1、4（180min）目 的要 求1、掌握盐酸普鲁卡因、对乙酰氨基酚、肾上腺素、盐酸麻黄碱的鉴别和含量测定2、理解盐酸普鲁卡因、对乙酰氨基酚、肾上腺素、盐酸麻黄碱的结构与性质3、了解本类药物的特殊杂质检查教 学 内 容重点（*）难点（#）疑点（?）时间分配（分钟）提问/举例/教具复习旧课、导入新课1、胺类药物的分析1 、结构与性质2、鉴别试验3、杂质检查4、含量测定二、苯乙胺类药物的分析1、结构与性质三、苯丙胺类药物的分析#*#* PPT讨论、思考题、作业：参考书目：药物分析 主编 张士清 孟彦波 科学出版社 药物分析 主编 牛彦辉 人民卫生出版社 第 1 页第一节 芳胺类药物的分析常见的芳胺类药
2、物 对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构酰胺类药物的基本结构 第 2 页一、结构与性质（一） 具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基，可用重氮化偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量，可与芳醛发生缩合反应，易氧化变色。（二） 酯键或酰胺键易水解 （三）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。（四）游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。（五） 某些特征取代基（如酚羟基）的反应 （六） UV （七） IR 二、鉴别试验 （一）重氮化偶合反应 芳香第一胺类鉴别反应 第 3 页直接：盐酸普鲁卡因、对氨基水杨酸钠 、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁卡因 ChP（2015）鉴别 （1
3、）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录） 取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。间接：对乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、贝诺酯 对乙酰氨基酚 ChP（2015）鉴别 （2）取本品约0.1g，加稀盐酸5m1，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5m1，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性-萘酚试液2m1，振摇，即显红色。（二）三氯化铁反应 对乙酰氨基酚 第 4 页（三）与重金属离子反应 1. 与铜和钴离子反应 2羟肟酸铁盐反应 3与汞离子的反应（五）制备衍生物测
4、熔点1三硝基苯酚衍生物 盐酸利多卡因 ChP（2000）鉴别 取本品0.2g，加水20ml溶解。（1）取溶液10ml，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤 第 5 页过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录C），熔点为228232，熔融时同时分解。盐酸布比卡因 ChP（2015）2. 硫氰酸盐衍生物 盐酸丁卡因 ChP（2015）鉴别 （1）取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80干燥，依法测定，熔点约为131。（六）UV 鉴别 （2）取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含
5、0.40mg的溶液，照分光光度法测定，在263nm与271nm的波长处有最大吸收；其吸收度分别为0.530.58与0.430.48。 第 6 页（七）IR 鉴别 （3）本品的红外光吸收图谱与对照的图谱一致。三、杂质检查（一）对乙酰氨基酚 1. 有关物质 杂质来源 中间体、副产物及分解产物 检查方法 TLC 对氯乙酰苯胺 杂质对照品法 其他杂质 参比杂质对照品法 2. 对氨基酚 杂质来源 中间体、水解产物 反应原理 检查方法 对照法 取本品1.0g，加甲醇溶液（12）20ml溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液1m1，摇匀，放置30min；如显色，与对乙酰氨 第 7 页基酚对照品1.0g加对氨基酚5
6、0g用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.005）。2. 盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查 杂质来源 水解产生 检杂质来源 水解产生 查方法 TLC 杂质对照品法 精密量取本品，加乙醇稀释使成为每1ml中含盐酸普鲁卡因2.5mg的溶液，作为供试品溶液。取对氨基苯甲酸对照品，加乙醇制成每1ml中含30g的溶液，作为对照品溶液。取上述两种溶液各10 l，分别点于含有羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，用苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（141 1 4）为展开剂，展开后，取出晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液（2对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml，加冰醋酸5ml制成）喷雾 第 8 页显色。供试品溶液如
7、显与对照品溶液相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液主斑点比较，不得更深。四、含量测定 （一）亚硝酸钠滴定法 1. 原理 具芳伯氨基的药物具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2O 第 9 页 K1 300 K2 加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重氮化反应速度（2）酸的种类及其浓度在不同酸中重氮化反应的速度为：HBrHCl H2SO4 HNO3盐酸 1:2.56；加
8、入盐酸： 重氮化反应速度加快； 重氮盐在酸性溶液中稳定； 防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果 第 10 页（3）室温条件下滴定 1030（4）滴定速度：先快后慢 滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定 3. 指示终点的方法（1）永停滴定法用作重氮化法的终点指示时，调节R1使加于电极上的电压约为50mV。取供试品适量，精密称定，置烧杯中，除另有规定外，可加水40ml与盐酸溶液（12）15ml，而后置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入铂铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速滴定，
9、随滴随搅拌，至近终点时，将滴定 第 11 页管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。（2）电位法 USP（24）（3）外指示剂法 KI淀粉糊剂或试纸2NaNO2+2KI+4HCl 2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O （4）内指示剂法 中性红 不可逆指示剂4. 测定方法 盐酸普鲁卡因 ChP（2015） 取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法，在1525，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于27.28mg的C13H20N2O2HCl（二）非水溶液滴定法 脂烃
10、胺侧链，具弱碱性 （三）紫外分光光度法 第 12 页 对乙酰氨基酚在0.4氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。 取本品约40mg，精密称定，置25ml量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数 为715 计算，即得。原料药 吸收系数法 （四）比色法 中性条件下的重氮化反应 第 13 页第二节 苯乙胺类药物的分析苯乙胺类药物的基本结构常见的苯乙胺类药物一、结构与性质 1. 脂
11、烃胺基侧链，显弱碱性2. 酚羟基，易氧化变色，可发生三氯化铁反应 第 14页 3. 具手性碳原子，具旋光性4. 溶解性 游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水5. UV6. IR7. 取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑特罗可用重氮化偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。二、鉴别试验1. 三氯化铁反应2. 氧化反应3. 与甲醛硫酸反应4. UV与IR 5. 与亚硝基铁氰化钠反应（Rimini反应） 脂肪族伯胺的专属反应 第 15 页（一）酮体的检查杂质来源 原料残存 检查方法 比较法（含量测定法） 检查原理 利用酮体在310nm波长处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液
12、在310nm波长处的吸收度限制酮体的量。（二）有关物质检查 盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇等药物 检查方法：TLC中高低浓度对比法 配制两种浓度对照溶液（三）盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查 检查方法：纸色谱法（PC）分离后，洗脱，照分光光度法于232nm波长处测定吸收度，控制吸收度以控制有关双胍的量四、含量测定（一）非水溶液滴定法 原料药 脂烃胺基侧链，显弱碱性 第 16 页 第3节 苯丙胺类药物的分析 1、结构特点与性质基本结构为：典型药物：性质：1.性状与溶解性：白色结晶性粉末 2.弱酸性：马来酸是较强的有机酸 3.叔胺的性质：可与枸橼酸-醋酐溶液反应；具有弱碱性，可用非水溶液滴定法测定含量
13、 4.紫外吸收特征：苯环和吡啶环在紫外光区有特征吸收 （一）顺丁烯二酸的还原反应 第 17 页 顺丁烯二酸能使高锰酸钾褪色（二）与枸橼酸-醋酸试液的显色反应马来酸氯苯那敏中的叔胺可与枸橼酸-醋酐发生显色反应（3）红外光吸收图谱马来酸氯苯那敏的检查项目：有关物质、四氢呋喃、二氧六环、吡啶、甲苯等残留溶剂1.有关物质的检查 ： 取本品0.4g，加二氯甲烷溶解并稀释成10ml ，作为供试品溶液；精密量取1ml，加二氯甲烷溶解并稀释成100ml，作为对照溶液。照气相色谱法（附录 E）测定。以3%苯基（50%）甲基聚硅氧烷作为固定液，白 色硅藻土为担体，玻璃柱：1.2m，柱温190测定。取对照溶液1l，
14、注入气相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10%20%；再精密量取供试品溶液与对照溶液各1l，分别注入气相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积。 第 18 页 2.四氢呋喃、二氧六环、吡啶、甲苯 的检查 ： 精密称取苯适量，加甲醇制成每毫升中约含60ug的溶液，作为内标溶液。精密称取四氢呋喃、二氧六环、吡啶和甲苯适量，加甲醇制成每毫升中各含720ug、380ug、200ug、890ug的溶液，作为对照储备溶液；精密量取对照储备溶液1ml与内标溶液1ml，置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密称取本品1.0g，置10ml量瓶中，加内标溶液1ml，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。用二乙烯基-乙基乙烯苯型高分子小球作为固定相，柱温190，依法测定。 四、含量测定 （一）非水溶液滴定法 马来酸氯苯那敏原料药 （二）高效液相色谱法 马来酸氯苯那敏片剂、滴丸和注射液
