教学案例库兽药残留检测部分磺胺类检测docx.docx
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教学案例库——兽药残留检测
教学案例一磺胺类药物代谢产物残留的检测技术
教学案例名称
猪肝中磺胺类药物代谢产物残留的检测
教学案例描述
该案例主要讲解水产品中磺胺类药物代谢产物残留的检测方法,适用于进行该项目检测的食品企业,以及进行兽药残留检测项目教学的高职学校。
主要内容
1)猪肝中磺胺类药物代谢产物残留的检测意义
2)猪肝中磺胺类药物代谢产物残留的检测方法
3)高效液相色谱的使用
4)检测报告的出具
教学目标
1、知识目标
1)熟悉磺胺类药物代谢产物的检测方法
2)熟悉高效液相色谱的原理
3)磺胺类药物代谢产物检测报告构成
4)内标法及外标法定量
2、能力目标
1)正确进行溶液的配制和稀释
2)熟练进行样品的制备
3)熟练使用高效液相
4)标准曲线的绘制
5)独立完成磺胺类药物代谢产物的检测工作
6)正确书写检测报告
适用对象
高职学生
知识准备
(一)磺胺类药物代谢产物的危害
磺胺类药物是兽医临床上使用最广的一类化学合成抗菌药,主要用于细菌感染性疾病和某些原虫病的预防和治疗。
但使用不合理很容易造成组织中的残留和蓄积,许多国家和组织规定了其最高残留限量(MRL)为0.1μg/g,甚至不得检出。
在摄食残留有磺胺类药物的肉品是一个长期低剂量吸收磺胺类药物的过程,而细菌对磺胺药较易产生抗药性,当剂量、疗程不足时更易发生。
其中以葡萄球菌最易产生,其次为痢疾杆菌、大肠杆菌、肺炎球菌和链球菌,同时各种磺胺药间有交叉抗药性。
人体内蓄积到一定程度时,有严重的毒副作用,会破坏人的正常免疫机能和造血系统。
损害人体泌尿系统,容易在肾小管内析出结晶,损伤肾小管引起结晶尿、血尿、蛋白尿,重者可发生尿少、尿闭甚至尿毒症。
多数磺胺类药抗菌谱广,易抑制肠道正常寄生细菌的生长,造成某些维生素的缺乏。
此外,磺胺药还可抑制骨髓的造血功能,引起溶血性贫血和再生障碍性贫血等严重反应,还影响中枢神经系统,引起头晕、头痛、全身乏力等,并可引起恶心、呕吐等消化道症状,磺胺药也是较多引起药物过敏的药,严重者引起甚至可引起剥脱性皮炎。
教学实施过程
一、情境创设
某肉制品加工企业检验部门对当天生产的一批产品进行磺胺类药物代谢产物的检测,要求检测方法依据国家标准进行。
【问题导入】为什么要检测磺胺类药物代谢产物残留?
引出:
1、水产品中磺胺类药物代谢产物残留的危害?
2、磺胺类药物代谢产物残留的检测方法?
【学生讨论】学生分组学习并讨论,得出问题答案。
【任务描述】
二、职责要求
科长:
负责检验流程的监督及检测报告的审批;
组长:
人员分工,各组工作的监督(摄像、照相),检测报告初审;
准备组:
负责检验材料、试剂、设备等的准备工作;
操作组:
负责仪器设备的检测操作
数据组:
负责样品信息的记录、检测结果的记录、报告单出具
【学生活动】发放学习资料单“农业部958号公告-12-2007水产品中磺胺类药物残留量的测定液相色谱法”,分组学习及讨论。
【结果展示】让学生绘制工作内容流程图,进行展示。
图1实验操作总流程图
3、实践操作
【学生】各组按照任务分工,开始实践操作。
准备组:
需填写工作准备单
数据组:
需填写检测记录单、检测报告单
检测样品
名称
单位
领取数量
使用情况
猪肝
检测设备
名称
型号
领取数量
使用情况
高效液相色谱仪,配置紫外检测器或二极管阵列检测器
旋转蒸发仪
超纯水器
冷冻离心机
振荡器
涡旋混合器
分析天平:
感量0.0001g。
离心管:
50ml,10ml。
氮吹仪
马弗炉
固相萃取装备
检测试剂
名称(浓度)
配制过程
用量
使用及回收情况
磺胺嘧啶(SD)对照品纯度≥98.0%。
磺胺二甲嘧啶(SM2)对照品纯度≥98.0%。
磺胺间甲氧嘧啶(SMM)对照品纯度≥98.0%。
磺胺甲恶唑(SMZ)对照品纯度≥98.0%。
磺胺喹恶啉(SQ)对照品纯度≥98.0%。
乙腈:
色谱纯。
氯仿。
硫酸钠:
磷酸
C18粉
中性氧化铝粉
用前于600℃马弗炉烘烤5h。
氯仿乙腈溶液:
取乙腈10ml加氯仿90ml。
磷酸三乙胺溶液
取3.4ml磷酸加水至1000ml,用三乙胺调节pH为3.0.
流动相
磷酸三乙胺溶液-乙腈(25:
75)
标准贮备液(1mg/ml)
准备称取SD、SM2、SMM、SMZ、SQ对照品各100mg,用乙腈溶解并稀释至100ml容量瓶中,必要时超声。
贮存于0℃-8℃冰箱中,有效期90d。
标准工作液:
取上述标准贮备液,用流动相稀释,得到磺胺类药物0.02μg/mL、0.1μg/mL、0.2μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL的标准混合溶液。
贮存于0℃-8℃冰箱中,有效期7d
备注
表2检测记录单
基本信息
样品名称
样品编号
检测项目
检测日期
分析条件
依据标准
检测方法
仪器名称
仪器状态
实验环境
温度
℃
湿度
%
分析数据
平行1
平行2
平行3
空白
数据记录
结果计算
计算公式
按照下式计算试样中各种药物残留的含量:
X
式中:
X---试样中各种药物的含量,单位为微克每千克(ug/kg)
A---试样溶液对应的色谱峰面积响应值;
AS---标准溶液对应的色谱峰面积响应值
V1---加入提取液的体积,单位为毫升(mL)
V2---取出提取液的体积,单位为毫升(mL)
检测结果
表3检测报告单
测定目的
采样日期
检测日期
样品名称
检测内容
检测结果
国家标准
检测方法
检验结论
与标准
对比情况
检验
审核
年月日
四、检测结果分析与展示
1、展示各组填写的记录单及报告单,让学生进行对比及纠错;
2、展示各组的检测结果;
3、结合检测过程中的问题进行分析,填写问题分析表。
表3问题分析表
常见问题汇总
完成检测项目,对照本项目方法及国标分析检测结果,总结实验结果
序号
出现问题
分析讨论可能的原因
改进的措施
1
2
3
4
未解决的问题及原因
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