环境重金属污染健康监测的技术指南试行.docx
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环境重金属污染健康监测的技术指南试行
环境重金属污染健康监测技术指南(试行)
为指导各地规范开展环境重金属污染人群健康影响监测工作,制订本技术指南。
一、人群健康基线调查
在环境保护部划定的重金属污染重点防控区域开展人群健康监测前,应当首先进行人群健康基线调查,查明重金属人体负荷水平和健康损害现状,为选择健康监测点提供依据。
(一)调查人群。
在重金属污染重点防控区域内居住、工作或学习连续6个月以上的人群(不含在污染企业内工作的职业人群)。
(二)样本采集及检测指标。
1.铅污染。
采集静脉血,检测静脉血血铅含量。
2.汞污染。
采集晨尿或头发根,甲基汞污染区人群检测头发总汞含量和甲基汞含量,无机汞污染区人群检测尿总汞含量。
3.砷污染。
采集晨尿,检测尿总砷含量。
4.镉污染。
采集晨尿,检测尿镉含量。
5.铬污染。
采集晨尿,检测尿铬含量。
存在1种以上重金属污染区域,可依据相关背景资料和重金属伴生污染的特点,选择铅、汞、砷、镉、铬等作为人群生物样品增测指标。
二、健康监测点筛选原则
(一)健康监测点应当在环保部门划定的重金属污染重点防控区域内选择,并全面分析环保部门提供的污染防控区域污染源资料及空气、土壤、地表水等基础资料,确定特征污染物。
(二)根据人群健康基线调查结果,选择重金属人体负荷水平较高,存在较大健康风险的人群设置健康监测点。
(三)健康监测点人群应当相对集中,能够满足监测样本量的需求。
三、健康监测方案
各地在人群健康基线调查基础上,成立健康监测专家委员会,制订详细的监测方案,原则如下:
(一)监测人群。
根据既往文献资料和人群健康基线调查结果,分析不同人群对本地区重点污染物的易感性,选择适宜人群开展健康监测。
监测人群应当在本地区连续居住、工作或学习6个月以上,在污染企业内工作的职业人群不作为监测人群。
铅污染监测人群应当包含14周岁以下儿童,镉污染监测人群应当包含45~55周岁绝经期妇女。
样本量应当能够反映当地人群的总体水平。
(二)样品采集与监测指标。
1.铅污染健康监测点
(1)样品采集
①生物样品:
静脉血。
②环境样品:
随机选择部分监测对象所在家庭,采集生活饮用水和当地自产的食物样品。
食物样品种类包含粮食及其制品、根及叶类蔬菜、肉类、乳类及其制品等,各地可根据监测人群主要食物适当调整。
对能够以废气形式排放含铅颗粒物的污染源,应当根据污染源的地理分布、当地气候条件及居民居住地、学校与污染源的距离,在室外、监测对象家中和学校设立空气采样点。
环境样品采集要在生物样品采集前一周内完成。
(2)监测指标
①人体负荷指标:
静脉血铅。
②健康效应指标:
血常规、红细胞锌原卟啉(ZPP)、红细胞游离原卟啉(EP)、儿童智力测验。
③环境危险因素指标:
饮用水、食品、空气颗粒物铅含量。
2.汞污染健康监测点
(1)样品采集
①生物样品:
晨尿和发根。
②环境样品:
随机选择部分监测对象所在家庭,采集生活饮用水和当地自产的食物样品。
食物样品种类包含水产品、粮食及其制品、蔬菜、肉类等,各地可根据监测人群主要食物适当调整。
对能够以废气形式排放含汞蒸气和颗粒物的污染源,应当根据污染源的地理分布、当地气候条件及居民居住地、学校与污染源的距离,在室外、监测对象家中和学校设立空气采样点。
环境样品采集要在生物样品采集前一周内完成。
(2)监测指标
①人体负荷指标:
甲基汞污染区人群监测头发总汞和甲基汞含量,无机汞污染区人群监测尿总汞含量。
②健康效应指标:
尿2-微球蛋白(2-MG)、尿视黄醇结合蛋白(RBP)、四肢末端感觉检查、视野检查、听力检查。
③环境危险因素指标:
甲基汞污染区监测饮用水和水产品甲基汞含量;无机汞污染区监测饮用水、食品、空气颗粒物无机汞含量。
3.砷污染健康监测点
(1)样品采集
①生物样品:
晨尿。
②环境样品:
随机选择部分监测对象所在家庭,采集生活饮用水和当地自产的食物样品。
食物样品种类包含大米、蔬菜、海水鱼、软体类、甲壳类、肝脏类、奶类等,各地可根据监测人群主要食物适当调整。
对能够以废气形式排放含砷颗粒物的污染源,根据污染源的地理分布、当地气候条件和居民居住地、学校与污染源的距离,在室外、监测对象家中和学校设立空气采样点。
环境样品采集要在生物样品采集前一周内完成。
(2)监测指标
①人体负荷指标:
尿总砷。
②健康效应指标:
皮肤损害检查,主要检查掌跖部位皮肤是否有疣状过度角化;身体非暴露部位皮肤是否有弥漫的黑色或棕褐色的色素沉着或色素脱失斑。
周围神经病检查,四肢远端向近端发展的感觉型或感觉运动型周围神经功能障碍。
③环境危险因素指标:
饮用水、食品、空气颗粒物总砷含量。
4.镉污染健康监测点
(1)样品采集
①生物样品:
晨尿。
②环境样品:
随机选择部分监测对象所在家庭,采集生活饮用水和当地自产的食物样品。
食物样品采集种类包含大米、叶类及根茎类蔬菜、软体类、甲壳类、肝脏类等,各地可根据监测人群主要食物适当调整。
对能够以废气形式排放含镉颗粒物的污染源,根据污染源的地理分布、当地气候条件和居民居住地、学校与污染源的距离,在室外、监测对象家中和学校设立空气采样点。
环境样品采集要在生物样品采集前一周内完成。
(2)监测指标
①人体负荷指标:
尿镉。
②健康效应指标:
尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG酶)和尿β2-微球蛋白(β2-MG)。
③环境危险因素指标:
饮用水、食品、空气颗粒物中镉含量。
5.铬污染健康监测点
(1)样品采集
①生物样品:
采集晨尿。
②环境样品:
随机选择部分监测对象所在家庭,采集生活饮用水和当地自产的食物样品。
食物样品种类包含粮食、蔬菜、奶类等,各地可根据监测人群主要食物适当调整。
对能够以废气形式排放含铬颗粒物的污染源,根据污染源的地理分布、当地气候条件和居民居住地、学校与污染源的距离,在室外、监测对象家中和学校设立空气采样点。
环境样品采集要在生物样品采集前一周内完成。
(2)监测指标
①人体负荷指标:
尿铬。
②健康效应指标:
皮肤铬溃疡(铬疮)、铬鼻病、肝功能、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG酶)和尿β2-微球蛋白(β2-MG)。
③环境危险因素指标:
饮用水、食品、空气颗粒物铬含量。
(三)监测频率。
原则上一年一次。
根据健康危害的严重程度,适当提高监测频率。
(四)人群环境流行病学调查。
以问卷调查方式调查监测对象日常活动范围和时间、个人生活和饮食习惯、个人卫生习惯、职业和环境污染物接触史、药物使用、生活燃料使用、居住和工作(学习)环境卫生状况、健康状况等情况,了解影响铅、汞、铬、镉、砷暴露的相关因素,推断可能的暴露途径。
四、质量控制
开展人群健康基线调查和健康监测前应当依据本指南制订详细的实施方案,并对实施基线调查和健康监测的人员进行统一培训。
环境和生物样品应当在通过国家计量认证的实验室检测,并按照附件1-4提供的全程质量保证措施开展样品的采集、转运、储藏和分析,同时低温保存所有受检生物样品的平行样,备复核和质控使用。
五、监测数据报告
人群健康监测结果应当及时向卫生部、当地人民政府及其卫生行政部门报告。
附件:
1.人体生物样品全程质量控制和检测方法
2.生活饮用水样品全程质量控制和检测方法
3.食物样品采集、检测和质量控制
4.空气样品采集、检测和质量控制
5.生物监测相关表格
附件1
人体生物样品全程质量控制和检测方法
一、生物样品的采集、处理和保存
人体生物样品采集须符合国家有关规定。
(一)尿样。
1.尿样采集
(1)采集晨尿不少于100ml,为避免污染,应当取中段尿;
(2)尿液采集后应当及时进行肌酐测定或比重测定;肌酐浓度<0.3g/L或>3g/L的尿样,比重<1.010或>1.030的尿样均应当弃去,并重新采集;
(3)尿样采集后至冷冻前,应当在阴凉、避光处暂存,暂存时间不超过3小时。
同一批次未开封尿瓶至少保留2个,作为样品空白测定。
2.尿样保存
尿瓶应当在-20℃或者更低温度下冷冻保存,直至运送到指定检测实验室。
到实验室后,立即保存在-20℃以下冰箱。
-20℃保存不超过1个月。
(二)血样。
1.血样采集
(1)样品采集应当在洁净的环境中进行;
(2)采血人员应当戴无粉乳胶或聚乙烯手套,静脉血的采集需按顺序用0.2%硝酸、纯水、碘酒、酒精清洁取血区皮肤后进行;
(3)血液样品的采集应当采用肝素锂抗凝剂,同时采集2份血液样品,样品采集量3ml;
(4)每采1管EDTA抗凝血后,要将抗凝管轻柔上下晃动5~8次;
(5)同一批次未开封真空采血管、采血针等耗材至少保留2个作为样品空白测定。
2.血样运输和保存
(1)样品运输:
样品置于放有冰袋的保温箱中0-20℃存,时间不超过48h;
(2)样品保存:
于-20℃冰柜冻存。
3.发样
采集后发际贴头皮1.0~2.0g,将发样置于10%中性洗涤剂中浸泡10分钟,振摇洗涤后,再依次用自来水、去离子水漂洗,干燥后剪成1~3mm长。
如果发样油脂较多,可将按上述方法清洗后的发样,浸泡于乙醚(或丙酮)中,搅拌10分钟后取出晾干。
晾干后的发样用纸袋或塑料袋封存备用。
二、生物样品的包装和运输
(一)尿样。
尿样的包装和运输要求请参见血样的包装及运输,以下为需特殊说明的几点:
1.包装时需将尿瓶瓶口向上依次放入内包装箱内,请勿颠倒或倾斜;
2.干冰需在箱底、中部及顶部均匀放置,以保持箱内温度符合要求;
3.外包装要用胶带密封严密、牢固,以防破损;
4.外包装箱上除贴注必要的信息外,请在明显位置贴图,警示“请勿倒置”。
(二)血样。
1.采用聚苯乙烯泡沫塑料隔热材料箱作为内包装箱,瓦楞纤维板样品运输箱作为外包装箱;
2.聚苯乙烯泡沫样品箱(内包装箱)底部放一些吸收材料,以起到缓冲作用;
3.在吸收材料顶部铺放一层干冰,将采血管顺序放入带有干冰的运输箱中;
4.再依次铺放干冰、采血管,直至聚苯乙烯泡沫样品箱不能再容纳样品;
5.用胶带将聚苯乙烯泡沫样品箱牢固密封;
6.用一层干净的防泄漏塑料袋,将样品箱包装;
7.将样品箱再放入瓦楞纤维板样品运输箱(外包装箱)中,顶部放置一层冰袋,以保证持续运输中样品运输箱温度在1℃-10℃;
8.将一份血液样品运输箱载货单置于自封袋中,并密封在包装箱中;
9.用胶带将外包装箱密封,并在外表面贴好标签,内容包括装箱人姓名、日期、箱内样品类型及数量;
10.如需托运,请按正规运输要求贴注托运人/收货人的地址等详细信息。
三、生物样品实验室质量控制
(一)检测实验室的基本要求。
1.从事重金属及类金属铅、镉、砷、铬和汞检测的实验室应当依法通过实验室资质认证,并依据质量控制手册、程序性文件和作业指导书对实验室检测全过程进行质量控制;
2.从事血、尿样品采集和实验室检测的人员应当经过技术培训,并掌握相应的标准、规范和检测技术;
3.实验室应当将具有独立的样品预处理实验间和仪器设备间,并具有良好的通风排毒设施,避免对检测人员造成危害;
4.检测用仪器应当满足检测方法的要求。
(二)样品测定过程中的质量控制。
1.测定用标准应当溯源至国家标准;
2.测定过程中应当采用二级标准物质或质量控制样品进行质量控制;
3.在测定样品溶液前,应当首先进行二级标准物质或质量控制样品测定,且结果在允许的参考值范围内;
4.无标准物质或质量控制样品时,可采用加标回收率和平行样检测进行质量控制;
5.建议实验室建立质量控制图对实验室进行质量控制;
6.异常样品应当进行备用样品的复检,当检测结果变异小于10%时,方可出具检测结果报告;
7.实验室可采用一级标准物质对样品检测结果进行修正;
8.每20个样品间应当设置标准控制样品。
(三)记录的控制。
实验室应当保存完整的原始记录实验检测和质量控制资料,建立监测档案。
(四)实验室间质量控制。
进行血、尿样品检测的实验室应当参加国内外相应的实验室能力验证、实验室比对、测量审核或盲样考核。
(五)检测结果的报告。
样品检测结果报告应当含实验室名称、样品采集日期、样品检测日期、检测依据、检测仪器设备名称、仪器编号、样品编号、检测结果和报告签发人等信息。
四、人体生物样品的检测方法
(一)人体生物样品重金属含量检测方法。
血铅测定参照WS/T174-1999血中铅、镉的石墨炉原子吸收光谱测定方法(详见中华人民共和国卫生行业标准)。
尿汞测定采用原子荧光光谱测定法(详见“尿汞原子荧光光谱测定法”);头发中总汞含量的测定方法参照GB6989-1986中附录D。
头发甲基汞含量的测定方法参照GB6989-1986中附录E。
尿砷含量测定采用原子荧光光谱测定法(详见“尿砷原子荧光光谱测定法”)。
尿镉含量测定参照WS/T32-1996尿中镉的石墨炉原子吸收光谱测定法(详见中华人民共和国卫生行业标准)。
尿铬含量检测参照WS/T37-1996尿中铬的石墨炉原子吸收光谱测定法(详见中华人民共和国卫生行业标准)。
尿样重金属含量采用肌酐校正。
(二)尿砷原子荧光光谱测定法。
1.原理
尿样经微波消解后,在酸性条件下,加入硫脲使五价砷预还原为三价砷,再加入硼氢化钠或硼氢化钾使还原生成砷化氢,由氩气载入石英原子化器中分解为原子态砷,在砷空心阴极灯的发射光激发下产生原子荧光,其荧光强度在固定条件下与被测液中的砷浓度成正比,与标准系列比较定量。
2.仪器
(1)具盖聚乙烯塑料瓶,500mL。
(2)具盖聚乙烯塑料离心管,15mL。
(3)电热板。
(4)微波消解器,带样品消解罐。
(5)原子荧光光度计,砷空心阴极灯。
仪器操作参考条件见下表。
波长,nm
193.7
灯电流,mA
70
原子化器温度,℃
200
延迟时间,S
0.5
光电倍增管负高压,V
300
读数时间,S
13
原子化器高度,mm
8
进样体积,mL
1
载气(Ar)流量,mL/min
300
进样方式
断续流动
屏蔽气(Ar)流量,mL/min
900
读数方法
峰面积
输阴极电流,mA
35
3.试剂
实验用水为重蒸水或去离子水。
(1)硝酸,优级纯。
(2)过氧化氢,优级纯。
(3)氢氧化钠溶液,5g/L。
(4)硼氢化钾溶液,30g/L。
(5)硫脲-抗坏血酸混合液,50g/L:
称取5g硫脲加约80mL纯水,加热溶解,待冷却后加入5g抗坏血酸,稀释至100mL,存储在棕色瓶中,可保存1个月。
(6)盐酸溶液,体积分数是5%。
(7)砷标准应用溶液:
溶解0.1320g三氧化二砷(预先在105℃烘干2h)于0.5mL氢氧化钠溶液(200g/L)中,用水稀释至100mL。
此溶液为1.0mg/mL砷标准贮备液。
临用前,用水稀释成1.0μg/mL砷标准应用溶液,或用国家认可的砷标准溶液配制。
4.采样、运输和贮存
用具盖聚乙烯塑料瓶收集尿样,混匀后,尽快按WS/T97测定肌酐。
取10mL尿,加入具盖聚氯乙烯塑料管,样品需冷藏贮存和运输。
样品于4℃可保存14d。
5.分析步骤
(1)样品处理:
将尿样从冰箱中取出,放置恢复到室温后,充分摇匀。
取5.0mL尿样于样品消解罐中,加入3mL硝酸,微波消化5min,冷却卸压后取出样品罐将消化液分次转移到25mL比色管中,同时加入1.25mL盐酸和5.0mL抗坏血酸-硫脲混合液,并定容至25mL,室温反应30min后供测定。
(2)样品空白:
取5.0mL水按样品同样处理,作为样品空白。
(3)标准曲线的绘制:
取砷标准应用溶液0.00mL、0.05mL、0.10mL、0.20mL、0.40mL、0.80mL分别置于6个25mL容量瓶中,各加入浓盐酸1.25mL,硫脲-抗坏血酸混合液5.00mL,以水定容至25mL。
室温反应30min后供测定。
参照仪器操作条件,将原子荧光光度计调节至最佳测定状态,分别测定样品和样品空白,以测得的荧光强度值与相应的尿砷浓度(μg/L)绘制标准曲线。
(4)样品测定:
用测定标准管的操作条件测定样品和样品空白,由标准曲线得尿砷浓度(μg/L)。
6.计算
按式(1)计算尿中砷的浓度:
C=
kc1
……………………………(1)
c2
式中:
C—尿中砷浓度,μg/g肌酐;
c1—从标准曲线上查得的尿样中砷浓度,μg/L;
c2—尿肌酐浓度,g/L;
k—尿样稀释倍数。
7.说明
(1)本法的最低检出浓度为0.32μg/L(取尿样5mL);标准曲线的线性范围为0μg/L~160μg/L;精密度范围为0.87%~1.75%;加标回收率为95%~105%(加标浓度10.0
μg/L~80.0μg/L)。
(2)硼氢化钾的浓度对测定结果有较大的影响,本法采用为30g/L。
硼氢化钾水溶液的稳定性较差,必须加入一定量的NaOH或KOH以提高其稳定性。
(3)5倍砷浓度以下的锑离子、20倍砷浓度以下的铅离子、25倍砷浓度以下的锡离子对测定无干扰;钾和钠离子对测定无干扰。
(4)通常室温条件下,硫脲30min可将五价砷还原为三价砷,故样品消化定容后30min即可进行测定。
(三)尿汞原子荧光光谱测定法。
1.原理
尿样品经微波消解后,在酸性条件下,尿样品中汞被硼氢化钠或硼氢化钾还原成原子态汞,由氩气载入石英原子化器中,在汞空心阴极灯的照射下,基态汞原子被激发至高能态,在返回基态时,发射出原子荧光,其荧光强度在固定条件下与被测液中的汞浓度成正比,与标准系列比较定量。
2.仪器
(1)具盖聚乙烯塑料瓶,500mL。
(2)具盖聚乙烯塑料离心管,15mL。
(3)微波消解器,消解罐。
(4)原子荧光光度计,汞空心阴极灯。
仪器操作参考条件见下表。
波长,nm
253.7
延迟时间,S
2
原子化器温度,℃
200
读数时间,S
15
光电倍增管负高压,V
300
灯电流,mA
15
原子化器高度,mm
12
进样体积,mL
0.5
载气(Ar)流量,mL/min
400
进样方式
断续流动
屏蔽气(Ar)流量,mL/min
1000
读数方法
峰面积
3.试剂
实验用水为去离子水或重蒸水。
(1)硝酸,优级纯。
(2)盐酸,优级纯。
(3)过氧化氢,优级纯。
(4)盐酸溶液,体积分数为10%。
(5)硼氢化钾(20g/L)溶液:
称取2.5g氢氧化钠溶于500mL水后再放入10g硼氢化钾用玻璃棒混匀溶解。
(6)重铬酸钾溶液,500mg/L:
称取5g重铬酸钾溶于50mL水,然后取出0.5mL,加入2.5mL硝酸,再加水定容至100mL。
存储在棕色瓶中,可保存3个月。
(7)汞标准应用溶液:
用国家认可的汞标准溶液配制。
取汞标准溶液(1000µg/mL)0.1mL于10mL比色管中用重铬酸钾溶液定容,配成10µg/mL的汞标准溶液。
临用前,用10%盐酸溶液配成100µg/L的汞标准应用液。
4.采样、运输和贮存
用具盖聚乙烯塑料瓶收集尿样,混匀后,尽快按WS/T97测定肌酐。
样品在室温下尽快运输和测定;样品置于4℃冰箱中可保存14d。
5.分析步骤
(1)样品处理:
将尿样从冰箱中取出,放置恢复到室温后,充分摇匀。
取1.0mL尿样于样品消解罐中,加入2mL硝酸,放入微波消解炉中二档消化3min,冷却后分次转移到10mL比色管中,并定容至10mL,供测定。
(2)样品空白:
并取硝酸2mL于样品消解罐中,其余操作同样品,作为样品空白。
(3)标准曲线的绘制:
用汞标准应用液,采用逐级稀释的方法按表2配置标准系列。
参照仪器操作条件,将原子荧光光度计调节至最佳测定状态,分别测定标准系列,用测定的荧光强度值与相应的汞浓度(μg/L)绘制标准曲线。
用标准应用液按照下表配制标准溶液系列。
管号
0
1
2
3
4
5
汞标准应用溶液体积,mL
0.0
0.1
0.3
0.5
1
2
盐酸溶液(10%),mL
定容体积10.0
汞的浓度,μg/L
0.0
1.0
3.0
5.0
10.0
20.0
(4)样品测定:
用测定标准的操作条件,测定样品和样品空白的荧光强度后,由标准曲线得尿汞浓度(μg/L)。
6.计算
按式
(1)计算尿中汞的浓度:
C=
c1k
……………………………(1)
c2
式中:
C—尿中汞浓度,μg/g肌酐;
c1—从标准曲线上查得的尿样中汞浓度(减去样品空白),μg/L;
c2—尿的肌酐浓度,g/L;
k—样品稀释倍数。
7.说明
(1)方法的最低检出浓度为0.042μg/L;标准曲线的线性范围为0μg/L~20μg/L;方法精密度:
RSD=5%~10%(n=6);加标回收率为96%~114%。
(2)铅、砷、钠、钙、镁等离子均对测定无干扰。
(3)测定过程中应注意汞浓度过高易引起仪器污染,仪器应清洗后再进行检测。
(四)健康效应指标检测方法。
1.尿β2-微球蛋白的放射免疫测定方法
(1)原理
β2-微球蛋白抗体能特异地与检样中的β2-微球蛋白(β2-MG)结合,如同时加入125I标记的β2-微球蛋白,则竞争与抗体结合,通过检查结合的放射量与游离的放射量之比,可以求出样品中β2-微球蛋白的含量。
(2)仪器
125I放免测定仪。
(3)测定盒的组分
①β2-MG标准:
0,10,20,50,100,200,500ng/ml。
②β2-MG抗体。
③125I-β2-MG。
④高浓度缓冲液。
⑤PEG溶液。
试剂的配制按每个批号的说明书中所规定的加入量稀释成工作液。
(4)尿样采集和保存
晨尿弃去,让受试者喝500ml水,1h后排尿于广口瓶中,尿样用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH至6.0-7.5。
4℃保存不超过一周,-20℃保存不超过1个月。
(5)测定步骤
①尿样稀释:
取尿样200µl,加稀释的缓冲液0.8ml。
②加样:
于5ml平底塑料试管中按表1顺序加样。
表1各测定管加样顺序单位:
µl
测定管
标准品
样品
125I-β2-MG
抗体
混匀,
37℃
温育3h
PEG
标记物*
标准
样品
—
100
—
—
—
100
100
100
100
—
200
200
—
200
200
*供了解标记物现有的放射量。
加完PEG后,充分摇匀,离心(6500r/min)20min,吸去上清液,计数沉淀物的放射量。
③样品放射量的计数:
于125I放免测定仪“双管两次均数”、“30s”档处计数沉淀物的放射量(每分钟次数),同时测量仪器本底读数,按下式求出各管的结合百分数:
[B/B0(%)]=
×100
式中:
B/B0—结合百分数,%;F—仪器本底读数值;
S—沉淀物的放射量计数值;
S0—标志系列中0ng/ml的放射量计数值;
B—S-f;
B0—S0-F。
(6)计算:
以标准系列0,10,20,50,100,200,500ng/ml各点的放射量计数值为对数横坐标,以各标准点结合百分数[B/B(%)]为纵坐标绘制标准曲线。
从标准曲线找出样品结合百分数相应的β2-微球蛋白浓度,乘以样品之稀释倍数即可换算成µl。
为避免排尿单位体积的影响,更确切地反应实际排出水平,c1k将含量的计量单位改尿容积为尿肌酐,结果表示为µg/g肌酐。
2.尿视黄醇结合蛋白酶联免疫吸附测定法
(1)原理
抗人RBP抗体与尿液中RBP结合,加入酶标抗体工作液后形成复合物,后者与底物作用呈现显色反应。
待测尿液中RBP的浓度与OD值(492nm)成正比。
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