1、催化相同黏性末端的DNA片段之间的连接催化不同黏性末端的DNA片段之间的连接催化两个黏性末端互补碱基间氢键的形成催化两个核苷酸之间的磷酸二酯键的形成A B C D答案D解析在DNA重组技术中，两个DNA片段间必须有相同黏性末端才能互补配对，进行结合；具有相同黏性末端的DNA分子连接时，DNA连接酶的作用是催化两个核苷酸之间的磷酸二酯键的形成，即把“梯子”的“扶手”缝合起来。故正确答案为D。4水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中Asp、Gly、Ser构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是（）A促使目的基因导入宿主细胞中B促使目的基因在宿主细胞
2、中复制C使目的基因容易被检测出来D使目的基因容易成功表达5限制酶是一种核酸内切酶，可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制酶BamH、EcoR、Hind和Bgl的识别序列和切割位点，切割出来的DNA黏性末端可以互补配对的是（）ABamH和EcoR BBamH和HindCBamH和Bgl DEcoR和Hind解析BamH切割出来的DNA黏性末端是GATC，Bgl切割出来的DNA黏性末端也是GATC，它们可以互补配对。6下列有关基因工程操作的叙述，正确的是（）A用同种限制性核酸内切酶切割载体与目的基因可获得相同的黏性末端B以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相
3、同C检测到受体细胞含有目的基因就标志着基因工程操作的成功D用含抗生素抗性基因的质粒作为载体是因为其抗性基因便于与外源基因连接答案A解析一种氨基酸可对应多个密码子，以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列可能不同。只有目的基因在受体细胞中成功表达才标志着基因工程操作的成功。用含抗生素抗性基因的质粒作为载体，是因为抗性基因作为标记基因可检测载体是否导入到受体细胞中。7在基因工程中，为将目的基因导入受体细胞常采用土壤农杆菌转化法，在土壤农杆菌中常含有一个Ti质粒。某科研小组欲将某抗虫基因导入某植物，下列分析错误的是（）ATi质粒含有对宿主细胞生存具有决定性作用的基因，是基因工程中重
4、要的载体B用Ca2处理细菌是重组Ti质粒导入土壤农杆菌中的重要方法C重组Ti质粒的土壤农杆菌成功感染植物细胞，可通过植物组织培养技术将该细胞培养成具有抗虫性状的植物D若能够在植物细胞中检测到抗虫基因，则说明将重组质粒成功地导入到了受体细胞解析Ti质粒是基因工程中重要的载体，不含有对宿主细胞生存具有决定性作用的基因；用Ca2处理细菌可增加细胞壁的通透性，是重组Ti质粒导入土壤农杆菌中的重要方法；转基因成功的植物细胞，可通过植物组织培养技术获得转基因植物。在植物细胞中检测到抗虫目的基因，说明目的基因已成功导入，但不能证明其能表达。8下图表示基因工程中获取水稻某目的基因的不同方法。下列相关叙述中正确
5、的是（）A这三种方法都用到酶，都是在体外进行B碱基对的排列顺序均相同C图示a、b、c三种方法均属于人工合成法D方法a不遵循中心法则解析由图示可知a为反转录法获得目的基因，用到逆转录酶；b为直接从生物体获得目的基因，用到限制酶；c为用PCR技术扩增获取目的基因，用到Taq酶，且三种方法均在生物体外进行，故A正确。9下列关于基因文库的说法，错误的是（）A可分为基因组文库和部分基因文库BcDNA文库属于部分基因文库C基因组文库的基因在不同物种之间均可进行基因交流D同种生物的cDNA文库基因数量较基因组文库基因数量少解析基因组文库只有部分基因能够在不同物种之间进行基因交流。故正确答案为C。10在用基因
6、工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是（）A用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸B用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C将重组DNA分子导入烟草原生质体D用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞解析限制性核酸内切酶切割的是DNA，而烟草花叶病毒的遗传物质为RNA，A错；目的基因与载体的连接由DNA连接酶催化连接，B正确；烟草原生质体可以作为受体细胞，C正确；目的基因为抗除草剂基因，所以未成功导入目的基因的细胞不具有抗除草剂的能力，筛选的时候应该用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞，D正确。11下列技术依据DNA分子杂交原理的是（）观察DNA在细胞中的分布检测目的基因是
7、否整合到受体细胞染色体DNA上检测目的基因是否翻译检测目的基因是否进行转录A B C D解析解题流程如下：12工程菌是指（）A用物理或化学方法，诱发菌类自身某些基因得到高效表达的菌类细胞株系B用遗传工程的方法，使同种不同株系的菌类杂交，得到的新细胞株系C用基因工程的方法，使外源基因得到高效率表达的菌类细胞株系D从自然界中选取能迅速增殖的菌类解析工程菌是指用基因工程的方法，使外源基因得到高效率表达的菌类细胞株系。本题A项是诱变育种的例子；B项是杂交育种的例子；D项是最传统的育种方式选择育种。13科学家运用基因工程技术，将人凝血因子基因导入山羊的DNA中，培育出羊乳腺生物反应器，使羊乳汁中含有人凝
8、血因子。以下有关叙述，正确的是（）A可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵B在该转基因羊中，人凝血因子存在于乳腺细胞，而不存在于其他细胞C人凝血因子基因开始转录后，DNA聚合酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNAD科学家将人凝血因子基因与乳腺蛋白基因重组在一起，从而使人凝血因子基因只在乳腺细胞中特异表达解析目的基因导入受精卵中，因此转基因羊的体细胞中都含有目的基因；DNA聚合酶催化DNA复制过程，而不作用于转录；乳腺蛋白基因的启动子与人凝血因子基因重组在一起，导入受精卵中。14上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带人白蛋白的转基因牛，他们还研究出一种可大大提高基因
9、表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍。标志着我国转基因研究向产业化的目标又迈进了一大步。下列有关的叙述中，正确的是（）A所谓“提高基因表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因B可将白蛋白基因导入牛的卵细胞中，通过组织培养形成转基因牛C人们只在转基因牛的乳汁中才能获取人白蛋白，是因为只在转基因牛的乳腺细胞中才有人白蛋白基因D运用基因工程技术让牛合成人白蛋白，该技术将导致定向变异解析“提高基因表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中的人白蛋白基因合成出更多的蛋白质；动物细胞的全能性变窄，用牛的卵细胞不能培养形成转基因牛；转基因牛的细胞中都含有人白蛋白基因，人们只
10、在转基因牛的乳汁中才能获取人白蛋白，是因为人白蛋白基因只在转基因牛的乳腺细胞中表达。15科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中，在医学研究及相关疾病治疗方面都具有重要意义。下列有关叙述错误的是（）A选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞具有全能性B采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达C人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用D将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代答案B解析受精卵的全能性最高；采用DNA分子杂
11、交技术可检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因；人的生长激素基因能在小鼠细胞中表达，说明生物共用一套遗传密码；通过克隆产生的后代相同。16下列关于基因工程的叙述，错误的是（）A目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶C人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达解析人胰岛素原合成后，须经内质网和高尔基体的加工，才能形成具生物学活性的胰岛素。而大肠杆菌是原核生物，没有内质网和高尔基体，因此在大肠杆菌中表达后无生物活性。载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞，但由于
12、它和目的基因是相互独立的，并不能促进目的基因的表达。17某研究小组为了研制预防禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图。A步骤所代表的过程是反转录B步骤需使用限制性核酸内切酶和DNA连接酶C步骤可用CaCl2处理大肠杆菌，使其从感受态恢复到常态D检验Q蛋白的免疫反应特性，可用Q蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原抗体特异性反应实验解析由图可知，步骤所代表的过程是反转录；步骤需使用限制性核酸内切酶和DNA连接酶；步骤可用CaCl2处理大肠杆菌，使其细胞从常态转化为感受态；检验Q蛋白的免疫反应特性，可用Q蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原抗体特异性反应实验。18利用基因工程技
13、术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如图所示，下列叙述正确的是（多选）（）A过程需使用逆转录酶B过程需使用解旋酶和PCR获取目的基因C过程使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备D过程可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞答案AD解析A项，过程是通过逆转录获取DNA，逆转录过程需要用到逆转录酶；B项，过程指的是从cDNA文库中获取目的基因，不需要利用PCR技术，也用不到解旋酶；C项，过程中使用的感受态细胞要用CaCl2溶液制备，而不是用NaCl溶液制备；D项，过程鉴定目的基因是否已经导入受体细胞，可以用标记的目的基因为探针来检测受体细胞中是否存在目的基因，即利用DNA分子杂交鉴定。二、
14、非选择题（本题共4个小题，共46分）19（11分）下图表示从苏云金芽孢杆菌分离出来的杀虫晶体蛋白质基因（简称Bt基因）及形成转基因抗虫棉的图解。请据图回答下面的问题：（1）图中a过程要用到的酶是_。（2）在进行图中b过程时，可以采用的十分简便经济的方法是_，此外，也经常采用_法。若要培育转基因绵羊，则此过程要用到的方法是_。（3）为确定抗虫棉是否培育成功，既要用放射性同位素标记的_作探针进行分子杂交测试，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是_。（4）活化的毒性物质应是一种_分子，可以全部或部分嵌合于昆虫的细胞膜上，使细胞膜产生孔道，导致细胞由于渗透平衡的破坏而破裂。（5）我国在“863”计划资
15、助下开展Bt抗虫棉、抗虫水稻等研究，可以减少农药、杀虫剂的使用，这将对_起到重要作用。答案（1）限制性核酸内切酶（2）花粉管通道法农杆菌转化显微注射技术（3）杀虫晶体蛋白质基因（或Bt基因、目的基因）让害虫吞食抗虫棉叶子，观察害虫的存活状态（或其他合理答案）（4）多肽（5）环境保护解析（1）图中a过程是提取目的基因，用到的酶是限制性核酸内切酶。（2）b为将目的基因导入受体细胞。花粉管通道法是我国科学家所创，此外还有农杆菌转化法、基因枪法等将目的基因导入植物细胞的方法，常用的是农杆菌转化法。（3）检测目的基因是否导入受体细胞的方法，可在分子水平检测和个体水平检测等。（4）活化毒性物质是晶体蛋白在
16、蛋白酶的作用下得到的，是多肽。（5）减少农药、杀虫剂的使用必然有利于环境保护。20（13分）农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞采用最多的方法。下图为农杆菌转化法示意图，请据图回答问题：（1）Ti质粒多存在于细菌中，它是能自我复制的_。（2）获取外源基因（目的基因）需要限制酶的参与，而目的基因在重组过程中需要_酶的参与，并依据碱基_原则进行重组。（3）Ti质粒原存在于_中，其上的TDNA具有可转移到受体细胞并整合到受体细胞的_上的特点，因此携带外源基因的DNA片段必须插入到_部位。（4）农杆菌转化法适于将目的基因导入_和祼子植物，而不易于感染大多数_。（5）若将相关的目的基因导入动物细胞或微生
17、物细胞则常采用_和_。答案（1）小型环状DNA分子（2）DNA连接互补配对（3）农杆菌细胞质染色体DNATDNA片段（内部）（4）双子叶植物单子叶植物（5）显微注射技术Ca2处理法解析将目的基因导入受体细胞的方法多种多样，应根据受体细胞的类型和目的基因的特点分别采用相应的方法。农杆菌转化法适于将目的基因导入植物细胞，而显微注射技术和Ca2处理法分别适于将目的基因导入动物细胞和微生物细胞。21（10分）下面是口蹄疫疫苗生产过程示意图，请据图回答下列问题：（1）首先从口蹄疫病毒中提取部分合成病毒蛋白的RNA，而不是用口蹄疫病毒的全部RNA，原因是合成病毒蛋白的RNA控制合成的病毒蛋白质，具有_特性
18、，又不会使动物致病。以合成病毒蛋白的RNA产生病毒蛋白的DNA，需用到的工具酶是_。（2）构建基因表达载体所需要的工具酶是_。基因表达载体除目的基因外，还应包括_。（3）导入大肠杆菌前需先将大肠杆菌处理为_细胞。（4）为检测目的基因是否导入受体细胞，常常要借助载体上_的表达，更准确的方法是利用放射性同位素标记的_作探针与基因组DNA杂交。最后还要检测目的基因是否翻译成了病毒蛋白质，利用的技术是_。答案（1）抗原逆转录酶（2）限制性核酸内切酶和DNA连接酶启动子、终止子、标记基因（3）感受态（4）标记基因病毒蛋白基因（目的基因）抗原抗体杂交技术解析（1）病毒由核酸和蛋白质组成，其蛋白质外壳具有免
19、疫特性，故口蹄疫疫苗生产过程只需提取口蹄疫病毒中控制合成病毒蛋白的RNA部分。以RNA为模板合成DNA的过程属于反转录，需要逆转录酶。（2）基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子、标记基因。构建基因表达载体一般用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个有黏性末端的切口，再用同种限制酶切割目的基因，产生相同的黏性末端。将切下的目的基因片段，插入质粒的切口处，在DNA连接酶的作用下使质粒与目的基因结合形成重组质粒。（3）将目的基因导入微生物细胞前，常用Ca2处理使其成为感受态细胞。（4）标记基因的表达可检测目的基因是否导入受体细胞，除此之外还可以用DNA杂交法和抗原抗体杂交技术进行检测。22（12
20、分）科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌体内表达成功。请据图回答下列问题：（1）图中DNA是以_为模板，_形成单链DNA，在酶的作用下合成双链DNA，从而获得了所需要的基因。（2）图中代表的是_，在它的作用下将质粒（_DNA）切出_末端。（3）图中表示将_。表示_随大肠杆菌的繁殖而进行_。（4）采用蛋白质工程可以对胰岛素进行改造，使之起效时间缩短，保证餐后血糖高峰和血液中胰岛素高峰一致。如果你是科研工作者，请写出研制速效胰岛素的思路。_。（5）下列关于蛋白质工程的说法不正确的是（）A蛋白质工程能将人抗体某些区段替代鼠单克隆抗体的区段，降低鼠单克隆抗体
21、免疫原性B蛋白质工程可对酶的催化活性、底物专一性、抗氧化性、热变性、碱变性等加以改变C理论上通过对关键氨基酸的转换与增删是进行蛋白质工程的唯一方法D蛋白质工程的崛起主要是工业生产和基础理论研究的需要答案（1）原胰岛素mRNA反转录（2）特定的限制性核酸内切酶环状黏性（3）目的基因导入受体细胞重组DNA扩增（4）确定蛋白质的功能蛋白质应有的高级结构蛋白质应具备的折叠状态应有的氨基酸序列应有的碱基序列（5）C解析蛋白质工程的类型主要有两种：一是从头设计，即完全按照人的意愿设计合成蛋白质。从头设计是蛋白质工程中最有意义，也是最困难的操作类型，目前技术尚不成熟，但理论上可行。二是定位突变与局部修饰，即在已有蛋白质基础上，只进行局部的修饰。通过造成一个或几个碱基定位突变，以达到修饰蛋白质分子结构的目的。“从头设计”的方法：确定蛋白质的功能蛋白质应有的高级结构蛋白质应具备的折叠状态应有的氨基酸序列应有的碱基序列，可以创造自然界不存在的蛋白质。蛋白质工程的崛起是因为天然蛋白质不能满足人类的需求，例如多数酶虽然在自然状态下有活性，但在工业生产中没有活性或活性很低。
