肠道病原菌——沙门氏菌属.doc
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第一章沙门氏菌属
一、分类
属
域
门
纲
目
科
沙门菌属
细菌域
变形菌门
Y-变形菌纲
肠杆菌目
肠杆菌科
沙门菌属主要包括肠道沙门氏菌和邦戈沙门氏菌。
肠道沙门氏菌广泛存在于猪、牛、羊、家禽、鸟类、鼠类等多种动物的肠道和内脏中。
根据沙门氏菌的致病范围,可将其分为三大类群。
类群
致病范围
类型
第一类群
只对人致病
伤寒沙门氏菌、副伤寒沙门氏菌(甲型、乙型、丙型)、仙台沙门氏菌
第二类群
食物中毒沙门氏菌群(对人和动物均致病)
猪霍乱沙门氏菌(最强)、鼠伤寒沙门氏菌(首位)、肠炎沙门氏菌、纽波特沙门氏菌等
第三类群
对动物致病(很少感染人)
马流产沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌
二、生物学特征
1.形态染色特性
G-无芽孢杆菌。
大小通常为0.7~1.5μm×2.0~5.0μm,菌端钝圆,散在,偶有短丝状,无荚膜(除鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌外),一般均有周身鞭毛,能运动,绝大多数菌株有菌毛。
2.培养特性
需氧或兼性厌氧菌;生长温度范围为10~42℃,最适生长温度为35~37℃;适宜pH为6.8~7.8;对营养要求不高,在普通培养基中生长旺盛;胆盐可促进其生长。
培养基
菌落特征
备注
NA
圆形、光滑、湿润、无色半透明、边缘整齐或不太整齐的中等大小(2~4mm)菌落
鸡白痢、鸡伤寒、猪副伤寒、甲型副伤寒沙门氏菌等只能长成细小菌落
MAC
无色透明或半透明(不发酵乳糖)、中等大小、边缘整齐、光滑、稍微隆起
在MAC/EMB/DHL/SS鉴别大肠埃希氏菌和弗劳地氏柠檬酸杆菌(迟缓或不发酵乳糖)。
EMB
无色透明或半透明(不发酵乳糖)、中等大小、边缘整齐、光滑、稍微隆起
DHL
无色半透明、中心黑色或几乎全部黑色(产H2S)的菌落
弗劳地氏柠檬酸杆菌产H2S,在WS/HE/DHL培养基上也形成中心带黑色的菌落。
SS
无色半透明、中心黑色或几乎全部黑色(产H2S)的菌落
HE
蓝绿色或蓝色,多数菌落中心黑色或几乎全部黑色(产H2S);有些菌株为黄色,中心黑色或几乎全部黑色
BS 蛋白胨、牛肉浸粉提供碳源、氮源、维生素和矿物质;葡萄糖提供能源;亚硫酸铋指示剂抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群,但不影响沙门氏菌的生长;磷酸氢二钠是缓冲剂;硫酸亚铁用于产生硫化氢,并与铁产生沉淀,使阳性培养物为具有金属光泽的棕色到黑色菌落;
黑色有金属光泽,棕褐色或灰色,菌落周围呈黑色或棕色,有些菌落呈绿色、周围不变色。
XLD
粉红色,带或不带黑色中心,有些菌株呈现大的带光泽的黑色中心,或呈现全部黑色的菌落;有些菌落呈绿色、周围不变色
血平板
灰色或灰白色,中等大小(2~4mm)、圆形、湿润
WS月示蛋白胨、牛肉膏提供碳源、氮源、维生素和矿物质;氯化钠维持均衡的渗透压;乳糖、蔗糖为可发酵的糖类;十二烷基硫酸钠、溴麝香草酚兰和酸性复红抑制革兰氏阳性菌;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生,使菌落中心呈黑色;琼脂是培养基的凝固剂;溴麝香草酚兰和酸性复红为pH指示剂,发酵糖产酸的菌落呈红色,不发酵糖的菌落为蓝绿色。
蓝绿色,中等大小(2~4mm)、圆形、湿润,中心呈黑色
3.生化特性
分解葡萄糖、麦芽糖、甘露醇和山梨醇产气;不分解乳糖、蔗糖、水杨苷和侧金盏花醇;产生硫化氢;原硝酸盐;不水解尿素;不液化明胶;V-P反应阴性;不产吲哚(靛基质试验阴性);能利用枸橼酸盐(个别菌株不利用)。
4.抵抗力
生长环境
生存时间
备注
水
2~3周
①该菌常借水或食物传播;
②对热抵抗力不强,60℃15min可死亡;5%石碳酸5min杀死;
③对氯霉素、合霉素极度敏感;
④选择性培养基用胆盐、煌绿抑制大肠杆菌。
粪便
1~2月
土壤
半年(冻土)
5.抗原构造与分类
抗原分类
构造
稳定性
菌体抗原(O抗原)
(群/组、亚组)刺激机体产生IgM抗体
存在菌体表面,多糖-类脂-蛋白复合物(多糖部分决定菌体抗原特异性)
稳定,耐热,不被酒精和0.1%石碳酸破坏。
鞭毛抗原(H抗原)
(型)刺激机体产生IgG抗体
蛋白质(蛋白质多肽链上的氨基酸排列顺序和空间构型决定鞭毛抗原特异性)
不耐热,加热60~70℃15min、酒精处理可被破坏;鞭毛可用甲醛固定制成H抗原,有两相,第一相特异性较高。
表面抗原(Vi抗原)如伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌等。
糖脂(毒力强,有抵抗吞噬作用,可阻碍O抗原和O抗体凝集)
不稳定,不耐热,加热60℃、酒精处理可被破坏;经加热破坏Vi抗原,O抗原和O抗体就可发生凝集。
6.变异
变异类型
变异结果
备注
S—R变异(光滑型—粗糙型)
O抗原消失
在生理盐水中会自发凝集
H—O变异
H抗原消失
S—R、H—O变异可分别进行,产生SH、RH、SO、RO四种型
V—W变异
Vi抗原消失,形成W型,与抗O血清发生凝集
可形成中间型—VW型
注:
以上变异不稳定,是可逆的。
如VW型在培养基中含有抗O血清时,可转变为V型。
三、致病性
致病因素
致病物质
所致疾病
内毒素
多糖-类脂-蛋白复合物/脂多糖(O抗原)
1.胃肠炎、肠热症(伤寒与副伤寒病,法定乙类传染病)、菌血症或败血症等;
2.食物中毒:
如鼠伤寒、肠炎、汤卜逊、猪霍乱、乙型及丙型副伤寒沙门菌等;
3.慢性肠炎:
沙门菌可引起老人和儿童的慢性肠炎;
4.败血症:
多由猪霍乱沙门菌引起;
5.沙门菌的局部感染如颈部、腰部等。
侵袭力
(Vi抗原)
肠毒素
(1)伤寒、副伤寒
伤寒沙门氏菌和甲、乙、丙型副伤寒沙门氏菌——急性肠道传染病(持续发热、表情淡漠、相对缓脉、玫瑰疹、肝脾大、白细胞减少,有时可出现肠出血、肠穿孔等严重并发症)。
【流行病学】
①传染源:
带菌者或患者是唯一传染源。
(典型伤寒患者在病程2~4周排菌量最大)
②传播途径:
粪→口传播。
(水、食物污染;患者密切接触;苍蝇、蟑螂等媒介机械性携带)
③人群易感性:
普遍易感,病后免疫力持久。
④流行特征:
夏秋季多见;学龄期儿童、青年易感。
【发病机制】
注:
①当胃酸pH<2时,伤寒杆菌很快被杀死;伤寒杆菌摄入量>105以上才能引起发病,胃酸减少和原先有幽门螺杆菌感染等有利于伤寒杆菌的定位和繁殖。
②伤寒杆菌释放脂多糖内毒素可激活单核吞噬细胞释放白细胞介素-1和肿瘤坏死因子等细胞因子,引起持续发热、表情淡漠、相对缓脉、休克和白细胞减少等表现。
(2)食物中毒
肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌、和汤普逊沙门氏菌等引起的食物中毒。
【病症】
①恶心、呕吐、腹泻、发热等急性肠胃炎症状;
②潜伏期短,一般12~48h;
③病程较短,一般2~4天即可完全恢复。
(3)败血症
四、 微生物学检查:
1.标本采集:
根据不同疾病采取不同的标本,最好在使用抗生素前采集,然后进行分离与培养。
肠热症的第一、二周采血液,第二、三周采粪便与尿液。
整个病程中骨髓分离细菌阳性率较高。
食物中毒采集食物与粪便。
2.检查方法及鉴定
(1)分离培养
1)粪便:
一般将粪便或肛拭直接接种于SS和MAC平板上,用两种培养基的目的是为提高标本的阳性检出率。
2)血液和骨髓:
抽取患者血液5ml或骨髓0.5ml,立即接种于含0.5%胆盐肉汤或葡萄糖肉汤5ml试管中进行增菌,48h将培养物移种到血平板和肠道鉴别培养基上,若有细菌生长取菌涂片革兰染色并报告结果。
对增菌培养物连续培养7天,仍无细菌生长时,则报告阴性。
3)尿液:
取尿液2~3ml经硫磺酸盐肉汤增菌后,再接种于肠道菌选择培养基或血平板上进行分离培养,亦可将尿液离心沉淀物分离培养。
4)局部感染的脓液。
(2)鉴定
沙门菌属的鉴定与志贺菌属相同,须根据生化反应和血清学鉴定两方面进行。
1)初步鉴定:
如为革兰阴性杆菌时作氧化酶试验,阴性时,挑取可疑菌落分别移种于KIA和MIU上。
并作生化反应。
以沙门菌多价诊断血清作玻片凝集试验。
凡符合KIA:
K/A、产气+/-、H2S+/-、MIU:
动力+、吲哚-、脲酶+,氧化酶-,触酶+,硝酸盐还原+,以沙门菌多价血清作玻片凝集试验阳性,鉴定为沙门菌属。
2)最后鉴定:
沙门菌血清学鉴定主要借助于沙门菌O抗原多价血清与O、H、Vi抗原的单价因子血清。
甲型副伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门菌和伤寒沙门菌分别属于A、B、D血清群。
(3)血清学诊断
肥达试验:
用已知的伤寒沙门菌0、H抗原,甲乙丙副伤寒沙门菌H抗原稀释后与被检血清作定量凝集试验,以检测患者血清中抗体的含量,来判断机体是否受沙门菌感染而导致肠热症并判别沙门菌的种类。
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- 肠道 病原菌 沙门氏菌