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    临床酶学检验技术PPT课件.ppt

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    • 资源格式: PPT        下载积分:1金币
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    临床酶学检验技术PPT课件.ppt

    1、精选ppt课件最新,1,临床酶学检验技术,临床生物化学检验,精选ppt课件最新,2,第一节 酶学基本知识,酶的本质-绝大部分的酶是蛋白质,有些酶是核酸 和酶蛋白组成的复合体,极少数酶的本质是核酸。酶的特性-极高的催化效率、高度的特异性(specificity)以及催化作用的可调节性 酶的结构与功能 单纯酶 酶蛋白(apoenzyme)结合酶 辅酶(coenzyme)辅因子(cofactor)辅基(prosthetic group),精选ppt课件最新,3,酶是蛋白质,具有一、二、三级结构,有些酶还具 有四级结构。单体酶(monomeric enzyme)-只由一条多肽链构成 寡聚酶(oligo

    2、meric enzyme)-由多个相同或不同 亚基以非共价键连接的酶 多酶体系(multienzyme system)-由几种不同功能 的酶彼此聚合而成的多酶复合物 酶的必需基团(essential group)-与酶的活性密 切相关的基团 酶的活性中心(active center)-组成具有能与底 物结合并起催化反应的特定空间结构区域,精选ppt课件最新,4,酶的命名、分类与编号,酶的命名-习惯命名法、系统命名法 酶的分类-可分为六大类 氧化还原酶(oxido-reductases)、转移酶(transferases)、水解酶(hydrolases)、裂解酶(或裂合酶)(lyases)、异构

    3、酶(isomerases)、合成酶(或连接酶)(synthetases或ligases)酶的编号-用4个数字加以系统编号 第一个数字表示酶的类别,第二个表示亚类,第三个表示亚-亚类,第四个表示酶的编号序数。,精选ppt课件最新,5,习惯用名 英文缩写 EC编号 系统名乳酸脱氢酶 LD(LDH)1.1.1.27 L乳酸:NAD+氧化还原酶单胺氧化酶 MAO 1.4.3.4 单胺:氧化还原酶-谷氨酰转移酶-GT/GGT 2.3.2.2-谷氨酰肽:氨基酸-谷氨酰转移酶门冬氨酸氨基转移酶 AST 2.6.1.1 L-门冬氨酸:-酮戊二酸氨基转移酶(谷草转氨酶)(GOT)丙氨酸氨基转移酶 ALT 2.6

    4、.1.2 L-丙氨酸:-酮戊二酸氨基转移酶(谷丙转氨酶)(GPT)肌酸激酶 CK 2.7.3.2 三磷酸腺苷:肌酸转磷酸酶碱性磷酸酶 ALP(AKP)3.1.3.1 正磷酸单酯磷酸水解酶,临床酶学分析中常用酶的名称与编号,精选ppt课件最新,6,精选ppt课件最新,7,三、酶促反应动力学,(一)酶促反应 方程,精选ppt课件最新,8,(二)酶促反应进程,精选ppt课件最新,9,(三)酶动力学参数,1反应速度2米氏常数,(1)初速度指在反应最初阶段底物的消耗量很小(一般在50%以内)时的反应速度(2)最大反应速度 指当酶的结合位点与底物结合饱和时的反应速度,精选ppt课件最新,10,(四)酶偶联

    5、反应,A B C D,酶学分析中作为试剂用于测定化合物浓度或酶活性浓度的酶,Ei指示酶,Ea辅助酶,Ex,Ei,Ea,工具酶,精选ppt课件最新,11,精选ppt课件最新,12,第二节 血清酶变化的生理病理机制,一、血清酶的来源与去路(一)血清酶的来源 1血浆固有酶 2非血浆固有酶 外分泌酶 细胞酶(二)血清酶的去路 1肾小球滤过从尿液中排出 2网状内皮系统清除 3血管内失活或灭活,精选ppt课件最新,13,二、血清酶变化的生理病理机制,(一)血清酶的生理差异 1性别 2年龄 3饮食 4运动 5妊娠(二)血清酶变化的病理机制 1酶合成异常 2细胞内酶的渗漏 3酶进入血液的方式 4其他血管内的抑

    6、制作用、清除速度,精选ppt课件最新,14,(一)酶活性单位 1惯用单位 2国际单位-在特定的条件下,一分钟内使底 物转变一微摩尔的酶量为一个国际单位。3Katal单位-在规定条件下,每秒钟催化转化 一摩尔底物的酶量。1katal60106U,第三节 酶含量的表示方法,一、酶活性浓度表示法,精选ppt课件最新,15,(二)酶活性浓度 指单位体积样品中的酶活性单位(三)正常上限升高倍数(ULN)是指用测得的酶活性结果除以参考范围上限,精选ppt课件最新,16,精选ppt课件最新,17,二、酶蛋白质量浓度表示法,测定酶蛋白质量浓度优点:,灵敏度高特异性高 可测定无活性的酶 与酶活性测定一起,计算免

    7、疫比活性 在同工酶测定中更有价值,精选ppt课件最新,18,第四节 酶催化活性浓度测定的理论基础,一、定时法 二、连续监测法,精选ppt课件最新,19,(三)连续监测法的方法设计,1以人工合成色素原做底物的连续监测2NAD(P)H的连续监测 3以Trinder反应做指示反应的连续监测 4特殊反应类型的连续监测,精选ppt课件最新,20,第五节 酶活性测定的影响因素与最适条件的确定,一、方法因素的影响,(一)正向反应与逆向反应(二)检测底物或检测产物(三)底物启动模式与样品启动模式,精选ppt课件最新,21,二、测定条件的影响与最适条件的确定,(一)底物种类和浓度(二)缓冲液种类、pH和离子强度

    8、(三)反应温度(四)辅助因子和激活剂(五)抑制剂(六)酶偶联法中的辅助酶和指示酶(七)延滞期与线性期的确定(八)样品与试剂比例,精选ppt课件最新,22,三、其他因素对测定结果的影响,(一)仪器(二)校准物(三)实验参数(四)副反应,精选ppt课件最新,23,第六节 同工酶检测技术,一、电泳法二、抑制法三、其他方法(一)热变性(二)亲和层析法,精选ppt课件最新,24,免疫抑制法 利用同工酶的一种亚基与相应的抗体结合后,酶活性受到抑制,测定加与不加抗体前后样品中酶活性的变化,可以计算出该型同工酶的活性。不加抗CK-MM血清时样品的CK活性:CK-MM和CK-MB活性;加入抗CK-MM血清时样品

    9、的CK活性:50CK-MB的活性;加入抗CK-MM血清时样品的CK活性2:CK-MB活性;所测CK-MM和CK-MB之总活性CK-MB活性CK-MM活性。,精选ppt课件最新,25,第七节 目前常用诊断酶的酶活性测定,一、丙氨酸氨基转移酶与门冬氨酸氨基转移酶的测定,精选ppt课件最新,26,L-丙氨酸-酮戊二酸-丙酮酸 L-谷氨酸,丙酮酸 NADH H+乳酸 NAD+,ALT(样品),LD(试剂),酶耦联法测定ALT,340nmA/min,-酮酸标本中,GLDH标本中,试剂1,试剂2,精选ppt课件最新,27,精选ppt课件最新,28,二、肌酸激酶的测定,三、碱性磷酸酶的测定,精选ppt课件最新,29,四、-谷氨酰基转移酶的测定,五、乳酸脱氢酶及其同工酶的测定,精选ppt课件最新,30,六、淀粉酶的测定,七、胆碱酯酶的测定,此课件下载可自行编辑修改,供参考!感谢您的支持,我们努力做得更好!,此课件下载可自行编辑修改,供参考!感谢您的支持,我们努力做得更好!,


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