内分泌激素的实验室检测.pptx
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内分泌激素的实验室检测.pptx
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内分泌激素的实验室检查,检验科吴伟平2016年1月,甲亢实验室检查,
(一)血清总甲状腺素(TT4),T4全部由甲状腺产生,每天约产生80100g。
血清中99.96%的T4以与蛋白结合的形式存在,其中80%90%与TBG结合。
TT4测定的是这部分结合于蛋白的激素,所以血清TBG量和蛋白与激素结合力的变化都会影响测定的结果。
妊娠、雌激素、急性病毒性肝炎、先天因素等可引起TBG升高,导致TT4增高;雄激素、糖皮质激素、低蛋白血症、先天因素等可以引起TBG降低,导致TT4减低。
如果排除上述因素,TT4稳定、重复性好,仍然是诊断甲亢的主要指标。
(二)血清总三碘甲腺原氨酸(TT3),人体每天产生T32030g,20%T3由甲状腺产生,80%T3在外周组织由T4转换而来。
血清中99.6%的T3以与蛋白结合的形式存在,所以本值同样受到TBG含量的影响。
正常情况下,血清T3与T4的比值小于20。
甲亢时TT3增高,T3与T4的比值也增加;T3型甲状腺毒症时仅有TT3增高。
(三)血清游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3),游离甲状腺激素是实现该激素生物效应的主要部分。
尽管FT4仅占T4的0.025%,FT3仅占T3的0.35%,但它们与甲状腺激素的生物效应密切相关,所以是诊断临床甲亢的首选指标。
但因血中FT4、FT3含量甚微,测定方法学上许多问题尚待解决,测定的稳定性不如TT4、TT3。
此外,目前临床应用的检测方法都不能直接测定真正的游离激素水平。
(四)促甲状腺激素(TSH),血清TSH浓度的变化是反映甲状腺功能最敏感的指标。
血清TSH测定技术经历了放射免疫法(RIA)、免疫放射法(immunoradiometricassay,IRMA)后,目前已经进入第三代和第四代测定方法,即敏感TSH(sTSH)(检测限0.01mU/I.)和超敏TSH测定方法(检测限达到0.005mU/L)。
免疫化学发光法(ICMA)属于第四代TSH测定法,成人正常值为0.34.8mU/L。
sTSH成为筛查甲亢的第一线指标,甲亢时的TSH通常小于0.1mU/L。
sTSH使得诊断亚临床甲亢成为可能,因为后者甲状腺激素水平正常,仅有TSH水平的改变。
传统的应用TRH刺激试验诊断不典型甲亢的方法已经被sTSH测定所取代。
(五)(131)I摄取率,(131)I摄取率是诊断甲亢的传统方法,目前已经被sTSH测定技术所代替。
(131)I摄取率正常值(盖革计数管测定)为3小时5%25%,24小时20%45%,高峰在24小时出现。
甲亢时(131)I摄取率表现为总摄取量增加,摄取高峰前移。
本方法现在主要用于甲状腺毒症病因的鉴别:
甲状腺功能亢进类型的甲状腺毒症(131)I摄取率增高;非甲状腺功能亢进类型的甲状腺毒症(131)I摄取率减低。
此外(131)I摄取率用于计算(131)I治疗甲亢时需要的活度。
(六)TSH受体抗体(TRAb),是鉴别甲亢病因、诊断GD的指标之一。
测定试剂已经商品化,放射受体法测定。
反应体系中的TSH受体是放射碘标记的牛TSH受体,或可溶性猪TSH受体,或重组的人TSH受体。
新诊断的GD患者75%96%TRAb阳性。
需要注意的是,TRAb中包括刺激性(TSAb)和抑制性(TSBAb)两种抗体,而检测到的TRAb仅能反映有针对TSH受体的自身抗体存在,不能反映这种抗体的功能。
但是,当临床表现符合Graves病时,一般都将TRAb视为TSH受体刺激抗体(TSAb)。
(七)TSH受体刺激抗体(TSAb),是诊断GD的重要指标之一。
与TRAb相比,TSAb反映了这种抗体不仅与TSH受体结合,而且这种抗体产生了对甲状腺细胞的刺激功能。
测定原理:
目前反应体系中培养的靶细胞是转染了人类TSH受体的中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞),测定指标是细胞培养液中的cAMP水平。
TSAb与CHO细胞表面的TSH受体结合,通过腺苷酸环化酶cAMP途径产生生物学效应,即cAMP水平增加。
85%100%的GD新诊断患者TSAb阳性,TSAb的活性平均在200%300%。
甲减实验室检查,
(一)血红蛋白多为轻、中度正细胞正色素性贫血。
(二)生化检查血清甘油三酯、总胆固醇、LDL-C增高,HDL-C降低,同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)增高,血清CK、LDH增高。
(三)血清甲状腺激素和TSH血清TSH增高、TT4、FT4降低是诊断本病的必备指标。
在严重病例血清TT3和FT3减低。
亚临床甲减仅有血清TSH增高,但是血清T4或T3正常。
亚急性甲状腺炎实验室检查,根据实验室结果本病可以分为三期,即甲状腺毒症期、甲减期和恢复期。
甲状腺毒症期:
血清T3、T4升高,TSH降低,(131)I摄取率减低(24小时100mm/小时。
甲减期:
血清T3、T4逐渐下降至正常水平以下,TSH回升至高于正常值,(131)I摄取率逐渐恢复。
这是因为储存的甲状腺激素释放殆尽,甲状腺细胞正在处于恢复之中。
恢复期:
血清T3、T4、TSH和(131)I摄取率恢复至正常。
Cushing综合征实验室检查,Cushing综合征共有的糖皮质激素分泌异常皮质醇分泌增多,失去昼夜分泌节律,且不能被小剂量地塞米松抑制。
尿17-羟皮质类固醇(简称17-羟)在55mol/24h以上,尤其是在70mol/24h以上时,诊断意义更大。
尿游离皮质醇多在304nmol/24h以上正常成人尿排泄量为130304nmol/24h,均值为(20744)nmol/24h),因其能反映血中游离皮质醇水平,且少受其他色素干扰,诊断价值优于尿17羟。
小剂量地塞米松抑制试验:
每6小时口服地塞米松0.5mg,或每8小时服0.75mg,连服2天,第二天尿17-羟不能被抑制到对照值的50%以下,或游离皮质醇不能抑制在55nrnol/24h以下;也可作一次口服地塞米松法:
测第1日血浆皮质醇作为对照值,当天午夜口服地塞米松img,次日晨血浆皮质醇不受明显抑制,不低于对照值的50%。
血浆皮质醇正常成人早晨8时均值为(27666)nmol/L(范围165441nmol/L);下午4时均值为(129.652.1)nmol/L(范围55248nmoi/L);夜12时均值为(96.533.1)nmol/L(范围55138nmol/L)。
患者血皮质醇浓度早晨高于正常,晚上不明显低于清晨(表示正常的昼夜节律消失)。
原发性肾上腺皮质功能功能减退症,1.基础血、尿皮质醇、尿17-羟皮质类固醇测定常降低,但也可接近正常。
2.ACTH兴奋试验静脉滴注ACTH25U,维持8小时,观察尿17-羟皮质类固醇和(或)皮质醇变化,正常人在兴奋第一天较对照日增加12倍,第二天增加1.52.5倍。
快速法适用于病情较危急,需立即确诊,补充糖皮质激素的患者。
在静注人工合成ACTH(124)0.25mg前及后30分钟测血浆皮质醇,正常人血浆皮质醇增加276552nmol/L。
对于病情较严重,疑有肾上腺皮质功能不全者,同时用静注(或静滴)地塞米松及ACTH,在注入ACTH前、后测血浆皮质醇,如此既可进行诊断检查,又可同时开始治疗。
3.血浆基础ACTH测定明显增高,超过55pmol/L,常介于88440pmol/L(正常人低于18pmol/L),而继发性肾上腺皮质功能减退者,ACTH浓度降低。
原醛实验室检查,
(一)血、尿生化检查低血钾:
一般在23mmol/L,严重者更低。
低血钾往往呈持续性,也可为间歇性。
早期患者血钾正常。
高血钠:
血钠一般在正常高限或略高于正常。
碱血症:
血pH和CO2结合力为正常高限或略高于正常。
尿钾高:
在低血钾条件下(低于3.5mmol/L),尿钾仍在25mmol/24h以上。
(二)尿液检查尿pH为中性或偏碱性;尿比重较为固定而减低,往往在1.0101.018之间,少数患者呈低渗尿;部分患者有蛋白尿,少数发生肾功能减退。
原醛实验室检查,(三)醛固酮测定血浆醛固酮浓度及尿醛固酮排出量受体位及钠摄入量的影响,立位及低钠时升高。
原醛症中血浆、尿醛固酮皆增高。
正常成人参考值:
血浆醛固酮卧位时50250pmol/L,立位时80970pmol/L(血浆醛固酮pmol/L换算成ng/dl时除以27.7);尿醛固酮于钠摄入量正常时6.486nmol/d,低钠摄入时47122nmol/d,高钠摄入时013.9nmol/d。
原醛症伴严重低血钾者,醛固酮分泌受抑制,血、尿醛固酮增高可不太严重,而在补钾后,醛固酮增多更为明显。
原醛实验室检查,(四)肾素、血管紧张素测定患者血浆肾素、血管紧张素基础值降低,有时在可测范围之下。
正常参考值前者为(0.550.09)pg/(mlh),后者为(26.01.9)pg/ml。
经肌内注射呋塞米(0.7mg/kg体重)并在取立位2小时后,正常人血浆肾素、血管紧张素较基础值增加数倍,兴奋参考值分别为(3.480.52)pg/(mlh)及(45.06.2)pg/ml。
原醛症患者兴奋值较基础值只有轻微增加或无反应。
醛固酮瘤患者肾素、血管紧张素受抑制程度较特发性原醛症更显著。
醛固酮高而肾素、血管紧张素低为原醛症的特点,血浆醛固酮(ng/dl)/血浆肾素活性ng/(mlh)比值大于30提示原醛症可能性,大于50具有诊断意义。
嗜铬细胞瘤实验室检查,
(一)血、尿儿茶酚胺及其代谢物测定持续性高血压型患者尿儿茶酚胺及其代谢物香草基杏仁酸(vanillylmandelicacid,VMA)及甲氧基肾上腺素(metanephrine,MN)和甲氧基去甲肾上腺素(normetanephrine,NMN)皆升高,常在正常高限的两倍以上,其中MN、NMN的敏感性和特异性最高。
阵发性者平时儿茶酚胺可不明显升高,而在发作后才高于正常,故需测定发作后血或尿儿茶酚胺,后者可以每毫克肌酐量或以时间单位计排泄量。
摄入咖啡、可乐类饮料及左旋多巴、拉贝洛尔(柳胺苄心定)、普萘洛尔(心得安)、四环素等药物可导致假阳性结果;休克、低血糖、高颅内压可使内源性儿茶酚胺增高。
嗜铬细胞瘤实验室检查,正常参考值:
尿TMN(MN+TMN)为1.54.6mol/d(0.30.9mg/d);血浆NMN为90570pmol/L(18102pg/ml);血浆MN为60310pmol/L(1261pg/ml);尿VMA为544mol/d(18mg/d);去甲肾上腺素:
血浆为3802365pmol/L(65400ng/L),尿为59470nmol/d(1080g/d);肾上腺素:
血浆为0380pmol/L(070ng/L),尿为0109nmol/d(020g/d);尿儿茶酚胺为1342g/d。
泌乳素瘤实验室检查,催乳素瘤患者血清PRL一般200g/L,若300g/L则可肯定,但200g/L时应检查有无药物(酚噻嗪、三环类抗抑郁剂、甲氧氯普胺、甲基多巴、雌激素等)的作用、原发性甲状腺功能减退症、慢性肾衰竭和下丘脑病变等,GH瘤实验室检查,24小时GH水平总值较正常值高出1015倍,GH分泌脉冲数增加23倍,基础GH水平增加达1620倍(正常值5g/L);IGF-1(正常值2.5ng/ml)升高可反映24小时GH分泌总体水平,可作为筛选和疾病活动性指标,也可作为本症治疗是否有效的指标。
TRH、LHRH兴奋试验可有GH反常升高;GHRH、生长抑素不能改变GH水平;葡萄糖负荷(100g)后GH不能降低到正常值(05g/L),可反而升高。
腺垂体功能减退症实验室检查,腺垂体功能情况可通过对其所支配的靶腺功能状态来反映。
(一)性腺功能测定女性有血雌二醇水平降低,没有排卵及基础体温改变,阴道涂片未见雌激素作用的周期性改变;男性见血睾酮水平降低或正常低值,精液检查精子数量减少,形态改变,活动度差,精液量少。
(二)肾上腺皮质功能24小时尿17-羟皮质类固醇及游离皮质醇排量减少,血浆皮质醇浓度降低,但节律正常,葡萄糖耐量试验示血糖低平曲线。
腺垂体功能减退症实验室检查,(三)甲状腺功能测定血清总T4、游离T4均降低,而总T3、游离T3可正常或降低。
(四)腺垂体分泌激素如FSH、LH、TSH、ACTH、GH、PRL均减少,但因垂体激素呈脉冲式分泌,故宜相隔1520分钟连续抽取等量抗凝血液3次,等量相混后送检测。
同时测定垂体促激素和靶腺激素水平,可以更好地判断靶腺功能减退为原发性或继发性。
对于腺垂体内分泌细胞的储备功能可采用兴奋试验,如GnRH、TRH、CRH、GHRH等下丘脑激素来探测垂体激素的分泌反应。
腺垂体联合兴奋试验(TRH、GnRH、胰岛素低血糖)结果若低于正常,有判断意义,但正常低值也属异常。
应当指出,有时结果可与正常重叠,ACTH试验对于判别原发性或继发性肾上腺皮质功能减退症有重要意义。
胰岛素低血糖激发试验忌用于老年人、冠心病、有惊厥和黏液性水肿的患者。
甲旁亢实验室检查,
(一)血血清总钙多次超过2.75mmol/L或血清游离钙超过1.28mmol/L应视为疑似病例.如同时伴有维生素D缺乏,肾功能不全或低白蛋白血症,血清总钙可不高,但血清游离钙是增高的。
血清磷一般均降低,但在肾功能不全时血清磷可不低。
血清碱性磷酸酶常增高,在骨骼病变比较显著的患者尤为明显。
血氯常升高,血HCO3常降低,可出现代谢性酸中毒。
(二)尿尿钙常增加,但由于PTH降低钙的清除率,当血清钙低于2.87mmol/L时,尿钙增加可不明显。
尿磷常增高,由于饮食等因素的影响,诊断意义不如尿钙增多。
尿cAMP增加,但注射外源性PTH后,尿cAMP不再进一步增加。
尿羟脯氨酸常增加,与血清碱性磷酸酶增高一样,均提示骨骼明显受累。
甲旁亢实验室检查,(三)血清PTH测定测定血清PTH可直接了解甲状旁腺的功能。
有氨基端片段、中间段和羧基端片段的放射免疫分析法和全分子PTH1-84的免疫放射法以及免疫化学发光法。
后两者的敏感性与特异性均大为提高,是原发性甲状旁腺功能亢进症的主要诊断依据。
该法正常范围为110pmol/L,平均值为3.42pmol/L。
本症患者血清PTH在10pmol/L以上。
血PTH水平增高结合血清钙值一起分析有利于鉴别原发性和继发性甲旁亢。
甲旁减实验室检查,多次测定血清钙,若2.2mmol/L者,存在低血钙。
有症状者,血清总钙一般1.88mmol/L,血清游离钙0.95mmol/L。
多数患者血清磷增高,部分正常。
尿钙、尿磷排出量减少。
碱性磷酸酶正常。
血PTH多数低于正常也可在正常范围,因低钙血症对甲状旁腺是一强烈刺激,血清总钙1.88mmol/L时,血PTH值应增加510倍,所以低钙血症时,如血PTH在正常范围,仍属甲状旁腺功能减退。
因此,检测血PTH时应同时测血钙,两者一并分析。
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