第十二章二氢吡啶类钙拮抗剂的分析.docx
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第十二章二氢吡啶类钙拮抗剂的分析
第十二章二氢吡啶类钙拮抗剂的分析
二氢吡啶类钙拮抗剂(Dihydropyridinecalciumantagonists,DHPs)是20世纪60年代后期研究开发的一类新型药物,是目前临床上特异性较高,作用较强的一类钙拮抗剂。
自从1974年第一个二氢吡啶类钙离子拮抗剂硝苯地平上市以来,目前上市的已有30余种,其中临床上常用的有硝苯地平、尼卡地平、尼鲁地平、尼群地平、尼索地平、尼莫地平、非洛地平、氨氯地平和依拉地平等。
硝苯地平为第一代钙拮抗剂的代表,具有强烈的血管扩张作用,临床上适用于预防和治疗冠心病、心绞痛,还适用于各种类型的高血压,对顽固性、重度高血压也有较好的疗效。
而第二代钙拮抗剂的冠脉扩张作用更强大,作用维持时间长,如尼卡地平适用于各种缺血性脑血管疾病、风湿性心脏病及各类型心绞痛,并用于高血压的治疗;氨氯地平起效较慢,但作用维持时间长,适用于心绞痛,也是理想的抗高血压药物;尼索地平适用于治疗心衰和高血压危象,作用迅速。
其他的如尼莫地平、尼鲁地平、尼群地平、非洛地平、依拉地平等也都属于第二代钙二氢吡啶类拮抗剂。
二氢吡啶类拮抗剂发展到现在,已经出现了第三代药物,包括马尼地平、拉西地平、贝尼地平和巴西地平等,它们的作用更强,毒副反应更小。
本章以硝苯地平、尼群地平、尼莫地平、尼索地平、氨氯地平为例,介绍这类药物的结构、理化性质、体内过程和测定方法。
第一节代表药物
一、结构
二氢吡啶类钙拮抗剂分子结构中的共同特征是均含有苯基-1,4-二氢吡啶的母核,其基本骨架如下:
由于R1、R2、R3、R4和R5各取代基团的不同,则形成了一系列不同结构的二氢吡啶类钙拮抗剂药物。
现将常用的二氢吡啶类钙拮抗剂及其结构列于表12-1。
表12-1常用的二氢吡啶类钙拮抗剂及其结构式
药物
R1
R2
R3
R4
R5
硝苯地平
Nifedipine
—CH3
—CH3
—CH3
—NO2
—H
尼卡地平
Nicardipine
—CH3
—CH3
—H
—NO2
尼鲁地平
Niludiping
—CH3
—(CH2)2OC3H7
—(CH2)2OC3H7
—H
—NO2
尼群地平
Nitrendipine
—CH3
—CH3
—C2H5
—H
—NO2
尼索地平
Nisoldipine
—CH3
—CH3
—CH2CH(CH3)2
—H
—NO2
尼莫地平
Nimodipine
—CH3
—(CH2)2OCH3
—CH(CH3)2
—H
—NO2
非洛地平
Felodipine
—CH3
—CH3
—C2H5
—Cl
—Cl
氨氯地平
Amlodipine
—CH2OCH2CH2NH2
—CH3
—CH3
—Cl
—H
依拉地平
Isradipine
—CH3
—CH3
—CH(CH3)2
=N—O—N=
二、主要理化性质
二氢吡啶类钙拮抗剂多为黄色或淡黄色结晶或结晶性粉末;无臭,无味;遇光热不稳定,易分解;在甲醇、乙醇、氯仿、丙酮等有机溶剂中溶解,在水中几乎不溶。
本类药物二氢吡啶环C4位常为手性碳原子,故具有光学异构体。
硝苯地平C17H18N2O6,分子量346.34,化学名2,6-二甲基-4-(2-硝基苯基)-1,4-二氢-3,5-吡啶二甲酸二甲酯(2,6-Dimethyl-4-(2-nitrophenyl)-1,4-dihydro-3,5-pyridine-dicarboxylicaciddimethylester),又名硝苯啶,硝苯吡啶、心痛啶。
本品为黄色结晶性粉末,无臭,无味,mp.171-175oC,易溶于丙酮、氯仿,略溶于乙醇,几乎不溶于水。
紫外吸收性质:
本品的无水乙醇溶液(含少许氯仿)λmax在237nm,在320-355nm有较大的宽幅吸收。
本品遇光极不稳定,分子内发生光化学歧化作用,降解为硝基苯吡啶衍生物,如4-(2-硝基苯基)-2,6-二甲基吡啶-3,5-二羧酸二甲酯,对人体有害,故本品在生产、贮存及使用中应注意避光,在分析过程中也应注意避光。
尼卡地平C26H29N3O6,分子量479.53,化学名为2,6-二甲基-4-(3-硝基苯基)-1,4-二氢吡啶-3,5-二羧酸,3-[β-(N-苄基-N-甲氨基)]乙酯-5-甲酯,又名硝苯苄胺啶。
本品常用其盐酸盐,为淡黄色粉末或黄色结晶性粉末;无臭,几乎无味。
在甲醇中溶解,在乙醇、氯仿中略溶,在水中或乙醚中几乎不溶;在冰醋酸中溶解。
紫外吸收性质:
本品的甲醇溶液λmax在236nm,在219nm的波长处有最小吸收。
本品遇光易分解。
尼群地平C18H20N2O6,分子量360.37,化学名为2,6-二甲基-4-(3-硝基苯基)-1,4-二氢-3,5-吡啶二甲酸甲乙酯(2,6-Dimethyl-4-(3-nitrophenyl)-1,4-dihydro-3,5-pyridinedicarboxylicacidethylmethylester),又名硝苯甲乙吡啶。
本品为黄色结晶或结晶性粉末,无臭,无味,mp.156-159oC,易溶于丙酮、氯仿,略溶于甲醇、乙醇,几乎不溶于水。
紫外吸收性质:
本品的无水乙醇溶液λmax在237nm与353nm,λmin303nm。
本品遇光易分解。
尼莫地平C21H26N2O7,分子量418.45,化学名为2,6-二甲基-4-(3-硝基苯基)-1,4-二氢-3,5-吡啶二甲酸,2-甲氧乙基,1-甲基乙基酯(2,6-dimethyl-4-(3-nitrophenyl)-1,4-dihydro-3,5-pyridinedicarboxylicacid,2-methoxyethyl,methylethylester)。
本品为淡黄色结晶性粉末,无臭,无味,mp.124-128oC,溶解于丙酮、氯仿、乙醇,不溶于水,遇光易分解。
尼索地平化学名为1,4-二氢-2,6-二苯基-4-(3-硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸甲乙酯(1,4-Dihydro-2,6-dimethyl-4-(3-nitrophenyl)-3,5-pyridinedicarboxylicacidethylmethylester),又名硝苯甲乙吡啶。
本品为黄色结晶性粉末,无臭,无味,mp.158-159oC,易溶于丙酮、氯仿、乙酸,微溶于甲醇、乙醇,几乎不溶于水,遇光易分解。
氨氯地平化学名为(±)2-[(2-氨基乙氧基)甲基]-4-(2-氯苯基)1,4-二氢-6-甲基-3,5-吡啶二甲酸,3-乙酯,5-甲酯((±)2-[(2-Aminoethoxy)methyl]-4-(2-chlorophenyl)-1,4-dihydro-6-methyl-3,5-pyridinedicarboxylicacid,3-ethyl,5-methylester),又名阿莫洛地平(Amlodipinebesylate)、安洛地平。
本品为白色结晶,mp.178-179oC,溶于醋酸乙酯。
第二节体内过程
二氢吡啶类钙离子拮抗剂的主要作用机制是抑制细胞外钙离子内流,使心肌和血管平滑肌细胞内钙浓度降低,导致心肌收缩力减弱,心率减慢,同时血管松弛,外周血管阻力降低,血压下降,因而减少心肌做功量和耗氧量。
另外,已有证据表明,二氢吡啶类药物能诱发NO从各类血管内皮释放。
血管内皮及血小板NO的释放,对二氢吡啶类药物的抗动脉粥样硬化作用和抗血栓形成作用有利。
二氢吡啶类药物口服易吸收,有首过效应,因此生物利用度较低。
该类药物在人体血浆中的蛋白结合率高,可达90%以上;经肝脏代谢消除,其代谢产物主要经肾脏和胆汁排泄。
一、硝苯地平
硝苯地平通过抑制细胞外Ca2+内流引起降压作用,对轻、中度高血压作用
明显,对正常血压则无明显影响。
在降压的同时,可伴有反射性心率加快和心输出量增加,并可增高肾素活性。
硝苯地平通过位于肠粘膜和肝脏的细胞色素P4503A4系统代谢,有较低的首过效应,口服后30~60min起效,作用持续3h,t1/2为3~4h,口服生物利用度为45%~60%,舌下含服,1~5min起效,有效血药浓度为20~100ng/mL。
硝苯地平在人体血浆中的蛋白结合率较高(92%~98%),其代谢产物也可与血浆蛋白结合,结合率为54%。
人血浆和尿中已定性分离出两种硝苯地平的代谢产物,为二氢吡啶的衍生物。
硝苯地平与β受体阻断剂或利尿药合用可增加降压效果,并减少不良反应。
其主要不良反应有头痛、眩晕、心悸、足部水肿等。
二、尼卡地平
尼卡地平是第二代二氢吡啶类钙离子拮抗剂,可在不减弱心肌收缩力的情况下有效扩张全身和冠状动脉血管,临床主要用于高血压和心绞痛等心血管疾病的治疗。
尼卡地平口服吸收较快,首过效应较强,生物利用度约为19%~38%,给药后主要在肝脏代谢并以代谢物的形式排出体外。
t1/2为1.3h,血浆蛋白结合率为89%~99.5%,尿排泄小于1%,清除率为13.4ml•min-1•kg-1,分布容积为1.1L/kg。
尼卡地平单次静脉注射,可选择性降低动脉血压,具有剂量依赖性。
降压效应在100s内达到峰值,3-7min恢复其效应的一半。
三、尼莫地平
尼莫地平为选择性作用于脑血管平滑肌的钙拮抗剂,对外周血管的作用较
小。
尼莫地平对脑血管的作用突出,能有效地预防和治疗因蛛网膜下腔出血所引起的脑血管痉挛造成的脑组织缺血性损害。
尼莫地平口服给药几乎全部吸收,吸收迅速,有明显的首过效应,生物利用度约为11%~13%,服药后10~15min后在血浆中能检测到活性成分及首过效应代谢产物。
t1/2为1.17~1.5h,血浆蛋白结合率为99%,动物实验表明能通过胎盘屏障。
尼莫地平代谢消除,在肝脏93%~95%被代谢,主要通过双氢吡啶环脱氢氧化代谢进行,血浆中代谢产物的残留作用对治疗几乎无影响。
代谢产物50%经肾脏排泄,30%从胆汁排泄。
四、尼群地平
尼群地平为选择性作用于血管平滑肌的钙拮抗剂,是一种高效、长效、低毒
的降压药。
尼群地平对血管的亲和力比对心肌大,对冠状动脉的作用更佳,能降低心肌耗氧量,对缺血性心肌有保护作用;可降低总外周阻力,使血压下降。
尼群地平口服后约80%被吸收,0.5~3h血浆药物浓度达峰值,t1/2为2~11.4h,口服生物利用度约为14%~55%,血浆蛋白结合率为96.4%~98.9%。
尼群地平在肝脏中生物转化,代谢产物70%经肾脏排泄,8%随粪便排出,尿中无活性代谢产物,原型药在尿中排泄量<0.1%。
五、尼索地平
尼索地平为当前作用最强的钙拮抗剂,具有选择性地扩张冠状动脉的作用,
其降压效果比硝苯地平强4~10倍。
对心率及心收缩力的影响极小,能降低心肌耗氧量及外周阻力,也可增加冠脉侧枝循环,使冠脉流量增加,主要用于冠心病合并高血压的预防和治疗。
尼索地平口服易吸收,1.5h后血药浓度达峰值,t1/2约为3h,血浆蛋白结合率较高。
常见的不良反应有脸红、头痛、心悸、倦怠等,但发生率较硝苯地平为低。
六、氨氯地平
氨氯地平是90年代推出的新型二氢吡啶类钙离子拮抗剂,它的作用与硝苯地平相似,与其它钙离子通道拮抗剂的最大不同点就是扩张血管的作用缓和并且长效。
第三节体内测定方法
二氢吡啶类钙拮抗剂的体内药物分析大多采用血浆作为样品,研究体内的代谢物则需要取尿液等样品。
样品经预处理后可用放射性同位素法、荧光法、气相色谱法和液相色谱法等方法测定,但以气相色谱法和液相色谱法应用较多。
一、样品的处理
在分析操作中应尽量避光进行。
取全血用肝素抗凝,经离心后分离出血浆,在中性或弱碱性条件下用合适的有机溶剂萃取,常用的有机溶剂有甲苯、苯、醋酸乙酯和氯仿等。
萃取出的有机相挥干,残渣用流动相溶解即可进样分析。
为了简化操作,提高提取效率,避免样品见光分解,可以采用预柱处理和柱切换技术。
二、体内测定方法
1.同位素标记法、荧光法Duhm等人[1]最早报道用同位素标记法研究硝苯地平在动物体内的药代动力学;Krol等人[2]应用放射性同位素法结合气相色谱法分析了人体内硝苯地平的代谢产物,但同位素标记法不仅要求操作技术高,而且同位素有放射性污染的缺点,目前基本已不再用于二氢吡啶类药物的体内分析。
Schlossmann等人[3]曾研究了用荧光法测定硝苯地平的含量,但该法对操作条件要求较高,专属性差,应用收到限制。
2.气相色谱法 气相色谱法是应用于二氢吡啶类钙拮抗剂体内测定较广泛的方法,可选用填充柱或毛细管柱,采用非极性固定液甲基硅油(OV-1)或甲基苯硅油(OV-17),柱温225~270℃。
由于二氢吡啶类钙拮抗剂血中浓度较低,在结构中又含有—NO2等电负性较强的基团,故一般选用灵敏度较高的电子捕获检测器(ECD)进行检测。
例1气相色谱法测定人血浆中的硝苯地平[4]
样品制备取人血浆样品1.0ml,置具塞离心管(已加入内标地西泮50μl并于水浴上氮气吹干)中,涡旋混合3min,加甲苯2ml,提取10min,3500r/min离心10min,分离出甲苯层,于60℃水浴中氮气吹干,残渣以50μl醋酸乙酯溶解,取1μl进样分析。
色谱条件色谱柱为OV-101石英毛细管柱25m×0.25mmID,载气和补充气均为高纯氮气,柱前压为196Kpa,补充气流速为35ml/min。
操作温度:
进样器为240℃,检测器为300℃,柱初始温度为150℃,维持80s,立即以40℃/min升到250℃,维持10min。
进样方式,不分流进样,进样时间1s,进样后80s启动分流阀。
检测器为63Ni电子捕获检测器。
结果色谱图(图12-1)表明,空白样品中内源性物质不干扰硝苯地平的分析;通过与空白样品添加标准品的色谱图比较,确证12.0min色谱峰为硝苯地平,9.5min色谱峰为内标地西泮峰,两峰的分离度R为8.26,不影响定量的准确性;以硝苯地平峰计算,理论塔板数n为1.4×105。
图12-1 硝苯地平血浆提取物的气相色谱图(a)空白血浆;(b)空白血浆加内标;(c)样品血浆,1.内标(地西泮);2.硝苯地平
本法采用不分流进样法进行测定,此法由于利用溶剂效应和热聚集的原理使样品组分在柱头进行预浓缩。
溶剂效应要求起始柱温应低于溶剂沸点20℃左右,而热聚集当柱温和被分析组分的沸点差距足够大时,作用非常有效。
硝苯地平为高沸点化合物,因此可有效的利用热聚集。
为了得到较好的分离效果及尽量缩短出峰时间,柱温采用程序升温方式。
本法灵敏度较高,血浆中最低检出浓度可达1μg/mL。
例2气相色谱电子捕获法测定人血浆中的尼索地平[5]
样品制备避光操作,于离心管中精密加入1μg/mL的内标尼莫地平溶液20μl,再加入血样1ml,混匀,加入1mol/mL的NaOH溶液0.5ml,涡旋混匀,加入乙醚-环己烷(1:
1)溶液6ml,涡旋振荡5min,于4000r/min离心5min。
取有机相4.5ml于40℃水浴中氮气吹干,残渣用50μl甲醇溶解,取2μl进样分析。
色谱条件色谱柱为DB-1交联熔融石英毛细管柱25m×0.328nm,0.52μm,检测器为63Ni电子捕获检测器。
检测器温度为300℃,进样口温度为260℃,程序升温,起始温度为255℃,维持6.2min,以40℃/min升至270℃,维持5min;分流进样法,分流比40:
1;柱前压为151.68Kpa,载气为高纯度氮气。
结果色谱图见图(12-2)。
尼索地平和内标尼莫地平的出峰时间分别为5.71min和8.15min,血浆中杂质峰不干扰样品测定,以尼索地平计算理论塔板数为1.16×105。
在0.1~30ng/mL浓度范围内峰面积比与浓度呈良好的线性关系,r=0.9997。
人血浆中尼索地平的最低检出浓度为50pg/mL。
0.3,3.0,15.0ng/mL三个浓度的平均回收率为91.92%~97.89%,日内和日间精密度RSD分别小于4.6%和6.9%。
图12-2硝苯地平血浆提取物的气相色谱图(A)空白血浆;(B)空白血浆添加尼索地平和内标尼莫地平;(C)受试者单剂量口服尼索地平片后的血浆加内标,1.尼索地平;2.尼莫地平
3.高效液相色谱法
高效液相色谱法在二氢吡啶类钙拮抗剂体内药物分析中应用广泛。
样品经预处理后可用正相或反相高效液相色谱法测定。
反相高效液相色谱法固定相常为十八烷基硅烷化学键合相(C18柱),流动相多由缓冲液与甲醇或乙腈以不同的配比组成。
一般使用紫外检测器,检测波长可设定在236±2nm,这是此类化合物的最大吸收峰。
另外,为了减少干扰峰,也可采用254nm波长。
除紫外检测器外还可选用灵敏度比紫外检测器更高的电化学检测器。
内标物除了选择其他二氢吡啶类药物互为内标外,尚可选用地西泮等化合物。
此外,也有报道使用外标法,原因是用地西泮或其他二氢吡啶类药物作内标时,若病人同时服用这些药物会影响测定。
应用HPLC法测定体内二氢吡啶类钙离子拮抗剂,不受样品挥发性和热稳定性的限制,因此是本类药物体内测定较为理想的方法。
例1HPLC测定血浆中的硝苯地平[6]
样品制备取待测血浆600μl,置10ml具塞离心管中,加地西泮内标液(300ng/mL)200μl,氨水120μl,涡旋振荡1min,再加入提取溶剂(无水乙醚-正己烷3:
1)4ml,涡旋振荡20min,离心(3000r/min),置-20℃的冰箱中冷冻2h,上层有机相转移至另一离心管中,于50℃水浴中用氮气挥干,残渣用50%乙腈溶液200μl定容,涡旋混合、离心(15000r/min)后取15μl进样(低浓度进样30μl)。
色谱条件色谱柱:
LunaC18(250×4.6mm,5μm);保护柱:
AlltechC18(30×2mm,40μm);流动相:
乙腈-水-二乙胺-磷酸(51:
49:
0.12:
0.10);流速1.2ml/min;柱温45℃;检测波长238nm;进样量15~30μl。
结果血浆中硝苯地平分离的HPLC图谱见图12-3。
图12-3硝苯地平血浆提取物的高效液相色谱图
1.硝苯地平2.内标(安定)
方法准确度和精密度回收率:
92.9%~112.4%。
日内RSD:
2.4%;日间RSD:
4.6%。
线性范围和检测限线性范围:
2~180ng/mL。
检测限:
2ng/mL。
例2RP-HPLC测定血浆中的尼莫地平及其代谢物[7]
样品制备在避光条件下取血浆样品加入内标物尼群地平,用氢氧化钠调成碱性后用乙醚-正己烷(1:
1)提取,离心后分离有机相,挥干溶剂,残留物溶于用等体积水稀释的流动相250μl中,取50μl进样。
色谱条件色谱柱:
SpherisorbC18柱(15cm×4.6mm,3μm)。
流动相:
水-乙腈(43:
57)。
流速:
0.5ml/min。
检测:
紫外,238nm或218nm。
结果色谱图见图12-4。
尼莫地平单羧酸和双羧酸代谢物:
6.32min,内标物:
10.66min,尼莫地平:
12.19min,脱氢尼莫地平:
13.02min。
图12-4血浆中尼莫地平及其代谢物的高效液相色谱图
1.尼群地平(内标)2.尼莫地平
方法线性范围:
5~100ng/mL;相对标准差:
5%;检测限:
1ng/mL。
例3电化学检测NP-HPLC测定血浆或血清中的尼卡地平及其代谢产物[8]
样品制备取待测血浆样品200μl,加入pH11.0的三(羟甲基)氨基甲烷和内标物布替林,用甲基叔丁基醚提取,离心后分离有机相,取100μl进样。
色谱条件色谱柱:
S5SCX硅胶柱(12.5cm×5.0mm,5μm)。
流动相:
甲醇,含20mmol/L高氯酸铵。
流速:
2.0ml/min。
检测:
电化学玻碳电极为工作电极,Ag/AgCl为参比电极,工作电位+1.1V。
结果色谱图见图12-5。
保留时间尼卡地平:
3.8min,去氢尼卡地平:
4.2min,内标物:
7.2min。
方法准确度和精密度回收率:
99%~108%。
日内RSD:
3.50%~12.14%;日间RSD:
0.80%~12.28%。
图12-5血浆中尼卡地平及其代谢物的高效液相色谱图
1.盐酸尼卡地平2.内标3.去氢尼卡地平
线性范围和检测限线性范围:
5~500ng/mL。
检测限:
5ng/mL。
4.色谱-质谱联用技术
随着联用技术近年来在药物分析方法学上不断的发展和完善,HPLC-MS、GC-MS等方法也逐步被用于二氢吡啶类钙拮抗剂的体内药物分析中。
这些方法选择性好,灵敏度高,操作简单,快速、准确,可使样品的分离、定性和定量一次完成,对于药物分析,尤其是体内药物分析的发展起到巨大的促进作用。
现举例如下:
例液相色谱-质谱-质谱联用法测定人血浆中的氨氯地平[9]
样品制备在暗室中,取血浆1.0ml置10ml具塞试管中,依次加入流动相100μl,内标液(80ng/mL4’-羟基普罗帕酮溶液,流动相溶解)100μl,1mol/LNaOH溶液100μl,涡旋30s。
加乙醚-二氯甲烷(2:
1)3ml提取,往复振荡10min,离心5min,分取有机相于40℃空气流中吹干。
残留物加100μl流动相溶解,取20μl进样。
色谱条件色谱柱:
ZorbaxXDBC8柱,150mm×4.6mmID,5μm。
流动相:
乙腈-水-甲酸(75:
35:
1)。
流速:
0.4ml/min。
柱温为20℃。
质谱条件离子源为ESI源;源电压4.5kV;加热毛细管温度150℃;鞘气为氮气,流速621kPa;辅助气(N2)流速23au;碰撞气(Ar)压力1.9Pa。
碰撞诱导解离(CID)电压20V(氨氯地平)和40V(内标);正离子方式检测;扫描方式为选择反应监测(SRM),用于定量分析的二级碎片离子分别为m/z238(氨氯地平)和m/z116(内标4’-羟基普罗帕酮),扫描时间为0.2s。
结果取空白血浆,按样品处理方法操作,得色谱图12-6A;将一定浓度的氨氯地平标准溶液加入空白血浆,依同法操作,得色谱图12-6B;取健康受试者给药后收集的血浆样品,依同法操作,得色谱图12-6C。
氨氯地平的保留时间为3.3min,内标物的保留时间为3.1min,内源性物质不干扰氨氯地平的测定。
图12-6氨氯地平和内标选择反应监测(SRM)的色谱图A.空白血浆;B.空白血浆加2ng/mL氨氯地平(a)和内标(b);C.健康志愿者口服10mg氨氯地平36h
图12-7A为氨氯地平的二级全扫描质谱图,图12-7B为内标4’-羟基普罗帕酮的二级全扫描质谱图。
氨氯地平采用正离子方式检测,其准分子离子峰m/z409,选择性对其二级质谱分析,得到两个碎片离子m/z238和m/z294,选择峰强度较高的碎片离子m/z238进行定量分析。
对于内标,使用质子化的准分子离子(m/z358)作为母离子,利用生成的主要碎片离子m/z116进行定量分析。
以这种方式获得的色谱图具有高度的专属性。
图12-7氨氯地平和内标(4’-羟基普罗帕酮)的MS/MS全扫描图
氨氯地平(A),4’-羟基普罗帕酮(B)
方法准确度和精密度回收率:
氨氯地平82.5%,内标物87.8%。
0.40、2.00、16.00ng/ml三个浓度的日内RSD分别为8.2%、6.6%和8.4%;日间RSD分别为6.7%、7.9%和9.7%。
线性范围和检测限线性范围:
0.4~16.0ng/mL。
检测限:
0.4ng/mL。
参考文献
1.DuhmB,MaulHW,MedenwaldKH,etal.Tierexprimentelleuntersuchungenzurpharmacokineticundbiotransformationvonra
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