植物组织培养技术所有名词解释.docx
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植物组织培养技术所有名词解释
植物组织培养复习材料
一、名词解释。
1、植物组织培养(planttissueculture):
植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进展无菌培养,并在人工控制的环境条件下,使其发育成完整植株的科学技术
2、脱分化〔dedifferentiation〕:
指失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进展分裂,形成无分化的细胞即愈伤组织的现象。
3、再分化〔redifferentiation〕:
愈伤组织形成不定芽或不定根或胚状体。
4、外植体(explant):
植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。
〔如器官、组织、细胞、原生质体、种子等〕
5、愈伤组织(callus):
原本指植物在受伤后于其伤口外表形成的一团薄壁细胞。
在组培中,那么指人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄壁细胞。
6、器官发生:
胚胎时期由胚层器官原基发育成器官的过程。
包括细胞分化和器官形成。
7、胚状体发生:
在植物细胞、组织或器官体外培养过程中,由一个或一些体细胞经过胚胎发生和发育过程,形成的与合子胚相类似的构造。
可进一步发育成植株。
8、细胞全能性〔celltotipotency〕:
指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组,并具有发育成完整植株的潜在能力。
9、细胞分化:
一个尚未特化的细胞发育出特征性构造和功能的过程。
10、极性:
细胞〔也可指器官或植株〕的一端与另一端在形态构造和生理生化上的差异。
11、试管苗:
通过组织培养产生的植株。
12、看护培养:
是指用一块活泼生长的愈伤组织来看护单个细胞,使其持续分裂和增殖的一种培养方法。
这块愈伤组织被称为看护组织。
13、固相化培养:
将细胞或原生质体固着在琼脂糖、藻〔月元〕酸盐或多聚赖氨酸中,然后将他们放入液体培养基中震荡培养。
这种培养方法既利用了振荡培养室营养物质和气体易于交换的优点,有利用了固相化使细胞免受振荡时剪切力的作用。
14、悬浮细胞培养:
将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进展培养增值的技术。
适用于大规模的培养,使细胞工程的根本平台。
15、植板效率=〔每个平板中新形成的细胞团数/每个平板中接种的细胞数〕*100
16、实验室的组成及功能:
1.根本实验室〔1〕准备室〔2〕接种室〔3〕培养室
2.辅助实验室〔1〕细胞学实验室〔2〕摄影室及暗室〔3〕生化分析室〔无菌操作室、化学实验室、培养室、细胞学观察室、暗室〕。
17、植物种质:
物亲代通过生殖细胞或体细胞传递给后代的遗传物质,植物种质资源即为携带各种不同遗传物质的植物总称。
18、玻璃化现象:
指试管苗的一种生长失调病症,当植物材料进展离体繁殖时,有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状,这种现象称为玻璃化。
其苗称为玻璃化苗。
19、根本培养基:
包括大量元素和微量元素〔无机盐类〕、维生素和氨基酸,还有糖和水等。
20、完全培养基:
在根本培养基根底上,根据各种不同试验要求,添加各种植物生长调节物质以及其他复杂有机附加物,包括有些成分尚不完全清楚的天然提取物。
21、外植体褐变:
在组织培养过程中,外植体向培养基中释放褐色的物质〔醌类〕致使培养基逐渐变成褐色,培养材料也随之变成褐色而逐渐死亡的现象。
22、微体快繁:
利用植物组织培养技术进展的一种营养繁殖方法。
23、微体嫁接:
把极小〔小于0.2mm〕的茎尖作为接穗嫁接到实生木上,然后将嫁接后的砧木接种到新培养基上培养。
24、敏感植物:
有些植物对病毒极为敏感,一旦感染病毒就会在其叶片乃至全株上表现特殊的病斑,如马铃薯病毒—千日红、黄烟花、心烟叶、毛叶蔓陀罗。
菊花病毒—矮牵牛。
25、固相化的方法:
凝胶包埋、外表吸附、网格及泡沫固定、膜固定。
26、悬浮细胞培养:
将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进展培养增殖的技术。
27、固相化细胞培养:
把细胞固定在一种惰性基质,如琼脂、藻盐酸、聚丙烯酰胺、纤维或膜上面或里面,细胞不能运动,而营养液可以在细胞间流动,供给其营养。
28、条件培养:
在选用的培养基中,参加一定量以生长过组织或细胞的培养液〔离心去除组织或细胞〕称条件培养液。
用条件培养液培养细胞,即使接种的细胞密度低于最低有效密度,这些细胞也能生长和分裂。
30、再分化培养:
31、液体培养:
指在进展培养时,培养基中不加琼脂等凝固剂,一般需要通过振荡等方法解决培养基的通气情况。
32、细胞培养:
指从植物体中别离了单细胞,无人工条件下进展培养,使其生长增殖,甚至发育成完整植株的技术。
33、无病毒苗:
指不含该种植物主要危害病毒的苗木。
34、原生质体融合:
指使别离下来的不同亲本的原生质体,在人工控制的条件下,像性细胞受精作用那样互相融合成一体,又称体细胞杂交。
35、胚状体:
体细胞在一定条件下所诱导形成的胚称为体细胞胚,即胚状体
36、原生质体:
指去掉细胞壁的由质膜包裹有生命活力的裸细胞。
37、单倍体植株:
只含有配子体染色体组数的植株。
38人工种子:
指通过组织培养技术,将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚,然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中,组成便于播种的类似种子的单位。
39、离体授粉:
将未授粉的胚珠或子房从母体上别离下来,进展无菌培养,并以一定的方式授以无菌花粉,使之在试管实现受精的技术,又称为离体受精或试管受精
40、植物生长调节剂:
植物中调节生长及其他功能的激素类物质。
主要分为三类:
植物生长素类、细胞分裂素类和赤霉素类。
41、器官培养:
指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。
42、植物胚胎培养:
指对植物的胚、胚胎、胚珠和子房的培养。
二、不定项选择〔每题2分,共10分〕
1、以下不属于生长素类的植物激素是___AD______。
AKt;BIAA;CNAA;DZT
2、影响培养基凝固程度因素有__ABCD____。
A琼脂的质量好坏;B高压灭菌的时间;C高压灭菌的温度;D培养基的PH
3、第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是:
B
AMorel;BHaberland;C Schleiden;DWhite
4、以下不属于大量元素的盐是___C______。
ANH4NO3;BKNO3;CZn SO4.7HO2;DMgSO4.7HO2
5、以下实验中可能获得单倍体植株的是___BCD_____。
A小麦的茎尖培养;B番茄花药培养;C玉米胚乳培养;D玉米花粉培养
6、活性炭在组织培养中的作用有__ABC____。
A吸附有毒物质; B减少褐变,防止玻璃化; C创造黑暗环境,增加培养基的通透性,利于根的生长;D增加培养基中的养分
7、以下具有细胞全能性的细胞是:
_ABCD___。
A成熟的老细胞;B幼嫩的组织细胞;C愈伤组织细胞D番茄的受精合子
8、以下培养基中____C___无机盐的浓度最低。
AMS培养基;BB培养基;CWhite培养基;DN6培养基
9、从单个细胞或一块外植体形成典型的愈伤组织,大致经历___ACD__三个时期。
A诱导期;B潜伏期;C分化期;D分裂期
10、植物组织培养的特点是_ABCD__:
A培养条件可人为控制;B生长周期短,繁殖率高;C管理方便;D取材少
11、高温易被破坏分解的植物激素是___ABD___。
AIAA;BGA;CNAA;DZt
12、同一植株以下___B___部位病毒的含量最低。
A叶片细胞;B茎尖生长点细胞;C茎节细胞;D根尖生长点细胞
13、在原生质体的培养中,渗透稳定剂的作用是--A---:
A稳定原生质体的形态而不使其被破坏B支持作用
C提供营养 D调节PH值
14、以下实验中不可能获得单倍体植株的是__AC_____。
A水稻茎尖培养;B草莓花药培养;C玉米叶片培养;D棉花胚乳培养
15、适合花粉培养的最适时期是---B--:
A单核早期B单核靠边期C二核期D三核期
16、IAA需要用___C____法灭菌。
A灼烧灭菌;B干热灭菌;C过滤灭菌D高压湿热灭菌
17、能打破种子休眠,促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发的激素是---AB----:
AGA;BIAA;CNAA;DZT
18、以下实验中可能获得单倍体植株的是__BCD____。
A小麦的茎尖培养;B番茄花药培养;C玉米胚乳培养;D玉米花粉培养
19、下面属于处于愈伤组织分裂期的特征是__ABCD____。
A细胞分裂加快 B正在分裂的细胞体积小,无液泡
C细胞的核和核仁增至最大D细胞中的RNA含量减少,而DNA含量保持不变
20、赤霉素〔GA〕需要用____C_____法灭菌。
A灼烧灭菌;B干热灭菌;C过滤灭菌D高压湿热灭菌
21、第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是___B_____:
AMorel;BHaberland;CSchleiden;DWhite
22以下那种方法不能脱除感染植株体的病毒AC
①茎段培养;②微茎尖培养;③愈伤组织的继代培养;④珠心胚培养
23.适合外植体材料外表消毒的方法是B
①高压蒸汽;②适宜浓度的消毒剂浸泡;③紫外线消毒;④熏蒸消毒
24、经高温灭菌后。
培养基的pH会A
A降低B升高C不变D不能确定
25、在植物组织培养中,培养基的PH值一般为B
A低于5.0B5.5—5.8C6.0—7.0D高于7.0
26、以下有关细胞全能性的含义,正确的选项是C
A每个生物体的所有细胞都具有一样的功能
B生物体的任何一个细胞可以完成该个体的全部功能
C生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能
D生物体的每个细胞都经过产生、分裂、分化、生长、衰老、死亡的全过程
27、以下那种方法不能脱除感染植株体的病毒〔AC〕
A茎段培养;B微茎尖培养。
C愈伤组织的继代培养;D珠心胚培养。
28、以下不属于生长素类的植物激素是___A______。
A6-BA;BIAA;CNAA;DIBA
三、填空题〔每空1分,共20分〕
1、去除植物病毒的主要方法是_组培法___和_理化法___两种方法,当把二者结合起来脱毒效果最好。
2、原生质体的融合可实现__体细胞___的杂交,其融合的方式分为_自然融合__和_人工诱导融合_两类。
3、在组织培养中,非洲菊是靠__丛生芽____的方式进展繁殖的,而蝴蝶兰是以__原球茎增殖_的方式进展快繁的。
4、单细胞培养的方法主要有--看护培养--、---微室培养---及---平板培养----。
5、在通过微茎尖培养脱毒时,外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定,一般以
__0.3—0.5___mm、带__1—2__个叶原基为好。
6、植物组织培养按培养过程中是否需要光,可分为___光___培养和___暗__培养。
7、细胞的再分化有----器官发生---和---体胚发生----两种形式。
8、连续培养有----浊度恒定法----和----化学恒定法----两种方法。
9、通过茎尖培养脱毒苗的过程中,切取茎尖的大小与其成活率成__正比__,而与脱毒效果成_反比__。
10、一个已停顿分裂的成熟细胞转变为_____未分化_____状态,并形成__未分化的愈伤组织___的现象称为"脱分化"。
11、植物的胚胎培养,包括____胚__培养、___胚乳____培养、____胚珠___培养、子房培养以及离体授粉的。
12、在组织培养中,IAA、ZT和GA必须用____过滤灭菌__法灭菌,而接种室空间采用___紫外线照射_或__甲醛熏蒸__法灭菌。
13、幼胚培养时,其发育过程有____早熟萌发__、__呸性发育____、___形成愈伤___三种方式。
14、原生质体的别离有___机械法___和__酶降解法____两种方法。
15、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为_普通茎尖培养__培养和__茎尖分生组织__培养两种类型。
16、花药培养是___器官__培养,花粉培养属于__细胞___培养,但二者的培养目的一样,都是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞,最后发育成_单倍体植株_。
17、不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样,次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生
___ClO-_______来杀菌的;升汞是靠__重金属________来到达灭菌目的。
18、一个已停顿分裂的成熟细胞转变为__分生__状态,并形成_未分化的愈伤组织__的现象称为"脱分化"。
19、White培养基___无机盐____浓度低,适合生根培养。
20、在无毒苗的组织培养中,外植体的大小与其成活率成_____正比_____,而与脱毒效果成____反比_____。
21、由胚乳培养可以获得___单___倍体植株,经秋水仙素处理可以获得___二_倍体植株。
22、使单倍体植株染色体加倍的途径主要有---自然加倍--、----人工加倍----和---通过愈伤组织再生加倍。
。
23、细胞悬浮培养有----成批培养---和----连续培养------两种类型。
24、通过植物组织培养获得无病毒苗的方法主要有----茎尖分生组织培养---、---愈伤组织培养-----、---珠心胚培养----及----花药培养----。
25、植物组织培养按培养对象分为-----器官培养----、---组织或愈伤组织培养-----、----细胞培养-----、------植株培养----_等几种类型。
26、1902年德国植物生理学家Haberlandt第一次提出植物细胞全能性的理论概念;1943
年White提出植物细胞“__全能性___〞学说,并出版了?
植物组织培养手册?
,从而使植
物组织培养成为一门新兴的学科。
27、细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的---全部遗传信息-----_和---发育成完整植株---的潜在的能力。
28、6-BA/NAA的上下决定了外植体的发育方向,比值低时促进___根____的生长,这
时___脱分化____占主导地位;比值高促进____芽____的生长,这时___再分化_____占主导地位。
29、在组织培养中,不耐热的物质用___过滤灭菌__法灭菌,而培养基常用_湿热灭菌_法灭菌。
30、组织培养中有三大不易解决的问题,它们分别是__污染____、____褐变____、__玻璃化_。
31、愈伤组织的形态发生有_器官形态建成_和_胚形态建成__两种情况。
33、在组织培养中,IAA和GA必须用____过滤____法灭菌,而接种室空间采用_70%的酒精_或_2%新洁尔灭喷雾或甲醛熏蒸__法灭菌。
36、根据培养的材料,植物组织培养分:
___愈伤组织培养__、 ___器官培养__、 __细胞培养___、 __原生质培养___ 等类型。
37、组织培养植株再生的途径:
__直接产生不定芽___和_通过愈伤组织形成不定芽____。
38、植物组织培养的开展分为三个阶段:
___萌芽阶段__、__奠基阶段___和_快速开展和应用阶段____阶段。
40、外植体污染原因从病源分面主要有 真菌 和 细菌 两大类
41、糖在植物组织培养中是不可缺少的,它不但作为离体组织赖以生长的 碳源 ,而且还能维持 培养基渗透压
42、外植体灭菌一般先用 酒精 ,再用 升汞 浸泡
43、由愈伤组织后成大致经历诱导期、分裂期、分化期、三个时期。
由愈伤组织再生植株有两条途径 和
45、常用的生长素有 IAA 、 2,4-D 、IBANAA 等,常用的细胞分裂素 KT 、 ZT 、 6-BA
46、防褐变的措施:
选取适宜的外植体和培养条件 、 剪切时尽量减少伤口面积 、 剪切口尽量平整 、 连续转移〔继代培养〕 、 参加抗氧化剂
47、植物常用脱毒方法:
热处理脱毒原理 、 茎尖培养脱毒原理 、 化学药剂处理 、 冷处理原理 、 原生质体,愈伤组织培养法、花药培养、株心胚培养脱毒
48、实验室必须满足三个根本的需要:
___试验准备__、___无菌操作__、__控制培养___。
49植物组织培养的难题是褐变、玻璃化和污染及变异现象
50植物组培获得单倍体植株的方法是进展,而获得三倍体的方法是进展
52、生长素与细胞分裂素比值高有利根生长,比值低有利芽生长,比例适宜诱导愈伤组织
53、植物组织培养按培养基的物理状态分为__固体_____培养和____液体___培养半固体培养基
五、简答题〔每题5分,共15分〕
1、培养基一般包括哪些根本成分?
答:
培养基的成份有:
〔1〕无机营养:
包括:
氧(O)、碳(C)、氢(H)、氮(N)、钾(K)、磷(P)、镁(Mg)、硫(S)和钙(Ca)等大量元素;铁〔Fe〕、铜〔Cu〕、锌〔Zn〕、锰〔Mn〕、钼〔Mo〕、硼〔B〕、碘〔I〕、钴〔Co〕、氯〔Cl〕、钠〔Na〕等微量元素〔2〕有机营养:
氨基酸、天然提取物、维生素、糖类〔3〕植物生长调节物质:
主要包括生长素类和细胞分裂素类。
〔4〕其他:
包括水、活性炭、琼脂等。
2、培养基、培养器皿和植物材料通常怎样灭菌?
答:
培养基一般采用湿热灭菌,如果培养基中的有些成分高温易分解,那么可采用过滤灭菌.培养器皿可采用湿热灭菌或干热灭菌。
植物材料一般采用药剂浸泡灭菌,具体操作如下:
〔1〕外植体的预处理,对植物组织进展修整,去掉不需要的局部,并将外植体用流水冲洗干净。
〔2〕用70%的酒精浸润材料30s左右。
〔3〕用灭菌剂浸泡灭菌,灭菌时不时搅动,使植物材料与灭菌剂有良好的接触,假设灭菌
过程中参加数滴吐温,那么灭菌效果更好。
〔4〕植物材料用无菌水冲洗3--5次,以除去灭菌剂。
3、提高商品化生产效率:
1.节约能源2.减少劳务开支3.扩大生产规模4.节约生产材料补:
降低商业化生产本钱提高经济效益:
4、针对试管苗生产所需的费用,应采取相应措施降低生产本钱,增强产品竞争力,提高试管苗经济效益。
5、诱导体胚的条件:
1.外植体:
①产生部位:
尤其胚、下胚轴、幼根、花序轴组织、未成熟的子房等;②生理状态:
采用外植体增殖能力较强时候的状态;③基因型。
2.培养基:
特别重要的是培养基中的生长素和N源。
N源:
复原态氮/硝态氮适宜比值。
3.生长调节剂:
①生长素:
所有生长素中,2,4-D被证明是极有效的。
体胚发生2个阶段:
胚的分化,胚性细胞的形成〔需2,4-D〕;胚状体的发育〔低或去除2,4-D〕。
2,4-D会诱导乙烯的产生,导致纤维素酶等活性升高,引起胚性细胞团的破坏。
②细胞分裂素:
细胞分裂素与生长素配合促进诱导体胚形成。
③赤霉素和脱落酸:
GA、ABA抑制体胚形成,但ABA可促进胚状体的正常发育,防止畸形胚的产生,尤其是对体胚成熟特别重要。
细胞再分化:
是指脱分化的分生细胞重新恢复分省能力,沿着正常的发育途径形成具有特定构造和功能的细胞。
7、培养基的配制
答:
配制培养基时应做好以下准备工作:
〔1〕实验用具的准备〔2〕试剂、药品的准备〔3〕根据培养基的配方、母液扩大倍数及需要配制的培养基体积计算所需的各种母液及其他附加物的量。
具体操作如下:
1,取规定数量糖原和凝固剂,加热使之溶解2,根据计算所需量依次参加大量元素、微量元素、铁盐、有机物、生长调节物质母液及其他特殊附加物,搅拌均匀3,加水定容至规定体积
9、热处理脱毒法
答:
原理:
〔1〕高于正常温度的环境〔35℃~40℃〕时,组织部的病毒局部或全部钝化〔2〕热处理使病毒失去传染力。
方法:
1,适用于离体材料和休眠器官的处理。
在50℃左右温水浸渍10min至数小时2,热空气法:
盆栽植物移入温热疗室,35~40℃,适合茎尖,处理时间短那么几十分钟,长可达数月。
局限性:
1并非所有的病毒都对热处理敏感2延长热处理时间,也可能会钝化,植物组织中的抗性因子3处理后只有一小局部植株能存活。
10、快繁中几大难题及解决方法
答:
影响快繁的方法有因有外因。
因主要是外植体的选取,应该在春夏、早秋时根据外植体基因型和生理、发育等方面选取0.5~1cm的。
外因,首先是污染,防止污染应从以下几方面考虑:
〔1〕选择植物材料〔2〕严格消毒灭菌〔3〕合理安排繁殖程序〔4〕规操作2,褐变问题,克制外植体产生褐变的措施有〔1〕选择适合的外植体和培养条件〔2〕连续转移〔继代培养〕〔3〕参加抗氧化剂;3,玻璃化,控制和克制玻璃化的措施有〔1〕使用透气好的封口材料〔2〕光照〔3〕温度〔4〕提高琼脂的量〔5〕硝态和氨态的比例提高〔6〕继代培养时,降低ck/IAA,增加乙烯醇等〔7〕抗逆性的锻炼。
原球茎:
缩短的呈珠粒状的,由胚性细胞组成的,类似嫩茎的器官
11、植物组织培养的应用及意义:
理论研究(在遗传、生理、生化、病理等研究上的应用);快繁;脱毒;遗传育种〔单倍体育种、突变育种、抗性选育、体细胞杂交〕;次生代产物生产〔主要用于药物、食品、调料、香精、颜料等领域〕;种质资源保存和交换;人工制种。
22、茎尖培养脱毒的原理:
1.病毒在植物体分布不均匀,越接近顶端分生组织,病毒浓度越稀;2.病毒DNA分子与细胞分装蛋白质合成竞争,在迅速合成的植物细胞中正常合成的蛋白质占优势;3.病毒的复制赶不上细胞分裂的速度。
关键:
通常茎尖培养脱毒的效果与茎尖的大小呈负相关,与成活率呈正相关。
操作程序:
外植体外表灭菌,在解剖镜下,经无菌操作切取小茎尖,接种到备用培养基土培养,并及时观察记录培养结果。
25、在植物组织培养中细胞分裂素和生长素各有什么作用?
答:
生长素能促进细胞的纵向伸长,它的作用具有两重性:
既促进生长,又能抑制
生长、甚至杀死植物;既促进发芽,又会抑制发芽;既能防止落花落果,又可疏花疏果。
这取决于浓度、细胞的年龄和器官的种类。
一般低浓度促进生长,中浓度抑制生长,高
浓度那么杀死植物。
细胞分裂素能促进细胞分裂和扩大、延迟衰老和保鲜、诱导芽的分化、促进侧芽发
育,防止果树生理落果、打破种子的休眠,促使其发芽等作用。
26、什么是看护培养?
其具体的方法是什么?
答:
看护培养指用一块生长活泼的愈伤组织来看护单个细胞或其他培养物,使其生长和增
殖的方法。
具体方法:
1、将生长活泼的愈伤组织放入灭过菌的固体培养基上,并在愈伤组织上放一片
无菌滤纸片。
2、将该愈伤培养过夜。
3、将单细胞或其他培养物放于滤纸片上面,移入培养室培养。
27、培养基、培养器皿和植物材料通常怎样灭菌?
答:
植物材料一般采用药剂浸泡灭菌,具体操作如下:
1、外植体的预处理,对植物组织进展修整,去掉不需要的局部,并将外植体用流水冲洗干净。
2、用70%的酒精浸润材料30s左右。
3、用灭菌剂浸泡灭菌,灭菌时不时搅动,使植物材料
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