中性粒细胞吞噬实验报告Word格式文档下载.docx
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【方式】体内法:
(1)实验前3小时,小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。
(2)实验时,每只小鼠注射鸡红细胞1ml,轻柔腹部,使其在腹腔中散布均匀,利于吞噬。
(3)30min后,将小鼠拉颈处死,固定,打开腹腔暴露肠管,用载玻片轻擦腹腔,使腹腔液均匀涂于载玻片过,再滴一滴0.03%冷亚甲蓝溶液,盖上盖玻片。
(4)高倍镜下进行观看,计数。
【结果】
【分析】
在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后,再给小鼠注射鸡红细胞后镜检腹腔液,可观看到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,而且可看到部份鸡红细胞聚集到吞噬细胞周围。
二沉淀反映双向琼脂扩散实验【原理】将可溶性抗原与相应抗体别离加入琼脂板上的孔内,二者都可发生扩散,而且随扩散距离的增大浓度降低,在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。
本实验是定性实验,经常使用于分析抗原抗体的纯度关系和彼此关系。
【方式】
(1)制板:
将熔化的1%琼脂加在载玻片上约5ml
(2)打孔:
待琼脂凝固后,将载玻片置于打孔样板上,用打孔器打孔
(3)加样:
在中央孔内加抗体,上下两孔加抗原1,左右加抗原二,每孔加10μl
(4)结果观看:
将琼脂板置于湿盒,37℃一天后观看结果。
在中央孔与添加抗原1的孔之间显现沉淀线,有抗原抗体反映,为阳性反映,说明抗原1与抗体相对应。
中央孔与添加抗原2的孔之间没有沉淀线,说明抗原2与抗体之间不相对应。
【分析】抗体与抗原发生扩散时,随扩散距离的增大浓度降低,在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。
当有沉淀线显现时,说明有抗原抗体反映。
琼脂铺板时要一次铺成,而且铺设均匀。
打孔时要注意垂直打孔,注意不要有裂隙产生。
篇二:
中性粒细胞吞噬功能实验(小吞噬实验)中性粒细胞吞噬功能实验(小吞噬实验)
实验目的
1.熟悉中性粒细胞的吞噬作用原理和方式。
实验原理血液中的中性粒细胞即小吞噬细胞,通过趋化、调理、吞入和杀菌等几个步骤,能吞噬和消化衰老、死亡细胞及病原微生物等异物,是机体非特异性免疫的重要组成部份。
实验材料
实验方式
片。
瑞氏染色法:
取瑞氏染液数滴滴于上述血片上先染1分钟。
然后加等量蒸馏水,轻轻晃动混匀,继续染5分钟,水洗,用吸水纸吸干后镜检。
结果观看油镜检查:
寻觅中性粒细胞,若是染色结果正确,可见细胞核及被吞噬的细菌染
成紫色,而粒细胞的细胞浆那么为淡红色。
中性粒细胞吞噬实验
计数:
1.吞噬百分率:
观看100个中性粒细胞,计算其中吞噬有细菌的中性粒细胞数,计算出吞噬细胞百分率。
2.吞噬指数:
观看100个中性粒细胞,计算其中被吞噬的细菌总篇三:
吞噬细胞吞噬功能检测实验
-----吞噬细胞吞噬功能检测实验实验概要
本文介绍了吞噬细胞吞噬功能检测(assayofthephagocyticfunctionofphagocyte)实验的大体原理、操作步骤及注意事项等。
实验原理
吞噬细胞具有对异物(细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等)吞噬和消化的功能,在机体非特异性免疫中发挥重要作用。
小鼠腹腔内注射硫代乙醇酸钠,可刺激巨噬细胞的聚集。
四往后小鼠腹腔内注入羊红细胞悬液,一小时后解剖搜集腹腔吞嗜细胞,染色、镜检可观看对羊红细胞的吞嗜现象。
通过计算吞嗜百分比或吞噬指数可测定吞噬细胞的吞嗜功能。
要紧试剂
1.pbs缓冲液
2.3%硫代乙醇酸钠
3.1%羊红细胞悬液
4.瑞氏染液
5.甲醇
要紧设备
1.解剖器材
2.注射器
3.尖吸管
4.橡皮吸头
5.小试管
6.载玻片
实验材料icr小鼠实验步骤
1.实验预备:
用无菌注射器吸取3%硫代乙醇酸钠3ml,注射于小鼠腹腔内。
2.四往后,注射1%羊红细胞悬液1ml于小鼠腹腔内。
3.注射1小时后,将小鼠用颈椎脱臼法处死,解剖暴露腹腔,于腹腔靠上部位,用镊子轻轻夹起腹膜,将腹膜剪一小口,用尖吸管注入5ml预温的pbs,同时用手反复揉搓腹腔约1—2分钟,以便尽可能多地冲洗出小鼠腹腔的吞噬细胞。
4.用尖吸管吸取腹腔液,置一干净试管内。
5.用尖吸管将腹腔液吹打均匀(尽可能幸免产动气泡),吸取一滴滴于载玻片上,加盖玻片镜检。
6.观看结果,也能够将腹腔液涂片,平放于湿盘内,37℃,孵育30分钟。
掏出涂片,用预温的pbs冲洗3次,然后用甲醇固定1分钟,以瑞氏染液1份加ph6.4的pbs
2份混匀后,滴于涂片上染色5-10分钟,以蒸馏水冲洗(切勿先将染液倾去)后,待干,镜检。
7.实验结果
观看小鼠腹腔巨噬细胞和中性粒细胞对羊红细胞的吞噬现象,计算吞噬百分比,即每100个吞噬细胞中吞噬有羊红细胞的细胞数。
也可用吞噬指数表示,即将100个吞噬细胞中所吞噬羊红细胞的总数除以100,即为吞噬指数。
吞噬百分比和吞噬指数一样是平行的。
注意事项1.充分揉搓腹腔,尽可能将吞噬细胞冲洗下来。
2.用尖吸管吸取腹腔液时,尽可能躲开腹腔脏器,幸免损伤血管引发出血,阻碍实验结果。
中性粒细胞吞噬功能实验(小吞噬实验)
中性粒细胞吞噬功能实验(小吞噬实验)
实验方式
结果观看油镜检查:
寻觅中性粒细胞,若是染色结果正确,可见细胞核及被吞噬的细菌染成紫色,而粒细胞的细胞浆那么为淡红色。
中性粒细胞吞噬实验
观看100个中性粒细胞,计算其中被吞噬的细菌总
篇三:
中性粒细胞吞噬细菌进程
中性粒细胞吞噬细菌进程
1)识别和粘着:
在血清调理素作用下,吞噬细胞借其表面的Fc和C3b受体,能识别被抗体和补体包被的细菌,后者经抗体或补体与吞噬细胞相应
受体相结合,细菌就粘着在吞噬细胞表面。
2)吞入:
细菌被粘着以后,吞噬细胞形成伪足将其包围,随着伪足的延伸并彼此吻合,形成由吞噬细胞膜包围吞噬物的泡状小体-吞噬体(phagosome)。
吞噬体慢慢离开细胞膜进入细胞内部,与溶酶体融合,形成吞噬溶酶体(phagolysosome)。
3)杀伤和降解:
吞噬溶酶体形成以后,吞噬细胞通过溶酶体酶(溶菌酶、杀菌素、酸性水解酶、乳铁蛋白等)可破坏细菌菌膜或菌体代谢噬细胞代谢产物如氧代谢活性产物和酸性代谢产物也具有杀伤和降解细菌作用。
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