植物细胞工程.docx
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植物细胞工程
第一章:
组织培养:
植物的任何器官,组织或细胞在人工预知的控制条件下,放在含有营养物质和植物生长调节剂的培养基中,使其分化为完整植株的过程;
愈伤组织:
植物各种器官的外植体在离体的条件下,细胞经过脱分化等一系列过程,转变为分化细胞,继而转变形成一种能迅速增殖的无特定结构和功能的细胞团;一般情况下,植物的各种器官和组织均有诱导产生愈伤组织的潜在可能性;
外植体:
取自植物体用于组织培养的活的植物细胞或组织切段、或用于继代培养的组织培养物;
固体培养:
培养基中加入适量的琼脂后,培养基呈现固体状态的培养;
液体培养:
培养基不加琼脂,培养基呈液体状态的培养;
初代培养:
将从植物体上分离下来的部分放在培养基上进行第一次培养;
继代培养:
将培养物转移到新的培养基上继续培养;
离体培养:
将植物的组织或器官离体后放在培养基上进行培养的过程;
脱分化:
已有特定结构与功能的植物组织,在一定的条件下,细胞改变原来的分化状态,失去原有的结构与功能,转变为具有分生能力的细胞;
再分化:
从愈伤组织再生出小植株的过程;
植物组织培养的特点?
------取材少,培养材料经济,人为控制培养条件,不受自然条件影响;生长周期短,繁殖率高;管理方便,利于自动化控制;
植物组织培养的理论依据?
------植物细胞具有全能性;
植物细胞全能性表达包括哪些基本过程?
------植物细胞在离体情况下全能性表达为完整的植株,除了生长外,还要经过分化、脱分化、再分化等过程;
植物离体器官分化的比较典型的三种方式?
-----1:
分生组织直接分生芽;2:
分生组织形成愈伤组织,经分化实现细胞的全能性;3:
游离细胞或原生质体形成胚状体,由胚状体重建完整植株;
为什么说愈伤组织是最为常见的培养方式?
1.大部分组织培养经历callus再生途径长出植株;2.callus可以用于悬浮培养和原生质体培养。
愈伤组织器官分化与激素的关系。
-------植物生长调节剂在愈伤组织分化过程中起重要的作用,一般来说,生长素与细胞分裂素比例高时,愈伤组织仅形成根;比例低时产生苗;
植物组织培养的优越性。
-------可以在不受植物体其他部分干扰的情况下研究被培养部分的生长和分化规律;
植物组织培养的特点?
-----取材少,培养材料经济;人为控制培养条件,不受自然条件影响;生长周期短,繁殖率高;管理方便,利于自动化;
植物组织培养的应用有哪些?
----无性系快速繁殖;花药培养和花粉单倍体育种;药用植物的工厂化生产;种质的保存和基因库的建立;突变体的筛选培育;
第二章:
1、植物的干细胞:
胚性细胞;植物组织培养的大量实践证实了植物细胞全能性学说,但并不是植物体内的每一个细胞都具有全能性。
一般说来,高度分化或特化的细胞,,已经失去分裂和再分化的能力。
只有那些胚性细胞或分化程度不高的细胞才可具备发育为胚胎或植抹的全能性。
被子植物的合子是胚性细胞,植物的早期胚胎细胞也属于胚性细胞。
植物的分生组织细胞也是一种胚性细胞或胚胎干细胞。
任何一个生活的细胞都有发育成完整生物个体的潜能,但生活细胞要表达全能性,首先要回复到分生状态或胚性细胞状态。
1.2脱分化的重要标志:
静止细胞启动分裂是分化细胞实现成功脱分化的重要标志。
2、在离体培养的条件下,一个分化的细胞转变为分生状态,形成胚性细胞团或愈伤组织的现象称作脱分化。
3分化细胞的脱分化需要两个条件:
组织培养研究的结果已经揭示,创伤和外源激素。
创伤引起的细胞脱分化现象在扦插试验中经常可以见到,创伤之所以能够诱导细胞的脱分化,主要是由于它在组织中的生长素分布发生了变化,伤口处生长素浓度的提高是细胞开始脱分化的直接原因。
在组织培养时,培养基中添加的外源激家对细胞脱分化起着决定性的作用。
4分化细胞表现其全能性,形成完整植株:
首先要经历脱分化过程,然后经历再分化过程。
在大多数情况下,再分化过程是在愈伤组织细胞中发生的,但在有些情况下,再分化可以直接发生于脱分化的细胞中,无需经历愈伤组织阶段。
5植物在成熟组织中也保留着一些干细胞,
它们具有重新发育为胚胎(胚胎干细胞)或组织器官(组织干细胞)潜能。
*合子和早期胚胎细胞;*顶端分生组织中的干细胞;*植物成熟物器官中遗留的胚性细胞
6:
在植物的离体培养中,经常可以看到,许多培养物在个体再生时经过类似合子胚的发育形式,先形成胚的类似结构,在生长发育为完整植株。
它是由器官发生途径形成个体以外形成个体的另外一种途径。
这种个体再生途径在各种培养类型中均可以观察到,无论是体细胞培养,还是生殖细胞培养。
离体培养下没有经过受精过程,但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物(不管培养的细胞是体细胞还是生殖细胞),统称为体细胞胚或胚状体。
体细胞胚起源于非合子细胞,以区别于合子胚。
7激素对器官分化的调控:
激素在细胞生长与个体发育中具有重要的调控作用。
离体培养下的器官分化,在大多数情况下是通过外源提供适宜的植物激素而实现的。
在众多的植物激素中,生长素与细胞分裂素是两类主要的植物激素,在离体器官分化调控中占有主导地位。
离体培养中,外源激素在细胞内的吸收和代谢影响到激素的活性从而影响其培养效果。
8光照对器官分化的影响:
光照时间、强度以及光质对器官分化均有影响。
由于培养条件下光合作用能力较低,因此光照的作用更大程度上是调节细胞的分化状态,而不是合成光合产物。
9:
照对器官分化的机理:
光照对器官发生的调节可能与其对培养物内源激素平衡的调节有关。
10体细胞胚的形成途径:
(一)体细胞胚从外植体上直接发生
(二)经过愈伤组织的体细胞胚发生
(三)细胞悬浮培养的体细胞胚胎发生
第三章
*一个正规的组织培养实验室应具备哪些房间?
最重要的房间是哪些?
------通常包括通用实验室(药品室、制备室、贮存室(区)、灭菌室;接种室、恒温培养室、细胞学实验室等;无菌操作室和恒温培养室;也是环境条件要求最高的工作室;
*无菌操作室的空气灭菌方法是怎样的?
-----定期甲醛熏蒸;酒精喷雾;紫外线照射;
*组织培养室常用到的设备有哪些?
各有何用途?
-------高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、恒温控制器等;
*组织培养室的环境条件有哪些?
-----温度、湿度、光照强度和光质;
*超静工作台的作用、原理、种类有哪些?
------形成无菌工作台面;鼓风机送入的空气经过细菌过滤板除去微生物后,再流过工作台面,并在操作人员和工作台之间形成风障;种类一般有水平送风、垂直送风或单人、双人或单面双面之分;植物细胞工程工作的无菌操作一般都在无菌室内的超净台内进行,保证无菌效果;
*高压灭菌锅的作用(用途)是什么?
---用于培养基、蒸馏水、接种器械等物品的灭菌;
但高压灭菌通常只适合耐热物的灭菌(热与压力不会改变其性质及其使用效果),植物激素,酶制剂,非耐热有机物采用过滤灭菌;
金属器具采用干热灭菌;
*微孔过滤器:
非耐热物质灭菌用:
激素,酶制剂,培养基中热不稳定性有机物;微孔滤膜的孔径小于0.45微米。
*植物细胞工程工作中的几种常见类型的显微镜及用途:
倒置显微镜:
原生质体观察;
普通显微镜:
染色体和叶片气孔等形态学观察;
荧光显微镜:
细胞活力观察;
解剖显微镜:
显微解剖及立体观察(胚);
*如何洗涤玻璃器皿?
新购置的玻璃器皿,重点是洗去含有的游离碱性物质(用1%盐酸浸泡24小时后,用自来水洗和蒸馏水洗);
有顽固污渍的玻璃器皿,首先用洗液(重铬酸钾、硫酸等配制)洗涤,然后用自来水、蒸馏水冲洗;
对于已经被霉菌污染的器皿,则要求先进行高压蒸汽灭菌30分钟后,在按有顽固污渍的器皿的洗涤方法进行洗涤;
洗净后的器皿通常要求用烘箱进行干燥;
*玻璃器皿的洗涤:
主要通过洗涤,减少器皿上微生物繁殖体的数量,提高灭菌效果。
减少污渍中含有的化学成分对培养基成分的影响,改变培养条件;
*冰箱在组织培养过程中的主要用途有哪些?
-----试剂和母液的保存;试验材料的冷处理;种子和种质材料的冰冻保存;
*烘箱的主要用途有哪些?
-----主要用于烘干器皿、测定物质的干中(烘干60~80ºC);干热灭菌(140ºC);
*封口膜的一般要求是什么?
有效隔断空气中微生物及孢子对培养物和培养基的污染的前提下,透气、透光等;
*摇床在组织培养中的作用是什么?
在进行液体培养时,培养材料浸入溶液中,会引起供氧不足;
为改善通气条件,通常使用摇床(振荡培养和悬浮培养);
*培养箱的作用:
在植物组织,细胞培养过程中,可人工控制温度,光照,湿度等条件的小型培养室。
第四章
*基本培养基-----MS、MT、White等;即培养基的基本组成成分,
*完全培养基-----基本培养基+其它成分;其它成分为根据不同使用方向而添加的关键成分;
*固体培养基的特点:
培养材料与培养基接触不充分、有毒物质、容易积累、污染局部、通气好
*液体培养基的特点:
培养材料与培养基接触充分、有毒物质不容易积累、污染全部、通气不好;
*培养基由哪几大类物质组成?
-----无机营养物(大量元素、微量元素)、有机物、激素、琼脂(固体培养基)、水、碳源;
*微量元素(Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Co):
植物细胞代谢必需的元素,用量少(过多容易导致中毒);
*糖类在培养基中的作用?
------主要作为碳源和能源(培养细胞以异养为主);还具有维持培养基一定的渗透压;
*培养基中添加维生素主要是哪些?
主要作用?
-----主要为B族维生素,有B1、B6、B5、B3;促进细胞对培养基的反应;
*活性炭的作用特点及注意问题:
(1)利用其吸附能力,减少一些有害物质对组织培养的影响。
防止褐化发生;
(2)(使培养基变黑)有利于某些植物的生根。
(3)促进形态发生和器官形成。
但高浓度的活性碳的(无选择性)吸附作用会吸收植物生长调节物质;一般使用浓度为0.02%~1.0%,常用为0.1%~0.5%;
*培养基中添加的天然有机物的特点是怎样的?
可以提供一些微量营养成分、生理活性物质和生长激素等;
但成分复杂而且不确定,难保证实验的重复性;
*培养基中的关键物质是什么?
生长调节物质;如生长素类、细胞分裂素类、赤霉素、多效唑等;
是培养基中不可缺少的关键物质,用量虽然少,但对愈伤组织的诱导和器官分化起重要且明显的调节作用;
*常见的生长激素有哪些?
在组织培养中的主要作用?
IBA(吲哚丁酸)、IAA(吲哚乙酸)NAA(萘乙酸)、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸);
作用:
诱导细胞的分裂、愈伤组织的形成、胚状体的产生和根的分化;重要是配合一定比例的细胞分裂素诱导腋芽及不定根的产生;
*常见的细胞分裂素有哪些?
主要作用?
6-BA(6-苄基氨基腺嘌呤)、KT(激动素)、ZT(玉米素)、2-iP(2-异戊烯基腺嘌呤)、TDZ(噻重氮苯基脲)、CPPU(吡效隆);
作用:
促进细胞分裂、器官(尤其是芽)分化、延缓器官衰老、增强蛋白质合成;
*琼脂的特点是什么?
PH值的变化对琼脂的影响是怎样的?
-----使培养基在常温条件下凝固,同时不参与代谢;
pH增加,过于凝固;
pH下降(另外,加热时间延长),琼脂变稀;
*活性炭的特点以及在组织培养中的主要作用?
具有吸附作用和不透光的效果;
用于消除褐化、有利于某些植物生根等;
但它的作用具有双重性:
使用浓度过高,导致培养基中的活性物质被吸附;
*为什么培养基配制时一般先配制母液?
-----使用方便,减少误差;
*配制培养基母液时,如果将几种元素配制在同一母液中,要注意的问题是什么?
-----各种化合物的组合和加入顺序,避免发生沉淀;
*培养基母液的存放要求是怎样的?
为什么?
用后及时放置在2~4ºC冰箱内;
含有营养素,微生物容易滋长;
另外,母液的浓度不能太高,以免在低温保存时出现沉淀;
*培养基的灭菌要注意那些事项:
根据成分的热稳定性,选择灭菌方式;
湿热灭菌要严格按灭菌操作进行:
温度与时间不够,导致灭菌的效果;
温度与时间过度,导致成分破坏和固体培养基液化;
*为什么培养基配制完毕后,要及时灭菌?
如果不能及时灭菌,怎样存放?
------配制好的培养基,因为带菌,而且含有微生物生长的各种营养元素,不及时灭菌,微生物繁殖,导致成分的消耗和改变;
------如果不能及时灭菌,则放置在冰箱或冰柜内,在24小时完成灭菌;
*灭菌后的培养基的处理:
高压灭菌后的培养基冷却凝固后,宜将培养基放置在培养室中预培养2~3天,如果没有杂菌污染,才可以放心使用;
暂时不用的培养基应放置在10ºC下保存,含有生长调节物质的培养基在4~5ºC温度下保存更好;
含有吲哚乙酸或赤霉素的培养基应该在配制灭菌后1周内使用;
其他培养基应该在灭菌后2周内使用;最多不超过1个月;
第五章:
*哪些方面决定外植体的选择?
----植物体的部位、取材季节、器官的生理状态和发育年龄、大小等;
----选择优良的种质;选择健壮的植株;
----发育阶段的选择(一二年生植物,差别不大。
----多年生的果树和观赏植物,从成年树和幼年树上选取的外植体,结果不同。
----良种繁育,从成年树上取材,结果早,性状稳定)
*植物体的不同部位的外植体的特点?
1茎尖部位是较好的外植体。
2叶片是常用的外植体。
3对较难再生的植物,用子叶或下胚轴外植体。
*植物组织培养中污染的病原有哪些?
各在接种后几天就出现?
菌落特点如何?
------细菌,2天出现,粘液状物;
------真菌,10天出现,不同颜色的绒状物;
所以,培养基配制后,先不要立即使用,而是进行预备培养。
*外植体灭菌技术要求:
对外植体伤害小,灭菌效果好,基本无残留毒害(清除残留,一般用无菌水反复冲洗);
*酒精常常作为消毒的第一步的原因:
因为酒精具有浸润和消毒的双重作用,但是,用酒精消毒,时间要严格把握,不能太长。
*举例采取哪些方式预防培养时的污染?
-----暗培养;
-----晴天的下午采集;
-----在培养基中加入抗生素;
*几种外植物体的比较与选择:
------茎尖是最好的外植物体(形态已经基本建成,生长速度快,遗传性稳定,也是获得无病毒苗的重要途径,花药、花粉培养也是);
------叶是最常见的外植物体(主要是来源有保证);
------对于难培养的植物,则通过子叶或下胚轴建立组织培养再生体系;
*用消毒剂对外植体灭菌灭菌后为什么要反复用无菌水冲洗?
在保证不被重新污染的前提下,尽可能减少消毒剂残留对材料的伤害,尤其是一些重金属盐类消毒剂,难与清洗;
第六章:
*接种室的空气怎样消毒?
----定期甲醛熏蒸;接种前用70%酒精喷雾和用紫外线照射20分钟;
*外植物体在切割时的注意要点是什么?
-----除防止污染外,刀锋利,切动作快,避免挤压;
*如何判断外植物体的污染类型:
1、细菌污染:
菌斑呈粘液状物,常在接种1-2天后出现。
2、真菌污染:
污染部分长有不同颜色的霉菌,常在接种10天左右后出现。
*为了防止污染,接种的基本原则:
小容器,多数量,尽量分散,互相隔离。
*固体培养的特点:
-------优点是简单,条件要求低;
-------缺点是:
外植物体与培养基接触不充分,导致各部分营养浓度的差异;
气体交换不畅通、排泄物质积累造成毒害;
组织受光不均匀,细胞群生长速度不一致;
*培养条件包括哪几个方面?
温度(25±2ºC)、
光照(光质、光照时间)、
培养基pH(5.6~6.0),
湿度(70~80%)、
气体(主要是氧);
*植物组织培养中的三大难题是什么?
-------污染,
-------褐化,
-------玻璃化;
*褐化:
在培养过程中,外植物体颜色变褐色(内部产生了致死性的褐化物),不仅使培养基变褐,而且造成培养失败;
*褐变的原因:
------植物(尤其是木本植物)体内含较多的酚类化合物,当外植物体受切割后,切口附近的酚类化合物和多酚氧化酶的分隔效应打破,酚类物质被氧化为醌类物质和水;
------醌类物质又会在酪氨酸酶的作用下,使蛋白质聚合,生长停顿、最终导致死亡;
*影响褐变的因素:
-------的基因植物型(种类);
-------生理状态;
-------培养条件;
-------培养基等;
*培养基中加入硫代硫酸钠、苏糖二硫醇、抗坏血酸、间苯二酚等减轻褐变的机理?
--------它们均为还原剂,能降低外植物体周围的氧化-还原电势,从而抑制酚类氧化;
*活性炭、聚乙烯吡咯烷酮等减轻褐变的机理?
--------均是吸附剂,能吸附外植物体周围的有毒物质;另外,活性炭还可以降低外植物体的光照强度,减轻褐变;
*玻璃化:
植物组织培养中出现的半透明状的、畸形的培养物;
*控制和克服玻璃苗的措施?
------适当提高培养基中蔗糖含量或加入渗透剂;
------适当降低培养基中的细胞分裂素和赤霉素的浓度;
------增加自然光照;改善培养器皿的气体交换条件;
------在培养基中添加某些物质(如间苯三酚、根皮苷等);
第七章
*一般组织器官是否都具有诱导产生愈伤组织的潜在可能性?
-------是;
*诱导愈伤组织成败的关键在于?
------不在于植物材料的来源,而在于培养的条件;其中,植物生长调节剂是诱导愈伤组织形成的重要因素;
*愈伤组织形成大致经过的几个时期?
-------起始期、分裂期、形成期;
*愈伤组织通过再分化形成再生植株的主要方式有?
-------先芽后根;
-------先根后芽;
-------在愈伤组织的不同部位分别形成根和芽;
*由愈伤组织诱导出不定芽产生的组织培养苗,比直接从顶芽或腋芽中产生的丛生芽形成的组织培养苗,具有更大的性状变异几率。
在遗传育种方面,利用这个特性进行突变体的筛选;
*愈伤组织在分化时,芽和根的发生部位?
------芽多发生在愈伤组织的表层(外起源),根多发生在愈伤组织的深处(内起源);
*激素怎样诱导愈伤组织的分化?
大多数植物组织和器官的再生作用符合器官分化的植物激素控制理论:
生长素/细胞分裂素的比例高时:
愈伤组织仅生根;
比例低时,产生苗;比例适中时,产生无结构的愈伤组织;
*体细胞胚:
植物体细胞具有形成胚的能力;由体细胞形成的胚状体叫体细胞胚;
*体细胞胚的诱导过程:
体细胞胚的诱导和形成需要经过至少两个阶段:
第一阶段:
在含高生长素浓度的培养基中,诱导培养胚性细胞;第二阶段:
在较低生长素或无生长素的培养基中形成体细胞胚。
*体细胞形成体细胞胚的过程?
-------原胚期、球形胚期、心形胚期、鱼雷胚期、子叶期等;
*人工种子:
将植物组织离体培养产生的体细胞胚包埋在含有营养成分和保护功能的物质中,在适宜条件下发芽出苗的颗粒体;
*人工种子包括哪些部分?
各自的作用是什么?
-------体细胞胚及各种类型的繁殖体、人工胚乳(含能量及刺激因素)、人工种皮(保护作用,防止水分丢失和机械损伤);
*体细胞胚同步化(人工种子生产的要求)生产方法有哪些?
:
低温处理:
使体细胞胚发育同步。
抑制剂法:
使细胞进入同步生长。
通气法:
显著提高细胞的有丝分裂同步率。
分离法:
可获得相对同步的体细胞胚。
渗透压法:
达到体细胞胚同步化的目的。
*固体培养
1、特点:
利用琼脂作凝固剂。
2、优点:
简单。
3、缺点:
(1)外植体或愈伤组织只底部接触培养基,导致上下营养差异,影响生长速度。
(2)外植体插入培养基后,气体交换不畅及排泄物质积累,影响组织吸收养分和导致毒害。
(3)组织受光不均匀,生长不均衡。
*液体培养
1、特点:
不加入琼脂作凝固剂。
2、种类:
静止培养:
用滤纸桥作支撑物。
震荡培养:
连续浸没和定期浸没
3、优点:
改善通气条件。
代谢产物不会在局部积累。
第八章
*器官培养:
主要指植物的根、茎、叶、花、小果实等器官在离体条件下的无菌培养;
*茎尖培养的类型?
小茎尖:
10-100m的茎尖分生组织(脱毒);
大茎尖:
几十mm茎尖或更大的芽(快繁);
材料体积小,不带叶原基的培养难,成苗所需时间长,体积大的则易于成功。
*茎尖培养的发育方向?
腋芽萌发;
脱分化后产生胚状体;
脱分化后直接产生不定器官;
脱分化后形成愈伤组织;
*植物器官消毒难度最大的是什么?
-----根及地下器官;
*器官培养的特点?
--------能保持器官所具有的特征性结构;
--------在组织培养研究中,常常以器官作为外植体,研究较广泛;
--------通过器官培养,可以进行植物的快速繁殖;
*花药或花粉培养的意义?
诱导形成单倍体,快速获得纯系;
缩短育种周期;
简化育种程序;
有利于筛选隐性突变体,提高选择效率。
第九章:
*实现快速繁殖,培养物的增殖是十分关键的步骤:
培养物的增殖方式有哪些?
(1)芽增殖;在离体培养条件下,培养基中加入适当浓度的细胞分裂素,可以使腋芽伸长或长成丛芽,丛芽经过切割即可得到大量的芽,又把丛芽切割的芽重复进行增殖培养,产生丛芽,再切割,如此几次培养之后的芽,再经过生根培养,就可以生产出大量的试管苗。
通过芽增殖的方式进行快速繁殖的特点主要表现在培养方法简单,后代能保持高度的遗传稳定性,虽经过长期离体繁殖,仍能保持高度的遗传稳定性。
(2)不定芽增殖:
从原有的芽以外的任何器官和组织通过器官发生重新形成的芽称为不定芽。
诱导不定芽时,一般需要在培养基中添加外源激素。
细胞分裂素一般高于生长素,以避免产生愈伤组织。
(3)、胚状体增殖:
在组织培养条件下,已经有30多个科,150多种植物能够产生胚状体。
诱导胚状体形成一般使用胚、分生组织、生殖器官为外植体,培养基中要求含有丰富的还原态的氮(铵态氮)和适宜浓度的生长素类激素。
胚状体增殖的特点是增长率高,所形成的试管苗免去了生根的环节。
但胚状体的休眠的诱导和休眠的打破难以把握。
因而,除了在人工种子制作时使用了胚状体增殖的增殖途径,一般在植物的快速繁殖过程中没有应用该项增殖技术。
(4)、愈伤组织增殖:
几乎所有的植物都可以通过组织培养的方法诱导形成愈伤组织,愈伤组织可以继续增殖,愈伤组织再进一步分化获得小植株。
愈伤组织增殖的特点是成功率高,繁殖系数大,但遗传稳定型较差。
对于遗传稳定性要求高的品种,一般不采用此途径解决增殖问题。
利用其遗传性状不稳定的特点,可以比较容易地获得新品种。
*在进行多代的继代培养中,往往会产生两种现象:
1.驯化现象2.衰退现象
*驯化现象:
植物在开始进行继代培养时需要加入生长调节物质,但随着继代次数的增加,少量加入或不加生长调节物质就能生长的现象。
*衰退现象:
植物长期进行继代培养后,生活能力、形态发生能力、再生能力都会下降的现象。
*壮苗:
在组培苗生根前,一般必须有一个壮苗的过程。
即将丛生苗分割成单苗,使其茎干变粗,叶色浓绿。
*炼苗:
组培苗从无菌,温、光、湿度稳定环境中进入到自然环境中,从异养过渡到自养过程,必须经过炼苗。
*植物病毒是通过无性繁殖传递的;
*除部分豆科植物外,种子不传递病毒;
*植物通过无性繁殖,病毒会在体内逐代积累,危害越来越严重;
*目前无特效药消除病毒,而快速反之可以实现脱毒;
*与衰退现象有关的因素?
-------植物材料(品种、部位)、培养基与培养条件、继代培养次数、季节等;
*病毒在植物体内的分布?
-------病毒浸染到感染植株的叶片后,经过一段时间即向附近的细胞增殖转移,转移速度很慢(通过胞间连丝);当叶片内病毒浓度增大到一定浓度后,就转移到韧皮部,随后通过微管束向其他部位转移;
*快速繁殖中,利用何种组织培养
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