1、1. 掌握免疫学检验常用技术的原理、技术要点、应用及方法学评价。2. 掌握免疫学检验常用技术的测定方法。3. 掌握免疫学技术在免疫预防计划免疫、动植物检疫、健康相关产品免疫功能评价中的应用。4. 了解免疫学技术的最新进展及与其他学科的关系。三、 各章节内容及学时分配第一章 抗原抗体的纯化（2学时）教学目的与要求掌握抗原和抗体纯化方法的基本原理、方法评价和应用。了解抗原抗体各种纯化方法的程序及分离物的选择。教学内容第一节 盐析法一、 原理二、 常用中性盐三、 操作步骤四、 影响因素五、 方法评价与应用第二节 凝胶层析法二、 常用凝胶的种类和性质四、 方法评价与应用第三节 离子交换层析二、 常用离
2、子交换剂的种类和性质三、 离子交换层析的程序第四节 亲和层析法二、 亲和层析载体与配基的选择三、 层析条件的选择考核要求：了解 蛋白质提纯方法的程序及条件掌握 蛋白质提纯方法的原理 第二章 免疫原与特异性抗体的制备（2学时）教学目的及要求： 掌握人工免疫原的制备方法，免疫血清的制备方法，杂交瘤技术的原理及技术要点。了解可溶性抗原的制备方法及单克隆抗体制备流程及应用。教学内容：第一节 免疫原的制备一、 颗粒性抗原的制备二、 可溶性抗原的制备三、 人工免疫原的制备及佐剂第二节 免疫血清的制备一、 免疫动物的选择二、 确定免疫方案三、 动物采血法四、 免疫血清的分离与保存第三节 单克隆抗体的制备一、
3、 杂交瘤技术的基本原理二、 单克隆抗体的制备要求三、 单克隆抗体的应用了解：1.颗粒性抗原、可溶性抗原的制备方法 2.单克隆抗体的制备流程掌握：1.人工免疫原的制备 2.免疫血清的制备方法 第三章 沉淀反应与凝集反应（2学时）掌握常用沉淀反应和凝集反应的原理及应用。了解其他凝集技术类型、原理和应用。第一节 沉淀反应一、 免疫浓度测定二、 双向琼脂扩散试验三、 免疫电泳技术第二节 凝集反应一、 直接凝集反应二、 间接凝集反应三、 其他凝集技术免疫浓度测定，其他凝集技术的原理及应用。双向琼脂扩散试验、双 免疫电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、间接血凝试验的原理及应用。 第四章 溶血反应和补体结合试验教学目
4、的与要求：掌握溶血反应体系及检测方法。了解补体结合试验的原理、类型、方法和评价。第一节 溶血反应一、 溶血反应的检测试验二、 血清总补体溶血（CH50）测定。第二节 补体结合试验一、 类型与原理二、 试验方法及影响因素三、 方法的评价和应用 补体结合试验的类型、原理、方法评价及应用。血清总补体溶血（CH50）测定。第五章 酶免疫技术（2学时）掌握固相酶免疫测定的方法类型及原理，ELISA技术要点，了解其他酶免疫技术及应用。第一节 酶免疫技术的分类第二节 固相酶免疫测定一、 基本原理二、 方法类型和操作步骤第三节 ELISA技术要点一、 试剂准备二、 酶标记方法三、 酶标记物的纯化与鉴定四、 最
5、适工作浓度的选择第四节 其他酶免疫技术一、 斑点-酶联免疫吸附试验二、 斑点酶免疫渗滤试验三、 免疫印记法其他酶免疫技术的原理及应用1.双抗体夹心法和间接法的原理 2.ELISA法的技术要点第六章 荧光免疫技术（1学时）掌握荧光抗体技术的原理、技术方法及应用。了解荧光抗体的制备方法及荧光免疫显微技术。第一节 荧光现象第二节 荧光抗体技术二、 荧光抗体技术方法三、 荧光抗体的制备四、 荧光免疫显微技术五、 应用荧光抗体的制备及荧光免疫显微技术荧光抗体技术的基本原理及技术方法。第七章 放射免疫技术（1学时） 掌握放射免疫测定的原理、方法、评价及应用。了解免疫放射测定试验。第一节 放射免疫测定二、
6、测定方法三、 方法评价四、 应用第二节 免疫放射测定二、 技术类型三、 技术要点考核要点：免疫放射测定的原理、技术类型及技术要点。放射免疫测定的原理、测定方法及应用。第八章 金免疫技术（2学时）掌握金免疫测定技术的原理、技术类型及应用。了解胶体金和免疫金的特性与制备。了解金免疫组化技术的方法。第一节 胶体金与免疫金的制备一、 胶体金的特性及其制备二、 免疫金的特性及其制备第二节 金免疫测定技术一、 斑点金免疫渗滤试验二、 斑点金免疫层析试验第三节 金免疫组织化学技术一、 免疫金光镜染色技术二、 免疫金电镜染色技术1.胶体金、免疫金的特性及制备方法。 2.免疫金（银）光镜染色技术的原理及方法。斑
7、点金免疫渗滤试验与斑点金免疫层析试验的原理、技术类型及方法。 第九章 免疫细胞检测技术（3学时）掌握免疫细胞分离纯化技术及评价免疫功能的相关试验原理、方法、结果判定。第一节 免疫细胞的分离与纯化一、 血液标本的采集二、 外周血液中白细胞的分离三、 外周血液中单个核细胞的分离四、 淋巴细胞及其亚群的分离纯化五、 吞噬细胞的分离六、 淋巴细胞的保存及活力测定。第二节 T淋巴细胞的检测一、 T淋巴细胞表面标志的检测二、 T淋巴细胞受体的检测三、 T淋巴细胞功能的检测第三节 B淋巴细胞的检测一、 B淋巴细胞表面抗原的检测二、 B淋巴细胞表面受体的检测三、 B淋巴细胞功能的体外检测第四节 自然杀伤细胞的
8、检测一、 概述二、 NK细胞活性检测三、 测定NK细胞活性的卫生学意义第五节 吞噬细胞功能的检测一、 巨噬细胞吞噬功能的检测二、 巨噬细胞吞噬功能检测的卫生学意义1.了解T淋巴细胞表面标志的检测方法及卫生学意义的评价。2.了解T淋巴细胞E受体和IL-2受体的检测方法。3.了解B淋巴细胞Sm2g受体及Fc受体的检测方法。1.外周血液中单个核细胞、淋巴细胞及亚群分离纯化方法，淋巴细胞保存及活力测定方法。 2.T淋巴细胞功能检测方法。 3.B淋巴细胞功能检测的体外实验 。4. NK细胞活性检测方法及卫生学意义。5. 噬细胞功能的检测方法及卫生学意义。第一十章 免疫球蛋白测定（1学时）掌握免疫球蛋白定
9、量测定的方法参考值及应用评价。了解免疫球蛋白定量的医学意义。第一节 免疫球蛋白定量的检测方法一、 常用检测方法。二、 参考值第二节 免疫球蛋白定量检测方法学评价及应用第三节 免疫球蛋白定量临床意义一、 血清Ig定量临床意义。二、 尿微量Ig定量临床意义。三、 脑脊液Ig定量临床意义。血清Ig、尿微量Ig、脑脊液Ig定量检测的临床意义。免疫球蛋白定量检测方法及参考值，方法评价及应用。 第十一章 动植物病原体的免疫学检验（2学时）掌握常见动植物疫病的免疫学检测方法。了解进出口商品检疫的新进展。第一节 动物病原体的免疫学检验一、 炭疽的免疫学检验二、 鼻疽的免疫学检验三、 口蹄疫的免疫学检验四、 布
10、鲁氏病的免疫学检验五、 狂犬病的免疫学检验六、 疯牛病的免疫学检验七、 禽流感的免疫学检验第三节 植物病原体的免疫学检验一、 植物细菌的免疫学检验二、 植物真菌的免疫学检验三、 植物病毒的免疫学检验植物病原体的免疫学检验方法。动物病原体的免疫学检验方法。 第十二章 健康相关产品的免疫学检验（2学时）掌握保健食品免疫学检验方法和评价标准及化妆品的免疫学检验方法。了解健康相关产品中有毒有害物质免疫学检验方法及新进展。第一节 有毒有害物质的免疫学检验一、 有毒有害物质免疫学检验的技术要点。二、 有毒有害物质免疫学检测方法。三、 有毒有害物质免疫学检测方法的应用。第二节 化妆品的免疫学检验第三节 保健
11、食品免疫学检验和评价一、 免疫学检验项目二、 免疫学检验方法三、 增强免疫功能结果判定与评价。有毒有害物质的免疫学检验的技术要点、方法和应用。保健食品免疫学检验项目、检验方法、结果判定及标价标准。 免疫学检验实验课教学大纲一、 实验目的与任务免疫学检验实验课的教学目的是使学生掌握诸项试验的原理、基本要求、操作步骤，正确分析实验结果、了解各种影响因素以及在卫生检验工作中的应用。通过实验课教学，培养学生认真、严谨的工作态度和实际动手操作能力，以适应检验工作的需要。二、 实验教学基本要求1. 掌握免疫学检验诸项试验的原理2. 掌握诸试验各种液体的配制方法3. 掌握必做实验的操作步骤、结果判定及影响因
12、素。4. 了解诸项试验所需的仪器设备。三、 实验教材或指导书 免疫学检验实习指导 人民卫生出版社 2006年8月第一版五、 实验项目一览表序号实验项目内容提要实验类型学时分配主要仪器设 备地点备注1免疫球蛋白的分离纯化盐析法血清中的免疫球蛋白粗提综合性10一组（每学期选取3个实验项目）2凝胶过滤层析法（分离不同分子量大小的抗原）层析柱3双向琼脂扩散鉴定抗原和抗体纯度的定性分析4聚丙烯酰胺凝胶电泳分离、鉴定血清中各类蛋白质电泳仪、圆盘电泳槽5酶联免疫吸附实验双抗体夹心法检验未知抗原酶标仪、微量加样器、酶标测定板6免疫金（银）染色实验免疫金标记抗体及检测抗原超速离心机、显微镜、温箱、分光光度计7保健食品免疫功能评价，包括：血清补体总活性测定（CH50法）ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验（MTT法）抗体生成细胞的检测（溶血空斑法）小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验（滴片法）测定血清总补体活性测定淋巴细胞增殖数量测定B细胞功能测定巨噬细胞功能96孔培养板（平底）、手术器械、CO2培养箱、酶标仪、721分光光度计、超净工作台、高压灭菌器、无菌滤器、恒温小浴箱、离心机、200目筛网、显微镜、计数器二组（每学期学生 自主选取1个实验项目）
