1、 取铂丝，用盐酸浸湿后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显砖红色。3和苯肼反应取本品约0.5g,置试管中，加水5 mL,微热溶解后，加冰醋酸0.7mL和新蒸的苯肼1mL，置水浴上加热30分钟，放冷，用玻璃棒擦试管的内壁，渐生成黄色的结晶。（二）含量测定：取本品5片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于葡萄糖酸钙1g），加水50毫升，微热使葡萄糖酸钙溶解，放冷至室温，移植至100mL容量瓶中，再用水稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取滤液25mL，加水75mL，加氢氧化钠溶液15mL和钙紫红素0.1g，用EDTA溶液滴定至溶液自紫色转变为纯蓝色。每1mLEDTA溶液（0.05mol/
2、L）相当于22.42mg的葡萄糖酸钙。标示量,（%）=VEDTA22.42100W1/（1000W2250.55）100% W1:5片药品的重量（g） W2: 称重溶解的药品重量VEDTA 滴定消耗的EDTA溶液的体积。实验二 葡萄糖的一般杂质检查一. 目的要求1了解葡萄糖的全检过程；2掌握氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐及炽灼残渣等一般杂质检查原理、操作方法及杂质限量计算；3掌握旋光法216定葡萄糖注射液含量的基本原理、操作方法及结果计算；4正确使用纳氏比色管、检砷器、高温炉及旋光仪，熟悉旋光仪的构造、以及保养。二. 基本原理葡萄糖分子结构中的五个碳都是手性碳原子，具有旋光性。一定条件下的
3、旋光度是旋光性物质的特性常数，测定葡萄糖的比旋度具有初步鉴别及估测纯度的意义。葡萄糖分子中具有醛基，还原碱性酒石酸铜生成红色氧化亚铜沉淀。本品除了检查氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属，砷盐等一般杂质外，还需检查溶液的澄清度和颜色（目的是检查水不溶性物质或有色杂质）、乙酸溶液的澄清度（目的是检查醇不溶性杂质，如蛋白质等）、亚硫酸盐和可溶性淀粉（因为制备时使用的醇可能带有亚硫酸盐，而可溶性淀粉为引入的中间体）。旋光度和溶液的浓度（c）和偏振光透过溶液的厚度（l）成正比。当偏振光通过厚1dm且每1ml中含有旋光性物质1g的溶液，使用光线波长为钠光D线（589.3nm），稳定温度为t记时，测得的旋光度称为
4、该物质的比旋度，以。葡萄糖的比旋度为52.75所以，测定葡萄糖溶液的旋光度可以求得其含量。三.实验操作一性状本品为无色结晶或白色结晶性或颗粒性粉末；无臭，味甜。取本品约10.81g精密称定，置100ml量瓶中，加水适量和氨试液0.2ml，溶解后水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，在25时测定比旋度，应为52.5至53.0二鉴别取本品约0.2g，加水5ml溶解后，缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中，即产生氧化亚铜红色沉淀。三检查1酸度 取本品2g，加新沸过的冷水20ml溶解后，加酚酞指示液3滴和氢化钠滴定浓（0.02mol/l）0.20ml，应显粉红色。2溶液的澄清度和颜色 取本品5g，置25ml纳
5、氏比色管中，加热水溶解后，放冷，用水稀释至10ml，溶液应澄清无色；如显浑浊，和号浊度标准液比较，不得更浓；如显色，和对照液（取比色用氯化钴溶液10ml，比色用重铬酸钾溶液30ml和比色用硫酸铜溶液20ml,加水稀释成100ml）0.4ml加水稀释至10ml比较，不得更深。3乙醇溶液的澄清度 取本品1g，加90%乙醇30ml，置水浴上加热回流约10min，溶液应澄清。4亚硫酸盐和可溶性淀粉 取本品1g，加水10ml溶解后，加碘试液1滴，应即显黄色。5干燥失重 取本品置和供试品同样条件下干燥至恒重的扁形称量瓶中，将供试品平铺于瓶底，厚度不超过5，加盖，精密称定。将称量瓶放入洁净的培养皿中，瓶盖半
6、开或置瓶旁，放入105干燥箱中干燥。取出后迅速盖好瓶盖，置干燥器内放冷至室温，迅速精密称重（放置时间和称重顺序和空称量瓶一致）。再于105干燥箱中干燥至恒重，即得。减失重量不得过9.5%。6蛋白质 取本品1.0g，加水10ml溶解后，加磺基水杨酸溶液（15）3ml，不得发生沉淀。7氯化物 取本品0.6g，置50ml纳氏比色管中，加水溶解使成约25ml（溶液如显碱性，可滴加硝酸使调pH试纸显中性），再加稀硝酸10ml（溶液如不澄清，应滤过），加水使成约40ml，摇匀，即得供试溶液。另取标准氯化纳溶液（10g/ml的Cl）6ml,置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水使成约40ml，摇匀，
7、即得对照溶液。于供试溶液和对照溶液中，分别加入硝酸银试液1ml，用水稀释至50ml，摇匀，在暗处放置5min，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比浊，供试溶液不得比对照溶液更浓（0.01%）。8硫酸盐 取本品2g，置50ml纳氏比色管中，加水溶解使成约40ml（溶液如显碱性，可滴加盐酸使遇pH试纸显中性；溶液如不澄清，应滤过）加稀盐酸2ml，摇匀，即得供试溶液。另取标准硫酸钾溶液（100gSO4/ml）2ml,置50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml，加稀盐酸2ml,摇匀，即得对照溶液。于供试溶液和对照溶液中，分别加入25%氯化钡溶液5ml,用水稀释至50ml,充分摇匀，放置10min，
8、同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比浊，供试溶液不得比对照溶液更浓（0.01%）。9铁盐 取本品2g，置50ml纳氏比色管中，加水20ml溶解后，加硝酸3滴，缓缓煮沸5min，放冷，加水稀释使成45ml,加硫氰酸铵溶液（30100）3ml,摇匀，如显色，和标准铁溶液（10gFe/ml）2ml用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.001%）。10重金属 取50ml纳氏比色管两支，甲管中加标准铅液（Pb8g/ml）一定量和醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml,用水稀释至25ml：若供试液带颜色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液，使之和乙管一致；再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺
9、试液各2ml,摇匀，放置2min，同置白纸上，自上向下透视，乙管中显出的颜色和甲管比较，不得更深（重金属不得过5ppm）。四.注意事项限度检查应遵循平行操作原则，即供试管和对照管的实验条件应尽可能一致，包括实验用具的选择、试剂和事业的量取方法及加入顺序、反应时间的长短等。1.比色、比浊前应使比色管内试剂充分混匀。比色方法是将两管同置于白色背景上，从侧面或自上而下观察；比浊方法是将两管同置于黑色背景上，从上向下垂直观察。所用比色管刻度高低差异不应超过2ml,使用过的比色管应及时清洗，注意不能用毛刷刷洗，可用硫酸洗液浸泡。一般情况下可取1份供试品进行检查，对供试品和对照管各复检2份，方可判定。五.
10、思考题1葡萄糖的检查项目中哪些属于一般杂质？哪些属于特殊杂质？试述它们的来源及检查意义。2亚硝酸盐和可溶性淀粉超标会出现什么现象？3氯化物、重金属及砷盐检查中的操作注意事项有哪些？比浊检查时为什么应将反应液稀释后再加沉淀剂？实验三 阿司匹林肠溶片的分析1. 熟悉片剂分析的项目和方法；2. 掌握阿司匹林鉴别实验的原理及和药物结构的关系；3. 掌握两步滴定法测定阿司匹林片含量的原理和操作，及容量分析法测定片剂含量的计算方法。 C9H8O4性状：本品为肠溶包衣片，除去包衣后显白色。本品含阿司匹林（C9H8O4）应为标示量的95.0%-105.0%1三氯化铁反应水杨酸及其盐在中性或弱酸性条件下，和三氯
11、化铁试液反应，生成紫堇色配位化合物。阿司匹林加热水解生成水杨酸，可用三氯化铁反应鉴别。2水解反应阿司匹林和碳酸钠试液加热，酯键水解，得水杨酸钠和醋酸钠，加过量稀硫酸酸化后，生成水杨酸沉淀，并发生醋酸得臭气，因此可用水解反应鉴别。（2）检查1阿司匹林游离水杨酸得检查a.杂质来源 游离水杨酸为阿司匹林生产中未反应的原料或贮存过程中的水解产物b.检查方法 阿司匹林无游离酚羟基，不和高铁盐溶液作用，而水杨酸则磕和之反应生成生成紫堇色此种方法称为对照法，极为灵敏，可检测出1ug的游离水杨酸。（3）含量测定阿司匹林分子结构中含有酯键，易水解成水杨酸和醋酸，片剂中为防止酯键水解加入少量酒石酸或枸橼酸做稳定剂
12、，因此在片剂中有酸性杂质，含量测定时为消除酸性杂质干扰，采用两步滴定法。第一步 中和，消除酸性杂质（酸性附加剂和降解产物）的干扰酒石酸枸橼酸水杨酸醋酸第二步 水解后剩余滴定（一）鉴别和三氯化铁反应取本品的细分适量（相当于阿司匹林0.1g）,加水10mL，煮沸，放冷，加三氯化铁试液一滴，即显紫堇色。（二）检查：游离水杨酸 取本品3片，研细，用乙醇30mL分次研磨，并移入100mL容量瓶中，充分振摇，用水稀释致刻度，摇匀，立即过滤，精密量取滤液10mL，致50mL纳氏比色管中，用水稀释致50mL，立即加新制的稀硫酸铁銨溶液（取1mol/L盐酸溶液1mL,加硫酸铁銨指示液2mL后再加水适量使成100
13、mL）3mL，摇匀，三十秒内如显色，和对照液（精密量取0.01%水杨酸溶液4.5mL，加乙醇3mL，0.05酒石酸溶液1mL，用水稀释致50mL,再加上述新制的稀硫酸铁銨溶液3mL,摇匀）比较，不得更深（1.5%）（三）含量测定： 取本品10片，研细，用中性乙醇70mL分数次研磨，并移入100mL容量瓶中，充分振摇，再用水适量洗涤研钵数次，洗液合并于100mL容量瓶中，再用水稀释致刻度，摇匀，过滤，精密量取滤液30mL（相当于阿司匹林0.3g），致锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）10mL,振摇，使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）致溶液显粉红色，再
14、精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40mL，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷致室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白实验校正，每1mL氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于18.02mgC9H8O4阿司匹林标示量， （四）注意事项：1掌握片剂的取样方法，并正确计算取样量范围。2中和操作要快，避免阿司匹林在碱中水解。3加碱、加热水解阿司匹林应不时振摇，保证水解完全；然后迅速放冷，尽量避免碱液在受热时吸收二氧化碳。实验四 过氧化苯甲酰凝胶的分析3.熟悉凝胶剂分析的方法；4.掌握阿过氧化苯甲酰凝胶分析的原理和操作。性状 本品为白色乳胶粘稠体. 本品含过氧化
15、苯甲酰（C14H10O4）应为标示量的90.0%110.0%本品具有氧化性，把碘化钾氧化为单质碘，再用硫代硫酸钠滴定生成的碘，根据消耗硫代硫酸钠溶液的体积即可计算出过氧化苯甲酰的含量。（一）鉴别 1取本品适量（约相当于过氧化苯甲酰50mg）, 加丙酮5mL，用玻棒挤压使过氧化苯甲酰溶解，加碘化钾试液2mL，溶液呈红棕色，加硫代硫酸钠试液5mL，红棕色应消失。2取本品适量（约相当于过氧化苯甲酰100mg）, 加丙酮10mL，用玻棒挤压，过滤，滤液作为供试溶液，另取过氧化苯甲酰标准品，用丙酮溶解并制成每1mL中含10mg的溶液作为对照液。吸取上述两种溶液各5微升，分别点于同一硅胶薄层板上，以甲苯-
16、二氯甲烷-冰醋酸（50:2:1）为展开剂，展开后，凉干，置紫外灯下（254nm）检示。供试品溶液所显主斑点的颜色和位置应和对照溶液的主斑点相同。（二）含量测定:精密称取本品适量（约相当于过氧化苯甲酰200mg），置100mL碘量瓶中，放置片刻，使供试品平铺于碘瓶底层，加丙酮30mL，用玻棒挤压使过氧化苯甲酰溶解完全，用少量丙酮冲洗玻棒，洗液并入溶液中，加碘化钾试液5mL，密塞，摇匀，于暗处放置10分钟，用硫代硫酸钠滴定液滴定至无色，用力振摇30秒，放置2分钟，如仍为无色，即为终点。1mL硫代硫酸钠（0.1mol/L）相当于12.11mg的过氧化苯甲酰.标示量（%）= c 硫代硫酸钠的浓度（mo
17、l/L）v消耗的硫代硫酸钠的体积（mL）m 称取的样品中按说明书的标示应含过氧化苯甲酰的质量（mg）（三）注意事项1样品转移要完全，玻棒上黏附的样品要全部冲洗到碘瓶中，否则测定结果偏低。2滴定终点的确定要准确，放置2分钟仍为无色，即为终点。实验五 盐酸小蘗碱片的分析1 . 掌握盐酸小蘗碱片鉴别实验的原理；2. 掌握氧化还原反应滴定法测定盐酸小蘗碱片含量的原理和操作。性状 本品为黄色片或糖衣片本品含盐酸小蘗碱（C20H18ClNO42H2O）应为标示量的93.0107.0%碱性溶液和丙酮作用生成沉淀本品水溶液和氢氧化钠试液作用生成季胺碱型小蘗碱而呈橙红色，再和丙酮作用生成黄色的丙酮小蘗碱沉淀。
18、橙红色黄色2氧化显色 本品溶于稀盐酸，可被漂白粉氧化而显樱红色。3和没食子酸作用而显色本品溶于硫酸，再和没食子酸的乙醇溶液作用，水浴加热后显翠绿色。（2）含量测定本品用重铬酸钾氧化后，剩余重铬酸钾以间接碘量法测定。用过量重铬酸钾滴定液氧化供试品中的盐酸小蘗碱，剩余的重铬酸钾将碘化钾氧化为碘，再用硫代硫酸钠滴定碘，即可测出剩余的重铬酸钾滴定液的毫升数，并以空白试验校正，测出重铬酸钾滴定液的总体积。空白试验和样品试验两次毫升数之差，即为氧化供试品所消耗的重铬酸钾滴定液的毫升数。1.取本品0.1g, 加水10mL, 缓缓加热溶解后，过滤，滤液备用，加氢氧化钠试液4滴，放冷（必要时过滤）,加丙酮8滴，
19、即发生浑浊。2.取本品约5mg，加稀盐酸2mL，搅拌，加漂白粉少量，即现樱红色3.取本品约0.1g, 加水20mL,缓缓加热溶解后，加硝酸0.3mL，冷却，放置10分钟，滤过，取滤液5mL, 加入硝酸银溶液，出现白色凝胶状沉淀。取本品20片，如为糖衣片，注意去除糖衣，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于盐酸小蘗碱0.3g）, 置烧杯中，加沸水150mL，搅拌，使盐酸小蘗碱溶解，放冷，移入250容量瓶中，精密加重铬酸钾滴定液50mL，加水至刻度，振摇5分钟，用干燥滤纸滤过，精密量取滤液100mL，置250mL具塞锥形瓶中，加碘化钾2g，振摇使溶解，加盐酸溶液10mL,密塞，摇匀，在暗处放置10
20、分钟，用硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液2mL，继续滴定至蓝色消失，溶液呈亮绿色，并将滴定的结果用空白实验校正。1mL重铬酸钾滴定液相当于12.39mg的C20H18ClNO42H2O。标示量=W1 20片总重gW2 供试品重gW3 供试品的标示量gC 硫代硫酸钠的浓度，mol/LV0 空白实验消耗硫代硫酸钠体积V1样品消耗硫代硫酸钠体积实验六 紫外分光光度法测定对乙酰氨基酚片的含量目的要求1熟悉片剂分析的基本操作；2掌握紫外分光光度法测定对乙酰氨基酚片含量的基本原理和方法。基本原理1药物 C8H9NO2 151.16本品为白色片、薄膜衣或明胶包衣片，除去包衣后显白色。含对乙酰氨
21、基酚（C8H9NO2）应为标示量的95.0%105.0%。2原理对乙酰氨基酚在0.4%氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。其片剂的溶液经干燥滤纸滤过，辅料不再干扰测定。仪器和试剂（一）仪器紫外-可见分光光度计、容量瓶、移液管、过滤装置。（二）试剂对乙酰氨基酚片、0.4%氢氧化钠溶液实验操作取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于对乙酰氨基酚40），置250ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50ml及水50ml，振摇15min，加水至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml
22、，加水至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法（中国药典2005年版二部附录A），在257nm的波长处测定吸光度，按C8H9NO2的吸光系数（）为715计算，即得。标示量%=式中 V为溶液的体积，ml。注意事项1对乙酰氨基酚片中含有辅料，因此紫外分析前应进行过滤操作。本实验先定容，后过滤，过滤时，所用仪器均需干燥。弃去初滤液，量取续滤液进行分析，以保持浓度的一致，从而保证结果的准确。2本实验用吸光系数法测定含量，其优点是操作简便、快捷，不必用对照品。但该法受仪器精度、操作及环境因素等影响较大，因此测定前必须对紫外-可见分光光度计进行校正和检定，波长、吸光度的准确度、杂散光均应符合要求，才能保证结果
23、的准确。3吸光系数法通常都是在最大吸收波长出测定吸光度，因为在此波长处测定灵敏度高，且波长稍有偏差对吸光度影响不大。4紫外-可见分光光度法测定时，除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用1的石英吸收池，在规定的吸收峰波长2nm以内测试几个点的吸光度，或由仪器在规定波长附近自动扫描测定，以核对供试品的吸收峰波长位置是否正确。除另有规定外，吸收丰波长应在该品种项下规定的波长2nm以内，并以吸光度最大的波长作为测定波长。思考题1简述片剂过滤得操作要点。2采用吸光系数法测定药物含量时，是否要对仪器进行校正和检定，为什么？实验七 维生素AD滴剂中维生素A的鉴别和含量测定一、目的要求1复
24、习并掌握维生素A鉴别反应的实验原理。2复习并掌握三点校正法测定维生素A含量的实验原理。3掌握三点校正法测定维生素A含量的操作方法。4掌握三点校正法的计算方法。5掌握滴剂的含量测定步骤及其计算方法。二、仪器及试药（一）器材紫外-可见分光光度仪，比色皿，电热恒温干燥箱，万分之一分析天平，托盘天平（精度0.01g），称量瓶，称量纸，药匙，研钵，量筒（5ml、10ml、50ml、100ml），胶头滴管，刻度吸管（1ml、2ml），容量瓶（100ml），计算器，温度计，湿度计（二）试药维生素AD滴剂，纯化水，三氯甲烷（分析纯，无水乙醇），三氯化锑（分析纯），环己烷（分析纯）三、实验准备25%三氯化锑的三
25、氯甲烷溶液：取三氯化锑25g，加三氯甲烷使溶解成100ml，即得。四、实验原理及方法（一）鉴别三氯化锑反应实验原理：维生素A在饱和无水三氯化锑的无醇氯仿溶液中即显蓝色，渐变紫红。反应机理为维生素A和三氯化锑（）中存在的亲电试剂氯化高锑（）反应，生成不稳定的蓝色碳正离子，反应式如下：实验方法：取本品，加三氯甲烷稀释成每1ml中含维生素A1020U的溶液；取1ml，加25%三氯化锑的三氯甲烷溶液2ml，即显蓝色至蓝紫色，放置后，蓝色渐消褪。（二）含量测定三点校正法用分光光度法测定维生素A在特定波长处的吸光度来计算其含量。由于维生素A制剂中含有稀释用油，且维生素A原料药中混有其他杂质，因此测定吸光度
26、中含有无关吸收引入的误差，需用校正公式校正以得到正确结果。其详细内容参见附录-D。取装量项下的内容物适量，精密称定，加环己烷溶解并定量稀释制成每1ml中含915U的溶液，照紫外-可见分光光度法，测定其吸收峰的波长，并在表9所列各波长处测定吸光度，计算各吸光度和波长328nm处吸光度的币值和波长328nm处的值。表9 维生素A测定第一法的药典规定值波长（nm）测得吸光度吸光度比值计算值药典规定值300316328340360A1A2A3A4A5A1/A3A2/A3A3/A3A4/A3A5/A30.5550.9071.0000.8110.299如果吸收峰波长在326329nm之间，且所测得各波长吸
27、光度比值不超过表中规定的0.02,可用下式计算含量：每1g供试品中含有的维生素A的单位=（328nm）1900如果吸收峰波长在326329nm之间，但所测得的各波长吸光度比值超过表中规定值的0.02，应按下式求出校正后的吸光度，然后再计算含量：A328（校正）=3.52（2A328-A316-A340）如果在328nm处的校正吸光度和未校正吸光度相差不超过3.0%，则不用校正吸光度，仍以未经校正的吸光度计算含量。如果校正吸光度和未校正吸光度相差在-15%至-3%之间，则以校正吸光度计算含量。如果校正吸光度超出未校正吸光度的-15%至-3%的范围，或者吸收峰波长不在326329nm之间，则供试品
28、须按下述第二法测定。第二法的详细描述参见附录-D。中国药典（2005）规定，本品含维生素A应为标示量的90.0%120.0%。五、注意事项1鉴别反应必须在无水、无醇的条件下进行。因此，所用仪器必须干燥无水，所用试剂必须为无水试剂，所用三氯甲烷中必须不含醇。2维生素A遇光易氧化变质，实验应尽量在暗处快速进行。3维生素A测定注意事项的详细描述参见附录-D。4紫外-可见分光光度法注意事项的详细描述参见附录-A。5滴剂分析注意事项的详细描述参见附录-D。六、计算维生素A的含量测定计算参见含量测定中的实验方法及附录-D相关内容。七、思考题1鉴别反应为何必须在无水、无醇的条件下进行？2为何不直接以紫外-可见分光光度法测定维生素A的含量，而要采用较为繁琐的三点校正法？用于测定的三点该如何选择？3使用三点校正法测定维生素A的含量，何时采用第一法，何时采用第二法？第二法如何操作？4计算式中的参数1900是如何得来的？实验八 牛黄解毒片的鉴别1.掌握中药制剂定性分析的一般原理和方法;2.掌握牛黄解毒片的原理及有关操作.1.处方 人工牛黄
