分光光度法测定水果中Vc的含量精.docx
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分光光度法测定水果中Vc的含量精
综合性、设计性实验报告
(本科学生
姓名:
杨道林
王丽萍
杨文英
张崇斌
学号:
2011021157
2011021143
2011021144
2011021160
专业:
化学
班级:
2011级
实验课程名称:
分光光度法测定水果中Vc的含量
指导教师及职称:
郭老师高级实验师
开课学期:
2012至2013学年下学期
上课时间:
2013年6月9日
一、实验设计方案
实验序号及名称:
分光光度法测定水果中Vc的含量
实验时间:
2013.6.18-2013.6.19
小组合作:
是〇否〇
小组号:
4号成员:
杨道林、杨丽萍、杨文英、张崇斌
一、实验目的:
1.了解柠檬、荔枝中Vc的含量
2.学习如何选择吸光度分析的实验条件
3.巩固分光光度法的应用
二、实验设备及仪器组成:
1、实验试剂:
a、Vc溶液(称取0.1gVc)配成500ml的储备液,移取25.00ml(储备液稀释至250mlb、铁标准溶液(100ug/ml)(准确称取0.04317gNH4Fe(SO42.12H2O,置于烧杯中,加入10ml,6mol/L的盐酸和适量蒸馏水,转至500ml容量瓶中,稀释至刻度c、邻二氮菲:
1.5g/L.d、HAc溶液.e、NaOH溶液,0.1mol/L
仪器:
分光光度计、50ml比色管、500ml,250ml容量瓶、吸量管、移液管
三、理论依据及实验原理:
Vc分子中有烯二醇基能还原三价铁为二价铁,二价铁与phen生成橙红色络合物反应如下:
2Fe3++C6H8O6=2Fe2++C6H6O6+2H+
二价铁与phen生成的橙红色络合物,此物在510nm处有最大吸收,其颜色的深浅在一定范围内与Vc含量成正比。
查阅资料知酸度控制在PH4.3至6.2,反应时间控制在15min为宜。
4、实验内容、步骤(用流程图表示及注意事项:
1.吸收曲线的绘制:
两支比色管,①0.00mlvc标液②2.00ml标液分别加入
2.00mlphen和4mlFe3+标液,1mol/LHAc定容暗处放置15min440-560nm间每隔10nm测一次②号的吸光度A
2.显色剂容量的确定:
7支50ml比色管分别加入4mlFe3+标液、2mlVc液和0.3ml、0.5ml、0.8ml、1.0ml、1.5ml、2ml、4ml、6ml1.5g/Lphen液,1mol/LHAc定容,暗处放15min,测吸光度。
3.溶液酸度的影响:
8支50ml比色管各加入4mlFe3+标液,2mlVc液,2mlphen
再分别加入NaOH0ml,0.2ml.0.5ml,1.0ml,1.5ml,2ml,2.5ml,3.0ml.1mol/LHAc定容,暗处放置15min,侧吸光度。
4.显色时间的影响:
1支比色管加入4mlFe3+标液,2mlVc标液,2mlphen
1mol/LHAc定容空白试剂作参比,立即侧吸光度放置5min,10min,15min,20min,30min,40min,60min,100min,120min分别侧吸光度。
5.标准曲线的绘制:
10支比色管各加入4mlFe3+标液,2mlphen分别加入0ml,0.5ml,1ml,2ml,4ml,6ml,8ml,10mlVc标液1mol/LHAc定容暗处放15min,测吸光度。
6.柠檬、梨中Vc含量的测定:
去皮、去籽的柠檬、梨分别榨汁各称50g定容250ml容量瓶抽滤取5ml
50ml比色管中加入4mlFe3+标液,2mlphen1mol/LHAc定容暗处放置15min空白试剂作参比,测吸光度(每种样品各测3次)
1参考文献:
分析化学实验(第五版)上册
2河南教育学院学报
3叶世柏,食品理化方法检验指南。
北京:
北京大学出版社,1991
6、指导教师对实验设计方案的意见:
指导教师签名:
年月日
二、实验报告
1、实验目的、设备与材料、理论依据、实验方法步骤见实验设计方案
2、实验现象、数据或图谱记录:
1、吸收曲线的绘制
测定时间:
30min
比色皿:
1cm
参比液:
水
测定人:
杨文英、王丽萍、杨道林、张崇斌
波长(nm)
440
450
460
470
480
490
500
吸光度(A)
0.069
0.08
0.088
0.12
0.122
0.124
0.132
波长(nm)
510
520
530
540
550
560
吸光度(A)
0.136
0.123
0.09
0.06
0.031
0.023
2、显色剂用量的确定
测定时间:
30min
比色皿:
1cm
参比液:
水
测定波长:
510nm
测定人:
杨文英、王丽萍
杨道林、张崇斌
显色剂用量(ml)
0.3
0.5
0.8
1
1.5
2
4
6
吸光度(A)
0.023
0.052
0.096
0.128
0.133
0.136
0.139
0.138
3、显色时间对吸光度的影响
比色皿:
1cm
参比液:
水
测定波长:
510nm
测定人:
杨文英、王丽萍、杨道林、张崇斌
时间(min
0
5
10
15
20
吸光度(A)
0.128
0.132
0.148
0.147
0.137
时间(min
30
40
60
100
120
吸光度(A)
0.136
0.136
0.136
0.136
0.136
1、Vc标准曲线的绘制
2、
测定时间:
30min
比色皿:
1cm
参比液:
空白试剂
测定波长:
510nm
测定人:
杨文英、王丽萍、杨道林、张崇斌
Vc含量(ml)
0
0.5
1
2
4
6
8
10
Ao
0.003
0.003
0.003
0.003
0.003
0.003
0.003
0.003
A
0.003
0.022
0.034
0.059
0.104
0.151
0.196
0.238
A-Ao
0
0.019
0.031
0.056
0.101
0.148
0.193
0.235
3、数据处理:
称取得柠檬汁质量为50.4024g,所测得三组吸光度值为A=0.0225,B=0.225
C=0.226计算得柠檬汁中vc含量为46.71mg\100g。
称取得荔枝汁质量为50.1598g,准确量取三份3ml荔枝汁实验所测得三组吸光度值为A=0.121,B=0.0.122,C=0.121计算得荔枝汁中vc含量为41.04mg\100g。
4.注意事项
①、分光光度计使用前应先预热30分钟;
②、手拿比色皿的毛玻璃面;
③、试剂加入顺序不能随意改动;
④、反应时间应控制足够长,保证反应完全;
⑤、测定顺序从稀到浓。
5、结论:
分光光度法测得柠檬中Vc含量为47.4mg/100g;荔枝汁中vc含量为41.04mg\100g
6、实验总结
(1、本次实验成败之处及其原因分析:
本次实验系统、完整的完成了设计实验。
并使自己的动手能力、解决问题的能力等得到了训练。
但也有不足之处:
提前准备不充分,导致试样预处理不是很顺利;操作不规范等。
总得来说,是考虑不周、准备不充分等原因造成。
(2、本实验的关键环节及改进措施:
①做好本实验需要把握的关键环节:
铁标准曲线的绘制、试样(柠檬)的溶解及相关处理、分光光度计的正确使用等。
②若重做实验,为实现预期效果,仪器操作和实验步骤应如何改进:
A、规范操作实验仪器(分光光度计),使测定结果更加精确;
B、操作应提前做好充分的准备;
(3)、对实验的自我评价:
本次实验总体是成功的。
在本次实验中,我真正体会到了理论联系实际的重要性。
让我知道凡事不能光说不做,有些事看着简单,做了才知道难。
做事应该脚踏实地,认真的做。
在这次实验中,我也看到了自己的不足之处,在今后的学习中应更加努力
7、指导教师评语及得分:
指导教师签名:
年月日
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- 关 键 词:
- 分光光度法 测定 水果 Vc 含量