维生素a强化乳清蛋白包装膜的研究docWord文档下载推荐.docx
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然而,塑料是由一种或两种有机小分子单体聚合或共聚反应而制成的高分子聚合物,不易被微生物降解,也不能循环利用,造成的大量堆积,会严重污染环境。
根据国际包装工业协会统计,对环境造成污染的垃圾中,塑料垃圾占72%,其中很大一部分来自食品塑料包装废弃物。
此外,塑料包装袋容易产生有害气体和异味,而且其中的一些添加剂、残留溶剂等还会从塑料包装向食品中迁移,会对人体造成一定的毒副作用。
随着食品工业的快速发展和人们环境保护意识的增强,塑料包装所带来的负面效应已日益受到人们的重视。
近年来,世界各国开始加强对塑料包装的控制使用,意大利的卡多拉市从1986年底就立法禁止使用、销售塑料制食品容器及包装袋等,美国自1992年开始禁止使用塑料包装食品,我国也自2008年6月1日以来正式实行了“限塑令”。
许多国家投入大量的人力物力,力求寻找可降解的绿色材料来取代塑料在食品包装中的应用。
因此,开发可降解绿色包装材料和可食用包装膜已经成为了食品包装工业的首要任务之一。
可食用膜不仅具有普通塑料包材对食品的保护作用,满足湿敏、氧敏、光敏等食品和鲜活农产品的保鲜要求,因其可食用特性,还可发挥其可作为食品特定组成部分,构成食品体系第二营养源的功能。
2.乳清蛋白
乳清蛋白是一类利用现代先进工艺从乳清中提取出来的蛋白质,它易消化吸收、具有很高的代谢效率和生物学价值[1]。
近几年来,乳清蛋白在生物高分子食品包装材料中的应用逐渐兴起。
有文献报道[2-4],乳清蛋白是一种良好的成膜基料。
天然的乳清蛋白呈球形,利用分子间氢键、离子键、疏水键、偶极相互作用以及二硫键作用等来维持其稳定的结构。
在生理pH值下,乳清蛋白分子结构紧密,表面由水化膜包围,内部则含有许多隐藏的-OH、-SH和其他疏水基团。
通过加热、酶处理、碱处理等变性手段,能破坏乳清蛋白的三级结构,使卷曲的球状分子链展开,解离出分子的亚基,从而导致蛋白质分子变性。
变性后的蛋白质分子内部疏水基因、巯基暴露,分子间的相互作用加强,从而结合成立体网络结构,在合适的条件下就可以得到具有一定机械强度和阻隔性的膜[5]。
乳清蛋白是最近几年才被用作可食用包装膜的基质材料。
国外有很多报道表明,乳清蛋白膜有很好的营养价值和独特的功能性质,例如良好的阻隔氧气、油脂和芳香类物质的性能。
但是由于蛋白分子中氨基酸残疾的亲水性,导致了乳清蛋白膜的水蒸气阻隔性较差,仍无法与塑料包装膜相比,极大地限制了其发展和应用。
国内对乳清蛋白膜的研究还处于初级阶段,姚晓敏[6]等、张占路[7]对乳清蛋白成膜工艺进行了研究,并将乳清蛋白膜用于果蔬的涂膜保鲜。
但总体来说,我国对乳清蛋白膜的研究与发达国家还有很大的差距。
3.微胶囊化维生素
维生素是维持人体正常生理功能所必需的一类微量低分子质量有机化合物。
在食品加工中维生素不稳定性,选择一种相对缓和的微胶囊包被工艺是极为必要的。
微胶囊是由天然或人工合成高分子制成的微型容器。
包囊是指将固体颗粒、液体微滴或气体作为胶囊的芯材料,在其外形成一层连续而薄薄的包囊的过程。
外部的一薄层物质称为壁材,此过程称为微胶囊技术。
制备微胶囊型维生素常用的壁材有:
淀粉及其衍生物类、糊精类、植物胶(海藻酸钠、琼脂、阿拉伯胶、黄原胶、卡拉胶等)、蛋白(明胶、酪蛋白及其盐类、植物蛋白等)、糖类(乳糖、糖浆、蔗糖、麦芽糖)、纤维素类、脂类(蜡类、卵磷脂、酯类等)等[8-10]。
乳清蛋白在宽广的pH、温度和离子强度范围内具有良好溶解度,甚至在等电点即pH4-5时仍能溶解于水[11],具有很好的微胶囊化特性,这使它成为一种新型的微胶囊壁材。
常用到微胶囊化的乳清蛋白是乳清分离蛋白(WPI)和乳清浓缩蛋白(WPC)。
乳清蛋白作为微胶囊产品壁材,已经应用于益生菌的包埋[12],多不饱和脂肪酸EPA(二十碳五烯酸)和DHA(二十二碳六烯酸)的微胶囊化[13],黄酮苷元微胶囊的制备[14]等等,得到的微胶囊产品具有较好的包埋效果和贮存稳定性。
国内外对于以乳清蛋白作为壁材制备维生素微胶囊的研究鲜有报道。
4.乳清蛋白营养强化膜
乳清蛋白膜作为食品包装膜,目的是实现食品的贮藏保鲜,改良品质,强化营养和表面装饰。
富含营养强化因子的包装膜更能提高食品的营养水平。
维生素A,又称抗干眼醇,属于脂溶性维生素,其功能是维持眼睛在黑暗情况下的视力。
缺乏维生素A时则患夜盲症。
维生素A能促进儿童的正常生长发育,缺乏它时可引起生殖功能衰退,骨骼成长不良及生长发育受阻。
维生素A还能维持上皮组织的健康,增加对传染病的抵抗力。
长期缺乏维生素A,会引起皮肤、粘膜的上皮细胞萎缩、角质化或坏死。
而目前维生素A是中国人的膳食中普遍缺少的成分,对于儿童、青少年以及经常面对电脑的职业女性来说,补充维生素A是刻不容缓的事[15]。
维生素A营养强化食品在许多国家得到广泛的应用。
维生素A为淡黄色油溶液,溶于脂肪或有机溶剂,但不溶于水,难以均匀的添加于食品中,在食品加工过程中易遭破坏。
若将维生素A微胶囊化,则既能保持其固有特性,又能弥补其不足。
以微胶囊化维生素A作为营养强化剂对食品包装膜进行营养强化,维生素A随可食性包装膜进入人体后释放出来,是一种很好的补充维生素A的途径。
国内王华[16],谢岩黎[17]已经研究并优化了维生素A微胶囊的制备,其在模拟胃液肠液中的释放也有人研究[18]。
以乳清蛋白为壁材制备维生素A胶囊,并将其添加到乳清蛋白食品包装膜中对其进行营养强化,这在国内外研究中报道都较少。
5.目的和意义
随着我国食品工业的发展,食品包装的需求也越来越大,带给可食用包装膜巨大的市场发展潜力。
这项研究以乳清蛋白为基础成膜材料,以乳清蛋白作为壁材制备微胶囊化维生素A,对乳清蛋白膜进行营养强化,以得到一种营养强化食品包装膜。
这种膜不仅可降解、对环境没有污染,还能够为国人补充膳食中缺乏的维生素A,提高我国青少年体质;
同时可为具有丰富营养价值和功能性质的乳清蛋白这些工业副产物开辟新的应用领域。
实验一含维生素A乳清蛋白微胶囊的制备
维生素A是人体不可缺少的一种重要的维生素。
它能促进儿童和青少年长高,提高视力,使皮肤湿润、光滑细嫩,预防皮肤癌,减少传染病的发生,防止多种上皮肿瘤发生,促进鼻、喉、肺等表层的正常运作。
但维生素A只可以在动物食品中发现,尤其是肝脏中,植物能在人体内转化成的维生素A的量非常少。
因此,以植物性食物为主的亚洲和非洲人VA缺乏严重。
中国人几乎每人都缺乏维生素A,其中妇女、儿童和青少年表现更为突出。
维生素A直接关系到儿童、青少年的生长发育,女士的外观和健康[15]。
所以在中国人饮食中补充维生素A刻不容缓。
目前VA营养强化食品在许多国家得到广泛的应用,VA为淡黄色油溶液,溶于脂肪或有机溶剂,但不溶于水,在食品加工过程中易遭破坏。
若将VA微胶囊化,则既能保持VA的固有特性,又能弥补其不足。
目前,国内外关于VE和VD的微胶囊化研究比较深入[19],但VA微胶囊的研究很少。
目前国内用于VA包埋的壁材有明胶[16]、变性淀粉[17],用天然乳清蛋白作为壁材的研究未见报道。
微胶囊化的包埋率(通过测定胶囊中VA的总量和未包埋量来计算)是评价微胶囊品质的重要参数。
本实验以乳清蛋白为壁材,用喷雾法制备VA微胶囊,设定了不同的芯壁比、均质压力和喷雾干燥的进风温度,以VA的包埋率和感官性质来评定成品的质量成品。
1实验方法
1.1材料
VA,德国巴斯夫公司;
乳清分离蛋白(BIPRO),美国DAVISCO公司;
盐酸,乙酸,氢氧化钠,石油醚,北京化学试剂公司(化学纯)。
1.2仪器与设备
79-1型磁力加热搅拌器;
HH-2型数显恒温水浴锅;
JJ-1型定时电动搅拌器;
Spectrumlab52型紫外分光光度计;
pHS-25B型数字酸度计;
电子分析天平;
高剪切乳化分散机FA25(上海福鲁克流体机械公司),高压均质机(ATS,AH100D)LPG-5型离心式喷雾干燥机。
1.3方法
1.3.1工艺流程
芯材(VA)+壁材(乳清蛋白)→乳化→高压均质→喷雾干燥→微胶囊产品
1.3.2操作要点
取5g乳清蛋白溶于100g的蒸馏水,合并后加的VA粉末,在避光条件下乳化,乳化,温度45~60℃,将pH值调节8.0,10000rpm高速剪切,之后一定的高压下均质三次;
最后进行喷雾干燥;
确定试验条件[16,19,20],对试验条件下的微胶囊的包埋率进行测定。
1.4微胶囊化效果的评定
1.4.1微胶囊中VA总量的测定[21]
1.4.1.1紫外分光光度法制定VA标准工作曲线
维生素A标准贮存液(1000IU/mL):
置醋酸维生素A标准样品(德国Merck公司,1000000IU/g)于65℃水浴,使其充分液化、摇匀。
稍冷,精确称取0.1000g于100mL棕色容量瓶中,加异丙醇溶解并定容至刻度。
维生素A标准使用液(10IU/mL):
精确移取1.0mL1000IU/mL维生素A标准贮存液于100mL棕色容量瓶中,用异丙醇定容至刻度。
分别移取10IU/mL维生素A标准使用液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于l0mL棕色容量瓶中,异丙醇定容至刻度,摇匀。
浓度分别为1.0、2.0、3.0、4.0、5.0IU/mL。
以异丙醇为空白对照,调零,于328nm处测定标准系列溶液的吸光度。
以浓度为横坐标、吸光度为纵坐标得到维生素A标准工作曲线方程。
1.4.1.2微胶囊样品中VA总量的测定
皂化:
精确称取样品1.5000g于平底烧瓶中,加入10mL、50%KOH溶液20mL无水乙醇、3粒沸石,摇匀,装上回流冷凝管,在85℃~90℃水浴回流60min。
提取:
样品皂化完全后,用l0mL温水冲冼冷凝管,将皂化液转入250mL分液漏斗中,每次用30mL无水乙醚提取3次皂化液,将乙醚层合并,用温水洗涤乙醚层(每次15mL)至洗涤水呈中性,弃去水层。
乙醚提取液经置有少量无水硫酸钠的小漏斗滤入平底烧瓶,用20mL乙醚分2次洗涤分液漏斗,洗涤液同样经置有无水硫酸钠的小漏斗合并至平底烧瓶。
挥发除去溶剂:
将平底烧瓶置于水浴中,蒸馏并回收乙醚,待残留物剩lmL左右时,停止蒸馏。
测定:
于残留物中加入异丙醇使之溶解,并转移至l0mL棕色容量瓶中,定容至刻度,待测。
以1.5mL蒸馏水代替样品,其余操作相同,得到样品空白液为参照调零,于328nm处测定样品液的吸光度。
样品中维生素A的含量按下式计算:
VA含量=C/W*10(IU/g)[C为样品的吸光度A代入回归曲线方程计算得到的测定液浓度(IU/mL),W为样品的重量(g),10为样品测定液的体积]
1.4.2微胶囊中未包埋VA量的测定[22]
取小锥形瓶,称量(W1)。
取样品适量(准确至0.0002g)置于小烧杯中,加入5ml乙醚,轻轻震荡后过滤,收集滤液至小锥形瓶中,反复洗脱3次,放入60℃烘箱中烘至恒重,称量(W2)。
未包埋VA量=W2-W1。
1.4.3评定指标
以微胶囊包埋率为评价指标。
包埋率=1-未包埋微胶囊包埋VA量/微胶囊中VA总量×
100%
1.4.4产品感官评定
对微胶囊气味,色泽,组织状态进行评定。
2结果与讨论
2.1芯壁比对VA微胶囊的影响
选用不同芯壁比,在乳化时间为30min、反应温为40℃条件下试验。
表1芯壁材比对VA包埋率影响
芯壁材比(%)
5
10
20
30
微胶囊包埋率(%)
78.15
75.12
65.12
54.12
从表1可以看出,随着微胶囊芯壁比的提高,微胶囊的包埋率在逐渐降低,但是当芯壁材比较低时,尽管包埋率较高,但是包埋的VA的量很有限,包埋效率较低,故综合考虑,选取芯壁材比为10%较为合适。
2.2不同的均质压力对VA微胶囊的影响
在芯壁材比确定,芯材添加量在10%情况下,考察均质压力对包埋率的影响。
从表2可以看出,经高速分散得到的粗乳状液如不经过均质作用,VA的包埋率明显的低于经过均质后的产品,并且微胶囊的包埋率随均质压力的增大而增大,这主要是由于经过均质作用,乳状液的稳定性及均一性得到很大程度的提高,所以,本次试验采用40Mp的均质压力,均质三次。
表2不同的均质压力对VA微胶囊的影响
均质压力(Mpa)
微胶囊的包埋率(%)
40.12
51.48
62.51
40
80.45
2.3不同的喷雾干燥温度对VA微胶囊的影响
表3不同的喷雾干燥温度对VA微胶囊的影响
试验号
进风温度(℃)
包埋率(%)
产品物性
1
170
70.15
稍粘壁,流动性差
2
180
82.15
不黏壁,流动性好
3
190
75.15
不黏壁,流动性一般
4
200
72.15
粘壁,流动性差
从表3可以看出,喷雾干燥的进风温度对微胶囊产品的包埋率有一定的影响。
进风温度涉及到干燥速度及干燥能力,同时又影响到产品的颗粒结构及热敏性成分的稳定性。
当喷雾干燥进风温度低时,产品干燥速度慢,而且在生产过程中易粘壁;
但进风温度过高时,水分散失过快,囊壁表面凹陷,但进风温度过高,会使水分散失过快,易粘壁,并且在高温下芯材易发生氧化变质,从而降低微胶囊的质量,考察进风温度对微胶囊包埋率的影响发现,当进风温度为180℃,包埋率最大。
3结论
通过上面的研究,我们确定当芯壁材在10%,均质压力在40Mp下均质三次,得到的VA的包埋率最大,通过采用喷雾干燥的方法,喷雾干燥进风温度为180℃,其微胶囊的包埋率可以达到80%,通过产品感官评定,发现微胶囊为白色粉末,具有很好的水溶性,良好的流动性及分散性,稳定性等性能。
实验二添加维生素A微胶囊的乳清蛋白膜的制备
乳清蛋白包装膜国内已有研究[6,7],它除了对食品的保护作用,还可发挥其作为食品特定组成部分,构成食品体系第二营养源的功能。
向乳清蛋白食品包装膜中添加维生素A微胶囊,是一种外源补充VA的好方法。
本研究把适量的维生素A微胶囊添加到乳清蛋白膜中,测定膜性能的变化情况。
膜的机械性能包括刺穿性能、拉伸性能;
乳清蛋白膜作为包装材料,其水蒸气透过性(WVP)是保证其保鲜能力的重要参数,WVP与膜的微观结构有关,微观结构中气孔的大小会影响膜对水气的阻隔性[23];
膜的玻璃转化温度和熔点与膜的结构致密度和均匀性有关。
因而本实验测定了乳清蛋白膜中加入VA微胶囊后刺穿性、拉伸性、水蒸气透过性、熔点的变化,分析了膜的微观结构。
1.实验方法
1.1微胶囊在膜中添加量的确定
配置10%(w/w)乳清蛋白溶液,调pH值8.0,80℃,30min,之后将一定的喷干粒子溶于少量水溶液中,将溶有粒子的水溶液加入到经过变性的10%乳清蛋白溶液,使其终浓度在8%,确定加入到乳清蛋白中粒子的量。
1.2膜性能的评价
对所制备膜的刺穿性能、拉伸性能、水蒸气透过性进行评价,测定膜的玻璃化转变温度,并分析膜的微观结构,所用检测方法按照国家标准执行。
1.2.1刺穿性能的测定方法
膜厚度的测定方法:
选择完好、均匀的膜,随机取10个点,用数显千分尺测量其厚度,取平均值。
使用质构仪进行测定[24]。
将完整均匀的待测膜样品放在两片自制的有机玻璃板之间,选用直径2mm的探针,探针下移速度为1mm/s。
刺穿强度(PS,N/mm)和刺穿变形(PD,mm)可从压力-应变曲线上计算获得,公式为:
PS=Fp/L
式中,FP为最大刺穿力;
L为膜样品的厚度(mm);
PD为膜被刺破时探针下降的距离。
1.2.2拉伸性能的测定方法
参照ASTM(1995)[25]方法,使用TMS-Pro质构仪的拉伸装置,最终有效拉伸长度为40×
6mm。
拉伸速度为1mm/s。
拉伸强度(TS,N/mm2)和断裂拉伸率(E,%)可从压力-应变曲线上计算获得。
TS=Ft/(L×
W)
式中,Ft为最大拉力;
W为膜样品的宽度(即6mm)。
E(%)=ΔL/L0×
100%
式中,L0为样品拉伸前的原始长度(即40mm);
ΔL为样品断裂时被拉长的长度(mm)。
1.2.3水蒸汽透过性(WVP)的测定方法
采用拟杯子法[26],略做改进。
具体方法为:
将膜密封在含5g无水氯化钙(0%RH)的有机玻璃透湿杯表面,膜外露面积为19.6cm2。
将透湿杯装置放入装有饱和NaBr溶液的干燥器中(56%,20℃),每隔1小时测定透湿杯的增重量。
WVP(g*mm/m2d*KPa)=W×
x/(A×
T×
ΔP)
式中,W为透湿杯的增重(g);
x为膜的厚度(mm);
A为膜外露面积(即19.6cm2);
T为测量间隔时间(即24h);
△P为膜两侧的水蒸气压差(△P=13.09KPa(20℃)。
1.3微观结构分析[23]
采用示差热量扫描(DSC)仪进行热力学分析,测定膜的玻璃化转变温度和熔点。
升温速率为20℃/min,温度扫描范围从-150℃至30℃。
待测的膜样品经过真空干燥后喷金,用扫描电镜(SEM)观察膜的微观结构。
2.1微胶囊在膜中添加量的确定
实验发现,当乳清蛋白成膜液中粒子浓度超过3.3%,粒子不能充分地在水中分散,有小块的凝聚,并且搅拌过程中出现大量的气泡,铺成的膜表面有大量气泡,凹凸不均匀,形成的膜性能很差。
所以,我们确定的膜中粒子的添加量为0.5%,1.0%,1.7%,2.5%及3.3%。
2.2不同的微胶囊粒子添加量对膜机械性能的影响
含有不同粒子的乳清蛋白膜的机械性能如图1所示。
复合膜的拉伸强度的变化趋势与刺穿强度的变化趋势相似。
随着粒子浓度的增加,膜的刺穿强度及拉伸强度没有明显变化。
其中纯膜10%时,复合膜刺穿强度为44.3485N/mm,当粒子浓度达到3.3%时,刺穿强度值49.4515N/mm,但两者没有显著性差异。
对于拉伸强度,纯膜的拉伸强度5.8018N/mm2,当粒子浓度达到1.7%,膜的拉伸强度为6.63N/mm2,通过分析两者也不存在显著性差异。
说明粒子的加入,没有破坏纯乳清蛋白膜结构。
(a)(b)
图1粒子浓度对膜刺穿性能(a)和拉伸性能(b)的影响
2.3不同的微胶囊粒子添加量对膜水蒸气透过率的影响
图2.粒子浓度对WVP的影响
乳清蛋白是一种两性蛋白质,其既有疏水基团又有亲水基团,故乳清蛋白膜对水蒸气有一定的透过率。
加入微胶囊粒子后,乳清蛋白膜水蒸气透过率也没有明显的变化。
乳清蛋白膜水蒸气透过率除与成膜基料的特性有关外,还与膜的微观结构有关。
微观结构中气孔的大小也会影响膜对水气的阻隔性[27]。
如图2所示,水蒸气透过率变化不大,可能由于微胶囊的粒径很小,溶于乳清蛋白成膜液后,能与成膜液很好的融合,所以,其对乳清蛋白膜的微观结构影响很小。
当粒子浓度达到3.3%时,其水蒸气透过率值21.93g•mm/m2•d•KPa,与粒子浓度达到0.5%,纯膜水蒸气透过率值26.05g•mm/m2•d•KPa存在着较为明显的差异(p<0.05),这可能是增强分子结构内氢键的结合,降低分子之间的空隙,从而限制了水分子在膜结构中的迁移。
2.4含微胶囊的乳清蛋白的微观结构分析
图3加入粒子后膜的DSC分析
通过差示热扫描仪(DSC)分析了乳清蛋白膜及加入粒子后乳清蛋白膜的玻璃态转变温度及熔点的测定(见图3)。
我们发现加入喷干粒子后,膜的熔点没有发生显著性变化,在-110℃左右,对于膜的熔点,加入粒子后膜的熔点有所降低,由130℃将为125℃,说明高浓度粒子(3.3%)的加入,使得膜结构的致密度升高,均匀性有所降低,所以其熔点稍有降低。
2.5含微胶囊的乳清蛋白的电镜照片
通过对纯乳清蛋白及含粒子乳清蛋白膜的电子显微镜的照片,我们发现纯膜及含粒子的膜表面并没有显著性差异,如图a所示,从图b我们可以看出纯膜有清晰的脉络结构,而对比图c,脉络结构仍清晰可见,而是增加了更为细密的结构,这可能粒子的加入对乳清蛋白膜结构有一定的影响,这也解释了DSC测的膜的熔点降低的原因。
定4._________________________________________________________________________________________________________________________
a:
纯膜的表面b:
纯膜的截面c:
加入粒子后膜的截面
图4含微胶囊乳清蛋白膜的电镜照片
维生素A微胶囊粒子的加入,没有破坏纯乳清蛋白膜结构,乳清蛋白膜的机械性能不受影响,水蒸气透过率、膜的熔点也没有明显的变化。
证明维生素A胶囊可以应用于乳清蛋白膜的营养强化而不影响膜的原有性质。
实验三乳清蛋白膜中维生素A释放特性研究
微胶囊化维生素A的溶出、渗透、扩散对其被人体吸收利用有重要的影响作用。
微胶囊壁材对维生素A同时具有保护和控制释放作用,壁材在胃肠液中缓慢降解使维生素A逐渐释放,从而在体内发挥最佳效果。
国内,谢岩黎[18]研究了以明胶包埋制成的胶囊化维生素A在模拟胃肠液中的释放特性,结果微胶囊化维生素A在模拟肠液中的释放速率较模拟胃液中的快。
目前,乳清蛋白对维生素A的释放控制特性的研究还未见报道。
所以本实验对微胶囊化维生素A在模拟胃肠中的释放动力学特征进行研究。
1.1含VA微胶囊乳清蛋白膜在人工模拟胃液中的释放实验
人工模拟胃液的配制:
取9mL的浓盐酸,加约800mL蒸馏水及胃蛋白酶10g,pH值约为1.2,混匀后待用[28,29]。
准确称取2.0g微胶囊化维生素A的乳清蛋白膜,用人工模拟胃液定容至100mL,恒温37℃水浴,搅拌速度为100r/min。
每隔15min取10mL上清液,加乙醚完全萃取,用异丙醇定溶至100mL,用紫外分光光度计测在310nm、325nm、334nm
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