-乳酸脱氡酶基因ldhL的DNA序列设计引物,采用RT-PCR扩增米根霉ldhL片段,构建米根霉菌基因工程菌。
根霉有乙醇发酵的酶,以至霉菌在短期缺氧状态下可以生长。
在氧气限制条件下,一个仅表达5%野生型乙醇脱氢酶活力的突变子被分离。
2.1.2乳酸菌菌属
乳酸细菌不能直接发酵淀粉,必须经过糖化过程,转变为糖质原料才能发酵。
乳酸细菌属于化能异性微生物除了碳源作为主要原料外,乳酸细菌的生长和发酵还需要复杂的外来营养,必须提供各类氨基酸、维生素、核酸等因子。
发酵原理如下图2-1所示。
乳酸菌产酸量高,厌氧,好能低,但是产物含有部分D-乳酸。
乳酸链球菌(Lactococcus)的优势是只产生L-乳酸。
Jeonga等分离筛选到一株乳酸链球菌,控制pH6.0条件下,32℃发酵,葡萄糖浓度为60g/L,乳酸对葡萄糖的转化率为90.2%。
而对乳酸链球菌ldhL基因的Lac操纵子的拷贝数增加的结果仅仅导致乳酸产量的些微增加。
乳杆菌以其产酸量高、产酸快的优势,成为广大研究者关注的热点。
图2-1乳酸菌发酵代谢途径
Figure2-1lacticacidfermentationmetabolicpathway
乳杆菌包括同型乳酸发酵和异型乳酸发酵两种类型,异型乳酸发酵乳杆菌产生L-乳酸光学纯度高,但是产量低,同时伴随大量副产物产生(如乙酸、乙醇、丁酸等)。
同型乳酸发酵乳杆菌产量高,但是同时产生两种同分异构体构型,从外消旋乳酸混合物中分离纯化L-乳酸成本太高,可能只能依靠昂贵的色谱技术。
最理想的是筛选只产L-乳酸的菌株或者以遗传技术改良菌株。
因此,近年来,研究人员在通过基因工程和代谢工程改良乳杆菌提高L-乳酸产量和光学纯度方面做了大量研究。
Ferain等采用增加基因拷贝数使编码L-乳酸脱氢酶基因在植物乳杆菌L.plantanum中过量表达,L-乳酸脱氢酶活性提高了13倍。
但是,对L-乳酸或总乳酸产量几乎无影响。
以德氏乳杆菌为出发菌株,采用类似青霉素浓缩营养缺陷型的经典育种方法改变培养条件使D-乳酸脱氢酶灭活,获得D-乳酸脱氢酶缺陷型ATCC55163,产100%L-乳酸以乳清渗透液为原料发酵20h,乳酸浓度达77.8g/L,产率1.11g/L·h。
Lapierre采用基因缺失方法使ldhD基因中8-bp缺失,获得一株L.johusoniildhD基因灭活突变株,突变子完全失去D-乳酸脱氢酶活性,L-乳酸脱氢酶活性保留下来,L-乳酸产量也有些微增加。
Nikkila等采用L.helveticusldhD用根霉生产L-乳酸与乳酸菌相比,根霉对糖转化率低,其理论值为75%,而使用乳酸菌时,糖的转化率理论值可达100%,在实际生产中都能在90%以上。
(L-乳酸脱氢酶)基因灭活策略,通过基因替换的方法,构建两株稳定ldhD基因灭活乳杆菌(lact-helveticus)。
其中一株通过启动子区域内部缺失阻止ldhD基因转录构建,另一株用ldhL基因代替ldhD基因构建,两株构建菌株L-乳酸脱氢酶活性分别提高了53%和93%且只生产L-乳酸,L-乳酸产量增加一倍,与野生型总产酸量相等。
Niju等人采用NTG诱L.rhamnosusMTCC1408菌株,分离到一株只生产L-乳酸的adh突变株,且乳酸产量增加了6.6%在研究如何提高L-乳酸产量和光学纯度的同时,对乳杆菌适于发酵生产工艺方面也做了大量研究。
2002年,Zhang等采用基因组(genome-shuffling)方法获得一株耐受低pH的突变菌株,此菌株可在pH3.8条件下发酵,在此条件下,乳酸以游离形式在可以直接用有机溶剂将乳酸从发酵液中萃取出来,从而降低了产品的纯化成本。
2007年,Wang等采用基因组改组技术对干酪乳杆菌进行提高耐酸性和L-乳酸生产速率的研究,获得一株能够在pH3.6条件下生长的突变株,在pH3.8条件下,L-乳酸产量提高了3.1倍;在CaCO3中和pH条件下,L-乳酸的生产速率达到5.77g/L·h,比原始菌株提高了26.5%±1.5%。
2.2发酵L-乳酸的原料
2.2.1发酵L-乳酸时所需的碳源及新型碳源的概括
一般用于发酵生产L-乳酸的碳源葡萄糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖、甘露糖、木糖和半乳糖均可以作为碳源发酵生产L-乳酸。
利用那些高纯度糖发酵生产乳酸可以获得高纯度产物,而且有利于节省后提取成本。
然而,L-乳酸的市场流通价格低廉,以高纯度糖发酵生产L-乳酸显然是不经济的。
这些原料激励了现代技术如超滤、电渗析的发展。
目前研究比较集中的新型碳源主要有:
淀粉质原料、糖蜜、乳清、纤维质原料及多种回收利用资源、工农业副产物和生活垃圾等资源。
(1)酒糟就是一种常见的纤维质材料,且来源丰富,仅巴西每年就有190万吨酒糟产生于酿造业。
酒糟经化学法和酶法综合处理后,获得了富含葡萄糖的水解液,并作为碳源成功地应用于乳酸生产中。
(2)葡萄糖和酶法综合处理后,获得了富含葡萄糖的水解液,采用同步糖化发酵工艺直接利用纸浆废水,先将纸浆废水酶解处理,再作为碳源用于L-乳酸的发酵生产,其优越性在于:
低木质素含量和细微的颗粒形式有利于酶制剂的高效降解;高蛋白含量可以节省添加的氮源;来源广,成本低;对其进行回收利用有利于保护环境,特别是保护水源。
(3)羊草(黍黄灯笼)青贮饲料也可以用于发酵乳酸。
(4)苹果渣也被看作是乳酸发酵生产的潜在碳源。
2003年,西班牙的苹果酒制造工业产出了超过2万吨苹果渣,每年全世界产生的苹果渣有几百万吨。
Beatriz等通过研究发现,每100kg干苹果渣经过处理,并经LactobcillusrhamnosusCECT-288发酵可生成46.5Kg乳酸,同时还可以产出13.4Kg寡聚糖和8.2Kg微生物体。
(5)米糠作为一种农业废弃物,广泛存在于世界各地,日本农林渔业部宣称:
仅2002年,日本的米糠产出量就高达90万吨。
Min-TianTao等通过采用酸解处理米糠的方式取代以往的酶解处理方式不仅降低了原材料处理成本而且显著提高了产酸速率。
(6)大豆是一种在中国各地区广泛种植的农作物,大豆叶茎作为大豆种植的主要副产物产量巨大。
2000年中国大豆叶茎的产出量为2500万吨。
Xu等报道了利用大豆叶茎酶解物作为碳源发酵生产乳酸的研究。
利用两株L-乳酸产生菌株混合培养的方式,将乳酸转化率提高到71%。
(7)上世纪大量植物藤被焚烧,不仅生成了大量温室气体破坏了环境,而且对资源是一种严重的浪费。
地球陆地表面藤本植物生长丰富,仅西班牙的加西亚省每年就可产出约6.5万吨的植物藤。
充分利用这些资源具有深远的环保意义。
Bustos等成功利用植物藤酸解液实现了L-乳酸的连续发酵生产。
(8)来源于食品工业和厨房垃圾的有机废料也含有丰富的碳源,且年产出量惊人。
以日本为例:
仅2000年,这类有机废料的年产量高达1940万吨。
因此开发利用这类资源用于产品的生产意义重大。
(9)源丰富的农业废弃物木薯渣,经液化糖化处理后作为碳源也表现出优良的乳酸生产潜力。
(10)Rojan等以甘蔗渣为支撑物,酶法处理后的木薯渣为碳源:
采用固态发酵法,经LactobacillusdelbrueckiiNCIM2025发酵生产乳酸。
发酵参数优化后的数据显示,99%的总糖被转化成乳酸。
这一成果为开发利用廉价的农业废弃物发酵生产L-乳酸提供了一个环境友好型的实施方法。
(11)糖蜜是制糖业的主要副产物,因其富含蔗糖,可
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