华南湍蛙aricketti骨骼系统的研究.docx
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华南湍蛙aricketti骨骼系统的研究
学号:
2011061057
本科毕业论文
华南湍蛙(A.Ricketti)骨骼系统的研究
学院:
生物与农林工程学院
学科:
理学
专业:
生物科学
姓名:
李婷
指导老师:
冉辉
贵州●铜仁
二〇一五年制
目录
摘要I
AbstractII
1前言1
1.1无尾类骨骼系统的研究现状1
1.2华南湍蛙的相关研究1
1.3本课题研究的内容,目的及意义2
1.3.1.研究的基本内容2
1.3.2目的及意义2
2材料与方法2
2.1实验材料及试剂2
2.1.1实验仪器设备2
2.2实验方法3
2.2.1相关文献的搜集和整理3
2.2.2华南湍蛙标本采集3
2.2.3华南湍蛙透明骨骼标本的制作3
2.2.4华南湍蛙骨骼系统的研究3
2.2.5红细胞沉降率(ESR)测定3
2.2.6白细胞分类计数4
2.2.7数据处理4
3结果4
3.1华南湍蛙骨骼系统的整体研究4
3.1.1红细胞5
3.1.2白细胞5
3.2华南湍蛙骨骼系统的局部研究5
3.2.1主轴骨骼7
3.2.1.1头骨7
3.2.1.2脊柱7
3.2.2附肢骨骼7
4讨论8
5结论9
参考文献9
致谢11
华南湍蛙(A.Ricketti)骨骼系统的研究
生物与农林工程学院生物科学专业学生李婷
[摘要]:
从1956年开始逐渐有报导过无尾类骨骼系统的研究,然而目前所有研究均未涉及到湍蛙属骨骼系统的研究,为了加深探讨华南湍蛙的分类和生活习性,本文首先通过透明骨骼标本染色法制作[5]和透明骨骼标本[6]两种方法制作出精美的完整骨架,再对华南湍蛙的骨骼系统与栖息环境相差较大的陆栖型中国林蛙,以及生境有差别的非湍流生境分布的黑斑侧褶蛙(Pelophylaxnigromaculatus)的骨骼长度值为对照,进行定性和定量的比较分析。
接着再对华南湍蛙骨骼系统的形态特征进行深入观察、测量及具体描素。
最后再次综合比较分析结果,总结出华南湍蛙骨骼形态特征对山区溪流湍急生境的相适应性。
结果发现,在生物的演化历程中存在着结构与功能相适应的规律。
三种蛙之间-中国林蛙前肢粗短,后肢肥大,前后肢比----黑斑侧褶蛙前肢粗短,后肢肥大,前后肢比---更适合于在安静水域的稻田、水塘等繁殖、生存和捕食活动。
华南湍蛙前肢粗短,后肢肥大,前后肢比?
,加上指、趾骨末节呈宽‘T’字形,其宽度为基部宽的2倍的结构增大吸盘面积,更有利于它对湍流生境的适应,减少激流水的冲击作用,更有利于它的生存,另外吸盘的不同的形态可能与生活环境和运动有关,造成这3种蛙类吸盘骨骼形状多样的机制仍有待研究。
--。
另一方面,骨骼的形态结构特征是两栖动物分类的重要依据之一《华西雨蛙景东亚种的骨骼研究----陈红.田应洲.李松.熊荣川》,在动物分类上曾用过母系遗传发育分析、分子系统学研究等来解决分类上的问题,但有些问题和争论依然存在,因此从骨骼形态比较也可以提供新的、独立的证据。
从本文对华南湍蛙的骨骼描述中也可知,将华南湍蛙分类到湍蛙亚科而不是蛙亚科是相符合的。
[关键词]:
骨骼系统华南湍蛙中国林蛙黑斑侧褶蛙
StudyonPhysicalSigns
inBloodofCoreopercawhiteheadi
EngineeringCollegeofBiologicalandAgriculture
andforestry
ChengyanZhao
Abstract:
Keywords:
1前言
1.1无尾类骨骼系统的研究现状
在我国,对无尾两栖类骨骼系统的研究最早可以追溯到20世纪50年代(周本湘,1956),60年代初,刘承钊和胡淑琴(1961)对蛙()的骨骼系统也有描述;此后一些学者又相继对一些种类的骨骼系统进行了研究[4]。
像冯孝义报导过雨蛙科秦岭雨蛙()、蟾蜍科中华大蟾蜍()骨骼的特征;吴贯夫等对粗皮蛙、泽蛙的骨骼系统方面也做过较为仔细的观察和描素,通过制作骨骼标本对上述种类的骨骼系统组成及形态结构特征作了描述;陆宇燕对中国林蛙、东北林蛙的骨骼系统做过定性定量的比较分析。
近几年来,有关蛙的骨骼系统的研究报道有逐渐增多的趋势,目前也增加了对林蛙、华西雨蛙、龇蟾、隆肛蛙等种类骨骼系统的研究[4],有的也分析了一些早期未命名的骨骼,如:
鼻腔骨。
至今所有的报导均未涉及到湍蛙属骨骼系统的研究。
1.2华南湍蛙的相关研究
华南湍蛙A.ricketti(Boulenger,1899),属于两栖纲Amphibia,滑体亚纲Lissamphibia,无尾目Salientta(Anura),新蛙亚目Neobatrachia蛙科Ranidae,湍蛙属AmolopsCope,固胸类;体扁;有犁骨齿;鼓膜小;指、趾均有吸盘和横沟,背面有横凹痕,腹面呈肉垫状[12-15],其生存的海拔范围为400至1500米[12-15]。
在我国中南丘陵山区是一种常见流溪型蛙类,分布于浙江、福建、江西、湖北、湖南、广东、广西、四川、云南、贵州等地,一般生活于山溪急流中及瀑布下的水中,白天很少见,夜晚就栖息在急流处的石上或石壁上,稍受惊即跃入水中[1,2][1]中国野生动物保护协会.中国两栖动物图鉴[M].郑州:
河南科学技术出版社,1999:
1~432.[2]田婉淑,江耀明.中国两栖爬行动物鉴定手册[M].北京:
科学出版社,1986:
1~164.。
对华南湍蛙的研究目前仅在见于物种种群数量监测[16]“皮肤抗菌肽克隆”[17]系统发育地位探讨[18]、种群分布调查[19]、两性异性、皮肤新型多功能抗菌肽的纯化、12S和16SrRNA序列的湍蛙属的系统发育、生态多样分析等方面,而这些均未涉及到骨骼系统的研究。
1.3本课题研究的内容,目的及意义
1.3.1.研究的基本内容
1)标本采集与测量
在制作华南湍蛙透明骨骼标本之前对新鲜标本进行性别鉴定、体重、体长、四肢长等初步测量,并及时拍照,再处死做成整体骨骼标本。
2)骨骼标本的制作
通过查阅骨骼标本制作的相关文献制作出透明骨骼标本。
3)骨骼标本的测量与分析
对完整的骨架进行数据收集、统计与分析,即:
对华南湍蛙骨骼系统用数显游标卡尺和电子天平分别对头骨、脊柱、前肢、后肢测量长度(±0.01mm)及称重(±0.01g),并及时拍照。
4)骨骼系统的解剖研究
对华南湍蛙骨骼系统进行定性观察、描述及分析,即:
对华南湍蛙的头骨(颅骨、咽骨)、脊柱(颈椎、胸椎、腰椎、荐椎、尾杆椎)、附肢骨骼(肩带、腰带、前肢骨、后肢骨)以包含在内的各个指骨和跖骨、趾骨等拍照,并利用显微镜观察,详细记录并描素骨骼形态结构特征,重点对头骨的蝶筛骨、副蝶骨、鼻骨、犁骨、翼骨、鳞骨及肩带等骨骼进行定性状观察分析。
1.3.2目的及意义
针对目前无尾类蛙科湍蛙属的骨骼系统的研究至今未有报道过。
本课题想通过对采自梵净山国家级自然保护区的华南湍蛙骨骼标本的制作与测量,观察描述华南湍蛙骨骼系统组成、各部分骨骼形态、结构特征,为研究其系统分类、进化提供参考依据,分析其骨骼系统对运动行为、生活习性和生活环境的适应性。
另外,也为今后研究蛙科湍蛙属提供一定的理论依据和科学资料。
1)通过华南湍蛙骨骼系统的测量后,可分析华南湍蛙骨骼系统对运动行为的影响以及与生活习性和生活环境的相适应性。
2)蛙类的骨骼系统是研究蛙类系统进化、分类等的重要依据,因此研究华南湍蛙骨骼系统组成、各部分骨骼形态、结构特征,可用于分析骨骼系统在分类学中的地位,为其系统分类、进化提供参考依据。
2材料与方法
2.1实验材料、药品及仪器
2.1.1实验材料
实验材料于2014年7月采集自贵州省梵净山国家级自然保护区,共4只(2只雌性蛙和2只雄性蛙),均为成体;体长?
?
--?
?
,平均体长?
?
;体重?
?
--?
?
,对采集的活性标本进行记录:
编号、时间、地点等具体信息;将活体标本带到铜仁学院动物实验室及时处死并于冰箱冷冻保存。
2.1.2实验药品
实验试剂是2014年7月份于贵州省铜仁市贵阳科仪代售商购买,主要试剂有:
NaOH、二甲苯、H202、酒精、KOH、2%茜素红、氨水、100%甘油等。
2.1.3实验仪器
电子天平(CP1502C)、502胶水、透明胶布、生物学显微镜(型号XS-200)、数显游标卡尺、照相机、博沃F-16手机等、冷冻冰箱。
2.2实验方法
2.2.1标本采集
在导师领导组织下,采集梵净山华南湍蛙,记录采集编号、地点、时间等具体信息,并用相机拍下野生华南湍蛙的形态特征及生境。
将所采集的华南湍蛙带回铜仁学院动物实验室进行鉴定,以确保物种鉴定准确无误。
物种鉴定根据田婉淑等(1986)和费梁等(2005),分类体系根据费梁等(2005)。
及时处死(75%酒精)并于冰箱冷冻保存。
2.2.3华南湍蛙透明骨骼标本的制作[17-18]
1)附韧带骨骼标本制作方法
剥皮去内脏→剔除肌肉(开水烫法)→腐蚀(0.8%NaOH/1min)→脱脂(二甲苯/2d)→漂白(0.8%H202/2d)→固定(70%酒精)→整形与装架(502胶水、透明胶布)
2)透明骨骼标本制作方法
剥皮去内脏→固定(95%酒精/2d)→透明(10%KOH/2min)→染色(茜素红酒精溶液染料:
2g茜素红用95%酒精制成200mL饱和溶液,取一份和九份70%酒精混合/12h)→褪色(按25%-50%-75%-100%酒精:
每梯度1d,至肌肉变白色透明)→进一步透明(30mL氨水+30mL甘油+70mL水/2d)→脱水(按25%-50%-75%-100%甘油:
每梯度2d)→保存(纯甘油)
2.2.4华南湍蛙骨骼系统的研究
(1)骨骼标本的测量与分析
在制作完整透明骨骼标本之后,用数显游标卡尺和电子天平分别对对头骨、脊柱、前肢、后肢测量长度及称重。
为后期对局部骨骼的观察、分析做基础。
(2)骨骼系统的解剖研究
对头骨(颅骨、咽骨)、脊柱(颈椎、胸椎、腰椎、荐椎、尾杆椎)、附肢骨骼(肩带、腰带、前肢骨、后肢骨)以包含在内的各个指骨和跖骨、趾骨等拍照,并利用显微镜观察,观察梵净山华南湍蛙骨骼系统的特征,根据栖息环境相差较大的陆栖型中国林蛙,以及生境有差别的非湍流水域的黑背侧褶蛙的骨骼长度值进行定性和定量的比较分析,得出华南湍蛙所特有的骨骼特征与其生活环境、运动方式的相关性。
2.2.5数据处理
用数显游标卡尺测定华南湍蛙的体长(吻端至泄殖腔孔的距离)、头长(吻端至上下颌关节后缘的距离)、头宽(头部最宽处的距离)、眼径(与体轴平行的眼睛直径)、前肢长(肩关节至第三指末端的长度)、后肢长(体后端正中部位至第四趾端的长度)等形态指标(±0.01mm),将测量的数据转换成相对值(相对值=绝对值/体长),消除个体间因体型大小不同而造成的量度绝对值之间的差异,利用SPSS软件对华南湍蛙、黑背侧褶蛙、中国林蛙形态特征的数据(黑背侧褶蛙、中国林蛙的数据来自中国动物志,)进行t检验(单因素分差分析),确定三者之间成体度量的差异程度。
用Excel对测量的数据计算出华南湍蛙主要骨骼长度、重量的平均值±标准差,分析得出雌性、雄性的成年华南湍蛙主要骨骼长度的变化范围及前后肢的比列,并参照生活习性与华南湍蛙有差异的无尾两栖类骨骼长度范围来分析,研究华南湍蛙骨骼系统与它的生存环境的关系。
3结果
3.1华南湍蛙骨骼系统的测量结果
用文字叙述。
(对4只标本骨骼系统的头重、---用电子天平进行测量,结果见表1)
表1华南湍蛙主要骨骼重量度量数据表
性别
♀
♀
♂
♂
头重
0.19,11.88%
0.17,12.32%
0.16,14.04%
0.12,
14.81%
脊柱重
0.28
0.27
0.25
0.11
前肢重
0.41
0.33
0.23
0.12
后肢重
0.72,
0.61
0.5
0.46
总重
1.6
1.38
1.14
0.81
(再对表1数据做说明)
图1:
华南湍蛙主要骨骼重量度量数据分析图
表2华南湍蛙主要骨骼重量度量数据表
性别
♀
♀
♂
♂
头重
0.19
0.17
0.16
0.12
脊柱重
0.28
0.27
0.25
0.11
前肢重
0.41
0.33
0.23
0.12
后肢重
0.72
0.61
0.5
0.46
总重
1.6
1.38
1.14
0.81
图2:
华南湍蛙主要骨骼长量度量数据分析图
由表2或图2可知,华南湍蛙主要骨骼长量
下表放到讨论中论述
♀
♀
♀平均数
与体长之比
♂
♂
♂平均数
与体长之比
体长
57.90
56.28
57.09
/
53.49
49.52
51.51
/
头长
18.86
18.84
18.85
33.02%
15.32
14.62
14.97
29.06%
头宽
19.78
18.85
19.32
33.83%
15.36
14.98
15.17
29.45%
吻长
8.03
7.23
7.63
13.36%
7.19
6.92
7.06
13.70%
鼻间距
7.73
7.03
7.38
12.93%
5.57
5.16
5.37
10.42%
眼间距
5.79
5.32
5.56
9.73%
5.16
4.91
5.04
9.77%
眼睑宽
5.38
5.19
5.29
9.26%
5.26
4.91
5.09
9.87%
眼径
7.09
6.83
6.96
12.19%
5.19
4.82
5.01
9.72%
前臂及手长
23.93
23.02
23.48
41.12%
25.42
24.23
24.83
48.19%
前臂宽
5.42
5.01
5.22
9.13%
5.47
4.89
5.18
10.06%
后肢长
93.20
92.41
92.81
162.56%
84.48
76.17
80.33
155.94%
胫长
30.21
29.36
29.79
52.17%
27.85
26.95
27.40
53.19%
胫宽
9.36
9.05
9.21
16.12%
8.19
7.36
7.78
15.09%
跗足长
43.74
40.37
42.06
73.66%
36.18
35.65
35.92
69.72%
足长
28.42
27.93
28.18
49.35%
22.98
19.61
21.30
41.34%
表4:
华南湍蛙、黑斑侧褶蛙、中国林蛙之间15项基本
♀
♂
与体长之比项目
华南湍蛙
黑斑侧褶蛙
中国林蛙
与体长之比项目
华南湍蛙
黑斑侧褶蛙
中国林蛙
体长
SVL/mm
57.09
74.4
50.10
体长
SVL/mm
51.51
62.3
46.9
头长
HL
33.02%
36.8%
34.1%
头长
HL
29.06%
40.7%
33.5%
头宽
HW
33.83%
36.8%
33.2%
头宽
HW
29.45%
35.9%
33.9%
吻长
SL
13.36%
14.6%
13.8%
吻长
SL
13.70%
16.4%
14.1%
鼻间距
INS
12.93%
4.5%
7.6%
鼻间距
INS
10.42%
4.8%
7.6%
眼间距
IOS
9.73%
6.7%
7.2%
眼间距
IOS
9.77%
7.7%
7.2%
眼径
ED
12.19%
11.0%
11.9%
眼径
ED
9.72%
12.2%
12.4%
前臂及手长
LAHL
41.12%
38.0%
45.8%
前臂及手长
LAHL
48.19%
40.0%
46.9%
后肢长
HLL
162.56%
144.2%
195.0%
后肢长
HLL
155.94%
157.3%
183.0%
胫长
TL
52.17%
47.7%
55.9%
胫长
TL
53.19%
48.1%
55.4%
3.2华南湍蛙骨骼系统的局部研究
华南湍蛙骨骼系统同其他蛙类一样,可分为主轴骨骼和附肢骨骼两大部分,除头部的蝶筛骨、副蝶骨、脊柱的椎体以及胸部的胸骨外,其余各骨块皆为左右对称的结构---《我国3种姬蛙Microhyla骨骼系统的比较研究》。
3.2.1主轴骨骼可分头骨及脊柱两大部分构成(图版)
3.2.1.1头骨
头骨在骨骼系统中的地位十分重要。
由表1可知,头骨的长(吻端至枕骨)与宽(两方骨末端之间距)之比约为1∶1.02。
头骨包括脑颅和咽颅两大部分。
1)脑颅cranium:
主要有:
鼻骨、鼻间软骨、犁骨、蝶筛骨、额顶骨、前耳骨、外枕骨、副蝶骨和颅内软骨,梵净山华南湍蛙的脑颅整体上较宽且也较扁。
鼻骨osnasale(图):
一对,位于两侧的鼻间软骨上,较小,构成鼻腔的背壁、位于额顶骨前方,且与蝶筛骨和额顶骨分离。
周围包被有鼻间软骨略向斜下伸展至下方的腭骨中部。
黑斑侧褶蛙的鼻骨较大两内缘稍微分离,并与额顶骨相连。
鼻间软骨cartilageinernasalis:
位于左右鼻孔间、前颌骨及蝶筛骨之间的一个较为大块的软骨板,另外在鼻间软骨下面的上颌区有一片软骨位于蝶筛骨上前方。
犁骨osvomeris(图):
整体上看是一对薄而扁平的骨片,存在于前颌骨后方和鼻骨的腹面位置。
外侧边缘也有三个略锐角的三角形突起,第1个偏向吻端,第2个指向上颌骨的前部,第3个朝向上颌骨的后侧方向。
且每侧犁骨都由外向内逐渐增厚。
犁骨后侧边缘上横生有一排十分细且短小的犁骨齿vomerineteeth(图),每侧枚数不超过5个。
蝶筛骨ossphenethmoidale(图):
于额顶骨前端和鼻骨后方,共同组成眼眶的内侧壁,副蝶骨嵌入其中将其分为2个部分,中间有隔壁,可能嗅神经由此进入嗅叶。
在左右腭骨间,副蝶骨背方有1软骨化的薄膜,上端被特殊的细硬骨包被,大宏观上像个戟形。
黑斑侧褶蛙的蝶筛骨或多或少显露;
额顶骨osfrontoparietale(图):
一对,介于两边二眼眶间、头骨的背中线两侧、枕骨前方,前接鼻间软骨后接外枕骨和前耳骨。
它是构成颅腔顶壁的主要部分。
华南湍蛙额顶骨偏向略扁的长方形,比较透明。
黑斑侧褶蛙的额顶骨窄长;
前耳骨osprootic(图):
一对,前耳骨位于额顶骨基部两侧,两外枕骨的侧前方,共同组成了眼眶后壁和耳囊前壁。
上表面略微有点拱状隆起,软骨骺较其他蛙类一样。
该位置前下方壁上有小孔,可能是三叉神经的出口。
整个骨块由内向外得一侧略微斜倾跟鳞骨内侧相连接,顶面向前倾斜,构成眼眶后壁的一小部分。
黑斑侧褶蛙的前耳骨较大
外枕骨osexoccipitale(图):
外枕骨位于颅骨末端正中央,前方以软骨相连接额顶骨,左右两骨块相环接,在中央共同构成枕骨大孔,大孔内部是颅腔,在枕骨大孔的外下方有两个枕髁,与寰椎相关节。
副蝶骨osparasphenoidale(图):
呈一块整体呈倒置“T”型扁骨片,前端较尖,在额顶骨腹面蝶筛骨的下方,承托起颅腔的腹壁,前端像剑锋般指向蝶筛骨,顶端较钝,后方向两侧伸展开。
颅内软骨cartilagecranialis(图):
位于额顶骨、副蝶骨间的内侧面上的软骨板,副蝶骨由中部到基部软骨不断加宽,骨片中无孔,而各有一孔位于中央,可能是视神经通过的地方。
2)咽颅visceral:
亦称咽骨,咽颅包括上颌骨(弓)、下颌骨(弓)。
①上颌骨osmaxillare(图):
即上颌弓,包括前颌骨、方轭骨、翼骨、鳞骨、软方骨、腭骨等。
是一对有一定曲度的前端较阔的骨片,构成上颌外缘的主要骨架,上方接前颌骨,后侧渐尖并跟软骨及下方的方轭骨相接,腹面凹陷下略成沟状,伴有细齿。
前颌骨ospremaxillae(图):
一对,位于头骨前端正中央,每块骨的上缘正中央位置都具有一个突起,向上方斜矗,并连附在鼻软骨囊的底壁。
腭骨ospalatinum(图):
一对,位于眼窝的前缘,外端上颌骨中段相接,内端与蝶筛骨前端相紧贴,呈棒状水平横列,。
鳞骨ossquamosum(图):
一对,位于眼眶后背侧,分为3支,鳞骨呈反“入”字形,中间渐窄,到顶端又恢复逐渐宽,并伴有弧形缺刻到眼眶后缘。
黑斑侧褶蛙的鳞骨额枝长(约为耳枝长的2倍)。
翼骨ospetenygodeum(图):
一对,前支与上颌骨、腭骨相连,后支与方轭骨相关节,中支附于前耳骨基部。
整体上呈小“人”字形,每骨具三分叉。
一支尖细的向前伸跟软骨、上颌骨的后端相缔结,一支向外伸与鳞骨主支末端、方轭骨末端和软方骨相连。
方轭骨osquadrato-jugal(图):
一对,位于上腭外缘两侧,前方接上颌骨,后端渐粗呈钝圆,连接下颌,末端和鳞骨主支、翼骨后支交汇于颌角三角区。
舌器apparatushyoideus:
在喉头软骨前方,几乎是软骨组成,仅仅在后角部分是硬骨。
可由1对耳柱骨、1块舌骨体、1对舌骨前角、1对舌骨后角组成。
a耳柱骨columellaauris(图):
一对,由软、硬两骨节组成呈细棒状,外端呈盘状扩大触在鼓膜的中央位置,内端紧贴在听囊外壁的椭圆窗且逐渐变细。
b舌骨体corpusossishyoidei(图):
是个近似长方形的扁薄半透明的骨片,有4个小突起:
2个位于从舌骨体后部外缘、2个舌骨位于前部外缘呈翼状突。
c舌骨前角cornuanterius(图):
从舌骨体的前缘伸出1对细长而弯曲的软骨,转到后方,经过舌骨体外侧后缘部分又转向背的前方,末端并附着在听囊的椭圆窗壁上。
前角上方有2个不显眼的突起,即:
前突,在于翼状突的正向前方。
黑斑侧褶蛙的舌角前突细短。
d舌骨后角cornuposterior(图):
一对,是舌器中仅有的一对骨化的硬骨,左右略呈“‵′”形,接在舌骨体的后缘,末端有极少为软骨,两根骨上半段由1块软骨平置于舌骨体下方,下半段,分别斜向下弯曲,构成1半弧,喉头软骨被环绕其中。
喉头软骨cartiladineslaryngis:
共3枚软骨组成,即:
2枚杓状软骨,1枚环状软骨,没有前杓软骨,几乎位于舌器的后面。
华南湍蛙雄性的该软骨接近雌性(图)。
a环状软骨cartilagecricoidea(图):
是一个细长软骨环位于杓状软骨的后部边缘,左右两边由内向外各伸出一个小支,先向内弯曲再朝外侧弯曲,末端膨大带有有数个大小各异的小孔
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