安捷伦1200标准操作规程分解.docx

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安捷伦1200标准操作规程分解

Agilent1200液相色谱仪操作规程

设备组成：

G1311A（四元泵）、G1329A（标准型自动进样器）、

G1316A（柱温箱）、G1314B（VWD检测器）、

G1315D（DAD检测器）。

基本操作步骤：

（一）、开机：

1、打开计算机，进入WindowsXP画面。

（IP地址由BootpService程

序写入）

2、打开1200LC各模块电源。

3、待各模块自检完成后，双击仪器1联机”图标，或（点击屏幕左下

角的开始”选择程序”选择“AgilentChemstation,选择仪器1联

机”化学工作站自动与1200LC通讯，进入的工作站画面如下所示。

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4、从视图”菜单中选择方法和运行控制”画面，点击系统视图”样品视图”使其命令前有V”标志，来调用所需的界面。

5、把流动相放入溶剂瓶中6、手动旋开冲洗阀。

7、点击“泵”图标，点击“设置泵”选项，进入泵编辑画面。

8、设流速：

3-5ml/min，点击“确定”。

9、点击“泵”图标，点击“控制”选项，选中“启动”，点击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。

若使用缓冲盐，要加入泵头冲洗（seal-wash），点击泵”图标，点击控制”选项，选择“用于泵密封垫清洗的泵”，开启清洗泵前要配制90%水+10%异丙醇，溶剂不能干涸。

10、点击“泵”图标，点击“控制”选项，选中“关闭”，点击“确定”关泵，手动旋紧冲洗阀。

11、点击“泵”图标，点击“设置泵选项”，设流速：

1.0ml/min。

12、点击泵下面的瓶图标，选择“溶剂瓶添充量”如下图所示（以四元泵为例），输入溶剂的实际体积和瓶体积。

也可输入停泵的体积，点击“确定”。

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（二）数据米集方法编辑：

1、开始编辑完整方法：

从方法”菜单中选择编辑完整方法”项，如下图所示选中除数据分

析”外的三项，点击确定”进入下一画面。

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2、方法信息:

在方法注释”中加入方法的信息（如：

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）。

点击确定”

进入下一画面。

3、泵参数设定：

（以四元泵为例）

在流速”处输入流量，如1.5ml/min，停止时间：

10min。

在溶剂B”处输

入70.0,（A=100-B-C-D），也可插入”一行时间表”编辑梯度。

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画面。

4、自动进样器参数设定：

（以标准型G1329A为例）

选择合适的进样方式，如图所示，进样体积1.0ul，洗瓶位置为6号。

标准进样”----只能输入进样体积，此方式无洗针功能。

洗针进样”---可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针。

使用进样器程序”--可以点击编辑”按钮进行进样程序编辑点击确定”进入下一画面。

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5、柱温箱参数设定在温度”下面的空白方框内输入所需温度，如：

40度。

并选中它，点击更多信息>>”键，如图所示，选中与左侧相同”，使柱温箱的温度左右一致。

点击确定”，进入下一画面。

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6、VWD检测器参数设定：

在波长”下方的空白处输入所需的检测波长，如254nm,在峰宽（响应时间）'下方点击下拉式箭头，选择合适的响应时间，如＞0.1min（2s）。

G1314B:

最快采样速率13.74HZ。

在时间表”中可以插入”一行，输入随时间切换的波长，如1min，波

长=300nm。

点击确定”，进入下一画面。

7、DAD检测器参数设定：

检测波长：

254nm,带宽=4nm,参比波长=360nm,带宽=100nm;

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检测波长：

一般选择最大吸收处的波长

参比波长：

一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域。

参比带宽：

至少要与样品信号的带宽相等，许多情况下用100nm作为缺

省值。

峰宽（响应时间）：

其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。

狭缝-狭缝窄，光谱分辨率高；宽时，噪音低。

同时可以输入采集光谱方式，步长，范围,阈值。

选中所用的灯。

10、在“运行时选项表”中，选中“数据采集”，点击确定”。

11、从方法”菜单，选中方法另存为”，输入一方法名，如测试”，点击确定”。

12、从视图”菜单中，选中在线信号”，选中信号窗口1”，然后点击改变”钮，将所要绘图的信号移到右边的框中，点击确定”。

（如同时检测

选走的信号（为

硕（g|单元泵低力

二个信号，则重复10,选中信号窗口2”。

）

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可选信号（A）

附0C:

254nm处妝参比信号

VWDB：

2S4nm处的耒用参:

比比檯正&

住腥箱：

温虞（右）宙屈箱：

温度（左）

单元泵；谎速

13、从运行控制”菜单中，选择样品信息”选项，如下图所示，输入操

作者名称，如安装工程师”；在数据文件”中选择手动”或前缀/计数区别：

手动--每次做样之前必须给出新名字，否则仪器会将上次的数据覆盖掉。

前缀/计数器----前缀”框中输入前缀，在计数器”框中输入计数器的起始位，仪器会自动命名，如vwd数据0001,vwd数据0002。

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14、点击确定”，从仪器”菜单选择启动系统”

15、等仪器准备好，基线平稳，从运行控制”菜单中选择运行方法”进样。

（若无自动进样器，则基线平稳后，进样并搬动手动进样阀，启动运行。

）

（三）、数据分析方法编辑：

1、从视图”菜单中，点击数据分析”进入数据分析画面2、从文件”菜单选择调用信号”选中您的数据文件名，如下图所示

点击“确定”则数据被调出

3、做谱图优化:

从图形”菜单中选择信号选项”如下图所示。

从范围”中选择满量程”或自动量程”及合适的时间范围或选择自定义量程”调整。

反复

进行，直到图的比例合适为止。

点击“确疋

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4、积分：

从积分”菜单中选择积分事件”选项，如下图所示。

选择合适的斜率灵敏度”峰宽”最小峰面积”最小峰高”

从积分”菜单中选择积分”选项，则数据被积分。

如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。

点击左边V”图标，将积分参数存入方法。

5、打印报告:

从报告”菜单中选择设定报告”选项。

点击定量结果”框右侧的黑三角，选中面积百分比”其它选项不变。

点击“确定”

从报告”菜单中选择打印报告”则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，贝S点击报告”底部的打印”钮。

（五）、关机：

1、关机前，先关灯，用相应的溶剂充分冲洗系统。

2、退出化学工作站，依提示关泵，及其它窗口，关闭计算机（用shutdown关）。

3、关闭Agilent1200各模块电源开关。

（六）、Agilent1200LC维护保养：

1、色谱柱长时间不用，存放时，柱内应充满溶剂，两端封死（乙睛/甲

醇适于反相色谱柱，正相色谱柱用相应的有机相）。

2、手动进样器，当使用缓冲溶液时，要用水冲洗进样口。

3、流动相使用前必须过滤，不要使用多日存放的蒸馏水（易长菌）。

4、带seal-wash的1200,要配制90%水+10%异丙醇，开启seal-wash青洗

泵，溶剂不能干涸。