细菌的革兰氏染色.ppt
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细菌的革兰氏染色.ppt
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细菌的革兰氏染色,目的要求革兰氏染色原理实验材料实验程序思考题,目的要求,1.初步掌握细菌涂片方法2.学习并掌握革兰氏染色法步骤,革兰氏染色的基本原理,根据细菌细胞壁的组分和结构不同,通过革兰氏染色法可将所有的细菌区分为两大类G+和G-,革兰氏染色是丹麦医生C.Gram(革兰)于1884年发明的一种鉴别不同类型细菌的染色方法,实验材料,菌种:
金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)大肠杆菌(E.coli)染色液和试剂:
结晶紫、卢哥氏碘液、95%酒精、蕃红二甲苯、香柏油。
器材:
载玻片、接种杯、酒精灯、擦镜纸、显微镜,
(1)制片:
涂片晾干固定。
(2)结晶紫色初染:
滴加适量(以盖满细菌涂面)的结晶紫染色液染色1min,水洗。
(3)碘液媒染:
滴加卢哥氏碘液,媒染1min,水洗。
(4)脱色:
将玻片倾斜,连续滴加95%乙醇脱色30s至流出液无色,立即水洗。
(5)复染:
滴加蕃红复染12min,水洗。
(6)晾干镜检。
革兰氏染色操作步骤,涂片制备过程,革兰氏染色的过程制片,革兰氏染色的过程染色,大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,革兰氏染色注意载玻片要洁净,滴无菌水和取菌不宜过多,涂片要均匀,不宜过厚;热固定温度不宜过高,否则会改变甚至破坏细胞形态;水洗时不要直接冲洗涂面,而应使水从载玻片的一端流下,水流不宜过急,过大,以免涂片薄层脱落。
革兰氏染色结果是否正确,乙醇脱色是革兰氏染色操作的关键环节,脱色不足,阴性菌被误染成阳性菌,脱色过度,阳性菌被误染为阴性菌。
注意事项,实验报告,1绘图说明经革兰氏染色后大肠肝菌和金黄色葡萄球菌的染色结果。
实验报告,2思考题:
你认为哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性?
其中最关键的环节是什么?
你的染色结果是否正确?
如果不正确,请说明原因。
进行革兰氏染色时,为什么特别强调菌龄不能太老,用老龄细菌染色出现什么问题?
革兰氏染色时,初染前能加碘液吗?
乙醇脱色后复染之前,革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌应分别是什么颜色?
你认为革兰氏染色中,哪一个步骤可以省去而不影响最终结果?
在什么情况下可以采用?
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- 细菌 革兰氏 染色