藏党参和潞党参中活性成份含量的对照研究Word文档格式.docx
- 文档编号:8062701
- 上传时间:2023-05-10
- 格式:DOCX
- 页数:5
- 大小:19.49KB
藏党参和潞党参中活性成份含量的对照研究Word文档格式.docx
《藏党参和潞党参中活性成份含量的对照研究Word文档格式.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《藏党参和潞党参中活性成份含量的对照研究Word文档格式.docx(5页珍藏版)》请在冰点文库上搜索。
Keywords:
CodonpsisthalictrifoliaWall.;
Codonopsispilosula(Franch.)Nnannf.;
Polysaccharide;
Saponins
党参RadixCodonopsisPilosulae其性味甘平、无毒,有补中益气、生津止渴等功效。
主治脾胃虚弱,中气不足,肺气亏虚,热病伤津,气短口渴,血虚萎黄,头晕心慌等症,是我国传统的补益药[1,2]。
现代研究说明党参中多种成份具有生理活性,尤其是对多糖和皂苷的活性研究较多,如党参多糖具有增强免疫能力[3,4]、提高应激能力[5]、抗衰老[6]等药理活性;
党参皂苷具有抗突变[7]、抗缺氧等活性[8]。
依照党参的产地不同,分为不同的商品规格。
藏党参,又名鲁堆多吉,为桔梗科党参属植物的根。
据《晶珠本草》记载,分为黑色类和白色类两种,脉花党参与长花党参别离符合黑色类和白色类的特点,视为正品[9]。
本研究所用的药材为长花党参CodonpsisthalictrifoliaWall.,生擅长青藏高原与西秦岭相汇处,海拔2000~3000m之间,常被藏族人民用于消炎散肿,滋补壮阳,健脾胃,补气,可医治风湿性关节炎、神经痛、神经麻痹、疮疥痈肿、麻风、脚气病、癔病等[10,11]。
潞党参Codonopsispilosula(Franch.)Nnannf.被视为党参中品质优良的品种,多为人工栽培,产于山西,临床应用普遍,研究较多。
本实验第一次测定了藏党参中多糖与皂苷这两种活性成份的含量,并与潞党参进行了对照研究,为藏党参的进一步研究和开发利用提供科学依据。
1材料与仪器
1.1仪器UNICO2000分光光度计(上海尤尼柯公司);
分析天平(瑞士METTLERTOLEDO公司);
恒温水浴锅(天津市泰斯特仪器);
5804R冷冻型高速离心机(德国eppendorf公司)等。
1.2试剂葡萄糖-D对照品,人参皂苷Re对照品(中国药品生物制品检定所);
其他试剂均为分析纯(北京化学试剂公司)。
1.3实验药材藏党参,产地为甘肃省岷县(购于兰州金开来商贸);
潞党参产地为山西省陵川县(购于北京药材公司)。
在阴凉处风干,粉碎后,过24目筛,置干燥处备用。
2方式与结果
2.1多糖含量的测定
2.1.1多糖的制备与精制精准称取60℃烘24h后的药材粉末80g,置于圆底烧瓶中,加500ml石油醚,回流脱脂1.5h,过滤,回收石油醚。
药渣挥干溶剂,别离用800,400,400ml80%的乙醇提取2,1.5,1h。
过滤,回收乙醇,药渣挥干溶剂,再别离用蒸馏水800,400,400ml,75~80℃回流提取2,1.5,1h,过滤,归并滤液,浓缩到150ml,用0.1%的活性炭脱色两次,过滤,滤液加95%乙醇至乙醇含量为80%。
置于冰箱中24h,过滤,残渣前后用95%乙醇,乙醚,丙酮洗涤数次,离心,得总多糖。
2.1.2多糖理化性质检识多糖为灰白色粉末,可溶于水,不溶于乙醇、丙酮、氯仿等有机溶剂。
Molish反映呈阳性,碘-碘化钾反映呈阴性。
2.1.3葡萄糖标准曲线的绘制精准称取105℃干燥至恒重的葡萄糖-D对照品25mg,加水溶解,定容至25ml,摇匀,配成浓度为1mg/ml标准葡萄糖溶液。
周密量取标准葡萄糖溶液0,10,20,40,60,80μl置干燥试管中,各加蒸馏水至2ml,再别离加入5%苯酚溶液1ml,摇匀,迅速滴加浓H2SO45ml,充分摇匀,室温放置25min。
进行全波长扫描,在490nm处均有最大吸收。
以490nm处吸光度为纵坐标,以样品浓度为横坐标绘制标准曲线,回归方程为A=0.0619C-0.0056,R2=0.9996,在1.25~10μg/ml之间有良好的线性关系,见图1。
2.1.4换算因素的测定精准称取干燥至恒重的多糖20mg,加水溶解后定容到100ml容量瓶中,摇匀,作为多糖储蓄液,浓度C1=0.2mg/ml。
周密吸取此溶液0.2ml,照“”项下的方式测其吸光度值,从回归方程求得藏党参和潞党参多糖供试液中葡萄糖的含量C2别离为4.775μg/ml和3.838μg/ml。
2.1.5样品溶液的制备称取药材粉末0.2g,3份,别离置于圆底烧瓶中加80%乙醇150ml,80℃水浴回流提取1h,趁热过滤,残渣用80%热醇洗涤。
然后将残渣连同滤纸置烧杯中,加蒸馏水150ml,80℃水浴提取1h,趁热过滤,残渣及烧瓶用热水洗涤,洗液并入滤液,放冷后移入250ml容量瓶中,用蒸馏水定容,浓度C为0.8mg/ml,备用。
图1葡萄糖标准曲线(略)
2.1.6样品中多糖含量测定周密量取0.2ml样品溶液,照“”项下的方式测其吸光度值,从回归方程求得藏党参和潞党参样品溶液中葡萄糖的含量C3别离为4.404μg/ml和2.756μg/ml。
2.1.7稳固性实验取样品溶液照“”项下的方式测其吸光度值,每隔15min测1次,结果说明1.5h内稳固性良好,RSD=0.68%(n=5)。
2.1.8回收率实验精准称取药材粉末1g,加入总多糖20mg,用150ml80%乙醇85℃回流提取2h,过滤,药渣用95%乙醇洗涤3次,挥干溶剂,再用150ml蒸馏水85℃提取2h,过滤并用蒸馏水洗涤数次,转移至容量瓶中,定容到250ml。
取5ml定容至100ml,然后取400μl依照“”项的方式测定吸光度。
藏党参和潞党参多糖含量测定的平均回收率别离为94.79%和98.37%,RSD均小于1.5%(n=3)。
2.1.9样品中多糖含量计算供试液多糖浓度C4的计算:
C2/C1=C3/C4
计算得藏党参和潞党参供试液中多糖浓度别离为0.185mg/ml和0.144mg/ml。
样品多糖含量的计算:
在吸取量均相同的情形下样品多糖含量为:
C4/C,经计算藏党参和潞党参中多糖平均含量别离为24.32%和18.25%,RSD均小于1.5%(n=3),见表1。
表1藏党参和潞党参中总多糖和总皂苷含量的测定结果(略)
2.2皂苷含量的测定
2.2.1皂苷供试液的制备精准称取前期处置好的药材粉末2g,置圆底烧瓶中加70%乙醇150ml回流提取2h,提取液过滤后浓缩,挥干溶剂,加入50ml蒸馏水溶解,用水饱和的正丁醇150ml萃取3次,浓缩,挥干溶剂,甲醇溶解定容至100ml,样品浓度为20mg/ml,待测。
2.2.2人参皂苷Re标准曲线的绘制精准称取105℃干燥至恒重的人参皂苷Re对照品10mg,甲醇溶解,定容至10ml,摇匀,配成浓度为1mg/ml标准人参皂苷Re溶液。
周密量取人参皂苷Re溶液0,20,40,80,120,160μl置干燥试管中,吹干,依次加入现配的5%香草醛冰醋酸溶液0.2ml,高氯酸0.8ml,60℃水浴15min,冷却后加入冰醋酸5.0ml,室温下放置5min。
进行全波长扫描,在544nm处均有最大吸收。
以544nm处吸光度为纵坐标,以样品浓度为横坐标绘制标准曲线,回归方程为A=0.0275C-0.0342,R2=0.9979,在3.33~26.67μg/ml之间有良好的线性关系,如图2所示。
2.2.3稳固性实验取样品溶液照“”项下的方式测其吸光度值,每隔15min测1次,结果说明1.5h内稳固性良好,RSD=0.59%(n=5)。
2.2.4回收率实验精准称取前期处置好的药材粉末1g,加入5mg人参皂苷Re对照品,按样品溶液的制备和测定方式别离进行实验。
藏党参和潞党参皂苷含量测定的平均回收率别离为97.73%,96.82%,RSD均小于1.5%(n=3)。
2.2.5样品中皂苷含量的测定周密吸取样品溶液60μl,依照“”项的方式测吸光度值,从回归方程求得藏党参和潞党参皂苷的含量别离为3.02%和2.48%,RSD均小于1.5%(n=3)。
见表1。
图2人参皂苷Re标准曲线(略)
3讨论
党参作为中医临床上经常使用的补益药,对其化学体系研究说明,其要紧成份有多糖、甾醇类成份、三萜类成份、生物碱、内酯类成份、香豆素类等[1]。
现代医学研究证明,党参对心血管系统、免疫系统、中枢神经系统都具有阻碍[12~14]。
本实验第一次测定了藏党参中多糖和皂苷的含量,并与临床上经常使用的同科属植物——潞党参进行了对照研究。
3.1多糖含量的比较藏党参和潞党参中多糖的含量都较高,且藏党参中多糖的含量是潞党参的1.33倍。
潞党参中多糖含量测定的结果与咸丰等[15]所测得的19.82%,和刘文生等[16]测得的20.99%大体一致,说明分析方式靠得住。
3.2皂苷含量的比较在以前的研究中,对党参属植物中皂苷的药理活性研究较多,但对皂苷含量进行测定的报导很少。
本实验参考程伶俐等[17]测定板桥党参皂苷含量的方式,选择以人参皂苷Re为对照品测定皂苷含量。
结果显示,二者皂苷含量都高于板桥党参的1.38%,藏党参中皂苷的含量是潞党参的1.22倍。
3.3存在含量不同的缘故分析第一,是生长环境不同。
本实验所选用的藏党参产于甘肃省岷县,生擅长青藏高原与秦岭相汇处,海拔在2000~3000m之间。
第二,是采摘、收成时节不同。
潞党参多为人工栽培,产于山西。
本实验所用药材虽均为市面上所销售的药材,可是采摘、收成时节可能存在不同。
综上所述,藏党参中多糖和皂苷含量与潞党参对照,结果显示,藏党参多糖和皂苷含量高,具有较高的开发利用价值,为藏党参的深切研究、质量评判和开发利用提供了加倍合理、靠得住的依据。
【参考文献】
[1]刘恩荔,秦雪.党参研究进展[J].山西医科大学学报,2002,33(6):
567.
[2]国家药典委员会.中国药典,Ⅰ部[S].北京:
化学工业出版社,2000:
233,附录60.
[3]杨光,李发胜,刘辉,等.党参多糖对小鼠免疫功能的阻碍[J].中药药理与临床,2005,21(4):
39.
[4]YongGyuLee,JooYoungKim,JiYeonLee,etal.RegulatoryeffectsofCodonopsislanceolataonmacrophage-mediatedimmuneresponses[J].JournalofEthnopharmacology,2007,112:
180.
[5]LiJianPing,LiangZhiMin,LiZhongYuan.Triteirpenoidsaponinsandanti-inflammatoryactivityofCodonopsislanceolata[J].Pharmazie,2007,62(6):
463.
[6]许爱霞,张振明,葛斌,等.党参多糖抗衰老作用机制的实验研究[J].中国现代应用药学杂志,2006,23(8):
729.
[7]韩春姬,韩龙哲,叶萌,等.轮叶党参总皂苷抗突变作用的实验研究[J].环境与职业医学,2004,21(5):
397.
[8]张壮,韦颖,刘楠,等.党参皂苷L1对抗缺氧缺糖再给氧诱导大鼠星形胶质细胞损伤的作用[J].中国临床康复,2006,10(27):
28.
[9]罗达尚.新修晶珠本草[M].成都:
四川科学技术出版社,2004:
596.
[10]杨永昌.藏药志[M].西宁:
青海人民出版社,1991:
13.
[11]宋立人.中华本草(藏药卷)[M].上海:
上海科学技术出版社,1999:
361.
[12]张天红,张馨,耿爱萍.潞党参药理实验研究[J].时珍国医国药,2001,12(6):
488.
[13]LiuJian-Hui,BaoYong-Ming,SongJi-Jun,etal.Codonopsispilosula(Franch)NannftotalalkaloidspotentiateneuriteoutgrowthinducedbynervegrowthfactorinPC12cells[J]..ActaPharmacolSin,2003,24(9):
913.
[14]焦红军.党参的药理作用及其临床应用[J].临床医学,2005,25(4):
89,92.
[15]咸丰,李发胜.苯酚-硫酸法测定党参多糖含量[J].沈阳军队医药,2006,19(3):
176.
[16]刘文生,薛霖莉,卫萍.潞党参多糖的提取及含量测定[J].安徽中医学院学报,2005,24
(1):
42.
[17]程伶俐,韩凤梅,陈勇.板桥党参活性成份分析[J].湖北大学学报(自然科学版),2004,24(4):
334.
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 党参 活性 成份 含量 对照 研究
![提示](https://static.bingdoc.com/images/bang_tan.gif)