临床酶学检验技术PPT课件.ppt
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精选ppt课件最新,1,临床酶学检验技术,临床生物化学检验,精选ppt课件最新,2,第一节酶学基本知识,酶的本质-绝大部分的酶是蛋白质,有些酶是核酸和酶蛋白组成的复合体,极少数酶的本质是核酸。
酶的特性-极高的催化效率、高度的特异性(specificity)以及催化作用的可调节性酶的结构与功能单纯酶酶蛋白(apoenzyme)结合酶辅酶(coenzyme)辅因子(cofactor)辅基(prostheticgroup),精选ppt课件最新,3,酶是蛋白质,具有一、二、三级结构,有些酶还具有四级结构。
单体酶(monomericenzyme)-只由一条多肽链构成寡聚酶(oligomericenzyme)-由多个相同或不同亚基以非共价键连接的酶多酶体系(multienzymesystem)-由几种不同功能的酶彼此聚合而成的多酶复合物酶的必需基团(essentialgroup)-与酶的活性密切相关的基团酶的活性中心(activecenter)-组成具有能与底物结合并起催化反应的特定空间结构区域,精选ppt课件最新,4,酶的命名、分类与编号,酶的命名-习惯命名法、系统命名法酶的分类-可分为六大类氧化还原酶(oxido-reductases)、转移酶(transferases)、水解酶(hydrolases)、裂解酶(或裂合酶)(lyases)、异构酶(isomerases)、合成酶(或连接酶)(synthetases或ligases)酶的编号-用4个数字加以系统编号第一个数字表示酶的类别,第二个表示亚类,第三个表示亚-亚类,第四个表示酶的编号序数。
精选ppt课件最新,5,习惯用名英文缩写EC编号系统名乳酸脱氢酶LD(LDH)1.1.1.27L乳酸:
NAD+氧化还原酶单胺氧化酶MAO1.4.3.4单胺:
氧化还原酶-谷氨酰转移酶-GT/GGT2.3.2.2-谷氨酰肽:
氨基酸-谷氨酰转移酶门冬氨酸氨基转移酶AST2.6.1.1L-门冬氨酸:
-酮戊二酸氨基转移酶(谷草转氨酶)(GOT)丙氨酸氨基转移酶ALT2.6.1.2L-丙氨酸:
-酮戊二酸氨基转移酶(谷丙转氨酶)(GPT)肌酸激酶CK2.7.3.2三磷酸腺苷:
肌酸转磷酸酶碱性磷酸酶ALP(AKP)3.1.3.1正磷酸单酯磷酸水解酶,临床酶学分析中常用酶的名称与编号,精选ppt课件最新,6,精选ppt课件最新,7,三、酶促反应动力学,
(一)酶促反应方程,精选ppt课件最新,8,
(二)酶促反应进程,精选ppt课件最新,9,(三)酶动力学参数,1反应速度2米氏常数,
(1)初速度指在反应最初阶段底物的消耗量很小(一般在50%以内)时的反应速度
(2)最大反应速度指当酶的结合位点与底物结合饱和时的反应速度,精选ppt课件最新,10,(四)酶偶联反应,ABCD,酶学分析中作为试剂用于测定化合物浓度或酶活性浓度的酶,Ei指示酶,Ea辅助酶,Ex,Ei,Ea,工具酶,精选ppt课件最新,11,精选ppt课件最新,12,第二节血清酶变化的生理病理机制,一、血清酶的来源与去路
(一)血清酶的来源1血浆固有酶2非血浆固有酶外分泌酶细胞酶
(二)血清酶的去路1肾小球滤过从尿液中排出2网状内皮系统清除3血管内失活或灭活,精选ppt课件最新,13,二、血清酶变化的生理病理机制,
(一)血清酶的生理差异1性别2年龄3饮食4运动5妊娠
(二)血清酶变化的病理机制1酶合成异常2细胞内酶的渗漏3酶进入血液的方式4其他血管内的抑制作用、清除速度,精选ppt课件最新,14,
(一)酶活性单位1惯用单位2国际单位-在特定的条件下,一分钟内使底物转变一微摩尔的酶量为一个国际单位。
3Katal单位-在规定条件下,每秒钟催化转化一摩尔底物的酶量。
1katal60106U,第三节酶含量的表示方法,一、酶活性浓度表示法,精选ppt课件最新,15,
(二)酶活性浓度指单位体积样品中的酶活性单位(三)正常上限升高倍数(ULN)是指用测得的酶活性结果除以参考范围上限,精选ppt课件最新,16,精选ppt课件最新,17,二、酶蛋白质量浓度表示法,测定酶蛋白质量浓度优点:
灵敏度高特异性高可测定无活性的酶与酶活性测定一起,计算免疫比活性在同工酶测定中更有价值,精选ppt课件最新,18,第四节酶催化活性浓度测定的理论基础,一、定时法二、连续监测法,精选ppt课件最新,19,(三)连续监测法的方法设计,1以人工合成色素原做底物的连续监测2NAD(P)H的连续监测3以Trinder反应做指示反应的连续监测4特殊反应类型的连续监测,精选ppt课件最新,20,第五节酶活性测定的影响因素与最适条件的确定,一、方法因素的影响,
(一)正向反应与逆向反应
(二)检测底物或检测产物(三)底物启动模式与样品启动模式,精选ppt课件最新,21,二、测定条件的影响与最适条件的确定,
(一)底物种类和浓度
(二)缓冲液种类、pH和离子强度(三)反应温度(四)辅助因子和激活剂(五)抑制剂(六)酶偶联法中的辅助酶和指示酶(七)延滞期与线性期的确定(八)样品与试剂比例,精选ppt课件最新,22,三、其他因素对测定结果的影响,
(一)仪器
(二)校准物(三)实验参数(四)副反应,精选ppt课件最新,23,第六节同工酶检测技术,一、电泳法二、抑制法三、其他方法
(一)热变性
(二)亲和层析法,精选ppt课件最新,24,免疫抑制法利用同工酶的一种亚基与相应的抗体结合后,酶活性受到抑制,测定加与不加抗体前后样品中酶活性的变化,可以计算出该型同工酶的活性。
不加抗CK-MM血清时样品的CK活性:
CK-MM和CK-MB活性;加入抗CK-MM血清时样品的CK活性:
50CK-MB的活性;加入抗CK-MM血清时样品的CK活性2:
CK-MB活性;所测CK-MM和CK-MB之总活性CK-MB活性CK-MM活性。
精选ppt课件最新,25,第七节目前常用诊断酶的酶活性测定,一、丙氨酸氨基转移酶与门冬氨酸氨基转移酶的测定,精选ppt课件最新,26,L-丙氨酸-酮戊二酸-丙酮酸L-谷氨酸,丙酮酸NADHH+乳酸NAD+,ALT(样品),LD(试剂),酶耦联法测定ALT,340nmA/min,-酮酸标本中,GLDH标本中,试剂1,试剂2,精选ppt课件最新,27,精选ppt课件最新,28,二、肌酸激酶的测定,三、碱性磷酸酶的测定,精选ppt课件最新,29,四、-谷氨酰基转移酶的测定,五、乳酸脱氢酶及其同工酶的测定,精选ppt课件最新,30,六、淀粉酶的测定,七、胆碱酯酶的测定,此课件下载可自行编辑修改,供参考!
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