细胞生物研究方法真题精选.docx
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细胞生物研究方法真题精选.docx
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细胞生物研究方法真题精选
[填空题]1核酸的杂交
参考答案:
通过互补的DNA或RNA探针与研究的DNA或RNA之间进行碱基配对,分离或鉴定特异的核酸片断。
也可用于比较两个核酸之间的相似性。
[单项选择题]
2、光学显微镜能够分辨出其详细结构的有()
A.细胞
B.线粒体
C.核仁
D.叶绿体
E.包被小泡
参考答案:
A
[单项选择题]
3、鉴别培养细胞中的死细胞时常用()
A.甲苯胺蓝
B.次甲基蓝
C.考马斯亮蓝
D.台盼蓝
E.甲基蓝
参考答案:
D
[多项选择题]
4、关于透射式电子显微镜,下列哪项叙述是错误的()
A.适于观察细胞的外表形貌
B.以电子束作为光源
C.电子透过标本后在荧光屏上成像
D.分辨力较高
E.样品要采用有机染料染色
参考答案:
A,E
[填空题]5为什么说细胞培养是细胞生物学研究的最基本技术之一?
参考答案:
高等生物是由多细胞构成的整体,在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内的功能活动是十分困难的。
但是如果把活细胞拿到体外培养进行观察和研究,则要方便得多,培养中的细胞不受体内复杂环境的影响,人为改变培养条件(如物理、化学、生物等外界因素的变化)即可进一步观察细胞在单因素或多因素影响下的生理功能变化。
活细胞离体后要在一定的生理条件下才能存活和进行生理活动,特别是高等动植物细胞要求的生存条件极其严格,稍有不适就要死亡。
所以,细胞培养技术就是选用最佳生存条件对活细胞进行培养和研究的最基本技术之一。
[填空题]6ultramicrotomy(超薄切片技术)
参考答案:
电子书穿透力很弱,须将标本制成40~50nm的超薄切片。
方法与步骤:
固定;脱水;包埋;切片;染色。
[填空题]7isodensitycentrifugation;isopycniccentrifugation(等密度离心)
参考答案:
将要分离的样本放在密度梯度液表面或混悬于梯度液中,通过离心不同密度的颗粒或上浮或下沉到与其各自密度相同的介质区带时,颗粒不再移动形成一系列区带,然后停止离心,从管底收集不同密度颗粒的分离技术。
[填空题]8cellengineering(细胞工程)
参考答案:
应用细胞生物学和分子生物学的方法,通过类似于工程学的步骤在细胞整体水平或细胞器水平上,遵循细胞的遗传和生理活动规律,有目的地制造细胞产品的一门生物技术。
[填空题]9GreenFluorescentProtein,GFP(绿色荧光蛋白)
参考答案:
是一种在美国西北海岸所盛产的水母中所发现的一种蛋白质。
[填空题]10为什么说细胞培养是细胞生物学研究的最基本的技术之一?
参考答案:
细胞培养的理论依据是细胞全能性,是生命科学的研究基础,是细胞工程乃至基因工程的应用基础。
植物细胞的培养为植物育种开辟了一条崭新的途径;动物细胞培养为疫苗的生产、药物的研制与肿瘤防治提供全新的手段;特别是干细胞的培养与定向分化的技术的发展,有可能在体外构建组织甚至器官,由此建立组织工程,同时在细胞治疗及其基因治疗相结合的应用中显示出诱人的前景。
[填空题]11细胞融合有那几种方法?
病毒诱导与PEG的作用机制有何不同?
参考答案:
1)细胞融合的方法有四种:
病毒法、聚乙二醇(PEG)法、电激和激光法。
2)病毒诱导:
是先足够数量的紫外灭活的病毒颗粒黏附在细胞膜上起搭桥作用,使细胞黏着成堆,细胞紧密靠近,同时细胞膜发生了一定的变化,在37℃温浴条件下,粘结部位的细胞膜破坏,形成通道,细胞质流通并融合,病毒颗粒也随之进入细胞。
两个细胞合并,细胞发生融合;聚乙二醇(PEG)法:
PEG使能改变各种细胞的末结构,使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组,利用两细胞接口处双分子层质膜的相互亲何以彼此的表面张力作用,使细胞发生融合。
[填空题]12超速离心技术的主要用途有哪些?
参考答案:
1)制备和纯化亚细胞成分和大分子,即制备样品;
2)分析和测定制剂中的大分子的种类和性质如浮力密度和分子量。
[填空题]13何谓免疫荧光技术?
可自发荧光的细胞物质是否可在普通显微镜下看到荧光?
参考答案:
1)免疫荧光技术是将免疫学方法(抗体同特定抗原专一结合)与荧光标记技术相结合用来研究特异蛋白抗原在细胞内分布、对抗原进行定位测定的技术。
它主要包括荧光抗体的制备、标本的处理、免疫染色和观察记录等过程。
2)不能。
首先,荧光是因一定波长(能量)的光(一般为紫外光)照射到物体后瞬间产生的,作为普通显微镜光源的可见光,其能量不足以使物体产生荧光;其次,所产生荧光的波长要比入射光的要长,即使可以激发出荧光,肉眼也看不到。
[填空题]14放射自显影技术的原理根据是什么?
为何常用H3、C14、P32标记物做放射自显影?
参考答案:
1)原理根据:
放射性同位素发射出的各种射线具有使照相乳胶中的溴化银晶体还原(感光)的性能。
利用放射性物质使照相乳胶膜感光,再经显影以显示该物质自身的存在部位.2)用H3、C14、P32标记物做放射自显影原因:
(1)有机大分子均含有碳、氢原子,DNA和RNA等物质中存在磷元素,
(2)且C14和H3均为弱β放射性同位素,半衰期长。
[填空题]15透射电镜与普通光学显微镜的成像原理有何异同?
参考答案:
透射电镜与光学显微镜的成像原理基本一样,不同的是:
1)透射电镜用电子束作光源,用电磁场作透镜,2)光学显微镜用可见光或紫外光作光源,以光学玻璃为透镜。
[填空题]16Hybridoma(杂交瘤)
参考答案:
一种通过融合而形成的杂交细胞,是由正常细胞和具有某种缺陷的肿瘤细胞杂交而获得。
[填空题]17cellcloning(细胞克隆)
参考答案:
把单个细胞从群体内分离出来单独培养,使之重新繁衍成一个新的细胞群体的培养技术。
[填空题]18fluorescenceinsituhybridization;FISH(荧光原位杂交)
参考答案:
用荧光素标记的探针研究一段DNA序列或一个基因在染色体上的位置的方法,是在生物医学领域里应用较多的一项分子细胞遗传学技术。
[填空题]19modelorganisms(模式生物)
参考答案:
生物学家通过对选定的生物物种进行科学研究,用于揭示某种具有普遍规律的生命现象,此时,这种被选定的生物物种就是模式生物。
[填空题]20knockin(基因嵌入)
参考答案:
又称基因置换,它是利用内源基因序列两侧或外面的断裂点,用同源序列的目的基因整个置换内源基因。
[填空题]21knockout(基因敲除)
参考答案:
将细胞基因组中某基因去除或使基因失去活性的方法。
常用同源重组的方法敲除目的基因,观察生物或细胞的表型变化,是研究基因功能的重要手段。
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参考答案:
利用物理或化学方法,将细胞核去除后所得到的细胞部分。
可以用来研究细胞核与细胞质的关系。
[填空题]23karyoplast(核体)
参考答案:
细胞经松胞菌素处理后,排出的带有质膜和少量细胞质的细胞核。
[填空题]24细胞拆合
参考答案:
把细胞核与细胞质分离开来,然后把不同来源的细胞质和细胞核相互结合,形成核质杂交细胞。
[填空题]25micromanipulationtechnique(显微操作技术)
参考答案:
是指在高倍复式显微镜下,利用显微操作器(micromanipulator)进行细胞或早期胚胎操作的一种方法。
显微操作器是用以控制显微注射针在显微镜视野内移动的机械装置。
显微操作技术包括细胞核移植、显微注射、嵌合体技术、胚胎移植以及显微切割等。
[填空题]26monocloneantibody(单克隆抗体技术)
参考答案:
通过克隆单个分泌抗体的B淋巴细胞,获得的只针对某一抗原决定簇的抗体,具有专一性强、能大规模生产的特点。
[填空题]27homokaryon(同核融合细胞)
参考答案:
由基因型相同的细胞融合而成的。
[填空题]28heterokaryon(异核融合细胞)
参考答案:
由基因型不同的细胞融合而成的。
[填空题]29cellfusion(细胞融合)
参考答案:
也称细胞杂交技术(cellhybridization),两个或多个细胞融合成一个双核细胞或多核细胞的现象。
一般通过灭活的病毒或化学物质介导,也可通过电刺激融合。
[填空题]30cell-freesystem(非细胞体系)
参考答案:
来源于细胞,而不具有完整的细胞结构,但包含了进行正常生物学反应所需的物质(如供能系统和酶反应体系等)组成的体系即为非细胞体系。
近年来,人们利用这一体系探讨了许多细胞生命活动中的重要问题,如细胞周期调控、核膜及染色质的组装、核质运输机制等。
[填空题]31infinitecellline(无限细胞系)
参考答案:
又称连续细胞系,在体外可以持续生存,具有无限繁殖能力的细胞系。
[填空题]32finitecellline(有限细胞系)
参考答案:
在体外的生存期有限即不能长期传代的细胞系。
[填空题]33cellline(细胞系)
参考答案:
细胞系(cellline)指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。
也指可长期连续传代的培养细胞。
(由此便引申出了后来的有限细胞系(FiniteCellLine)、无限细胞系(InfiniteCellLine)),因此,细胞系狭义的是指可连续传代的细胞(特定环境下口语和书面语都使用),广义是指可传代的细胞。
[填空题]34cellstrain(细胞株)细胞株:
参考答案:
在体外一般可以顺利地传40—50代,并且仍能保持原来二倍体数量及接触抑制行为的传代细胞。
[填空题]35subculturecell(传代培养细胞)
参考答案:
原代培养形成的单层培养细胞汇合以后,需要进行分离培养(即将细胞从一个培养器皿中以一定的比率移植至另一些培养器皿中的培养),否则细胞会因生存空间不足或由于细胞密度过大引起营养枯竭,将影响细胞的生长,这一分离培养称为传代细胞培养。
进行传代培养的细胞称为传代培养细胞
[填空题]36primaryculturecell(原代培养细胞)
参考答案:
直接从有机体取出组织,通过组织块长出单层细胞,或者用酶消化或机械方法将组织分散成单个细胞,在体外进行培养,在首次传代前的培养称为原代培养。
传10代以内的细胞称为原代培养细胞。
[填空题]37cellculture(细胞培养)
参考答案:
把机体内的组织取出后经过分散(机械方法或酶消化)为单个细胞,在人工培养的条件下,使其生存、生长、繁殖、传代,观察其生长、繁殖、接触抑制、衰老等生命现象的过程。
[填空题]38microspectrophotometry(细胞显微分光光度术)
参考答案:
利用细胞内某些物质对特异光谱的吸收,测定这些物质(如核酸与蛋白质等)在细胞内的含量。
包括:
紫外光显微分光光度测定法可见光显微分光光度测定法。
[填空题]39flowcytometer(流式细胞仪)
参考答案:
主要应用:
用于定量测定细胞中的
DNA、RNA或某一特异蛋白的含量;测定细胞群体中不同时相细胞的数量;从细胞群体中分离某些特异染色的细胞;分离DNA含量不同的中期染色体。
[填空题]40radioautography;autoradiography(放射自显影技术)
参考答案:
是利用放射性同位素的电离辐射对乳胶(含AgBr或AgCl)的感光作用,对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究的一种细胞化学技术。
放射自显影技术用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用机理、作用部位等等。
[填空题]41insituhybridization(原位杂交)
参考答案:
用单链RNA或DNA探针通过杂交法对细胞或组织中的基因或mRNA分子在细胞涂片或组织切片上进行定位的方法。
[填空题]42densitygradientcentrifugation密度梯度离心
参考答案:
用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度,将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离的方法。
密度梯度离心常用的介质为氯化铯、蔗糖和多聚蔗糖。
[填空题]43differentialcentrifugation(差速离心)
参考答案:
利用不同物质沉降速率的差异,在不同离心速度下分离和收集不同颗粒的离心技术。
常用于分离细胞匀浆中的各种细胞器。
[填空题]44radioimmunoprecipitationassay;RIPA;radioimmunoprecipitation(放射免疫沉淀)
参考答案:
以放射性标记的抗原或抗体进行的免疫沉淀法。
能大大提高检测抗原抗体复合体的灵敏度。
[填空题]45immunofluorescenttechnique;immunofluorescencetechnique(免疫荧光技术)
参考答案:
将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。
由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出,从而可对抗原进行细胞定位。
[填空题]46immunoblotting(免疫印迹)
参考答案:
又称蛋白质印迹(Westernblotting),是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。
该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。
[填空题]47immunoelectronmicroscopy(免疫电镜)
参考答案:
将抗体进行特殊标记后用电子显微镜观察免疫反应的结果。
根据标记方法的不同,分为免疫铁蛋白技术、免疫酶标技术和免疫胶体金技术。
[填空题]48laserscanningconfocalmicroscope;LSCM(激光扫描共聚焦显微镜)
参考答案:
利用激光点作为荧光的激发光并通过扫描装置对标本进行连续扫描,并通过空间共轭光阑(针孔)阻挡离焦平面光线而成像的一种显微镜。
是当今世界最先进的细胞生物学分析仪器。
[填空题]49atomicforcemicroscope;AFM(原子力显微镜)
参考答案:
一种可用来研究包括绝缘体在内的固体材料表面结构的分析仪器。
它通过检测待测样品表面和一个微型力敏感元件之间的极微弱的原子间相互作用力来研究物质的表面结构及性质。
将一对微弱力极端敏感的微悬臂一端固定,另一端的微小针尖接近样品,这时它将与其相互作用,作用力将使得微悬臂发生形变或运动状态发生变化。
扫描样品时,利用传感器检测这些变化,就可获得作用力分布信息,从而以纳米级分辨率获得表面结构信息。
根据扫描隧道显微镜的原理设计的高速拍摄三维图像的显微镜。
可观察大分子在体内的活动变化。
[填空题]50scanningtunnelmicroscope;STM(扫描隧道显微镜)
参考答案:
利用量子隧道效应产生隧道电流的原理制作的显微镜。
其分辨率可达原子水平,即观察到原子级的图像。
在生物学中,可观察大分子和生物膜的分子结构。
[填空题]51electronmicroscopethree-dimentionalreconstructiontechnique(电镜三维重构技术)
参考答案:
电子显微术、电子衍射与计算机图象处理相结合而形成的具有重要应用前景的一门新技术。
电镜三维重构技术与X-射线晶体衍射技术及核磁共振分析技术相结合,是当前结构生物学,主要研究生物大分子空间结构及其相互关系的主要实验手段。
[填空题]52critical-pointdryingmethod(临界点干燥)
参考答案:
制作电子显微镜干燥标本的一种方法。
将标本用低临界温度液体(如液态CO2)替换水,再升温超过临界温度。
如此处理的标本,可减小表面张力,保持样品自然状态的形貌。
[填空题]53freezeetching(冰冻蚀刻技术)
参考答案:
是在冰冻断裂技术的基础上发展起来的更复杂的复型技术。
如果将冰冻断裂的样品的温度稍微升高,让样品中的冰在真空中升华,而在表面上浮雕出细胞膜的超微结构。
当大量的冰升华之后,对浮雕表面进行铂-碳复型,并在腐蚀性溶液中除去生物材料,复型经重蒸水多次清洗后,置于载网上作电镜观察。
[填空题]54negativestaining(负染色技术)
参考答案:
用重金属盐对铺展在载网上的样品染色,吸取多余染料,干燥后,使样品凹陷铺展上一层重金属盐,而凸出的地方没有染料沉积,从而负染效果;分辨率可达
1.5nm左右。
与金属投影染色背景,衬托出样品的精细结构
[填空题]55scanningelectronmicroscope;SEM(扫描电子显微镜)
参考答案:
是1965年发明的较现代的细胞生物学研究工具,主要是利用二次电子信号成像来观察样品的表面形态,即用极狭窄的电子束去扫描样品,通过电子束与样品的相互作用产生各种效应,其中主要是样品的二次电子发射。
二次电子能够产生样品表面放大的形貌像,这个像是在样品被扫描时按时序建立起来的,即使用逐点成像的方法获得放大像。
扫描电子显微镜的制造是依据电子与物质的相互作用。
[填空题]56transmissionelectronmicroscope;TEM(透射电子显微镜)
参考答案:
在一个高真空系统中,由电子枪发射电子束,穿过被研究的样品,经电子透镜聚焦放大,在荧光屏上显示出高度放大的物像,还可作摄片记录的一类最常见的电子显微镜。
[填空题]57electronmicroscope(电子显微镜)
参考答案:
一类用电子束为光源,显示标本超微结构的显微镜。
分为透射电子显微镜和扫描电子显微镜等。
[填空题]58fluorescencephotobleachingrecovery;FPR(荧光漂白恢复)
参考答案:
研究膜蛋白和脂质平移扩散以及溶质通过质膜和在细胞内转运的一种技术。
包括三个步骤:
荧光染料与膜成分交联;激光照射猝灭(漂白)膜上部分荧光;检测猝灭部位荧光再现速率(由于膜成分的流动性)。
[填空题]59fluorescenceresonanceenergytransfer(荧光共振能量转移)
参考答案:
当一个荧光分子(又称为供体分子)的荧光光谱与另一个荧光分子(又称为受体分子)的激发光谱相重叠时,供体荧光分子的激发能诱发受体分子发出荧光,同时供体荧光分子自身的荧光强度衰减。
FRET程度与供、受体分子的空间距离紧密相关,一般为7~10nm时即可发生FRET;随着距离延长,FRET呈显著减弱。
[填空题]60video-enhancemicroscopy(录像增差显微镜技术)
参考答案:
计算机辅助的DIC显微镜可在高分辨率下研究活细胞中的颗粒及细胞器的运动。
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