几种电动机正反转星三角启动及能耗制动电路Word格式文档下载.docx
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5:
{i:
0;s:
10544:
"机电传动控制与PLC考试试题@#@机电传动控制与PLC考试试题@#@试卷编号:
@#@129404@#@试卷总分:
@#@100@#@出卷时间:
@#@2012-02-20 @#@15:
@#@18@#@答题时间:
@#@90分钟@#@ @#@@#@注意@#@1.请在试卷、答题纸上分别填上你的姓名和准考证号;@#@@#@2.本卷总分100分,限时1.5小时;@#@@#@3.仔细阅读以下资料后,按照后面的申论要求,在试题上依次作答。
@#@@#@一、填空题(每小题2分,共20分)@#@1.@#@现代机床的动力主要由@#@来提供。
@#@[每空1分]@#@2.@#@机床电气控制的主要任务是实现对机床的@#@和@#@的控制,有时还要完成各种保护、冷却和照明等控制。
@#@[每空1分]@#@3.@#@低压电器按照控制对象的不同,可以划分为@#@电器和@#@电器。
@#@[每空1分]@#@4.@#@低压隔离开关是重要的机床电源控制部件,在有@#@无@#@的情况下作接通或隔离电源之用。
@#@[每空1分]@#@5.@#@鼠笼式异步电动机的常用降压启动方法有:
@#@星三角降压启动、@#@,@#@。
@#@[每空1分]@#@6.@#@数控机床电器控制系统由@#@、 @#@@#@ @#@、主轴伺服系统、机床强电控制系统包括可编程序控制器和 @#@@#@、接触器、@#@等组成。
@#@[每空1分]@#@7.@#@数控机床的控制分为两大部分,一部分是@#@,另一部分是@#@。
@#@[每空1分]@#@8.@#@常见的电气控制系统图有@#@、@#@、@#@。
@#@[每空1分]@#@9.@#@接触器按其主触点控制电路中电流的种类分@#@和@#@两种[每空1分]@#@二、单项选择题(每小题2分,共30分)@#@10.@#@低压断路器即低压自动开关它相当于( @#@ @#@)的组合。
@#@[2分]@#@A@#@刀开关、熔断器、热继电器、欠压继电器@#@B@#@刀开关、熔断器、热继电器、启动器@#@C@#@刀开关、熔断器、热继电器、压力继电器@#@D@#@刀开关、熔断器、热继电器、操作手柄@#@11.@#@交流接触器常用于远距离接通和分断( @#@ @#@)的电路。
@#@[2分]@#@A@#@电压至380V、电流至630A@#@B@#@电压至1140V、电流至630A@#@C@#@电压至1140V、电流至1000A@#@D@#@电压至380V、电流至1000A@#@12.@#@热继电器是一种利用( @#@ @#@)进行工作的保护电器。
@#@[2分]@#@A@#@电流的热效应原理@#@B@#@监测导体发热的原理@#@C@#@监测线圈温度@#@D@#@测量红外线@#@13.@#@数控机床的性能很大程度上取决于( @#@ @#@)的性能。
@#@[2分]@#@A@#@计算机运算@#@B@#@伺服系统@#@C@#@位置检测系统@#@D@#@机械结构@#@14.@#@数控机床主轴用三相交流电动机驱动时采取( @#@ @#@)方式最佳。
@#@[2分]@#@A@#@调频和调压@#@B@#@变级和调压@#@C@#@调频和变级@#@D@#@调频@#@15.@#@数控机床进给伺服系统的负载不大,加工精度不高时,可采用( @#@ @#@)控制。
@#@[2分]@#@A@#@全闭环@#@B@#@半闭环@#@C@#@开环@#@D@#@二者皆可@#@16.@#@使用闭环测量与反馈装置的作用是为了( @#@ @#@)。
@#@[2分]@#@A@#@提高机床的安全性@#@B@#@提高机床的使用寿命@#@C@#@提高机床的定位精度、加工精度@#@D@#@提高机床的灵活性@#@17.@#@数控机床进给控制的交流伺服电动机结构是( @#@ @#@)。
@#@[2分]@#@A@#@转子、定子都装有永磁体和绕组@#@B@#@转子、定子都是绕组@#@C@#@定子装有永磁体,转子是绕组@#@D@#@转子装有永磁体,定子是绕组@#@18.@#@熔断器主要是用于电路的( @#@ @#@)保护。
@#@[2分]@#@A@#@过压@#@B@#@过载@#@C@#@短路@#@D@#@漏电@#@19.@#@延时动作的继电器是( @#@ @#@)。
@#@[2分]@#@A@#@电流继电器@#@B@#@电压继电器@#@C@#@时间继电器@#@D@#@速度继电器@#@20.@#@CA6140型车床的主轴电机是( @#@ @#@)。
@#@[2分]@#@A@#@三相笼型异步电动机@#@B@#@三相绕线转子异步电动机@#@C@#@直流电动机@#@D@#@双速电动机@#@21.@#@电路图中接触器线圈符号下左栏中的数字表示该接触器( @#@ @#@)所处的图区号。
@#@[2分]@#@A@#@线圈@#@B@#@主触头@#@C@#@常开辅助触头@#@D@#@常闭辅助触头@#@22.@#@安装在X62W型万能铣床工作台上的工件可以在( @#@ @#@)个方向调整位置或进给。
@#@[2分]@#@A@#@2@#@B@#@3@#@C@#@4@#@D@#@6@#@23.@#@采用星-三角降压起动的电动机,正常工作时定子绕组接成( @#@ @#@)。
@#@[2分]@#@A@#@角形@#@B@#@星形@#@C@#@星形或角形@#@D@#@定子绕组中间带抽头@#@24.@#@电压继电器的线圈与电流继电器的线圈相比,具有的特点是( @#@ @#@)。
@#@[2分]@#@A@#@电压继电器的线圈与被测电路串联@#@B@#@电压继电器的线圈匝数多、导线细、电阻大@#@C@#@电压继电器的线圈工作时无电流@#@D@#@电压继电器的线圈匝数少、导线粗、电阻小@#@三、判断题 @#@对“√”错“×@#@”(每小题1分,共10分)@#@25.@#@可以用过电流继电器来做电动机的过载保护。
@#@( @#@ @#@)[1分]@#@对@#@ @#@ @#@@#@错@#@ @#@ @#@@#@26.@#@CA6140型车床的主轴电动机M1因过载而停转,热继电器FR1的常闭触头是否复位,对冷却泵电动机M2和刀架快速移动电动机M3的运转没有影响。
@#@( @#@ @#@)[1分]@#@对@#@ @#@ @#@@#@错@#@ @#@ @#@@#@27.@#@M7130平面磨床工作台的往复运动是由电动机M3正反转来拖动的。
@#@( @#@ @#@)[1分]@#@对@#@ @#@ @#@@#@错@#@ @#@ @#@@#@28.@#@X62W型万能铣床为了避免损坏刀具和机床,要求只要电动机M1、M2、M3有一台过载,三台电动机都必须停止运转。
@#@( @#@ @#@)[1分]@#@对@#@ @#@ @#@@#@错@#@ @#@ @#@@#@29.@#@X62W型万能铣床的顺铣和逆铣加工是由液压装置实现的。
@#@( @#@ @#@)[1分]@#@对@#@ @#@ @#@@#@错@#@ @#@ @#@@#@30.@#@数控机床具有柔性,只需更换程序,就可适应不同品种及尺寸规格零件的自动加工。
@#@( @#@ @#@)[1分]@#@对@#@ @#@ @#@@#@错@#@ @#@ @#@@#@31.@#@全闭环伺服系统所用位置检测元件是光电脉冲编码器。
@#@( @#@ @#@)[1分]@#@对@#@ @#@ @#@@#@错@#@ @#@ @#@@#@32.@#@梯形图不是数控加工编程语言。
@#@( @#@ @#@)[1分]@#@对@#@ @#@ @#@@#@错@#@ @#@ @#@@#@33.@#@目前,交流伺服驱动系统已完全取代直流伺服驱动系统。
@#@( @#@ @#@)[1分]@#@对@#@ @#@ @#@@#@错@#@ @#@ @#@@#@34.@#@可编程序控制器都是模块式结构。
@#@( @#@ @#@)[1分]@#@对@#@ @#@ @#@@#@错@#@ @#@ @#@@#@四、简答题(每小题5分,共20分)@#@35.@#@为何用热继电器进行过载保护?
@#@[5分]@#@参考答案:
@#@@#@电动机在实际运行中,短时过载是允许的,但如果长期过载,欠电压运行或断相运行等都可能使电动机的电流超过其额定值,将引起电动机发热,绕组温升超过额定温升,将损坏绕组的绝缘,缩短电动机的使用寿命,严重时甚至会烧毁电动机。
@#@因此,必须采取过载措施,最常用的是利用热继电器进行过载保护。
@#@@#@36.@#@PLC控制与继电器控制的主要区别?
@#@[5分]@#@参考答案:
@#@@#@1工作方式不同,PLC是以反复扫描的方式工作,按顺序、连续逐条执行程序,即“串行”方式工作,而继电器是只要形成电流通路,几个继电器将同时动作,即按“并行”方式工作的2触电数量不同,继电器一般为4~8对,而PLC为无限对;@#@3组成器件不同,继电器为真实器件,而PLC为存储器中的触发器即为软继电器;@#@4实施控制的方法不同。
@#@@#@37.@#@简述可编程控制器(PLC)的十条指标。
@#@[5分]@#@参考答案:
@#@@#@1)编程方便,可现场修改程序;@#@2)维修方便,采用插件式结构;@#@3)可靠性高于继电器控制装置;@#@4)体积小于继电器控制装置;@#@5)数据可直接送入管理计算机;@#@6)成本可与继电气控制装置竞争;@#@7)输入为市电;@#@8)输出为市电,容量在2A以上,可直接驱动电磁阀、接触器等;@#@9)扩展时原系统改变最小;@#@10)用户存储器大于4K。
@#@@#@38.@#@PLC的特点?
@#@[5分]@#@参考答案:
@#@@#@1)系统构成灵活,扩展容易,以开关量控制为其特长;@#@也能进行连续过程的PID回路控制;@#@并能与上位机构成复杂的控制系统,如DDC和DCS等,实现生产过程的综合自动化。
@#@2)使用方便,编程简单,采用简明的梯形图、逻辑图或语句表等编程语言,而无需计算机知识,因此系统开发周期短,现场调试容易。
@#@另外,可在线修改程序,改变控制方案而不拆动硬件。
@#@3)能适应各种恶劣的运行环境,抗干扰能力强,可靠性强,远高于其他各种机型。
@#@@#@五、分析原理题(每小题10分,共20分)@#@39.@#@如下图分析写出,利用速度继电器实现反接自动控制电路过程。
@#@@#@ @#@ [10分]@#@参考答案:
@#@@#@按下SB2后KM1接触器吸合,电动机直接启动,电动机转速升高以后,速度继电器KS的常开触点闭合,为反接制动做准备。
@#@停车时,按下停止按钮SB1,SB1的常闭触点分断,常开触点闭合,此时接触器KM1断电释放,其常闭互锁触点闭合,使KM2通电吸合,将电动机的电源反接,进行反接制动。
@#@电动机转速迅速降低,当转速接近于零时,速度继电器的常开触点KS分断,KM2断电释放,电动机脱离电源,制动结束。
@#@@#@40.@#@如下图分析写出,利用时间继电器实现从“角接”到“双星接”自动加速控制电路过程。
@#@@#@ @#@ [10分]@#@参考答案:
@#@@#@按下SB2时,时间继电器KT通电,其延时打开常开触点瞬间闭合,接触器KM1因线圈通电而吸合,电动机定子绕组接成角接起动,同时中间继电器KA通电吸合并自锁,使时间继电器KT断电,经过延时KT触点断开,接触器KM1断电,使接触器KM2通电,电动机便自动地从“角接”改成“双星接”运行,完成了自动加速过程。
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26902:
"金融保险提升的金融基础设施@#@(金融保险)提升的金融基础设施@#@提升香港的金融基础设施@#@研究报告@#@“为迈向卓越的电子化经济体系@#@建立电子化金融基础设施”@#@金融基础设施督导委员会@#@香港@#@1999年9月@#@“为迈向卓越的电子化经济体系@#@建立电子化金融基础设施”@#@提升香港的金融基础设施研究报告@#@章次@#@1.引言@#@2.面对市场挑战,把握难得机遇@#@3.达致成功的远景目标@#@4.电子化金融基础设施@#@5.迈向未来的进程@#@鸣谢@#@附件@#@甲金融基础设施督导委员会职责范围@#@乙金融基础设施督导委员会及工作小组的成员名单@#@第1章@#@引言@#@财政司司长在1999年3月3日发表财政预算案时,宣布全面改革金融市场,以增强香港的竞争力,藉以令香港继续成为主要的国际金融中心。
@#@@#@财政司司长理解到,虽然香港的证券及衍生工具市场在过去十年取得了长足的进展和辉煌的成就,但全球市场近期的发展,例如电子化经济的急速来临、另类电子交易系统的出现、投资者的成熟程度和日俱增及市场和投资产品的全球化发展,带来了日趋激烈的竞争,令香港作为地区及国际性金融中心的首要地位受到挑战。
@#@@#@为了回应全球市场的挑战,财政司司长就香港的证券及期货市场宣布了壹个三管齐下的改革方案:
@#@@#@
(1)透过将交易所及结算X公司股份化和合且,彻底改变市场的结构;@#@@#@
(2)提升金融基础设施,以改善风险管理、提高效率和降低成本;@#@及@#@(3)进行监管改革和法例修订,以改善监管制度和提高对市场参和者的保障。
@#@@#@“我们必须追上先进科技发展,才能维持香港作为世界金融中心的地位。
@#@证券及期货市场的改革规模庞大,影响深远。
@#@”@#@财政司司长@#@交易所和结算X公司的股份化和合且这个重大改革现正进行中。
@#@《证券及期货综合条例草案》已进入最后的草拟阶段,且将会在1999年12月初提交立法会审议。
@#@为了增强证券及期货市场的科技基础,财政司司长于1999年3月委任壹个由证券及期货事务监察委员会(证监会)主席沈联涛先生领导的金融基础设施督导委员会,负责研究香港的金融基础设施中需要改善的环节,且作出有关建议。
@#@@#@金融基础设施督导委员会的职责范围和成员名单分别载于附件甲及乙。
@#@在1999年3月至9月这段期间,金融基础设施督导委员会召开过12次会议。
@#@委员会研究的具体目标,是要针对以下事项进行研究,以便在风险管理、提高效率及降低成本方面,提高香港作为国际金融中心的竞争力:
@#@@#@●为证券、股票期权、期货及其他在交易所进行的交易设立单壹结算安排;@#@@#@●提升金融科技基础设施的水平,以利便对在各金融市场上的交易作直通式处理;@#@及@#@●迈向壹个保密、无纸化的证券市场。
@#@@#@为征询业界及有关机构的意见,以及了解他们见法,金融基础设施督导委员会成立了壹个使用者工作小组和壹个科技工作小组。
@#@在1999年3月至9月期间,该使用者工作小组及科技工作小组分别举行过7次及13次会议。
@#@他们对研究作出了宝贵的贡献。
@#@各工作小组的成员名单载于附件乙。
@#@@#@本报告书载述金融基础设施督导委员会的研究结果及建议,且会探讨香港所面对的市场挑战、机会及为取得成功而需具备的视野。
@#@同时,亦会从建议的单壹结算安排、直通式处理、无纸化证券市场及科技结构等各方面,详细说明香港须建立的理想金融基础设施。
@#@最后,报告书会就配合未来发展所需的基础设施新猷提出建议。
@#@@#@第2章@#@面对市场挑战,把握难得机遇@#@香港的服务性行业的增值额占本地生产总值84%,令香港成为全球的主要服务经济体系。
@#@世界银行估计由1994-97年,全球服务的出口增长超过25%。
@#@然而,亚洲金融风暴过后,区内很多货币都大幅贬值,无论是在价格及金融服务的类别及素质方面,香港都面对来自其他金融中心愈来愈激烈的竞争。
@#@全球化市场及24小时交易,意味着在金融服务方面的竞争不单来自亚太时区,而且仍来自欧洲及美国等多个金融中心。
@#@@#@善用科技面对竞争@#@虽然租金及薪酬已大幅下调,但我们知道香港必须继续提高服务的素质和扩大服务的类别,尤其是应透过科技、创新及方便使用者的途径来达到增值的效果。
@#@近日有调查指出,某个地方是否具备先进的基础设施,尤其是在运输、通讯、法律、会计及商业服务等环节而言,是营商者为其地区性总部、服务及采购业务选址时的首要考虑因素,而在为生产程序选址时,这亦是第二大的考虑因素。
@#@@#@美国近期的发展显示,在科技方面进行突破性的改善,可抵销高成本所带来的影响。
@#@美国商业部有关“新兴的数位经济II”(EmergingDigitalEconomyII)的报告书(1999年6月)指出,虽然国内生产总值持续3年以每年4%的幅度稳健增长,但美国的通胀率仍然下降,这是因为资讯科技生产行业的价格大幅下调所致。
@#@例如,在1997年,资讯科技产品及服务的价格下调(跌幅为7.5%),抵销了经济体系其余环节的2.6%价格升幅,以致整体通账率只得1.9%。
@#@由此可见,香港必须利用资讯科技来提高生产力、降低成本和增强竞争力(图表2.1)。
@#@@#@图表2.1资讯科技生产行业及其余的经济环节的价格变动比较@#@ @#@@#@电子商贸和电子交易的最新发展@#@金融科技基础设施非正式工作小组在1997年12月的报告书内曾有以下的建议:
@#@“随着由私人机构所发展及推动的电子商贸和电子化支付系统在全球兴起,香港必须充分利用其优越的电讯基础设施,以便利用科技来提供超卓的服务。
@#@”@#@自1997年以来,电子商贸及电子交易(电子商贸及交易,包括交易、付款、采购及供应链上的其他活动等)发展速度之快超乎壹切预期。
@#@就亚太区而言,GartnerGroup预测企业间的电子商贸数额会由1999年的80亿美元增加到2003年的2800亿美元(上升约34倍),而企业和消费者之间的电子商贸数额会由1999年的50亿美元增加到2003年的400亿美元(上升约7倍)(图表2.2及2.3)。
@#@@#@互联网的出现,打破了时间、地域和形式的限制,刺激了电子商贸爆炸式的发展。
@#@@#@图表2.2在亚太区企业间的电子商贸额@#@图表2.3在亚太区企业和消费者之间的电子商贸额@#@YankeeGroup预测亚太区的互联网用户数目到2005年便会超过3亿7400万,而在1998年时其数目只稍为多于3900万(升幅接近10倍)。
@#@YankeeGroup又预言,中国在2001年会成为亚太区内主要的互联网用户地区,因为届时将有约4000万个互联网用户;@#@而到了2005年,中国应该会超越美国,成为全球互联网用户最多的国家。
@#@@#@ @#@@#@互联网令电子商贸和电子交易得以实现,以及利便其运营和处理。
@#@电子商贸和电子交易急速的增长为运营业务的方式带来了根本和不可逆转的改变。
@#@市场再不受地域强界所限制。
@#@由于新的参和者,尤其是中小型企业,能够电子方式开展业务和用极少资金便能进行竞争,传统的专营权正受到威胁。
@#@在资讯发达的年代成长及自小便长期使用互联网的新壹代顾客,正要求透过电子网络来获取各种服务。
@#@@#@网上证券交易,尤其是在美国,正出现爆炸式的增长。
@#@在1998年底,估计约有730万个网上证券买卖户口;@#@到1999年中,有关数字已达到1100万。
@#@现时,在纳斯迪克(Nasdaq)及纽约证券交易所的买卖,超过四分壹是透过互联网进行的。
@#@在欧洲,超过90万个投资者在网上进行交易。
@#@在亚洲,韩国证券的买卖因为有接近100万个网上户口的出现而变得兴旺,而在日本则约有超过10万个网上户口(图表2.4及2.5)。
@#@@#@图表2.4网上股票交易的趋势@#@ @#@@#@网上经纪@#@年份@#@网上交易商@#@数目@#@透过电话落盘进行@#@交易的平均@#@百分比@#@在网上落盘进行@#@交易的平均@#@百分比@#@CharlesSchwab@#@1997@#@750@#@64%@#@36%@#@1998@#@750@#@50%@#@50%@#@Ameritrade@#@1997@#@150@#@53.5%@#@46.5%@#@1998@#@200@#@26%@#@74%@#@E-Trade@#@1997@#@175@#@18%@#@82%@#@1998@#@200@#@11.3%@#@88.7%@#@Quick&@#@Reilly@#@1997@#@50@#@3.5%@#@96.5%@#@1998@#@100@#@3.5%@#@96.5%@#@DLJdirect@#@1997@#@120@#@8%@#@92%@#@1998@#@180@#@12%@#@88%@#@资料来源:
@#@IDG@#@图表2.5网上股票交易和传统落盘情况比较@#@近年来,电子商贸的急速来临令壹群功能超卓、成本低及拥有强大竞争力的中介机构-电子通讯网络(ECN)-应运而生。
@#@在证券市场方面,有例如Instinet,IslandECN,Archipelago,Primex,Tradepoint等;@#@在衍生工具市场,类似的网上网络有BrokerTec及国际证券交易所等。
@#@这些另类市场正不断大量地蚕食传统市场的交投量。
@#@例如,到了1999年,其中9个电子通讯网络便占去全美证券交投量约25%。
@#@@#@面对这些市场挑战,很多金融中心(例如阿姆斯特丹、悉尼、法兰克福、新加坡)的交易所及结算X公司都正在或计划采取策略性措施,将本身变为以客户为本及市场主导的商业机构。
@#@纽约证券交易所及伦敦证券交易所正考虑进行股份化,继而将交易所上市。
@#@此外,交易所及结算X公司正建立策略性联盟,以便它们能够更有效地发展跨市场产品,及在科技上所作的投资发挥规模经济的效果。
@#@这方面的例子包括由芝加哥商品交易所(CME)、法国国际期货和期权市场(MATIF)、新加坡国际金融交易所(SIMEX)及新近加入的巴西期货交易所(BM&@#@F)组成的GLOBEX联盟,共同使用NSC交易系统;@#@德国期货及期权交易所(DTB)、瑞士期权及金融期货交易所(SOFFEX)、芝加哥交易所(CBOT)及赫尔新基交易所(HEX)共同使用的欧洲交易系统(Eurex);@#@世达国际结算X公司(Cedel)和德国证券及衍生工具结算所正进行合且,以便成立欧洲结算所(ECH)等。
@#@@#@香港拥有全亚洲首屈壹指的电讯基础设施、超过130个互联网服务供应商、接近100万个互联网用户及稳健增长的互联网使用率(图表2.6)。
@#@我们已准备就绪,以便充分地把握电子商贸和电子交易所带来的机遇。
@#@@#@2.6香港的互联网使用率@#@1992-93年,香港联交所安装了现代化的自动对盘及成交系统(AMS),及推出中央结算及交收系统(CCASS),以减低风险和提高证券交收的效率。
@#@1996年底,香港安装了全球其中壹个最先进的大额支付系统-即时支付结算系统(RTGS)。
@#@联交所已发展了预计将于2000年启用的第三代证券交易系统(AMS/3),而香港期交所则打算尽快将交易由公开喊价的方式,过渡至全面电子化的交易系统中进行。
@#@另壹方面,政府已就发展“数码21新纪元”资讯科技策略及公共服务电子化计划迈开了第壹步。
@#@@#@虽然香港有之上的优点和成就,可是我们不能自满。
@#@亚洲及太平洋区内很多经济体系已着手建立或提升他们以现代及电子商贸科技为本的基础设施。
@#@中国内地的全国自动化支付系统(CNAPS)、韩国的资讯高速公路、马来西亚的多媒体超级走廊(MSC)及新加坡的SingaporeONE都是其他地区对上述挑战作出回应的例子。
@#@@#@第三章@#@达致成功的远景目标@#@电子商贸及电子交易已成为无可避免及不可逆转的趋势。
@#@因此,提高本地的金融基础设施,以允许整个经济体系内的个人及/或机构同时进行交易,是香港保持其竞争力及维持其作为全球及亚洲区其中壹个主要金融中心的地位的必备条件(图表3.1)。
@#@@#@香港应采用超卓的金融基础设施,以容许本地及全球的市场参和者,在开放、稳健、安全、具备灵活规模及高性能的网络上,自由取用各项金融产品和服务。
@#@@#@香港应达致的远景目标-电子化经济-应该是壹个容许本地及全球的市场参和者自由地取用由金融机构所提供全面的金融产品和服务的基础设施,而有关的金融机构将透过开放、稳健、安全、具备灵活规模及高性能的网络互相连系起来。
@#@在上述的基础设施之中,交易是以电子化和直通(即无需人手介入或重覆工序)形式处理,亦能随时接受电子文件(例如成交单据)。
@#@这套基础设施不单能够为市场参和者提供更多产品选择,及更快更佳的服务,同时亦容许交易能够安全地在较低成本及较低风险的情况下进行。
@#@这套基础设施可称为“电子化金融基础设施”。
@#@@#@为了实现这个远景目标,金融基础设施督导委员会依循以下的指导性原则,为香港的目标金融基础设施(即电子化金融基础设施)作出定位:
@#@@#@●达致卓越的风险管理;@#@@#@●充分发挥直通式处理的发展潜能;@#@@#@●确保交易能即时完成,以及其在法律上的确定性;@#@@#@●符合国际标准及适当的最佳作业方式;@#@@#@●寻求和主要的金融中心建立策略性伙伴关系;@#@及@#@●采用开放及互联网上的科技,以达致全球性连系和不断创新的目标。
@#@@#@ @#@@#@图表3.1香港的策略定位@#@香港可按照这些原则,达致下列各项目标,成为:
@#@@#@●亚洲时区内其中壹个领导性的结算及交收中心;@#@@#@●亚洲区内的卓越风险管理中心及市场流通的枢纽;@#@@#@●亚洲和全球市场建立策略性联系的大门;@#@及@#@●功能卓越的金融基础设施中心。
@#@@#@在加强其金融基础设施的同时,香港不单能够提高其作为主要国际金融中心的地位,亦能够巩固其作为中国内地的主要集资及风险管理中心的地位,以配合其经济的急速增长。
@#@@#@香港的电子化金融基础设施共有四个组成元素(图表3.2):
@#@@#@
(1)单壹结算安排,以达致更佳的风险管理;@#@@#@
(2)首至尾直通式处理,以提高成本效益;@#@@#@(3)无纸化证券市场,以提高效率及增加法律上的确定性;@#@及@#@(4)开放、稳健、切合时宜及规模灵活多变的科技架构,以达致本地及其他地区之间的连接性和发挥卓越功能。
@#@@#@表3.2香港的电子化金融基础设施@#@第四章@#@电子化金融基础设施@#@本章会从建议的单壹结算安排、直通式处理、无纸化证券市场及科技结构等各方面,描述香港的目标金融基础设施(即电子化金融基础设施)。
@#@@#@实现单壹结算安排@#@为证券及衍生工具市场设立单壹结算安排,是香港实现卓越风险管理的基本条件,而这亦是吸引国际投资者参和香港市场的重要因素。
@#@对投资者而言,若有任何市场能保证其交易的交收得以完成,提供审慎、透明度高和达到国际最佳标准的风险管理作业方式,及可改善其资金在不同市场及产品之间的流动性,他们便会选择到该市场进行交易。
@#@市场这种必然的转变正好从国际间愈来愈多交易所及结算X公司实行股份化和合且反映出来。
@#@@#@单壹结算安排的目标必须符合下列最佳作业方式和国际标准:
@#@@#@●综合结算户口架构;@#@@#@●建立实时持仓资料及实时持仓管理;@#@@#@●透过银行之间的即时支付结算系统实施统壹资金交收程序;@#@@#@●以投资组合为基础的风险管理;@#@及@#@●就单壹结算运作安排实施同步操作程序。
@#@@#@如果在将来能够提升即时支付结算系统的功能,令其得以用外币进行支付及结算,以及延长其运作时间,则对于结算X公司在筹划以全球多种货币进行交收的24小时货银对付安排,将会大有帮助。
@#@@#@电子化金融基础设施将包含这些最佳作业方式和标准作为其结构组件。
@#@单壹结算安排将为香港带来下列益处:
@#@@#@●就跨市场、产品及使用者的风险提供既全面又准确的风险评估资料,从而改善市场参和者、交易所及结算X公司的风险管理和监管机构的系统风险管理;@#@@#@●简化及改善资金交收的效率。
@#@透过在银行之间的即时支付结算系统进行结算以减低交收及流通性风险;@#@及@#@●透过统壹资金交收安排、跨市场保证金机制和跨市场扺押品机制提供更有效的资金运用和流通量。
@#@@#@本报告建议香港首先必须设立壹个共通衍生工具结算平台,再重新评估全球性的发展,然后才将证券及衍生工具的结算平台合且。
@#@在短期内,可考虑就结算参和者的持仓风险设立综合账目报告架构,以便就改善跨市场风险管理提供即时见效的措施。
@#@@#@实现直通式处理@#@缺乏效率的处理程序带来风险和增加成本。
@#@直通式处理(STP)确保金融交易能够由壹开始的“成交”直至最终的交收和确认,均以电子化方式记录和处理交易资料。
@#@现时的作业方式涉及从纸张及其他来源将数据重覆输入的昂贵程序,既容易出现错误、差异、延误,亦可能衍生诈骗行为。
@#@@#@业内的机构性交易通讯标准(ISITC)、香港证券业组织(HKSIG)及ThomsonESG的研究/检讨报告,列出在香港实施直通式处理的主要障碍。
@#@当中包括:
@#@@#@●市场参和者之间缺乏连接性(及兼容性);@#@@#@●业内参和者之间缺乏最佳作业方式程序(例如在确认和修订交易方面实施不同时限和程序);@#@@#@●对于厘定哪些资料须加以交流和如何交流缺乏标准;@#@@#@●给予托管人的交收指示缺乏时间性及完整性;@#@@#@●不同国家之间存在不同的标准(例如对交易指示的配对时限的容忍限度);@#@@#@●未能取得或没有常备的交收指示;@#@@#@●以人手操作的预先配对工作;@#@及@#@●对有效地使用壹致的静态数据缺乏支援(例如常备的交付指示)。
@#@@#@为了加强本港在愈趋国际化的证券市场上的竞争力,我们必须继续致力消除缺乏效率的措施(例如重覆程序的交易和失败的交付),因为这些措施只会增加成本和风险。
@#@@#@建立充分利用直通式处理的金融基础设施,肯定有助消除上述障碍和加强本港的竞争力。
@#@直通式处理必须以下列条件配合:
@#@@#@●壹套稳健的金融基础设施,将全球主要的交易所和结算X公司连接起来,包括利用计算机和支付系统直接连系起来;@#@@#@●和监管机构及税务机构合作,以确保电子数据/文件及电子签署的合法性;@#@@#@●采用符合最佳国际标准的划壹计算机规程及信息标准;@#@及@#@●各个市场参和者及使用者加强合作,以确保通用作业方式得以建立和实行。
@#@@#@鉴于直通式处理是达致成本效益的必要措施,不同的国际市场参和者成立了全球直通式处理协会(GSTPA),创立在跨市场实施直通式处理的基础设施和标准。
@#@全球直通式处理协会的目标旨在改善及加快业内参和者的资讯交流、提高交收效率、减低风险及确保相互之间的连接性。
@#@在1999年中,GSTPA已向业界发出邀请,要求就全球直通式处理的科技平台的规格提出建议书。
@#@该项工作会在2000年逐步落实。
@#@国际最佳作业方式建议在2002年开始实施T+1交收制度,而直通式处理是达致这个目标的先决条件。
@#@香港作为国际性金融中心,必须为这个国际性措施作好准备。
@#@@#@金融基础设施督导委员会委托了环球银行金融电讯协会(SWIFT)研究如果香港的证券界充分利用直通式处理,将可节省多少金钱。
@#@据环球银行金融电讯协会估计,和其有关的信息但未有实施直通式处理的成本(单以工资成本计算)每年大约为6亿美元。
@#@现时,香港环球银行金融电讯协会直通式处理的百分比为40-45%,和新加坡大致相约。
@#@然而,这个比率却低于澳洲及日本的相应比率。
@#@鉴于统计显示在香港直通式处理的使用者的为数较少,环球银行金融电讯协会估计,如果采用直通式处理的百分比能够达到80%,香港的金融市场每年可节省大约1,500万至2,000万美元(单以工资成本计算)。
@#@由于环球银行金融电讯协会大约占本港证券交易信息的50%,真正可节省的成本(包括租金及其他间接成本)每年大约可倍增至3,000万美元至4,000万美元,或2.34亿港元至3.12亿港元。
@#@@#@本报告建议充分利用直通式处理,从而在运作效率、准确性和降低成本方面提高香港的竞争力,而处理较大量的交易时的能力亦能相应地增强。
@#@要在证券无纸化环境下实现电子化金融基础设施内的直通式处理,需要以下的结构组件配合:
@#@@#@●壹个易于使用和开放的交易流程管理系统(TFM),可预先将交易配对,以减少交收失败的可能性,特别能和海外交易流程管理系统作出联系;@#@@#@●网上交易路径选择系统(TRS),为顾客提供有效率和有保证的交易管理和不同的输入渠道;@#@@#@●统壹电子交易界面(ETI),为跨市场交易提供壹个国际认可的通讯标准。
@#@这包括采用壹些国际标准,例如金融产品方面的国际证券号码(ISIN)、金融机构方面的银行识别密码(BIC)及国际标准化组织(ISO)的信息标准,例如金融交易信息的ISO15022等;@#@@#@●将结算X公司直接连接到银行之间的即时支付结算系统,以减低付款及交收风险;@#@@#@●银行设施共通界面(CBI),容许不同结算对手利用标准及稳健的设施界面处理银行交易;@#@@#@●中央证券存管处之间的多个双边联系安排,使香港和区内及国际托管人及中央证券存管处(CSD)之间的连系得以改善,且建立最方便、稳健及有效率的联系;@#@及@#@●透过非实物化及逐渐提供以国际竞争为基础的有效率的股份登记,以落实电子及即时股份登记。
@#@@#@体现无纸化的证券市场@#@无纸化的证券市场为直通式处理缔造必备的环境,避免了涉及实物股票的风险,又可减低拥有权的转让成本和提高证券交易的处理效率。
@#@香港要转变成为壹个无纸化的市场,必须按阶段逐步迈向全面非实物化:
@#@@#@●将所有新发行的股份非实物化;@#@@#@●将现已发行的股票非流动化,鼓励将实物股票转变为电子纪录,在可行范围内尽量将股票非实物化;@#@@#@●对在香港境外注册成立的X公司所发行的股票,如当地法例规定股票必须以实物形式存在,则可采用发出全球通用证明书的做法,而毋须将实物股票发行给投资者;@#@及@#@●在交易时,采用电子成交单据。
@#@@#@要在电子化金融基础设施内实现无纸化证券市场所需的结构组件包括下列各项:
@#@@#@●以电子方式即时更新股份登记处的股东名册;@#@@#@●建立中央证券存管处和股份登记处之间的电子联系;@#@@#@●投资者参和中央证券存管处以便进行直接交收;@#@@#@●提升中央证券存管处和股份登记处的系统及服务,以符合无纸化证券市场的要求;@#@及@#@●适当地更新现行的法例及监管架构,及采用国际接纳的电子化交易标准。
@#@@#@《电子交易条例草案》的制定将为电子文件(例如成交单据、“转手纸”)、纪录(例如股东名册)及签署提供合法地位。
@#@这条例是香港迈向无纸化证券市场所必需的。
@#@@#@透过直通式处理,无纸化证券市场的架构亦为交易以外的活动(例如电子认购首次公开招股及X公司行动)提供改善效率及减低成本的重要机会。
@#@转变为无纸化证券市场是重大的改变。
@#@因此,在市场上必须有充足的沟通,以确保市场参和者了解这些转变和增强对转变的信心。
@#@@#@建设稳建的科技架构@#@为了进行竞争和保持市场兴旺,金融基础设施必须建筑于开放、稳健、合时、规模灵活多变及能够支援持续创新的科技基础和组织结构之上。
@#@具备竞争优势的科技,有助消除进入市场的障碍,让任何人都能够随时随地更方便地参和市场。
@#@假如缺乏开放、稳建、可靠和达到世界级水平的科技架构,单壹结算安排、直通式运作环境及无纸化证券市场都将无法成为事实。
@#@@#@为了进行竞争和保持兴旺,金融基础设施必须建筑于开放、稳健、合时、规模可变及能够支缓持续创新的科技基础和组织结构之上。
@#@@#@为香港的电子化金融基础设施建立稳健的科技架构,必须具备下列最佳作业方式及国际标准:
@#@@#@●支援为证券及衍生工具的交易及结算工作而设的统壹及开放的接连途径;@#@@#@●为所有市场及产品的风险管理及直通式处理提供综合的运作平台;@#@@#@●采用以信息为基础的标准界面,促成系统之间的连接性和互用性;@#@@#@●采用主要市场参和者所提供的最佳方法或经证明行之有效的方案;@#@及@#@●提供统壹、安全及性能卓越及复元能力强的网络,容许来自本地及其他地区的开放式接连。
@#@@#@在法国,巴黎证券交易所曾计划将证券及衍生工具的系统结合成为单壹平台-Clearing21。
@#@在德国,德国证券及衍生工具交易所正计划在1999年年底,为欧洲交易系统(Eurex)及Xetra交易系统推出统壹的交易接连窗口和介面。
@#@而芝加哥交易所亦计划使用";i:
2;s:
20956:
"基坑降水方法要点讲解@#@地下水控制@#@基坑工程中的降低地下水亦称地下水控制,即在基坑工程施工过程中,地下水要满足支护结构和挖土施工的要求,并且不因地下水位的变化,对基坑周围的环境和设施带来危害。
@#@@#@地下水控制方法选择@#@在软土地区基坑开挖深度超过3m,一般就要用井点降水。
@#@开挖深度浅时,亦可边开挖边用排水沟和集水井进行集水明排。
@#@地下水控制方法有多种,其适用条件大致如表6-123所示,选择时根据土层情况、降水深度、周围环境、支护结构种类等综合考虑后优选。
@#@当因降水而危及基坑及周边环境安全时,宜采用截水或回灌方法。
@#@@#@地下水控制方法适用条件表6-123@#@方法名称@#@土类@#@渗透系数@#@(m/d)@#@降水深度@#@(m)@#@水文地质特征@#@集水明排@#@填土、粉土、粘性土、砂土@#@7~20.0@#@<@#@5@#@上层滞水或水量不大的潜水@#@降水@#@真空井点@#@0.1~20.0@#@单级<@#@6多级<@#@20@#@喷射井点@#@0.1~20.0@#@<@#@20@#@管井@#@粉土、砂土、碎石土、可溶岩、破碎带@#@1.0~200.0@#@>@#@5@#@含水丰富的潜水、@#@承压水、裂隙水@#@截水@#@粘性土、粉土、砂土、碎石土、岩溶土@#@不限@#@不限@#@回灌@#@填土、粉土、砂土、碎石土@#@0.1~200.0@#@不限@#@当基坑底为隔水层且层底作用有承压水时,应进行坑底突涌验算,必要时可采取水平封底隔渗或钻孔减压措施,保证坑底土层稳定。
@#@否则一旦发生突涌,将给施工带来极大麻烦。
@#@@#@2基坑涌水量计算@#@根据水井理论,水井分为潜水(无压)完整井、潜水(无压)非完整井、承压完整井和承压非完整井。
@#@这几种井的涌水量计算公式不同。
@#@@#@1.均质含水层潜水完整井基坑涌水量计算根据基坑是否邻近水源,分别计算如下:
@#@
(1)基坑远离地面水源时(图6-168a)@#@Q1.366K(2HS)S(6-124)@#@R@#@lg
(1)@#@r0@#@式中Q——基坑涌水量;@#@@#@K——土壤的渗透系数;@#@@#@H——潜水含水层厚度;@#@@#@S——基坑水位降深;@#@@#@R——降水影响半径;@#@宜通过试验或根据当地经验确定,当基坑安全等级为二、三级时,对潜水含水层按下式计算:
@#@@#@R2SkH(6-125)@#@对承压含水层按下式计算:
@#@@#@R10Sk(6-126)@#@k——土的渗透系数;@#@@#@r0——基坑等效半径;@#@当基坑为圆形时,基坑等效半径取圆半径。
@#@当基坑@#@非圆形时,对矩形基坑的等效半径按下式计算:
@#@@#@r0=0.29(a+b)(6-127)@#@式中a、b——分别为基坑的长、短边。
@#@@#@对不规则形状的基坑,其等效半径按下式计算:
@#@@#@式中A——基坑面积@#@2)基坑近河岸(图6-168b)@#@3)基坑位于两地表水体之间或位于补给区与排泄区之间时(图6-168c)@#@(2HS)S@#@2(b1b2)(b1b2)@#@lg[cos]@#@r02(b1b2)@#@4)当基坑靠近隔水边界时@#@(2HS)S@#@2lg(Rr0)lgr0(2br0)@#@图6-168均质含水层潜水完整井基坑涌水量计算简图@#@a)基坑远离地面水源;@#@(b)基坑近河岩;@#@@#@c)基坑位于两地表水体之间;@#@(d)基坑靠近隔水边界@#@2.均质含水层潜水非完整井基坑涌水量计算@#@1)基坑远离地面水源(图6-169a)@#@H2h2@#@Q1.366kRHhlhmhlg(1R)hmllg(10.2hm)r0lr0@#@式中M——由含水层底板到滤头有效工作部分中点的长度@#@(3)基坑近河岸(含水层厚度很大时):
@#@@#@a)基坑远离地面水源;@#@(b)基坑近河岸,含水层厚度不大;@#@@#@c)基坑近河岸,含水层厚度很大@#@3.均质含水层承压水完整井基坑涌水量计算@#@1)基坑远离地面水源(图6-170a)@#@ @#@@#@式中M——承压含水层厚度。
@#@@#@2)基坑近河岸(图6-170b)@#@Q2.73klgM(2rSb)@#@r0@#@b<@#@0.5r0)@#@6-137)@#@ @#@@#@6-138)@#@3)基坑位于两地表水体之间或位于补给区与排泄区之间(图6-170c)@#@Q2.73klg[2(b1b2)cos(b1b2)]r02(b1b2)@#@图6-170均质含水层承压水完整井涌水量计算简图@#@ @#@@#@a)基坑远离地面水源;@#@(b)基坑近河岸;@#@(c)基坑位于两地表水体之间@#@6-139)@#@图6-171均质含水层承压水非完整井涌水量计算简图@#@5.均质含水层承压-潜水非完整井基坑涌水量计算@#@Q1.366k(2HM)Mh2@#@R@#@lg(1R)@#@r0@#@6-140)@#@ @#@@#@图6-172均质含水层承压-潜水非完整井基坑涌水量计算简图@#@3集水明排法@#@在地下水位较高地区开挖基坑,会遇到地下水问题。
@#@如涌入基坑内的地下水不能及时排除,不但土方开挖困难,边坡易于塌方,而且会使地基被水浸泡,扰动地基土,造成竣工后的建筑物产生不均匀沉降。
@#@为此,在基坑开挖时要及时排除涌入的地下水。
@#@当基坑开挖深度不很大,基坑涌水量不大时,集水明排法是应用最广泛,亦是最简单、经济的方法。
@#@@#@1.明沟、集水井排水@#@明沟、集水井排水多是在基坑的两侧或四周设置排水明沟,在基坑四角或每@#@隔30~40m设置集水井,使基坑渗出的地下水通过排水明沟汇集于集水井内,然@#@1-排水明沟;@#@2-集水井;@#@3-离心式水泵;@#@@#@4-设备基础或建筑物基础边线;@#@5-原地下水位线;@#@6-降低后地下水位线@#@排水明沟宜布置在拟建建筑基础边0.4m以外,沟边缘离开边坡坡脚应不小于0.3m。
@#@排水明沟的底面应比挖土面低0.3~0.4m。
@#@集水井底面应比沟底面低0.5m以上,并随基坑的挖深而加深,以保持水流畅通。
@#@@#@沟、井的截面应根据排水量确定,基坑排水量V应满足下列要求:
@#@@#@V≥1.5Q(6-141)@#@式中Q——基坑总涌水量,按6-2-8-2节提供的方法计算。
@#@@#@明沟、集水井排水,视水量多少连续或间断抽水,直至基础施工完毕、回填土为止。
@#@@#@当基坑开挖的土层由多种土组成,中部夹有透水性能的砂类土,基坑侧壁出现分层渗水时,可在基坑边坡上按不同高程分层设置明沟和集水井构成明排水系统,分层阻截和排除上部土层中的地下水,避免上层地下水冲刷基坑下部边坡造成塌方(图6-174)。
@#@@#@1-底层排水沟;@#@2-底层集水井;@#@3-二层排水沟;@#@@#@4-二层集水井;@#@5-水泵;@#@6-原地下水位线;@#@7-降低后地下水位线@#@2.水泵选用@#@集水明排水是用水泵从集水井中排水,常用的水泵有潜水泵、离心式水泵和泥浆泵,其技术性能如表6-124、表6-125、表6-126和表6-127所示。
@#@排水所需水泵的功率按下式计算:
@#@@#@式中K1——安全系数,一般取2;@#@Q——基坑涌水量(m3/d);@#@H——包括扬水、吸水及各种阻力造成的水头损失在内的总高度(m);@#@@#@η1——水泵效率,0.4~0.5;@#@η2——动力机械效率,0.75~0.85。
@#@@#@般所选用水泵的排水量为基坑涌水量的1.5~2.0倍。
@#@@#@潜水泵技术性能表6-124@#@型号@#@流量@#@扬程@#@电机功率@#@转速@#@电流@#@电压@#@(m3/h)@#@(m)@#@(kw)@#@(r/min)@#@(A)@#@(V)@#@QY-3.5@#@100@#@3.5@#@2.2@#@2800@#@6.5@#@380@#@QY-7@#@65@#@7@#@2.2@#@2800@#@6.5@#@380@#@QY-15@#@25@#@15@#@2.2@#@2800@#@6.5@#@380@#@QY-25@#@15@#@25@#@2.2@#@2800@#@6.5@#@380@#@JQB-1.5-6@#@10~22.5@#@28~20@#@2.2@#@2800@#@5.7@#@380@#@JQB-2-10@#@15~32.5@#@21~12@#@2.2@#@2800@#@5.7@#@380@#@JQB-4-31@#@50~90@#@8.2~4.7@#@2.2@#@2800@#@5.7@#@380@#@JQB-5-69@#@80~120@#@5.1~3.1@#@2.2@#@2800@#@5.7@#@380@#@7.5JQB8-97@#@288@#@4.5@#@7.5@#@-@#@-@#@380@#@1.5JQB2-10@#@18@#@14@#@1.5@#@-@#@-@#@380@#@2Z6@#@15@#@25@#@4.0@#@-@#@-@#@380@#@JTS-2-10@#@25@#@15@#@2.2@#@2900@#@5.4@#@-@#@B型离心水泵主要技术性能表6-125@#@水泵型号@#@流量(m3/h)@#@扬程(m)@#@吸程(m)@#@电机功率(kW)@#@重量(kg)@#@11B-17@#@2@#@6~14@#@20.3~14.0@#@6.6~6.0@#@1.5@#@17.0@#@2B-31@#@10~30@#@34.5~24.0@#@8.2~5.7@#@4.0@#@37.0@#@2B-19@#@11~25@#@21.0~16.0@#@8.0~6.0@#@2.2@#@19.0@#@3B-19@#@32.4~52.2@#@21.5~15.6@#@6.2~5.0@#@4.0@#@23.0@#@3B-33@#@30~55@#@35.5~28.8@#@6.7~3.0@#@7.5@#@40.0@#@3B-57@#@30~70@#@62.0~44.5@#@7.7~4.7@#@17.0@#@70.0@#@4B-15@#@54~99@#@17.6~10.0@#@5.0@#@5.5@#@27.0@#@4B-20@#@65~110@#@22.6~17.1@#@5.0@#@10.0@#@51.6@#@4B-35@#@65~120@#@37.7~28.0@#@6.7~3.3@#@17.0@#@48.0@#@4B-51@#@70~120@#@59.0~43.0@#@5.0~3.5@#@30.0@#@78.0@#@4B-91@#@65~135@#@98.0~72.5@#@7.1~40.0@#@55.0@#@89.0@#@6B-13@#@126~187@#@14.3~9.6@#@5.9~5.0@#@10.0@#@88.0@#@6B-20@#@110~200@#@22.7~17.1@#@8.5~7.0@#@17.0@#@104.0@#@6B-33@#@110~200@#@36.5~29.2@#@6.6~5.2@#@30.0@#@117.0@#@8B-13@#@216~324@#@14.5~11.0@#@5.5~4.5@#@17.0@#@111.0@#@8B-18@#@220~360@#@20.0~14.0@#@6.2~5.0@#@22.0@#@-@#@8B-29220~34032.0~25.46.5~4.740.0139.0@#@BA型离心水泵主要技术性能表6-126@#@水泵型号@#@流量@#@(m3/h)@#@扬程@#@吸程@#@电机功率@#@外形尺寸(mm)@#@重量@#@(m)@#@(m)@#@(kW)@#@(长×@#@宽×@#@高)@#@(kg)@#@11BA-6@#@2@#@11.0@#@17.4@#@6.7@#@1.5@#@370×@#@225×@#@240@#@30@#@2BA-6@#@20.0@#@38.0@#@7.2@#@4.0@#@524×@#@337×@#@295@#@35@#@2BA-9@#@20.0@#@18.5@#@6.8@#@2.2@#@534×@#@319×@#@270@#@36@#@3BA-6@#@60.0@#@50.0@#@5.6@#@17.0@#@714×@#@368×@#@410@#@116@#@3BA-9@#@45.0@#@32.6@#@5.0@#@7.5@#@623×@#@350×@#@310@#@60@#@3BA-13@#@45.0@#@18.8@#@5.5@#@4.0@#@554×@#@344×@#@275@#@41@#@4BA-6@#@115.0@#@81.0@#@5.5@#@55.0@#@730×@#@430×@#@440@#@138@#@4BA-8@#@109.0@#@47.6@#@3.8@#@30.0@#@722×@#@402×@#@425@#@116@#@4BA-12@#@90.0@#@34.6@#@5.8@#@17.0@#@725×@#@387×@#@400@#@108@#@4BA-18@#@90.0@#@20.0@#@5.0@#@10.0@#@631×@#@365×@#@310@#@65@#@4BA-25@#@79.0@#@14.8@#@5.0@#@5.5@#@571×@#@301×@#@295@#@44@#@6BA-8@#@170.0@#@32.5@#@5.9@#@30.0@#@759×@#@528×@#@480@#@166@#@6BA-12@#@160.0@#@20.1@#@7.9@#@17.0@#@747×@#@490×@#@450@#@146@#@6BA-18@#@162.0@#@12.5@#@5.5@#@10.0@#@748×@#@470×@#@420@#@134@#@8BA-12@#@280.0@#@29.1@#@5.6@#@40.0@#@809×@#@584×@#@490@#@191@#@8BA-18@#@285.0@#@18.0@#@5.5@#@22.0@#@786×@#@560×@#@480@#@180@#@8BA-25@#@270.0@#@12.7@#@5.0@#@17.0@#@779×@#@512×@#@480@#@143@#@泥浆泵主要技术性能表6-127@#@泥浆泵@#@型号@#@流量@#@(m3/h)@#@扬程@#@(m)@#@电机功率@#@(kw)@#@泵口径(mm)@#@外形尺寸(m)@#@(长×@#@宽×@#@高)@#@重量@#@(kg)@#@吸入口@#@出口@#@3PN@#@108@#@21@#@22@#@125@#@75@#@0.76×@#@0.59×@#@0.52@#@450@#@3PNL@#@108@#@21@#@22@#@160@#@90@#@1.27×@#@5.1×@#@1.63@#@300@#@4PN@#@100@#@50@#@75@#@75@#@150@#@1.49×@#@0.84×@#@1.085@#@1000@#@21NWL@#@2@#@25~45@#@5.8~3.6@#@1.5@#@70@#@60@#@1.247(长)@#@61.5@#@3NWL@#@55~95@#@9.8~7.9@#@3@#@90@#@70@#@1.677(长)@#@63@#@BW600/30@#@(600)@#@300@#@38@#@102@#@64@#@2.106×@#@1.051×@#@1.36@#@1450@#@BW200/30@#@(200)@#@300@#@13@#@75@#@45@#@1.79×@#@0.695×@#@0.865@#@578@#@BW200/40@#@(200)@#@400@#@18@#@89@#@38@#@1.67×@#@0.89×@#@1.6@#@680@#@注:
@#@流量括号中数量单位为L/min。
@#@@#@4降水降水即在基坑土方开挖之前,用真空(轻型)井点、喷射井点或管井深入含水层内,用不断抽水方式使地下水位下降至坑底以下,同时使土体产生固结以方便土方开挖。
@#@@#@1.降水井(井点或管井)数量计算@#@Q@#@n1.1(6-143)@#@q@#@式中Q——基坑总涌水量;@#@@#@q——设计单井出水量;@#@@#@3真空井点出水量可按36~60m/d确定;@#@@#@真空喷射井点出水量按表6-128确定;@#@管井的出水量q(m3/d)按下述经验公式确定:
@#@@#@q120rsl3k(6-144)@#@rs——过滤器半径(m);@#@@#@l——过滤器进水部分长度(m);@#@@#@k——含水层的渗透系数(m/d)。
@#@@#@喷射井点的设计出水能力表6-128@#@型号@#@外管直径@#@(mm)@#@喷射管@#@工作水压力(MPa)@#@工作水流量(m3/d)@#@设计单个井点出水能力(m3/d)@#@适用含水层渗透系数(m/d)@#@喷嘴直径@#@(mm)@#@混合室直径@#@(mm)@#@1.5型并列式@#@38@#@7@#@14@#@0.6~0.8@#@112.8~163.2@#@100.8~138.2@#@0.1~5.0@#@2.5型圆心式@#@68@#@7@#@14@#@0.6~0.8@#@110.4~148.8@#@103.2~138.2@#@0.1~5.0@#@4.0型圆心式@#@100@#@10@#@20@#@0.6~0.8@#@230.4@#@259.2~388.8@#@5~10@#@6.0型圆心式@#@162@#@19@#@40@#@0.6~0.8@#@720@#@600~720@#@10~20@#@2.过滤器长度@#@真空井点和喷射井点的过滤器长度,不宜小于含水层厚度的1/3。
@#@管井过滤@#@器长度宜与含水层厚度一致@#@群井抽水时,各井点单井过滤器进水部分长度应符合下述条件:
@#@@#@y0>@#@l(6-145)@#@式中y0——单井井管进水长度,按下式计算:
@#@@#@
(1)潜水完整井@#@5-146)@#@ @#@@#@式中r0——基坑等效半径;@#@rw——管井半径;@#@H——潜水含水层厚度;@#@@#@R0——基坑等效半径与降水影响半径之和@#@R0=r0+RR——降水井影响半径。
@#@@#@
(2)承压完整井@#@(6-147)@#@式中H'@#@——承压水位至该承压含水层底板的距离;@#@@#@M——承压含水层厚度。
@#@@#@当滤管工作部分长度小于2/3含水层厚度时,应采用非完整井公式计算。
@#@若不满足上式条件,应调整井点数量和井点间距,再进行验算。
@#@当井距足够小仍不能满足要求时,应考虑基坑内布井。
@#@@#@(3)基坑中心点水位降低深度计算@#@1)块状基坑降水深度计算@#@1潜水完整井稳定流时:
@#@@#@(6-148)@#@(6-149)@#@式中S——基坑中心处地下水位降低深度;@#@@#@r1、r2,,rn——各井距基坑中心或井点中心处的距离。
@#@@#@2)对非完整井或非稳定流,应根据具体情况采用相应的计算方法。
@#@@#@3)当计算出的降深不能满足降水设计要求时,应重新调整井数、布井方式。
@#@@#@3.井点结构和施工的技术要求@#@
(1)一般要求@#@1)基坑降水宜编制降水施工组织设计,其主要内容为:
@#@井点降水方法;@#@井点管长度、构造和数量;@#@降水设备的型号和数量;@#@井点系统布置图;@#@井孔施工方法及设备;@#@质量和安全技术措施;@#@降水对周围环境影响的估计及预防措施等。
@#@@#@2)降水设备的管道、部件和附件等,在组装前必须经过检查和清洗。
@#@滤管在运输、装卸和堆放时应防止损坏滤网。
@#@@#@3)井孔应垂直,孔径上下一致。
@#@井点管应居于井孔中心,滤管不得紧靠井孔壁或插入淤泥中。
@#@@#@4)井孔采用湿法施工时,冲孔所需的水流压力如表6-129所示。
@#@在填灌砂滤料前应把孔内泥浆稀释,待含泥量小于5%时才可灌砂。
@#@砂滤料填灌高度应符合各种井点的要求。
@#@@#@冲孔所需的水流压力表6-129@#@土的名称@#@冲水压力@#@(kPa)@#@土的名称@#@冲水压力@#@(kPa)@#@松散的细砂@#@250~450@#@中等密实粘土@#@600~750@#@软质粘土、软质粉土质粘土@#@250~500@#@砾石土@#@850~900@#@密实的腐殖土@#@500@#@塑性粗砂@#@850~1150@#@原状的细砂@#@500@#@密实粘土、密实粉土质粘土@#@750~1250@#@松散中砂@#@450~550@#@中等颗粒的砾石@#@1000~1250@#@黄土@#@600~650@#@硬粘土@#@1250~1500@#@原状的中粒砂@#@600~700@#@原状粗砾@#@1350~1500@#@5)井点管安装完毕应进行试抽,全面检查管路接头、出水状况和机械运转@#@情况。
@#@一般开始出水混浊,经一定时间后出水应逐渐变清,对长期出水混浊的井点应予以停闭或更换。
@#@@#@6)降水施工完毕,根据结构施工情况和土方回填进度,陆续关闭和逐根拔出井点管。
@#@土中所留孔洞应立即用砂土填实。
@#@@#@7)如基坑坑底进行压密注浆加固时,要待注浆初凝后再进行降水施工。
@#@
(2)真空井点结构和施工技术要求@#@1)机具设备@#@真空井点系统由井点管(管下端有滤管)、连接管、集水总管和抽水设备等@#@组成@#@①井点管@#@井点管为直径38~110mm的钢管,长度5~7m,管下端配有滤管和管尖。
@#@滤管直径与井点管相同,管壁上渗水孔直径为12~18mm,呈梅花状排列,孔隙率应大于15%;@#@管壁外应设两层滤网,内层滤网宜采用30~80目的金属网或尼龙网,外层滤网宜采用3-10目的金属网或尼龙网;@#@管壁与滤网间应采用金属丝绕成螺旋形隔开,滤网外面应再绕一层粗金属丝。
@#@@#@滤管下端装一个锥形铸铁头。
@#@井点管上端用弯管与总管相连。
@#@@#@2连接管与集水总管@#@连接管常用透明塑料管。
@#@集水总管一般用直径75~110mm的钢管分节连接,每节长4m,每隔0.8~1.6m设一个连接井点管的接头。
@#@@#@3抽水设备@#@根据抽水机组的不同,真空井点分为真空泵真空井点、射流泵真空井点和隔膜泵真空井点,常用者为前两种。
@#@@#@真空泵真空井点由真空泵、离心式水泥、水气分离器等组成(图6-175),有定型产品供应(表6-130)。
@#@这种真空井点真空度高(67~80kPa),带动井点数多,降水深度较大(5.5~6.0m);@#@但设备复杂,维修管理困难,耗电多,适用于较大的工程降水。
@#@@#@图6-175真空泵真空井点抽水设备工作简图@#@1-井点管;@#@2-弯联管;@#@3-集水总管;@#@4-过滤箱;@#@5-过滤网;@#@6-水气分离器;@#@@#@7-浮筒;@#@8-挡水布;@#@9-阀门;@#@10-真空表;@#@11-水位计;@#@12-副水气分离器;@#@@#@13-真空泵;@#@14-离心泵;@#@15-压力箱;@#@16-出水管;@#@17-冷却泵;@#@18-冷却水管;@#@@#@19-冷却水箱;@#@20-压力表;@#@21-真空调节阀@#@真空泵型真空井点系统设备规格与技术性能表6-130@#@名称@#@数量@#@规格技术性能@#@往复式真空泵@#@1台@#@3@#@V5型(W6型)或V6型;@#@生产率4.4m3/min,真空度100kPa,电动机功率5.5kW,转速1450r/min@#@离心式水泵@#@2台@#@3@#@B型或BA型;@#@生产率30m3/h,扬程25m,抽吸真空高度7m,吸口直径50mm,电动机功率2.8kW,转速2900r/min@#@水泵机组配件@#@1套@#@井点管100根,集水总管直径75~l00mm,每节长1.6~4.0m,每套@#@29节,总管上节管间距0.8m,接头弯管100根;@#@冲射管用冲管1根;@#@机组外形尺寸2600mm×@#@1300mm×@#@1600mm,机组重1500kg@#@射流泵真空井点设备由离心水泵、射流器(射流泵)、水箱等组成,如图6-176所示,配套设备如表6-131,系由高压水泵供给工作水,经射流泵后产生真空,引射地下水流;@#@设备构造简单,易于加工制造,操作维修方便,耗能少,应用日益广泛。
@#@@#@图6-176射流泵真空井点设备工作简图@#@(a)工作简图;@#@(b)射流器构造@#@1-离心泵;@#@2-射流器;@#@3-进水管;@#@4-集水总管;@#@5-井点管;@#@6-循环水箱;@#@@#@7-隔板;@#@8-泄水口;@#@9-真空表;@#@10-压力表;@#@11-喷嘴;@#@12-喉管@#@2)井点布置@#@井点布置应根据基坑平面形状与大小、地质和水文情况、工程性质、降水深度等而定。
@#@当基坑(槽)宽度小于6m,且降水深度不超过6m时,可采用单排井点,布置在地下水上游一侧(图6-177);@#@当基坑(槽)宽度大于6m,或土质不良,渗透系数较大时,宜采用双排井点,布置在基坑(槽)的两侧,当基坑面@#@积较大时,宜采用环形井点(图6-178);@#@挖土运输设备出入道可不封闭,间距可达4m,一般留在地下水下游方向。
@#@井点管距坑壁不应小于1.0~1.5m,距离太小,易漏气。
@#@井点间距一般为0.8~1.6m。
@#@集水总管标高宜尽量接近地下水位线并沿抽水水流方向有0.25%~0.5%的上仰坡度,水泵轴心与总管齐平。
@#@井点管的入土深度应根据降水深度及储水层所有位置决定,但必须将滤水管埋入含水层内,并且比挖基坑(沟、槽)底深0.9~1.2m,井点管的埋置深度亦可按下式计算(图6-178);@#@@#@φ50型射流泵真空井点设备规格及技术性能表6-131@#@名称@#@型号技术性能@#@";i:
3;s:
26560:
"基因工程简答题总结@#@基因工程原理复习题思考题@#@5、简单叙述同尾酶和同裂酶的差别。
@#@@#@同尾酶:
@#@来源不同,识别的序列不同,但能切出相同的粘性末端,连接后不能被相关的酶同@#@时切割。
@#@@#@同裂酶:
@#@识别序列相同,切割位点有些相同,有些不同。
@#@分完全同裂酶和不完全同裂酶@#@(PS:
@#@完全同裂酶:
@#@识别位点和切点完全相同。
@#@@#@不完全同裂酶:
@#@识别位点相同,但切点不同。
@#@)@#@6、连接酶主要有哪些类型?
@#@有何异同点?
@#@影响连接酶连接效果的因素主要有哪些?
@#@类型:
@#@DNA连接酶和RNA连接酶@#@异同点:
@#@@#@相同点:
@#@都能以DNA为模板,从5'@#@向3'@#@进行核苷酸或脱氧核苷酸的聚合反应。
@#@@#@不同点:
@#@DNA聚合酶识别脱氧核糖核苷酸,在DNA复制中起作用;@#@而RNA聚合酶聚合的是核@#@糖核苷酸,在转录中起作用。
@#@@#@7、试分析提高平端DNA连接效率的可能方法。
@#@(传说中的网上答案)@#@1、低温下长时间的连接效率比室温下短时间连接的好。
@#@@#@2、在体系中加一点切载体的酶,只要连接后原来的酶切位点消失。
@#@这样可避免载体自连,应该可以大大提高平端连接的效率。
@#@@#@3、足够多的载体和插入片段是最重要的。
@#@@#@4、平端的连接对于离子浓度很敏感@#@5、尽可能缩小连接反应的体积@#@6、建议放在四度冰箱连接两天效率更高比14度好@#@8、基因工程中常用的DNA聚合酶主要有哪些?
@#@@#@1)大肠杆菌DNA聚合酶@#@2)Klenowfragment@#@3)T7DNA聚合酶@#@4)T4DNA聚合酶@#@5)修饰过的T7DNA聚合酶@#@6)逆转录酶@#@7)TaqDNA聚合酶@#@第四章基因克隆的载体系统@#@1、作为基因工程载体,其应具备哪些条件?
@#@@#@具有针对受体细胞的亲缘性或亲和性(可转移性);@#@@#@具有合适的筛选标记;@#@@#@具有较高的外源DNA的载装能力;@#@@#@具有多克隆位点(MCS;@#@具有与特定受体细胞相适应的复制位点或整合位点。
@#@@#@3、载体的类型主要有哪些?
@#@在基因工程操作中如何选择载体?
@#@@#@基因工程中常用的载体(vector)主要包括质粒(plasmid)、噬菌体(phage)和病毒(virus)一大类。
@#@这些载体均需经人工构建,除去致病基因,并赋予一些新的功能,如有利于进行筛选@#@的标志基因、单一的限制酶切点等。
@#@@#@4、质粒转化原理,影响转化率的因素有哪些?
@#@@#@A化学法(CaCI2法)转化原理:
@#@是Ca2+与细菌外膜磷脂在低温下形成液晶结构,后者经热脉冲发生收缩作用,使细胞膜出现空隙,质粒或DNA重组分子便可进入细胞内(感受态细胞)。
@#@@#@B电穿孔转化转化原理:
@#@将待转化的质粒或DNA重组连接液加在电穿孔转化仪的样品池@#@中,两极施加高压电场,在强大电场的作用下,细菌细胞壁和细胞膜产生缝隙,质粒或DNA@#@重组分子便可进入细胞内。
@#@@#@影响转化率的主要影响因素:
@#@@#@1)载体本身的性质及其空间构象:
@#@超螺旋构象转化率最高;@#@@#@2)插入片段的大小:
@#@插入片段越大,转化效率越低;@#@@#@3)受体细胞的类型及预处理;@#@@#@4)转化方法:
@#@电击法高于化学法。
@#@@#@5、重组体分子的选择方法主要有哪些?
@#@并简单阐述其原理。
@#@@#@从总体上看,重组体分子的选择与鉴定方法基本上可以分为如下几个类型:
@#@@#@
(1)基于载体遗传标记检测法@#@在构建基因工程载体系统时,载体DNA分子上通常携带了一定的选择性遗传标记基因,转化@#@或转染宿主细胞后可以使后者呈现出特殊的表型或遗传学特性,据此可进行转化子或重组子@#@的初步筛选。
@#@@#@
(2)基于克隆DNA序列检测法@#@Southern印迹杂交:
@#@根据毛细管作用的原理,使在电泳凝胶中分离的DNA片段转移并结合@#@在适当的滤膜上,然后通过与已标记的单链DNA探针的杂交作用以检测这些被转移的DNA@#@片段。
@#@@#@(3)基于外源基因产物检测法@#@如果目的基因产物能降解某些药物使菌株呈现出抗性标记,或者基因产物与某些药物作用是@#@显颜色反应,则可根据抗性或颜色直接筛选含目的基因的克隆子。
@#@@#@第五章基因的克隆一般方法@#@1、基因的克隆方法主要有哪些?
@#@并阐述其克隆原理(至少3种,都是书上找的,自选哈,@#@建议必选DDRT-PCR和SSH原因请看下题)?
@#@@#@1)差减杂交(SH@#@通过DNA复性动力学原理富集目的基因序列,并以此构建减数文库的方式来进行目的基因分@#@离克隆的。
@#@@#@2)抑制性差减杂交(SSH@#@SSH的核心技术是抑制性PCR它是一种将检测子cDNA单链标准化步骤和消减杂交步骤结合为一体的技术。
@#@其中标准化步骤均等了检测子中的cDNA单链丰度,而消减杂交步骤去除了@#@检测子和驱赶子之间的共同序列,使检测子和驱赶子之间不同的序列得到扩增。
@#@@#@3)差异显示PCR(DDRT-PCR@#@利用真核生物mRNA吉尾处有POLY(A)结构,在其3'@#@端设计象5'@#@-T11GA样引物,该引物可与mRNA、数的十二分之一结合,从而使这部分基因得到逆转录,同时结合5'@#@端的随机引物@#@(20条10-mer),可以使不同长度的基因得到扩增。
@#@@#@4)DNA代表性差异分析(DNARDA@#@代表性差别分析是通过突变型(驱赶DNAdriverDNA与野生型(检测DNAtesterDNA@#@基因组之间的差异来分离和鉴定突变基因的方法。
@#@@#@5)扩增限制性片段长度多样性(AFLP@#@基因组DNA经过限制性内切酶消化后,产生粘性末端。
@#@使用人工合成的短的双链接头,该接@#@头一端具有同样的内切酶识别粘性末端,互补连接后成为DNA莫板。
@#@接头和与接头相邻的酶@#@切片断的几个碱基序列作为引物的结合位点。
@#@@#@[@#@2、简单阐述差异显示PCR克隆基因的原理及其优缺点,有何应用?
@#@@#@主要原理:
@#@利用真核生物mRNA吉尾处有POLYYA)结构,在其3'@#@端设计象5'@#@-T11GA样引物,该引物可与mRNA总数的十二分之一结合,从而使这部分基因得到逆转录,同时结合5'@#@端的@#@随机引物(20条10-mer),可以使不同长度的基因得到扩增。
@#@@#@优点:
@#@@#@简便、灵敏、高效、省时,能快速显示mRNA勺组成。
@#@@#@所需的mRNA量少。
@#@@#@各样本mRNA勺差异可同时进行比较。
@#@@#@扩出的cDNA可直接用于测序、文库筛选等。
@#@@#@缺点:
@#@@#@假阳性条带多,对低丰度的基因表达不容易检测。
@#@@#@工作量大。
@#@@#@无法定量研究。
@#@@#@扩出的条带往往是3'@#@端比较短的UTR区的一段序列,提供的信息较少。
@#@@#@利用该技术,目前已有越来越多的差别表达基因得以分离和鉴定,在分子生物学和基因工程@#@研究领域发挥了极大的作用。
@#@(P221)@#@3、抑制性差减杂交的原理与应用。
@#@@#@原理:
@#@SSH的核心技术是抑制性PCR它是一种将检测子cDNA单链标准化步骤和消减杂交步骤结合为一体的技术。
@#@其中标准化步骤均等了检测子中的cDNA单链丰度,而消减杂交步骤@#@去除了检测子和驱赶子之间的共同序列,使检测子和驱赶子之间不同的序列得到扩增。
@#@@#@应用:
@#@@#@基因突变体的研究:
@#@如基因的表达与不表达;@#@@#@基因时空表达的研究:
@#@如根、茎、叶;@#@@#@不同处理条件下的基因表达差异:
@#@如施肥与不施肥、光照与不光照。
@#@@#@4、酵母双杂交技术、噬菌体表面展示技术的原理。
@#@@#@A.酵母双杂交技术原理:
@#@大部分真核生物的位点特异转录激活因子通常具有两个可分隔开@#@的结构域,一个是DNA特异结合域(DNA-bingingdomain,BD),一个是转录激活域@#@(transcriptionalactivationdomain,AD)。
@#@这两个结构域各具功能,互不影响,但一个完@#@整的、具有激活特定基因表达的激活因子必须同时含有这两个结构域,否则无法完成其激活@#@功能。
@#@不同来源的激活因子的BD区与AD区结合后则能特异地激活BD结合基因的表达。
@#@@#@B.噬菌体表面展示技术原理:
@#@当外源DNA片段插入丝状噬菌体基因组的一个外被蛋白基因@#@中时,如果两者读码框结构保持一致,这个外源DNA片段所编码的产物可与此外被蛋白一起@#@以融合蛋白的形式表达,并显示在噬菌体的表面。
@#@利用抗此外源基因编码产物(多肽或蛋白)的抗体,通过亲和纯化,就能从大量的噬菌体中富集、分离出含有所要的基因的融合噬菌体。
@#@@#@然后,通过基因扩增,得到大量所要的目的基因。
@#@@#@5、T-DNA标签法克隆基因的一般技术路线。
@#@@#@农杆菌侵染植物得到转化苗,筛选出表现某种突变性状的个体。
@#@@#@建立突变体基因组文库及野生型基因组文库@#@用T-DNA片段做probe筛选突变体文库,获得阳性克隆。
@#@@#@用获得的阳性克隆筛选野生型基因组文库,获得野生型的阳性克隆。
@#@把阳性克隆转化突变体进行功能互补及进行测序分析。
@#@@#@第七章克隆基因的表达@#@1通过比较,分析大肠杆菌表达系统和酵母表达系统各有何优缺点。
@#@大肠杆菌表达外源基因的优势:
@#@@#@全基因组测序,共有4405个开放型阅读框架;@#@@#@基因克隆表达系统成熟、完善;@#@@#@繁殖迅速、培养简单、操作方便、遗传稳定;@#@@#@被FDA批准为安全的基因工程受体生物。
@#@大肠杆菌表达外源基因的劣势:
@#@@#@缺乏对真核生物蛋白质的复性功能;@#@@#@缺乏对真核生物蛋白质的修饰加工系统;@#@@#@内源性蛋白酶降解空间构象不正确的异源蛋白;@#@@#@周质内含有种类繁多的内毒素。
@#@@#@甲醇酵母表达系统的优点:
@#@@#@具有强的受严格调控的AOX1启动子@#@表达蛋白的翻译后的加工和修饰@#@营养要求低,工业化生产成本低@#@可高密度发酵@#@表达蛋白可存在于胞内和胞外@#@酵母表达系统的缺点:
@#@酵母表达蛋白有时会出现蛋白切割问题(这个找不到,XX的)@#@2、如何提高克隆基因的表达水平?
@#@@#@1)、表达载体的优化设计;@#@@#@2)、提高目标基因mRN和目标基因产物的稳定性;@#@@#@3)、密码子偏爱性;@#@@#@4)、表达环境条件的优化。
@#@@#@3、克隆基因目的蛋白的表达的形式主要有哪些类型?
@#@@#@表达蛋白按溶解特性通常包括:
@#@不溶性蛋白和可溶性蛋白两类,具体包括如下几种结构形态:
@#@包涵体型蛋白、融合型蛋白、分泌型蛋白@#@5、表达载体和基因工程一般克隆载体在元件构成上有何差别?
@#@@#@表达载体:
@#@启动子;@#@终止子;@#@核糖体结合位点(SD序列);@#@筛选标记;@#@复制子(质粒拷贝数);@#@多克隆位点@#@克隆载体:
@#@筛选标记;@#@复制子(质粒拷贝数);@#@多克隆位点@#@第八章植物基因工程@#@2、外源基因导入植物的方法主要有哪些?
@#@@#@物理方法:
@#@电击法、基因枪法(biolistic)、显微注射法、微激光束法@#@化学方法:
@#@PEG介导法、脂质体介导法@#@生物学方法:
@#@农杆菌介导法、花粉管通道法@#@四•问答题@#@
(一)简答@#@4.某学生在用EcoRI切割外源DNA片段时,出现了星号活性,请分析可能的原因。
@#@答:
@#@盐离子浓度不对,温度不对,甘油浓度过高。
@#@@#@5.在序列5'@#@-CGAACATATGGAGT-中含有一个6bp的II类限制性内切核酸酶的识别序列,@#@该位点的序列可能是什么?
@#@@#@答:
@#@回文序列是5'@#@-CATATG-3'@#@。
@#@@#@6.下面几种序列中你认为哪一个(哪些)最有可能是II类酶的识别序列:
@#@GAATCGAAATTT@#@GATATC@#@ACGGC?
@#@为什么?
@#@@#@答:
@#@GATATC和AAATTT因为它们是回文序列。
@#@@#@7.用Klenow酶填补的办法可使5'@#@黏性末端转变成平末端。
@#@这种方法常使DNA上的某些限制酶的识别位点消失。
@#@请问,对于下列限制酶,用这种方法处理会不会使它们的识别序列@#@都消失?
@#@BamHI(GJGATCC)TaqI(TJCGA、BssHII(GJCGCGC)@#@答:
@#@BssHII不会。
@#@@#@四、问答题@#@2.DNA连接酶的作用特点有哪些?
@#@@#@1连接反应需要在一条DNA链的3'@#@末端具有一个游离的-0H,而另一条DNA链的5'@#@末端具有一个磷酸基团(-P)的情况下,才能发挥其连接DNA分子的功能作用,而在末端带有5'@#@-羟基和3'@#@-羟基;@#@5'@#@-磷酸和3'@#@-二脱氧核苷基团的两个DNA片段之间不起连接作用。
@#@@#@2连接反应中需要ATP或NAD+和Mg2+为辅助因子和激活因子;@#@@#@3DNA连接酶不能够连接两条单链的DNA分子,被连接的DNA链必须是双螺旋的一部分。
@#@@#@4DNA连接酶只封闭双螺旋DNA骨架上的缺口(Nick),即在双链DNA的某一条链上两个@#@相邻核苷酸之间失去一个磷酸二酯键所出现的单链断裂,而不能封闭双链DNA的某一条链@#@上失去一个或数个核苷酸所形成的裂口(Gap)。
@#@@#@3.影响DNA连接酶连接反应的因素主要有哪些?
@#@@#@答:
@#@1)反应温度:
@#@最佳反应温度37C,但黏性末端之间退火形成的氢键结合不稳定,连接黏性末@#@端的最佳温度,一般认为4〜20C比较合适。
@#@@#@2)DNA片段末端:
@#@不仅要考虑反应体系中DNA末端的总浓度,还要考虑载体与插入片段的@#@末端浓度的比例。
@#@原则上应保证一个DNA分子的末端有较高的几率与另一DNA分子连接,@#@减少同一个分子两个末端之间的自身连接。
@#@载体与插入片段3:
@#@1~1:
@#@3。
@#@@#@3)连接酶浓度:
@#@平末端DNA分子的连接反应,最适酶量大约是1〜2单位;@#@而黏末端DNA片@#@段间的连接,在同样的条件下,仅为0.1单位时,便能得到最佳连接效率。
@#@@#@四、问答题@#@1.YAC载体具有什么样的?
@#@为什么在克隆大片段时,YAC具有优越性?
@#@@#@答:
@#@
(1)功能性DNA序列:
@#@@#@1来自于酵母的125bpDNA片段的着丝点序列(CEN4)。
@#@@#@2来自酵母的自主复制序列(ARS1),起始在酵母中的DNA复制。
@#@@#@3来自酵母的端粒序列,它是(5-TGTGGGTGTGGTG-3的多拷贝重复,它对染色体的复制和维持是必需的。
@#@@#@4在酵母中进行选择的标记基因,URA3(尿嘧啶生物合成基因)和TRP1(色氨酸合成基因)。
@#@@#@寄主是这些基因的营养缺陷性,只有带有这些基因的转化体才能在选择培养基上生活@#@5具有细菌的复制起始点和选择标记基因。
@#@YAC载体通常含有ColEI的ori和氨苄青霉素@#@抗性标记基因,可以在大肠杆菌中复制和繁殖,所以它也是一种穿梭载体。
@#@@#@
(2)优越性:
@#@YAC能够容纳长达上千kb的外源DNA这是质粒和黏粒办不到的。
@#@大片段的插入更有可能包含完整的基因,在染色体步移中每次允许更大的步移距离,同时能够减少完@#@整基因组文库所需的克隆数目。
@#@@#@3•举例说明什么是穿梭载体?
@#@@#@答:
@#@穿梭载体是含有细菌质粒和克隆的真核生物DNA片段的杂种质粒,有两个复制起点和@#@能在两种不同细胞中进行选择的选择标记,所以,很容易从一宿主转到另一个宿主(来回穿@#@梭)。
@#@@#@5.什么是YAC?
@#@YAC克隆载体常出现哪些问题?
@#@@#@答:
@#@YAC即酵母人工染色体(YeastArtificialChromosome)的缩写,是人工构建的染色体样大容量克隆载体,基本组成有着丝点、能在细菌和酵母中进行复制的复制起始点和选择标记及端粒。
@#@最大DNA克隆片段可达到2000kb。
@#@@#@问题有:
@#@
(1)YAC有嵌合现象,一个YAC中克隆的DNA片段可能来自两个或多个不同的染色体。
@#@在基因组文库中,嵌合体占克隆总数的10%〜60%。
@#@@#@
(2)YAC内部有重组现象,插入的DNA较大,序列发生重排,导致和原来染色体的序列不@#@一致,重组很难检出。
@#@@#@(3)YAC还有缺失现象,影响YAC文库的代表性。
@#@@#@(4)YAC结构和酵母天然染色体结构相似,使用常规方法不易将YAC和酵母天然染色体分@#@开。
@#@@#@(5)构建好的YAC转化原生质化的酵母菌,转化效率低。
@#@@#@(6)建好库后保存方便,但要筛选某个基因时工作量大@#@6.什么是BAC?
@#@BAC载体的组成与优缺点有哪些?
@#@@#@1细菌人工染色体(BAQ是从大肠杆菌F因子改造构建而来的,能够携带大约300kb的@#@DNA插入片段。
@#@@#@2载体具有F因子的复制起始点(oriS),可使载体维持每个细胞一个拷贝的水平。
@#@@#@3载体包括有4个维持DNA复制和拷贝数目的基因,repE,parA,parBandparC。
@#@@#@4具有一个抗生素选择标记基因,和lacZ'@#@基因。
@#@在lacZ'@#@基因中组装有一多克隆位点,@#@便于外源片段的插入和蓝白反应筛选克隆子。
@#@@#@5插入的DNA片段非常稳定,可以在大肠杆菌细胞中维持数百代,而且不易发生重组和从@#@寄主细胞中丢失。
@#@@#@6主要缺点是每个细胞中的拷贝数少(1~2个),使得分离和筛选较为困难。
@#@@#@7•利用pBR322质粒插入失活分离带有外源DNA片段的重组克隆的原理是什么?
@#@@#@1外源DNA片段插入在pBR322质粒tetr基因的编码序列内(BamH)位点,使该基因失活;@#@@#@2体外重组反应混合物转化大肠杆菌ampstets菌株,并涂布在amp琼脂平板上,凡获得@#@了pBR322质粒和重组质粒(AmprTets)的寄主细胞都可长成菌落;@#@@#@3将amp琼脂上的菌落原位影印在tet琼脂平板上生长,对比这两个平板的菌落生长情@#@况,凡在amp平板上能够生长而在tet平板上不能生长的菌落,便是属于带有重组体质粒的转化子克隆;@#@挑出这样的阳性克隆,扩增分离带有外源DNA插入片段的重组体质粒。
@#@@#@8.PUC质粒利用a-互补作用筛选重组子原理是什么?
@#@@#@答:
@#@pUC系列质粒载体是在PBR322质粒载体基础上改造来的,它用lacZ'@#@基因取代了@#@PBR322质粒载体上的tetr基因。
@#@lacZ'@#@基因编码B-半乳糖苷酶的N末端1-63个氨基酸(a-肽链)的DNA片段,在lacZ'@#@基因内组入了一个多克隆位点(MCS,但不影响lacZ'@#@@#@基因的功能。
@#@pUC载体的宿主(E.coli)携带一个编码B-半乳糖苷酶C端序列的基因片段,它们本身用这个基因片段产生的B-半乳糖苷酶片段是无活性的,但它们可以通过a-@#@互补作用在体内相互弥补,即两部分产物可以结合形成有活性的B-半乳糖苷酶。
@#@当pUC质@#@粒引入大肠杆菌中,在含有指示剂X-gal和IPTG的诱导培养基上培养时,菌落成蓝色。
@#@@#@如果在MCS插入外源DNA片段(基因),破坏了lacZ'@#@基因的功能(插入失活),不再产生a-肽链,不能和宿主细胞产生的多肽片段形成有活性的B-半乳糖苷酶,形成的菌落是无@#@(白)色的。
@#@因此,根据这种B-半乳糖苷酶的显色反应,便可以检测出含有外源DNA插入序@#@列的重组体克隆。
@#@@#@9•自然界中具备理想条件的质粒载体为数不多,即使是ColE1和pSCI01这两个自然质粒@#@也不尽如人意,通常需要进行改造。
@#@请问质粒改造包括哪些基本内容?
@#@@#@答:
@#@@#@基本内容包括:
@#@@#@
(1)删除一些非必要的区段及对宿主有不良影响的区段;@#@削减载体的分子质量,使载体具有@#@更大的容纳外源片段的能力。
@#@@#@
(2)加上易于选择或检测的标记。
@#@@#@⑶限制性内切核酸酶的酶切位点的改造,便于外源基因插入到载体中的特定位置。
@#@@#@(4)加上一些调控元件,有利于克隆基因的表达。
@#@@#@(5)安全性改造,限定载体的宿主范围。
@#@@#@10.质粒制备的基本原理?
@#@@#@答:
@#@带有质粒的细菌细胞在SDS作用下裂解,并在碱性条件下使DNA变性。
@#@调节pH值至@#@中性时质粒DNA首先复性,而细菌基因组DNA不能复性而与SDS-蛋白质形成复合体,可以被离心沉淀除去。
@#@上清液中的质粒DNA分子可被酒精沉淀或其他方法沉淀纯化出来。
@#@@#@四、问答题@#@1.入噬菌体DNA被包装到噬菌体的头部需要哪些基本条件?
@#@为什么?
@#@@#@答:
@#@①两个cos位点;@#@②线性DNA③分子大小在入噬菌体基因组的75%^105%@#@2.为什么野生型的入噬菌体DNA不宜作为基因工程载体?
@#@@#@答:
@#@
(1)噬菌体DNA没有容载能力,因为噬菌体的头部对DNA包装的量是有限制的,不能@#@大于基因组的105%,所以要将入噬菌体改造成载体,必须削减本身的分子大小;@#@@#@
(2)野生型的入DNA对于一些常用的酶都有多个识别和切割位点,不便于克隆;@#@@#@(3)没有可供选择的标记;@#@@#@(4)野生型的入噬菌体具有感染性,因此不够安全。
@#@@#@4.入噬菌体载体具有哪些优点与不足?
@#@@#@答:
@#@优点:
@#@
(1)入基因组中有1/3的非必需区可以被置换。
@#@改造成载体后,克隆的片段较@#@大(可达20kb),而质粒载体的克隆片段只有几个kb;@#@@#@
(2)用噬菌体入DNA作为载体,即使不进行体外包装,转染的频率也比质粒转化的效率高,@#@包装后的效率就更高了;@#@@#@(3)入可通过溶原化反应整合到寄主染色体上,当不需要外源基因大量表达时,可让它以@#@溶原性存在,若要表达,可通过诱导即可进入裂解途径,释放出大量的噬菌体,得到的重组@#@DNA的拷贝数就会很多。
@#@@#@缺点:
@#@
(1)包装比较麻烦,包装率不稳定,购买包装蛋白的费用高;@#@@#@
(2)没有质粒的用途广泛。
@#@@#@5•以置换型入噬菌体作为载体进行克隆时,为什么说能够形成噬菌斑的就一定是重组体?
@#@@#@答:
@#@改造的置换型噬菌体载体,重组入外源片段之后,总体积不能超过入基因组的105%,@#@不能小于又基因组的75%。
@#@以置换型入噬菌体DNA作为载体,首先要分离左、右两臂同外源DNA重组。
@#@如果没有外源片段,仅是两臂连接,长度短于久基因组的75%,不能被包入@#@噬菌体颗粒,就不能感染寄主,也就不能形成噬菌斑。
@#@如果插入了外源片段后,总长度超过@#@入基因组105%后,也不能包入噬菌体颗粒,自然也不能形成噬菌斑。
@#@@#@6.M13系列载体具有哪些优缺点?
@#@@#@答:
@#@M13克隆系统具有很多优点:
@#@@#@
(1)克隆的片段大:
@#@M13噬菌体的DNA在包装时不受体积的限制,所以容载能力大。
@#@有报@#@道,有些噬菌体颗粒可以包装比野生型丝状噬菌体DNA长6〜7倍的DNA(插入片段可达@#@40kb)。
@#@@#@
(2)可直接产生单链DNA这对于DNA测序、DNA诱变、制备特异的单链DNA探针都是十分有用的。
@#@@#@(3)单链DNA和双链DNA都可以转染宿主,并可根据人工加上的选择标记进行筛选。
@#@@#@M13克隆系列的不足:
@#@@#@
(1)较大的外源片段插入后,在扩增过程中往往不够稳定。
@#@一般说,克隆的片段越大,发生@#@丢失的概率越大。
@#@@#@
(2)单链载体分子感染的细胞中,往往是单链和双链混杂,分离双链比较麻烦。
@#@@#@7.黏粒载体具有哪些特点与不足?
@#@@#@答:
@#@主要特点有:
@#@@#@1柯斯质粒是含有入噬菌体COS位点的质粒载体。
@#@柯斯质粒具有质粒的复制子,进入寄主@#@细胞后能够像质粒一样进行复制,并且能够被氯霉素扩增。
@#@@#@2具有质粒载体的抗生素抗性基因的选择标记和克隆位点。
@#@@#@3插入片段的消化、连接及后来重组克隆的纯化与质粒载体相同。
@#@@#@4具有入噬菌体的包装和转导特性。
@#@与质粒载体转化细菌细胞不同,重组体像入载体一样,@#@需体外包装后转染细菌。
@#@@#@5包装后形成的入颗粒用来感染大肠杆菌,重组DNA像入DNA一样注入细菌细胞,并@#@以COS位点环化。
@#@由于缺乏入的其他DNA序列,环化DNA在细菌体内以质粒一样维持。
@#@@#@6简化了筛选。
@#@载体体积小,承载外源DNA片段大。
@#@如果载体的分子质量在5kb的话,@#@得到的转导子几乎排除由载体自连的可能性,因为要被成功包装,至少要7个分子的载体@#@自连。
@#@尽管如此,也是不能被包装的,因为COS位点太多了。
@#@重组体只有达到32-45kb才@#@能有效包装体外包装,这就提供了对重组体的正向选择。
@#@@#@7对转化体的选择是基于载体上的抗生素标记。
@#@@#@8感染后形成菌落,而不是噬菌斑。
@#@@#@黏粒载体也有如下不足:
@#@@#@1如果两个黏粒之间有同源序列,可能会发生重组,结果会使被克隆的片段重排或丢失。
@#@@#@2含不同重组DNA片段的菌落生长速度不同,会造成同一个平板上菌落大小不一。
@#@另外由@#@于不同大小的插入片段对宿主细胞的作用不同,会造成文库扩增量的比例失调。
@#@@#@3包装过程复杂,包装效率不稳定,代价高。
@#@@#@四、问答题@#@1怎样将一个平末端的DNA片段插入到EcoRI的限制位点中去?
@#@@#@答:
@#@可以化学合成一个连接子(linker),即一段长为lObp含有EcoRI识别位点的短的@#@DNA片段,@#@EcoRI切割这种连接片段,就会产生EcoRI的@#@2•构建基因组文";i:
4;s:
1192:
"几种电动机正反转星三角启动及能耗制动电路@#@几种电动机正反转星三角启动及能耗制动电路@#@ @#@@#@ @#@@#@————————————————————————————————作者:
@#@@#@————————————————————————————————日期:
@#@@#@ @#@@#@@#@断电/通电延时带直流能耗制动的星—三角起动控制线路@#@图1原理如下@#@大功率电动机双向星三角启动及能耗制动电路@#@大功率的电动机一般使用星三角启动的控制方式,以减少对电网及设备的冲击;@#@为了提高工效,停车时采用能耗制动的方式以利于设备的利用率;@#@本电路的控制要求如下:
@#@@#@1、双向启动均采用星三角减压方式;@#@@#@2、正、反转均设有点动控制功能;@#@@#@3、停车设有能耗制动;@#@@#@4、停车时先将电动机绕组首尾串联,然后进行制动,制动时间由时间继电器控制;@#@@#@5、点动操作时电动机只能作星接运行,能耗制动不起作用。
@#@@#@@#@正反转星三角启动带能耗制动电路图:
@#@@#@";}
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