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添加剂作业文件
文件编号:
AQWSC-3-TJJ-01
共2页第1页
食品中抗氧化剂的测定
第1版
第0次修改
1.原理
丁基羟基茴香醚(BHA)、二丁基羟基甲苯(BHT)和没食子酸丙脂(PG),用与油脂及制剂、油炸、饼干、罐头等食品中防腐败。
2.试剂
(1)甲醇
(2)冰乙酸
(3)石油醚
(4)乙醚
(5)丁基羟基茴香醚
(6)二丁基羟基甲苯
(7)没食子酸丙酯
(8)BHA标准储备液取25mgBHA与25ml棕色容量瓶中,用甲醇溶解,稀释至刻度为1.0mg/ml可用一周。
(9)BHT标准储备液同(8)
(10)PG标准储备液同(8)
(11)混合配制BHA、BHT、PG标准液
3.仪器
(1)高效液相色谱仪具有紫外检测器
(2)紫外可见分光光度计
4.测定方法
(1)样品处理
1.食用油:
取5g油置于10ml离心管中,加5ml甲醇,振2min,冰水冷却,离心5min(2000r/min),取上清液于100ml烧瓶中,再分别用5ml甲醇提取,重复3次,合并上清液,与40℃水浴蒸发甲醇至体积3~4ml时,移入10ml刻度离心管中,用少量的甲醇洗瓶2~3此,离心,用流动相稀释至刻度,离心除去遗留油滴,上机.
2.油炸食品等:
取样10g,放入50ml石油醚:
乙醚(40:
10),振荡30min,放置,取上层离心10min,备用.取一定量的石油醚+乙醚提取液于蒸发皿中通风挥干,以下同食油的测定。
5.液相条件
1. 色谱柱:
C1810um,4.6mm×250mm。
文件编号:
AQWSC-3-TJJ-01
共2页第2页
食品中抗氧化剂的测定
第1版
第0次修改
流动相:
甲醇+水+冰乙酸(85+15+1)。
2流速:
1.0ml/min。
3.波长:
254nm。
6.结果分析
x=m1v/m2
式中
x——样品中抗氧化剂(BHA、BHT、PG)的含量,ug/g;
m1——被测液中抗氧化剂(BHA、BHT、PG)的含量,ug/g;
m2——样品质量,g;
v——样品定容体积,ml。
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作业文件
文件编号:
AQWSC-3-TJJ-02
共2页第1页
植物油种特丁基对苯二酚的测定
第1版
第0次修改
一.原理
样品中特丁基对苯二酚(TBHQ)进甲醇提取后过滤膜上机。
二.试剂
(1)甲醇
(2)甲醇水溶液(92+8)
(3)特丁基对苯二酚储备液取25mg用甲醇定溶至25ml。
(4)特丁基对苯二酚标准使用液0.1mg/ml。
三.仪器
高效液相色谱仪带紫外检测器
四.测定方法
1.样品处理
(1)液体样品
准取称取约1g样品,加10mL含L—抗坏血酸棕榈酸盐的用正己烷饱和的乙腈(该液称作“饱和乙腈”),振摇1min。
在3000rpm下离心5min后,收集乙腈层,加10mL正己烷,充分振摇,在3000rpm下离心5min,收集乙腈层,然后通过0.45um过滤器制成样品溶液。
(2)黄油和人造黄油
准取称取约1g样品,用1g硫酸钠与其混合,以10mL正己烷溶解此样品。
准确加入10mL饱和乙腈,振摇1min。
在3000rpm下离心5min后,收集乙腈层,加10mL正己烷,充分振摇,在3000rpm下离心5min,收集乙腈层,然后通过0.45um过滤器制成样品溶液。
(3)胶姆糖(口香糖)
准取称取约5g样品切成小块,用5g硫酸钠与其混合,加30mL乙酸乙酯,振摇1min,用滤纸(5A)过滤乙酸乙酯层。
于滤渣中加30mL乙酸乙酯,以相同的方式处理。
合并滤液,然后蒸发乙酸乙酯。
于残渣中加饱和乙睛溶液使其溶解,定容至50mL。
取部分溶液,在3000rpm下离心5min,然后准确量取10mL。
加10mL正己烷,充分振摇,在3000rpm下离心5min,收集乙腈层,然后通过0.45um过滤器制成样品溶液。
(4)固体样品
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文件编号:
AQWSC-3-TJJ-02
共2页第2页
植物油种特丁基对苯二酚的测定
第1版
第0次修改
准取称取约5g样品切成小块,用5g硫酸钠与其混合,加30mL乙酸乙酯,振摇1min,用滤纸(5A)过滤乙酸乙酯层。
于滤渣中加30mL乙酸乙酯,以相同的方式处理。
合并滤液,然后蒸发乙酸乙酯。
加正己烷于残渣中使其溶解,定容至50mL。
准确量取10mL该溶液,然后加入10mL饱和乙睛,振摇1min,在3000rpm下离心5min后,除去正己烷层,加10mL正己烷至乙睛层,充分振摇。
收集乙睛层,然后通过0.45um过滤器制成样品溶液。
2.高效液相色谱参考条件
(1)色谱柱:
C18,6mm*150mm。
(2)柱温:
50℃。
(3)流速:
1.0ml/min。
(4)进样量:
5ul。
(5)检测波长:
280nm。
(6)流动相:
甲醇+水(92+8)
五.分析结果
x=m1×v1/m2×v2
式中x——样品种特丁基对苯二酚的含量,g/kg;
m1——进样体积中特丁基对苯二酚的质量,mg;
v2——进样体积,ml;
v1——样品稀释总体积,ml;
m2——样品质量
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文件编号:
AQWSC-3-TJJ-03
共5页第1页
食品中环己基氨基磺酸钠的测定
第1版
GB/T5009.97-2003
第0次修改
1范围
本标准规定了食品中环己基氨基磺酸钠的三种测定方法---气相色谱法、比色法、薄层层析法。
本标准气相色谱法及比色法适用于饮料、凉果等食品中环己基氨基磺酸钠的测定;薄层层析法适用于饮料、果汁、果酱、糕点中环己基氨基磺酸钠的含量测定。
本标准检出限为4ug。
第一法气相色谱法
2原理
在硫酸介质中环己基氨基磺酸钠与亚硝酸反应,生成环己基亚硝酸酯,利用气相色谱法进行定性和定量。
3试剂
3.1正己烷。
3.2氯化钠。
3.3层析硅胶(或海砂)。
3.450g/L亚硝酸钠溶液。
3.5100g/L硫酸溶液。
3.6环己基氨基磺酸钠标准溶液(含环己基氨基磺酸钠,98%):
精确称取1.0000g环己基氨基磺酸钠,加入水溶液并定容至100ml,此溶液每毫升含环己基氨基磺酸钠10mg。
4仪器
4.1气相色谱仪:
附氢火焰离子化检测器。
旋涡混合器。
4.3离心机。
4.410uL微量注射器。
4.5色谱条件
4.5.1色谱柱:
长2m,内径3mm,U形不锈钢柱。
4.5.2固定相:
ChromsorbWAWDMCS80目~100目,涂以10%SE—30。
5试样处理
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文件编号:
AQWSC-3-TJJ-03
共5页第2页
食品中环己基氨基磺酸钠的测定
第1版
GB/T5009.97-2003
第0次修改
5.1液体试样:
摇匀后直接称取.。
含二氧化碳的试样先加热除去,含酒精的试样加40g/L氢氧化钠溶液调制碱性,于沸水浴中加热除去,制成试样。
5.2固定试样:
凉果、蜜馅类试样将其剪碎制成试样。
6.分析步骤
6.1试样制备
6.1.1液体试样:
称取20.0g试样于100L带塞比色管,置冰浴中。
6.1.2固体试样:
称取2.0g已剪碎的试样于研钵中,加少许层析硅胶或海砂)研磨至成粉状,经漏斗倒入100mL容量瓶中,加水洗研钵,并将洗液一并转移至容量瓶中。
加水至刻度,不时摇动,1h后过滤,即得试样,准确吸取20mL于100mL带塞比色管中,置冰浴中。
6.2测定
6.2.1标准曲线的制备:
准确吸取1.00mL环己基氨基磺酸钠标准溶液于100mL带塞比色管中,加水20mL。
置冰浴中,加入5mL50g/L亚硝酸钠溶液,5mL100g/L硫酸溶液,摇匀,在冰浴中放置30min,并经常摇动,然后准确加入10mL正己烷,5g氯化钠,摇匀后置旋涡混合器上振动1min(或振摇80次),待静置分层后吸出正己烷层于10mL带塞离心管中进行离心分离,每毫升正己烷提取液相当于1mg环己基氨基磺酸钠,将标准提取液进样1uL~5uL于气相色谱仪中,根据响应值绘制标准曲线。
6.2.2试样管按6.2.1自“加入5mL50g/L亚硝酸钠溶-------”起依法操作,然后将试料同样进样1uL~5mL,测得响应值,从标准曲线图中查出相应含量。
7结果计算
见式
(1)。
m1×10×100010m1
X=————————=———————
m×V×1000m×V
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文件编号:
AQWSC-3-TJJ-03
共5页第3页
食品中环己基氨基磺酸钠的测定
第1版
GB/T5009.97-2003
第0次修改
式中:
X-----试样中环己基氨基磺酸钠的含量,单位为克每千克(g/kg);
m-----试样质量,单位为克(g);
V-----进样体积,单位为微升(ul);
10-----正己烷加入量,单位为毫升(mL);
m1-----测定用试样中环己基氨基磺酸钠的质量,单位为微克(ug);
计算结果保留两位有效数字。
8精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
第二法比色法原理
9原理
在硫酸介质中环己基氨基磺酸钠与亚硝酸钠反应,生成环己醇亚硝酸酯,与磺胺重氮化后再与盐酸萘乙二胺偶合生成红色燃料,在550nm波长测其吸光度,与标准比较定量。
10试剂
10.1三氯甲烷。
10.2甲醇。
10.3透析剂:
称取0.5g二氯化汞和12.5g氯化钠于烧杯中,以0.01mol/L盐酸溶液定容至100mL。
10.410g/L亚硝酸钠溶液。
10.5100g/L硫酸溶液。
10.6100gv/L尿素溶液(临用时新配或冰箱保存)。
10.7100g/L盐酸溶液。
10.810g/L磺胺溶液:
称取1g磺胺容于10%盐酸溶液中,最后定容至100mL。
10.91g/L盐酸萘乙二胺溶液。
10.10环己基氨基磺酸钠标准溶液:
精确称取0.1000g环己基胺基磺酸钠,加水溶解,最后定容至100mL,此溶液每毫升含环己基氨基磺酸钠0.1mg。
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文件编号:
AQWSC-3-TJJ-03
共5页第4页
食品中环己基氨基磺酸钠的测定
第1版
GB/T5009.97-2003
第0次修改
11仪器
11.1分光光度计。
11.2旋涡混合器。
11.3离心机。
11.4透析纸。
12试样处理
同第5章。
13分析步骤
13.1提取
13.1.1液体试样:
称取10.0g试样于透析纸中,加10ml透析剂,将透析纸口扎紧。
放入盛有10ml水的20ml广口瓶中,加盖,透析20h~24h得透析液。
13.1.2固定试样:
准确吸取10.0ml,经“6.1.2”处理后的试样提取液于透析纸中,以下操作按“13.1.1”项下进行。
13.2测定
13.2.1取2支50ml带塞比色管,分别加入10ml透析液和10ml标准液,于0~30C冰浴中,加入1ml10g/L亚硝酸钠溶液,1ml100g/L硫酸溶液,摇匀后放入冰水中不时摇动,放置1h,取出后加15ml三氯甲烷,置涡旋混合器上振动1min。
静置后吸去上层液。
再加15ml水,振动1min,静止后吸去上层液,加10ml100g/L尿素溶液,2ml100g/L盐酸溶液,再振动5min静置后吸去上层液,加15ml水,振动1min,静止后吸去上层液,分别准确吸出5ml三氯甲烷于2支25ml比色管中。
另取一支25ml比色管加入5ml三氯甲烷作参比管。
于各管中加入15ml甲醇,1ml10g/L磺胺,置冰水中15min,取出恢复常温后加入1ml1g/L盐酸萘乙二胺溶液,加甲醇至刻度,在150C~300C下放置20min~30min用1cm比色杯于波长550nm处测定吸光度,测得吸光度A及AS。
13.2.2另取2支50ml带塞比色管,分别加入10ml透析液和10ml水,除不加10g/L亚硝酸钠外,其他按“13.2.1”项下进行,测得吸光度As0及A0。
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作业文件
文件编号:
AQWSC-3-TJJ-03
共5页第5页
食品中环己基氨基磺酸钠的测定
第1版
GB/T5009.97-2003
第0次修改
14.结果计算
见式
(2)
CA—A0100+1011000
X=——×————×————×———×———…………
(2)
MAS—AS0V10001000
式中:
X-----试样中环己基氨基磺酸钠的含量,单位为克每千克(g/kg);
m-----试样质量,单位为克(g);
V----透析液用量,单位为毫升(mL)
C----标准管浓度,单位为微克每毫升(/ugmL)
AS-----标准液吸光度
AS0----水的吸光度
A----试样透析液吸光度
A0----不加亚硝酸钠的试样透析液吸光度。
计算结果保留两位有效数字
15.精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
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文件编号:
AQWSC-3-TJJ-04
共4页第1页
食品中苏丹红染料的检测方法——高效液相色谱法
第1版
GB/T19681——2005
第0次修改
1.范围
本标准适用于食品中苏丹红染料的检测。
本标准规定了食品中苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ的高效液相色谱测定方法
方法最低检测限:
苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ均为10ug/kg
2.术语和定义
2.1苏丹红
属偶氮系列化工合成染料。
3.方法要点
样品经溶剂提取、固相萃取净化后,用反相高效液相色谱——紫外可见光检测器进行色谱分析,采用外标法定量。
4.试剂与标准品
4.1乙睛色谱纯
4.2丙酮色谱纯、分析纯
4.3甲酸分析纯
4.4乙醚分析纯
4.5正己烷分析纯
4.6无水硫酸钠分析纯
4.7层析柱管:
1cm(内径)×5cm(高)的注射器管
4.8层析用氧化铝(中性100目~200目):
1050C干燥2h,于干燥器中冷至室温,每100g中加入2mL水降活,混匀后密封,放置12h后使用.
4.9氧化铝层析柱:
在层析柱底部塞入一薄层脱脂棉,干法装入处理过的氧化铝至3cm,轻敲实后加一薄层脱脂棉,用10mL正己烷预淋洗,洗净柱中杂质后,备用。
4.105%丙酮的正己烷液:
吸取50mL丙酮用正己烷定容至1L。
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文件编号:
AQWSC-3-TJJ-04
共4页第2页
食品中苏丹红染料的检测方法——高效液相色谱法
第1版
GB/T19681——2005
第0次修改
4.11标准物质:
苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ,纯度≥95%。
4.12标准贮备液:
分别称取苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹
红Ⅳ各10.0mg(按实际含量折算),用乙醚溶解后用正己烷定容250mL。
5.仪器与设备
5.1高效液相色谱仪(配有紫外可见光检测器)
5.2分析天平
5.3旋转蒸发仪
5.4均质机
5.5离心机
5.60.45um有机滤膜
6.样品制备
将液体、浆状样品混合均匀,固体样品需磨细。
7.操作方法
7.1样品处理
7.1.1红辣椒粉等粉状样品
称取1g~5g样品(准确至0.001g)样品于三角瓶中,加入10ml~30ml正己烷,超生5min,过滤,用10ml正己烷洗涤残渣数次至洗出液无色,合并正己烷液,用旋转蒸发仪浓缩至5ml以下,慢慢加入氧化铝层析柱中,为保证层析效果,在柱中保持正己烷液面为2mm左右时上样,在全程的层析过程中不应使柱干涸,用少量正己烷多次淋洗浓缩瓶并注入层析柱,控制氧化铝表层吸附的色素带宽宜小于0.5cm,待样品完全流出后,视样品中含油类杂质的多少用10ml-30ml正己烷洗柱直至流出液无色,弃去全部正己烷淋洗液,用含5%丙酮的正己烷液60ml洗脱、收集、浓缩后,用丙酮转移并定容至5ml,经0.45um有机滤膜过滤后待测.
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文件编号:
AQWSC-3-TJJ-04
共4页第3页
食品中苏丹红染料的检测方法——高效液相色谱法
第1版
GB/T19681——2005
第0次修改
7.12红辣椒油、火锅料、奶油等油状样品
称取0.5g~2g(准确至0.001g)样品于小烧杯中,加入适量正己烷溶解约(1ml~10m),难溶解的样品可于正己烷中加温溶解。
按7.1.1中“慢慢加入到氧化铝层析柱……过滤后待测”操作。
7.1.3辣椒酱、番茄沙司等含水量较大的样品
称取10g—20g样品于离心管中,加入10ml—20ml水将其分散成糊状,含增稠剂的样品多加水,加入30ml正己烷:
丙酮(3:
1),匀浆5min、3000rpm离心5min,吸出正己烷层,于下层再加入20ml×2次正己烷匀浆、离心,合并3次正己烷液加入5g无水硫酸钠脱水,过滤后于旋转蒸发仪上蒸干并保持5min,用5ml正己烷溶解残渣后,按7.1.1中“慢慢加入到氧化铝层析柱……过滤后待测”操作。
7.1.4香肠等肉制品
称取粉碎样品10g—20g(准确至0.01g)于三角瓶中,加入60ml正己烷充分匀浆5min,滤出清液,再以20ml×2次正己烷匀浆、过滤。
合并3次滤液,加入5g无水硫酸钠脱水,过滤后于旋转蒸发仪上蒸至5ml以下,按7.1.1中“慢慢加入到氧化铝层析柱……过滤后待测”操作。
7.2推荐色谱条件
7.2.1仪器条件
色谱柱:
C18
流动相:
乙睛:
乙酸=70:
30
检测波长:
478nm
温度:
300C
7.2.2标准曲线
吸取标准储备液0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ml,用正己烷定容至25ml,此标准系列浓度为0、0.16、0.32、0.64、1.28、2.56ug/ml,
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文件编号:
AQWSC-3-TJJ-04
共4页第4页
食品中苏丹红染料的检测方法——高效液相色谱法
第1版
GB/T19681——2005
第0次修改
绘制标准曲线。
7.3计算
按下式计算苏丹红含量
R=C×V/M
R------样品中苏丹红含量,单位为毫克每千克(mg/kg)
C------由标准曲线得出的样液中苏丹红的浓度,单位为微克每毫升(ug/ml)
V——样液定容体积,单位为毫升(ml)
M——样品质量,单位为毫克(g)
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文件编号:
AQWSC-3-TJJ-05
共2页第1页
面粉中过氧化苯甲酰的测定
第1版
第0次修改
1.原理
样品中过氧化苯甲酰用无水乙醇提取,然后还原成苯甲酸,进HPLC系统分离测定,以保留时间定性,峰面积定量。
2.试剂
(1)无水乙醇分析纯
(2)过氧化苯甲酰标准使用液称取过氧化苯甲酰0.0500g,用无水乙醇溶解后,转移入10.0mL容量瓶中,加无水乙醇至刻度,摇匀。
再吸取此溶液1.0mL于10.0mL容量瓶中,加无水乙醇至刻度,摇匀。
即得0.05mg/mL的过氧化苯甲酰标准使用液。
(3)5%盐酸羟胺溶液
3.仪器
高效液相色谱仪(带紫外检测器)
4.测定方法
(1)样品处理称取10.00g样品,置50mL比色管中,加20mL无水乙醇,剧烈振摇5min,放置过夜,再振摇混匀30s,待分层后过滤,取滤液5ml,加5ml5%盐酸羟胺反复混合,室温下放置10min并不断混合,过0.45um滤膜→待测。
(2)高效液相色谱参考条件
1色谱柱:
C18
2紫外检测器:
波长230nm。
3流动相:
甲醇:
乙酸铵溶液
5.分析结果的表述
5.m1×1000
X=————————
m2×(V1/V2)×1000
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作业文件
文件编号:
AQWSC-3-TJJ-06
共2页第1页
植物油种特丁基对苯二酚的测定
第1版
第0次修改
六.原理
样品种特丁基对苯二酚(TBHQ)进甲醇提取后过滤膜上机。
七.试剂
(5)甲醇
(6)甲醇水溶液(92+8)
(7)特丁基对苯二酚储备液取25mg用甲醇定溶至25ml。
(8)特丁基对苯二酚标准使用液0.1mg/ml。
八.仪器
高效液相色谱仪带紫外检测器
九.测定方法
1.样品处理
(4)液体样品
准取称取约1g样品,加10mL含L—抗坏血酸棕榈酸盐的用正己烷饱和的乙腈(该液称作“饱和乙腈”),振摇1min。
在3000rpm下离心5min后,收集乙腈层,加10mL正己烷,充分振摇,在3000rpm下离心5min,收集乙腈层,然后通过0.45um过滤器制成样品溶液。
(5)黄油和人造黄油
准取称取约1g样品,用1g硫酸钠与其混合,以10mL正己烷溶解此样品。
准确加入10mL饱和乙腈,振摇1min。
在3000rpm下离心5min后,收集乙腈层,加10mL正己烷,充分振摇,在3000rpm下离心5min,收集乙腈层,然后通过0.45um过滤器制成样品溶液。
(6)胶姆糖(口香糖)
准取称取约5g样品切成小块,用5g硫酸钠与其混合,加30mL乙酸乙酯,振摇1min,用滤纸(5A)过滤乙酸乙酯层。
于滤渣中加30mL乙酸乙酯,以相同的方式处理。
合并滤液,然后蒸发乙酸乙酯。
于残渣中加饱和乙睛溶液使其溶解,定容至50mL。
取部分溶液,在3000rpm下离心5min,然后准确量取10mL。
加10mL正己烷,充分振摇,在3000rpm下离心5min,收集乙腈层,然后通过0.45um过滤器制成样品溶液。
(4)固体样品
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文件编号:
AQWSC-3-TJJ-06
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植物油种特丁基对苯二酚的测定
第1版
第0次修改
准取称取约5g样品切成小块,用5g硫酸钠与其混合,加30mL乙酸乙酯,振摇1min,用滤纸(5A)过滤乙酸乙酯层。
于滤渣中加30mL乙酸乙酯,以相同的方式处理。
合并滤液,然后蒸发乙酸乙酯。
加正己烷于残渣中使其溶解,定容至50mL。
准确量取10mL该溶液,然后加入mL饱和乙睛,振摇1min,在3000rpm下离心5min后,除去正己烷层,加10mL正己烷至乙睛层,充分振摇。
收集乙睛层,然后通过0.45um过滤器制成样品溶液。
2.高效液相色谱参考条件
(1)色谱柱:
C18,6mm*150mm。
(2)柱温:
50℃。
(3)流速:
1.0ml/min。
(4)进样量:
5ul。
(5)检测波长:
280nm。
(6)流动相:
甲醇+水(92+8)
一十.分析结果
x=m1*v1/m2*v2
式中x——样品种特丁基对苯二酚的含量,g/kg;
m1——进样体积中特丁基对苯二酚的质量,mg;
v2——进样体积,ml;
v1——样品稀释总体积,ml;
m2——样品质量
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