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分子生物学zuq题库
31G蛋白偶联受体的信号传递的基本过程包括:
(1) 配体与受体结合;
(2)受体激活G蛋白(3)G蛋白激活或抑抑细胞中的效应分子;(4)效应分子改变细胞内小分子信使的含量与分布;(5)细胞内小分子信使作用于相应的靶分子,使之构象改变,从而改变细胞的代谢过程及基因表达等功能。
32G蛋白的循环或活化过程:
当物理或化学信号刺激受体时,受体活化,与G蛋白结合并使之发生构象改变。
A亚基与GDP的亲和力下降,结合的GDP为GTP所取代。
A亚基结合了GTP后即与BR亚基发生解离,成为活化状态的A亚基。
活化了的A亚基此时可以作用于下游的各种效应分子。
这种活化状态将一直持续到GTP被A亚基自身具有的GTP酶水解为GDP。
33小分子细胞内信使一般具有的三个特点:
(1)不位于能量代谢途径的中心;
(2)在细胞中的浓度或分布可以迅速地改变;(3)作为变构效应剂作用于相应的靶分子,已知的靶分子主要为各种蛋白激酶。
34表皮生长因子受体(EGFR)介导的信号转导途径
EGFR——Ras——MAPK
(1) 受体二聚体的形成及其磷酸化;
(2)募集接头蛋白Grb2:
(3)调控分子SOS的活化(4)低分子量G蛋白Ras的活化;(5)MAPK的级联激活;(6)转录因子的磷酸化及其转录调控作用。
35r——干扰素受体介导的细胞转导途径:
r-干扰素与受体结合以后。
也可以导致受体二聚体化,二聚体化的体可以激活JAL-STAT系统,后者将干扰素刺激信号传入核内。
JAK为一种存在于胞浆中的蛋白酪氨酸激酶,它活化后可使干扰素受体磷酸化。
STAT可以通过其SH2结构域识别磷酸化的受体并与之结合,然后STAT分子亦发生酪氨酸的磷酸化,酪氨酸磷酸化的STAT形成二聚体并进入胞核。
二聚体STAT分子作为有活性的转录因子,影响相关基因的表达,进而改变靶细胞的增殖与分化。
36Klenow片段的用途:
(1)补齐双链DNA的3末端;
(2)通过补齐3端使3末端标记;(3)在cDNA克隆中,第二股链的合成。
(4)DNA序列分析。
37几种常见修饰酶:
(1)DNA聚合酶I:
这个酶除有聚合酶活性外,尚有3-5及5-3核酸外切酶活性。
由于它具有5-3核酸外切酶活性,当用缺口平移法标记DNA探针时,常用DNA聚合酶I。
(2)逆转录酶:
逆转录酶以RNA为模板合成DAN,合成时需要4种脱氧核苷酸及引物,合成方向为5-3延伸,无3-5外切酶活性。
广泛用于mRNA为模板合成cDNA,构建cDNA文库。
(3)T4DNA连接酶:
催化双链DNA一端3-OH与另一双链DNA的5端磷酸根形成3、5-磷酸二酯键,使具有相同粘性末端或平端的DNA末端连接起来。
(4)碱性磷酸酶:
去除DNA或RNA5端的磷酸根,制备载体时,用碱性磷酸酶处理后,可防止载体自身连接,提高重组效率。
(5)末端脱氧核苷酰转移酶:
(TdT):
将脱氧核苷酸加到DNA的3-OH上,主要用于探针标记;或者在载体和待克隆的片段上形成同聚物尾,以便于进行连接。
(6)TaqDNA聚合酶和其它耐热DNA聚合酶。
38作为克隆载体的质粒具备以下特点:
(1)分子量相对较小,能在细菌内稳定存在,有较高的拷贝数。
(2)具有一个以上的遗传标志,便于对宿主细胞进行选择,(3)具有多个限制酶的单一切点,称为多克隆位点(MCS)。
39粘性质粒的特点:
(1)含有质粒的抗药性标记
(2)带有入噬菌体的粘性末端(cos区);(3)具有一个或多个限制酶的酶切位点;(4)其本身分子量小,容纳40kb左右的DNA片段;(5)由于非重组粘性质粒很小,不能在体外包装,因而体外包装的主要是重组体,有利于以后的筛选。
40M31噬菌体的优点:
(1)噬菌体颗粒中所含有的是单链DNA,该单链DNA可作为模板用于DNA序列分析;
(2)利用单链M13克隆可制备成单链DNA探针用于杂交分析,检测DNA或RNA,或者作为基因定点诱变的载体。
41大肠杆菌与哺乳动物表达载体的不同:
大肠杆菌:
含有复制位点、抗性基因、克隆位点,可导入大肠杆菌,与克隆载体一样,表达载体中含有表达系统元件,即启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号。
哺乳动物:
真核表达载体中含有一套真核表达元件:
;启动子/增强子-克隆位点-终止信号和加poly(A)信号。
42重组DNA的目的和基本过程:
目的:
(1)克隆某个特定的基因;
(2)建立基因组文库、cDNA文库,(3)将特定的基因片段进行亚克隆以进行DNA序列测定;(4)构建表达载体以便在特定的宿主细胞中表达某个基因。
过程:
(1)制备目的基因和相关载体
(2)将目的基因和有关载体进行连接(3)将重组的DNA导入受体细胞(4)DNA重组体的筛选和鉴定(5)DNA重组体的扩增、表达和其它研究。
43cDNA的合成过程:
先从细胞中提取高质量的mRNA。
因mRNA有poly(A)尾巴,可用12~18寡聚d(T)片段作为引物,加入4种dNTP,AMV(或MMLV)逆转录酶催化第一股链的合成。
然后用RNaseH去掉mRNA,剩下的单链DNA的3端往往有自发回折(原因不明)形成的发夹结构,正好可以作为合成第二条DNA链的引物;由T4DNA聚合酶催化第二股链的合成,即得到双链cDNA的混合体,采用S1核酸酶处理,可得到平端的双链cDNA。
44目的基因的筛选与鉴定:
首先筛选出转化菌;然后筛选出带有重组体的克隆;最后是对DNA重组体进行鉴定。
方法:
遗传学方法(插入灭活法、a-互补);免疫学方法;核酸杂交法;PCR技术;酶切鉴定。
45真核细胞转染的基本方法:
(1)磷酸钙共沉淀法
(2)电穿孔法(3)DEAE-葡萄糖法(4)脂质体介导基因导入(5)显微注射法
46在大肠杆菌中表达外源基因,主要考虑以下基本要素:
(1)目的基因如果来自真核细胞必须是cDNA,因为大肠杆菌没有剪切内含子的功能。
(2)从真核基因转录的mRNA缺乏结合细菌核糖体的SD序列,因此,cDNA的起始密码子(ATG)上游部分(5端非编码区)是无用的,必须除去。
(3)所用表达载体必须是大肠杆菌表达载体。
含有大肠杆菌RNA聚合酶所能识别的启动子和SD序列。
47寡核苷酸介导的诱变技术步骤:
(1)将目的DNA片段插入M13噬菌体载体;
(2)以重组噬菌体制备单链DNA;(3)设计并合成诱变寡核苷酸引物;(4)诱变寡核苷酸引物与靶单链DNA杂交;(5)利用Klenow片段在杂交的寡核苷酸上延伸;(6)用T4DNA连接酶将新合成的杂合双链DNA连接成双链闭环DNA分子;(7)转化宿主细菌;(8)筛选含有诱变DNA片段的重组噬菌体;(9)以含有诱变DNA的重组噬菌体制备单链DNA;(10)测序证实M13噬菌体DNA带有目标诱变而无其它诱变。
最后从重组M13噬菌体RF型DNA中回收诱变的DNA片段,克隆到其它适当的载体中,对诱变DNA片段进行进一步研究。
48双脱氧链终止法基本原理:
和模板互补结合的引物在DNA聚合酶作用下发生互补链的延伸反应,反应体系中的2,3-双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)与底物脱氧核苷三磷酸竞争结合于延伸互补链末端,造成延伸终止。
由于产生一系列分别终止于A、G、C、T位置的不同大小的DNA片段,应用高分辨率聚丙烯酰胺凝胶电泳可分辨仅相差一个核苷酸的20-500碱基的DNA片段,结合放射自显影技术,便能直接读出模板DNA的待测序列。
双脱氧终止法测定DNA序列的片段通常克隆于M13或质粒pUC载体,利用多克隆位点两侧的通用引物进行测序反应。
较长链的待测DNA片段可采用随机法、嵌套缺失法和引物延伸法进行序列测定。
Maxam-Gilbert法基本原理:
采用化学试剂处理末端放射标记的DNA单链片段,造成碱基特异性切割,由此产生一组具不同长度的DNA链的反应混合物,经凝胶电泳按分子大小分离和放射自显影,直接读出待测DNA的核苷酸顺序。
激光测序技术:
应用荧光基团标记引物或4种ddNTP,采用双脱氧链终止法原理进行测序反应,双脱氧核苷酸终止产物经荧光激发产生信号,通过计算机自动读出被测序列。
49 温度对DNA复性(杂交)的影响:
温度过高不利于核酸复性,而温度过低,少数碱基配对形成的局部双链不易解离,适宜的复性温度是较Tm值低25℃。
在0度时杂交进行非常缓慢,随着温度的升高,杂交率也明显增加,当温度比Tm值低20-25度时,DNA-DNA杂交达到最高杂交率。
但在更高温度情况下,双链分子逐渐趋向解链,当温度达到Tm-5度时杂交率即非常低。
(1)错配率第增加1%,Tm值应相应下降10-15度;(2)RNA/DNA杂交体的稳定性较DNA/DNA的稳定性高,Tm值应相应增加10-15度;(3)RNA/RNA杂交体的Tm值应相应增加20-25度,因此,采用RNA探针时,加入适量的甲酰胺以降低Tm值是必需的;(4)寡核苷酸探针的碱基数很少,可以采用下式计算寡核苷酸探针Tm值:
Tm=4*(G+C)+2*(A+T);寡核苷酸探针杂交反应一般在低于Tm值5度下进行。
50 常用的Southern转膜方法:
(1)毛细管虹吸印迹法:
(2)电转印法(3)真空转移法
51 Southern\Northern印迹法区别:
(1) 靶核酸:
N所检测的靶核酸是RNA,S是DNA(2)RNA电泳:
RNA样品依其分子量大小在变性胶中进行分离,凝胶中需加入变性剂,防止RNA分子形成二级结构,维持其单链线性状态。
(3)转膜:
电泳结束后,不需要再进行变性和中和,直接采用毛细管虹吸法将胶中的RNA转移到膜上,也可采用电转移或真空转移法。
52 核酸原位杂交步骤:
(1)组织或细胞的固定(2)组织细胞杂交前的预处理(3)探针的选择和标记(4)杂交(5)杂交结果检测。
53 RNA酶保护分析法(RPA)基本程序步骤:
(1)制备待测RNA(2)RNA探针的标记(3)杂交(4)除去单链RNA(5)电泳分析
54 探针及标记物的种类:
探针(1)cDNA探针(2)基因组DNA探针(3)寡核苷酸探针(4)RNA探针。
标记物:
(1)核素标记物(2)非核素标记物:
半抗原、配体、荧光素、化学发光探针。
55核酸体外标记法分为化学法和酶法:
(1)化学法:
利用标记物分子上的活性基团与探针分子上的基团(如磷酸基团)发生的化学反应将标记物直接结合到探针分子上。
(2)酶法(酶促标记法):
将标记物预先标记在核酸苷酸(NTP或dNTP)分子上,然后利用酶促反应将标记的核苷酸分子掺入到探针分子中去,或将核苷酸分子上的标记基团交换到探针分子上。
56 酶促标记法:
(1)缺口平移法;(2)随机引物法(3)PCR标记法(4)末端标记法
57缺口平移法原理:
利用适当浓度的DNaseI在DNA双链上随机切割单链,造成单链切口。
切口处产生一个5末端和一个3末端,3末端即可作为引物,在大肠杆菌DNA聚合酶I的5-3DNA聚合酶活性的催化下,以互补的DNA单链为模板,依次将dNTP连接到切口的3端羟基上,合成新的DNA单链;同时DNA聚合酶I的5-3核酸外切酶活性在切口处将旧链人5末端逐步切除,新合成链不断延伸,从而使原DNA分子上的部分核苷酸残基被标记的核苷酸所取代。
58 PCR基本过程:
(1)变性:
通过加热至95度左右,使DNA双螺旋的氢键断裂,形成单链DNA,作为反应的模板。
(2)退火:
将温度降至引物的Tm值左右或以下,引物与DNA模板互补区域结合,形成杂交链。
(3)延伸:
当反应体系温度升至70度左右时,TaqDNA聚合酶催化以引物为起始点的5-3DNA链延伸反应,形成新生DNA链。
59 PCR引物设计的基本要求:
(1)引物长度一般为15-30个核苷酸。
(2)引物中的碱基组成尽可能随机分布,避免出现嘌呤、嘧啶碱基堆积现象。
(3)引物自身不应存在互补序列,尤其应避免折叠成发夹结构。
(4)两个引物之间不应存在互补序列,尤其应避免3端的互补重叠。
(5)引物与非特异扩增区的序列的同源性不要超过70%,引物3末端连续8个碱基在待扩增区以外不能有完全互补序列,否则易导致非特异性扩增(6)引物3端碱基是引发延伸的起点,因此一定要与模板DNA配对(7)引物与模板结合时,引物的5端最多可以游离十几个碱基而不影响PCR反应的进行。
60PCR技术的要类型:
(1)筑巢PCR(2)共享引物PCR(3)多重PCR(4)不对称PCR(5)锚定PCR(6)反向PCR(7)彩色PCR(8)原位PCR(9)定量PCR(10)差异显示PCR(11)重组PCR。
61 PCR反应体系包括:
核酸模板、引物、TaqDNA聚合酶、缓冲液、Mg2+、dNTPs、反应温度与循环次数。
62 转基因动物及基本原理:
转基因动物是指用人工方法将外源基因导入或整合到基因组内,并能稳定传代的一类动物。
基本原理:
将目的基因(或基因组片段)用显微注射等方法注入实验动物的受精卵或着床前的胚胎细胞中,使目的基因整合到基因组中,然后将此受精卵或着床前的胚胎细胞再植入受体动物园的输卵管(或子宫)中,使其发育成携带有外源基因的转基因动物。
导入基因的方法有显微注射法、胚胎干细胞法、逆转录病毒感染法、精子载体法。
转基因动物中外源DNA的检测:
(1)染色体及基因水平的检测:
斑点杂交、Southern杂交和PCR分析、原位杂交等;(2)转录水平的检测:
利用Northern杂交、RNase保护分析及RT-PCR方法检测转基因mRNA的存在及表达水平。
(3)蛋白质水平检测,采用Western印迹分析法。
63 转基因动物的应用:
(1)对基因组织或阶段特异表达的研究(2)通过研究转入外源基因后的新表型,可以发现基因的新功能;(3)导入外源基因后,由于基因的随机插入,可能会导致内源基因的突变,对这些突变表型进行分析,可以发现新的基因(4)可用于只在胚胎期才表达的基因的结构和功能的研究(5)建立研究外源基因表达、调控的动物模型(6)对遗传性疾病的研究(7)建立人类疾病的动物模型,(8)动物新品种的培育(9)基因产品的制备(10)在免疫学中,可用于对免疫机制、免疫相关疾病的研究及建立免疫性疾病动物模型等。
64 转基因植物技术路线:
(1)选择及获得外源目的基因,(2)受体细胞培养,(3)选用适当的转基因方法将目的基因导入受体细胞(4)将转化细胞进行适当培养(5)筛选阳性转化细胞(6)培植阳性转化植株(7)转基因植株的鉴定。
65转基因植物在医学上的应用:
(1)可成为新的疫苗来源,植物病毒也成为人类疫苗的可能来源(2)因为植物病毒对动物不致病,因此可利用植物病毒表达抗原蛋白的片段,以诱导哺乳动物免疫系统发生反应。
(3)还可产生单抗,作为化疗药物的靶向载体。
66基因打靶的必备条件:
(1)胚胎干细胞:
ES细胞的特点:
能在体外培养,并保留发育的全能性。
体外培养要维持细胞的分裂增殖与正常的核型,同时抑制细胞的分化。
(2)打靶载体:
a、neo阳性筛选标志:
b、HSV-tk阴性筛选标志:
67 构建打靶载体的基本过程:
(1)获得目的基因(待敲除基因)的同源片段,将此DNA片段克隆到一般的质粒载体中;(2)从重组质粒中切除目的基因的大部分同源DNA序列,只留部分序列在线性质粒载体的两端;(3)将neo基因克隆到带有目的基因同源顺序的线性质粒中,使之位于残留目的基因同源顺序的中间;(4)在目的基因同源顺序的外侧线性化重组质粒载体,将HSV-tk基因克隆到此线性载体中。
68 DNA芯片技术的应用:
(1)DNA序列测定(2)基因表达分析(3)基因组研究(4)基因诊断(5)药物研究与开发(药物筛选、新药发现、合理用药、中草药鉴定和真假药辨别)
69引起DNA一级结构变异的诱变剂的作用机制:
(1)碱基类似物诱发突变(2)改变DNA的化学结构(3)结合到DNA分子上诱发移码突变(4)紫外线及其其它射线引起的DNA分子变化。
70 突变类型:
点突变(转换和颠换)、缺失(一个碱基或一段核苷酸链从DNA大分子上消失)、插入(一个原来没有的碱基或一段原来没有的核苷酸链插入DNA大分子中间)、倒位(DNA链内重组,使其中一段方向反置)
71 突变所引起的遗传效应包括:
(1)遗传密码的改变:
错义突变、无义突变、同义突变、移码突变;(2)对mRNA剪接的影响(3)蛋白质肽链中的片段缺失。
72病毒癌基因与细胞癌基因的不同之处:
(1) 病毒癌基因与细胞癌基因相比,通常丢失了两端的某些序列。
(2)病毒癌基因没有内含子,而细胞癌基因中通常含有内含子或插入序列。
(3)病毒癌基因与同源的细胞原癌基因在外显子序列中也有微小的差别。
(4)病毒癌基因常会出现碱基取代或碱基缺失等突变,而细胞癌基因则较少发现这一类突变。
73癌基因家族:
src\ras\myc\sis\erb\myb.
74RB抑癌基因机制:
RB蛋白在静止细胞中与E2F结合成复合物,抑制E2F的转录活性;P105-RB通过抑制多种原癌基因如c-myc\c-fos的表达而抑制细胞增殖。
75P53抑制细胞生长机制:
(1)P53蛋白可抑制cyclinA的表达,故P53基因的变异或缺失,可使cyclinA过量表达而促进细胞在DNA复制不完全时即进入M期而致癌,
(2)P53能阻碍DNA聚合酶与DNA复制起始复合物的结合而抑制DNA复制的启动,进而阻止DNA的复制。
(3)P53的酸性氨基酸末端结构区具有转录激活作用,它能激活一些抑制细胞分裂的基因而间接抑制细胞增殖。
(4)正常P53还能抑制c-myc\ras基因或腺病毒E1A对细胞的转化作用。
76癌基因活化致癌的主要机制:
(1)原癌基因点突变
(2)原癌基因获得外源启动子而激活(3)原癌基因因甲基化程度降低而激活(4)原癌基因的拷贝数增加(5)基因易位或重排使原癌基因激活
77肿瘤发生的多基因协同作用:
该假说认为细胞癌变是多步骤、多重打击的复杂过程,在肿瘤发生发展的各阶段,至少需要两个或多个不同的癌相关基因的异常激活或失活,才有可能引起细胞的癌变。
直肠结肠癌的发生、发展过程可分6个阶段:
上皮细胞过度增生、早期腺瘤、中期腺瘤、晚期腺瘤、腺癌和转移癌。
从正常上皮细胞到上皮细胞过度增生可能涉及FAP基因异常(突变或失活),从早期腺瘤到中期腺瘤涉及K-ras的异常(突变),从中期腺瘤到晚期腺瘤涉及DCC基因异常(如丢失),从晚期腺瘤到直肠结肠癌涉及P53基因异常(丢失),癌转移还涉及到其它基因的激活与失活,如nm23基因表达异常、血管生长因子基因表达在肿瘤细胞表达的Ras刺激下增高等。
78基因诊断中常用的分子生物学技术
(1)核酸分子杂交
(2)聚合酶链反就(PCR)(3)单链构象多态性检测(4)限制酶酶谱分析(5)DNA序列测定(6)DNA芯片技术
79DNA指纹特点:
(1)一个DNA指纹探针可同时检测十几个、甚至几十个位点的变异,
(2)具有高度特异性(3)具有稳定的遗传性(4)DNA指纹图谱具有体细胞稳定性。
80基因诊断的方法包括:
(1)基因突变检测;
(2)多态性分析(3)基因表达的检测(4)外源DNA的检测。
81基因诊断策略:
一、遗传性疾病:
(1)直接诊断策略,即直接检测导致遗传病发生的各种基因突变;
(2)间接诊断策略,即寻找具有基因缺陷的染色体并判断被检者是否具有这条染色体。
二、感染性疾病:
针对病原体的基因序列,设计特异性探针进行分子杂交或合成特异的寡核苷酸引物进行PCR扩增,即能对该疾病作出明确的病原体诊断;三肿瘤:
(1)检测肿瘤相关基因的突变及表达异常
(2)检测肿瘤相关病毒基因(3)检测肿瘤标记物基因。
四、法医:
应用DNA多态性分析、DNA指纹技术。
82基因置换的条件:
(1)对导入的基因及其产物有详尽的了解;
(2)外来基因能有效地导入靶细胞(3)导入基因能在靶细胞中长期稳定驻留(4)导入基因能有适度水平的表达(5)基因导入的方法及所用载体对宿主细胞安全无害。
83选择转移基因的靶细胞时,一般考虑以下几个因素
(1)不管是直接体内还是间接体内基因转移,选择目的基因表达的组织细胞,最好是组织特异性细胞,
(2)细胞较易获得,县城生命周期较长。
(3)离体细胞较易受外源遗传物质转化。
(4)离体细胞经转染和一定时间培养后再植回体内仍较易成活。
目前常用的靶细胞:
造血细胞、皮肤成纤维细胞、肝细胞、血管内皮细胞、淋巴细胞、肌肉细胞、肿瘤细胞。
84反义RNA在基因治疗中的意义和需解决的问题及前景:
通过反义RNA结合细胞中特异mRNA而调控其翻译,可望按剂量来调节特定基因的表达或功能。
问题是:
(1)专一性转移问题
(2)反义RNA进入靶细胞前的降解问题。
(3)受体介导反义RNA转移技术。
前景:
(1)安全性高
(2)反义RNA设计和制备方便(3)具有剂量调节效应(4)能直接作用于一些RNA病毒。
分子生物学要点总结
名词解释:
1分子生物学:
是一门从分子水平研究生命现象、生命本质、生命活动及其规律的科学。
2医学分子生物学:
是分子生物学的一个重要分支,又是一门新兴交叉学科。
它是从分子水平上研究人体在正常和疾病状态下的生命活动及其规律,从分子水平开展人类疾病的预防、诊断和治疗研究的一门科学。
3酶工程:
过去主要是通过生物化学方法从各种材料中提取、制备酶制剂。
现在主要应用基因工程技术制取酶制剂。
4蛋白质工程:
过去主要是采用化学方法对纯化的蛋白质进行结构改造,制备出有特定功能的蛋白质。
现在主要应用基因工程技术,从改造目的基因的结构入手,在受体细胞中表达不同结构的蛋白质。
5微生物工程:
又称发酵工程是利用微生物特定性状,使微生物产生有用物质或直接用于工业化生产的技术。
6DNA的甲基化:
DNA的一级结构中,有一些碱基可以通过加上一个甲基而被修饰,称为DNA的甲基化。
7CG岛:
在整个基因组中存在一些成簇、稳定的非甲基化CG,这类CG称为CG岛。
8信使RNA:
从DNA分子转录的RNA分子中,有一类可作为蛋白质生物合成的模板,称为信使RNA。
9顺反子:
由结构基因转录生成的RNA序列亦称为顺反子。
10帽子结构:
5端第1个核苷酸是甲基化鸟嘌呤核苷酸,它以5端三磷酸酯键与第2个核苷酸的5端相连,而不是通常的3、5磷酸二酯键。
11核酶:
在没有任何蛋白质(酶)存在的条件下,某些RNA分子也能催化其自身或其它RNA分子进行化学反应,即某些RNA具有酶样的催化活性,这类具有催化活力的RNA被命名为核酶。
12蛋白质的变性:
蛋白质分子爱到物理化学因素(如加热、紫外线、高压、有机溶剂、酸、碱等)的影响时,可使维持空间结构的次级键断裂,性质改变,生物活性丧失,称为蛋白质的变性。
13:
蛋白质的复性:
导致蛋白质变性的因素除去后,某些蛋白质又可重新回复天然构象,表现出天然蛋白质的生物活性,称为蛋白质的复性。
14基因:
是核酸分子中贮存遗传信息的遗传单位,是指贮存有功能的蛋白质多肽链或RNA序列信息及表达这些信息所必需的全部核苷酸序列。
15基因组:
细胞或生物体中,一套完整单倍体的遗传物质的总和称为基因组。
16操纵子:
是指数个功能上相关联的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区(包括启动子和操纵基因)以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的RNA为多顺反子。
转录单位:
储存RNA和蛋白质肽链序列信息的结构基因与指导转录起始部位的序列(启动子)和转录终止的序列(终止子)共同组成转录单位。
17启动子:
是RNA聚合酶结合的区域,操纵基因实际上不是一个基因,而是一段能被特异阻遏蛋白识别和结合的DNA序列。
18质粒:
是细菌细胞内携带的染色体外的DNA分子,是共价闭合的环状DNA分子,能独立进行复制。
19质粒的不相容性:
具有相同复制起始位点和分配区的两种质粒不能共存于一个宿主菌,这种现象称为质粒的不相容性。
20转位因子:
即可移动的基因成分,是指能够在一个DNA分子内部或两个DNA分子之间移动的DNA片段。
20自私DNA:
核生物基因组中也存在一些可移动的遗传因素,这些DNA顺序
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