基因工程ppt.ppt
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- 上传时间:2024-01-13
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基因工程ppt.ppt
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,第一节基因工程,一、基因工程的概念,二、基因工程技术路线,三、应用,一、基因工程的概念,定义:
又称为重组DNA技术,指将某些特定的基因或DNA片断,通过载体或其它手段送入受体细胞,使它们在受体细胞中增殖并表达的一种遗传学操作。
1、DNA片段的取得(目的基因的分离和制备)2、DNA片段和载体的连接重组体DNA3、外源DNA片段引入受体细胞基因克隆和基因文库4、选择基因(目的基因)5、目的基因表达,二、基因工程技术路线,切接转选表达,
(一)DNA片段的获得,1、从基因所在的生物体直接取得限制性内切酶(restrictionenzymes)2、人工合成DNA片段(DNA合成仪)3、PCR反应合成DNA4、mRNA反转录成cDNA5、用机械的方法超声波,
(二)DNA片段和载体的连接重组体DNA,载体:
细菌中的质粒、温和噬菌体重组体DNA:
载体DNA+引入的DNA粘性末端平整末端连接酶,(三)重组体DNA引入受体细胞,受体:
大肠杆菌、真核细胞转基因动物(transgenicanimals):
接受了外源基因,发生了性状改变的动物克隆(clones)、无性繁殖系:
基因文库(genelibrary),(四)选择基因,分子杂交(molecularhybridization):
基因序列遗传学方法:
性能免疫学方法:
蛋白质探针(probes):
根据所需基因的核苷酸顺序制成一段与之互补的核苷酸短链,并用同位素标记合成,蛋白质核苷酸顺序mRNAcDNA原位分子杂交,(五)目的基因的表达,目的基因在插入载体后,在其编码顺序的5端有能被受体细胞识别的启动基因顺序及能和核糖体结合的顺序。
则该目的基因就可以表达,从而使是因工程得以实现。
三、应用,生命科学基础理论研究中的应用农林牧副渔中的应用工业中的应用在医学中的应用,谢谢!
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