1、采样点要避免田边、路边、沟边、挖方、填方及堆肥等特殊地方；采样点的数目一般应根据采样区域大小和土壤肥力差异情况，酌情采集520个点。2采样方法：在确定采样点上，先将23mm表土刮去，然后用取土钻或小铁铲垂直入土1520cm左右，每点取土深度、质量应尽量一致，将各点土样在盛土盘上集中起来，初略选去石砾、虫壳、根系等物质，混合均匀，采用四分法弃去多余的土，直至所需要数量为止，一般每个混合土样的质量以1Kg左右为宜。 3采样时间：为了解决随时出现的问题，需要土壤测定时，应随时采样；为了摸清土壤养分变化和作物生长规律，即按作物生育期定期取样；为了制订施肥计划而进行土壤测定时，在前作物收获后或施基肥前进
2、行采样；若要了解施肥效果，则在作物生长期间，施肥的前后进行采样。4装袋与填写标签：采好的土样装入布袋中，立即写标签，一式2份，1份系在口袋外，1份放入袋内，标签用铅笔写明采样地点、日期、深度、样品编号、土壤名称等。同时将此内容登记在专门的记录本上备查。四、思考题：如何使采集的土壤混合样品具有最大的代表性？实验二 风干土壤样品的制备风干土壤样品的制备，是土壤养分分析工作中的一个重要环节，其正确与否，直接影响分析结果的准确性和有无利用价值，必须按科学的方法进行样品制备。通过实验，使学生初步掌握风干土壤样品的制备和保存方法，确保后续实验的分析结果能指导生产实践。 二、仪器用具 木锤、镊子、土壤筛（1
3、8目、60目）、广口瓶、研钵、盛土盘等。1风干剔杂：除速效养分、还原物质的测定需用新鲜样品外，其余均采用风干土样，以抑制微生物活动和化学变化，便于长期保存。风干土样的处理方法：将新鲜土样铺平放在木板上或光滑厚纸上，厚约23cm，放置在阴凉干燥通气清洁的室内风干。严禁曝晒或受到酸、碱气体等物质的污染，应经常翻动，捏碎大土块，剔除根茎叶、虫体、新生体、侵入体等，经过57d后可达风干的要求。 2磨细过筛：将风干以后的土样平铺在木板或塑料布上，用木棒碾碎，边磨边筛，直到全部通过lmm（18目）筛孔为止。石砾和石块切勿弄碎，必须筛去，少量可弃去，多量时，应称其质量，计算其百分含量。过筛后的土样经充分混匀
4、后，用四分法分成2份，一分供pH、速效养分等测定。另一份继续仔细地挑弃残存的植物根等有机体，然后磨细至全部通过025mm（60目）筛孔，又按四分法取出50g左右供有机质、全氮测定之用。 3装瓶贮存：过筛后的两份土样经分别充分混合后，应分别装入具有磨口塞的广口瓶中，内外各附标签一张，标签上写明土壤样品编号、采样地点、土壤名称、深度、筛孔号、采集人及日期等。在保存期间应避免日光、高温、潮湿及酸碱气体的影响或污染，有效期1年左右。四、思考题为什么测定土壤pH、交换性能、速效养分等项目时，土壤样品不能研磨得太细？实验三 土壤水分含量的测定（烘干法）一、目的要求 土壤水分是土壤的重要组成部分，也是重要的
5、土壤肥力因素。进行土壤含水量的测定有两个目的：一是了解田间的土壤水分状况，为土壤耕作、播种、合理排灌等提供依据；二是在室内分析工作中，测定风干土的水分，把风干土重换算成烘干土重，可作为各项分析结果的计算基础。 本实验要求掌握烘干法测定土壤水分的原理和方法，能较准确地测定出土壤的水分含量。二、方法原理在1052的温度下水分从土壤中全部蒸发，而结构水不会破坏，土壤有机质也不致分解。因此，将土壤样品置于1052下烘至恒重，根据其烘干前后质量之差，就可以计算出土壤水分含量的百分数。三、仪器与试剂天平（感量0.01g和0.001g）、烘箱、干燥器、称样皿、铝盒、小刀。四、测定方法 1. 取有盖的铝盒（或
6、称样皿），洗净，烘干，放人干燥器中冷却至室温，然后在分析天平上称重（W1），并注意编好号，以防弄错。 2. 用角匙取过1mm筛孔的风干土样45g（精确至0.001g），铺在铝盒中（或称样皿中）进行称重（W2）。 3. 将铝盒盖打开，放入恒温箱中，在1052的温度下烘6h左右。 4. 盖上铝盒盖子，将铝盒放入干燥器中2030min，使其冷却至室温，取出称重。5. 打开铝盒盖子，放入恒温干燥箱中，在1052下再烘2h，冷却，称至恒重（W3）。五、结果计算 以烘干土为基数计算土壤水分的百分含量（w） 土壤的质量含水量（%）= （W2W3）（W3 W1）100% 六、注意事项 1. 测定风干土样中吸湿
7、水含量时，一般用感量0.001g的分析天平称量，前后两次称重相差不大于0.003g为恒重。 2. 一般土壤样品的烘干温度不得超过1052，温度过高，土壤有机质易碳化损失。土壤含水量的测定酒精燃烧法一、方法原理 本方法主要利用酒精在样品中燃烧，使水分迅速蒸发干燥。酒精燃烧时，火焰距土面23cm，样品温度约7080，当火焰将熄灭前几秒钟，火焰下降，土温迅速上升到180200，然后很快下降至8590，缓慢冷却。由于高温阶段的时间短，所以样品中的有机质及盐类损失甚微（有机质含量高于5%的样品不适用本方法）。二、试剂与仪器 酒精、铝盒、天平 三、操作步骤 1. 先将铝盒称重（W1）记录下来，然后称取样品
8、35g（W2）（精确至0.1g）。2. 向铝盒内滴加酒精，直到土面全部浸没即可。将铝盒在桌面上轻轻敲击几次使样品均匀分布于铝盒中，此时样品易被酒精浸透。3. 点燃酒精，经数分钟后熄灭，待样品冷却后，再滴加1.52ml的酒精进行第二次燃烧。一般情况下，样品经34次燃烧后即可达恒重（W3）。每次燃烧后都要称重记下数据。四、结果计算 以烘干土为基数计算土壤水分的百分含量（w）,计算方法与烘干法相同。实验四 土壤容重的测定（环刀法） 一、方法原理土壤容重是土壤在未破坏自然结构的情况下，单位容积原状土的质量，通常以克/立方厘米表示。土壤容重的大小与土壤质地结构、有机质含量、土壤紧实度、耕作措施等有关。一
9、般腐殖质多的表层土壤容重都较小。耕作土壤的耕层容重一般为1.001.30g/cm3，土层愈深则容重愈大，可达1.401.60g/cm3。土壤容重不仅用于鉴定土壤颗粒间排列的紧实度，而且是计算土壤孔隙度和空气含量的重要依据。本法是利用一定体积的环刀切割未搅动的自然状态土样，使土样充满其中，称量后计算单位体积的烘干土重。二、仪器、药品 环刀（容积为100cm3）、环刀托、天平、削土刀、小铁铲、铝盒、酒精 1. 用修土刀修平土壤剖面，并记录剖面的形态特征，按剖面层次分层采样，每层重复三次。2. 将已知重量（W1）和容积（V）的环刀刃口向下垂直压入土中，直至环刀筒中充满土壤样品为止。若土层坚实，可用铁
10、锤慢慢敲打，环刀压入时要平衡，用力一致。3. 用修土刀切开环刀周围的土样，取出已装土的环刀，细心削去环刀两端多余的土，并擦干净环刀外面的土，立即加盖，以免水分蒸发，随即称重并记录（W2），精确到0.01g。4. 从环刀内取出约10克重的土样，放入铝盒内，测定土壤质量含水量（M）。土壤容重烘干土质量环刀容积（W2W1）（1M）实验五 土壤有机质的测定（稀释热法）一、方法原理基本原理、主要步骤与重铬酸钾容量法（外加热法）相同。稀释热法（水合热法）是利用浓硫酸和重铬酸钾迅速混合时所产生的热来氧化有机质，以代替外加热法中的油浴加热，操作更加方便。由于产生的热，温度较低，对有机质氧化程度较低，只有77%
11、。二、试剂（1）1molL-1重铬酸钾溶液。准确称取K2Cr2O7（分析纯，105烘干）49.04g，溶于水中，稀释至1L。（2）0.4molL-1重铬酸钾的基准溶液。准确称取K2Cr2O7（分析纯，130烘3h）19.6132g于250mL烧杯中，以少量水溶解，全部洗入1000mL容量瓶中，加入浓H2SO4约70mL，冷却后用水定容至刻度，充分摇匀备用其中含硫酸浓度约为2.5molL-1。（3）0.5molL-1FeSO4溶液。称取FeSO47H2O 140g溶于水，加浓H2SO415mL，冷却稀释至1L。此溶液的准确浓度以0.4molL-1重铬酸钾的基准溶液标定之。即准确分别吸取3份0.4
12、molL-1重铬酸钾的基准溶液各25mL于150mL三角瓶中，加入邻啡罗啉指示剂23滴，然后用0.5molL-1FeSO4溶液滴定至终点，计算出FeSO4的准确浓度。硫酸亚铁（FeSO4）溶液在空气中易被氧化，需新鲜配制或以标准的K2Cr2O7溶液每天标定之。（4）邻菲罗啉指示剂。称取邻菲罗啉（分析纯）1.485g与FeSO47H2O 0.695g,溶于100ml水中。（5）二氧化硅。分析纯，粉末状。三、操作步骤准确称取0.5000g土壤样品（注1）于500mL的三角瓶中，然后准确加入1molL-1重铬酸钾溶液10mL于土壤样品中，转动瓶子使之混合均匀，然后加浓H2SO4 20mL，将三角瓶缓
13、缓转动1min，促使混合以保证试剂与土壤充分作用，并在石棉板上放置约30min，加水稀释至250mL，加34滴邻啡罗啉指示剂，用0.5molL-1FeSO4溶液滴定至近终点时溶液颜色由绿变成暗绿色，逐渐加入FeSO4溶液，直至生成砖红色为止。用同样的方法做空白测定（即不加土样，用二氧化硅粉末代替土样）。如果K2Cr2O7被还原的量超过75%，则须用更少的土壤重做。4、结果计算土壤有机碳（gkg-1） c（V0V）10-33.01.331000烘干土重土壤有机质（gkg-1） 土壤有机碳（gkg-1）1.724式中：c0.5molL-1FeSO4标准溶液的浓度；V0空白滴定用去FeSO4体积（m
14、l）；V样品滴定用去FeSO4体积（ml）；10-3将ml换算为L；3.01/4碳原子的摩尔质量；1.33为氧化校正系数；1.724土壤有机碳换算成土壤有机质的平均换算系数。注释：泥碳称0.05g，土壤有机质含量低于10gkg-1者称2.0g。实验六 土壤碱解氮含量的测定土壤碱解氮包括无机态氮和部分有机质中易分解的、比较简单的有机态氮，它是铵态氮、硝态氮、氨基酸、酰胺和易水解的蛋白质的总和。它能反映出土壤近期内氮素供应情况，所以又称为土壤有效氮。测定土壤碱解氮含量对了解土壤供氮能力，指导合理施氮肥具有一定意义。通过实验，了解其测定原理，掌握其测定方法和基本操作技能，并能比较准确地测定出土壤碱解
15、氮含量。扩散皿中，用1.2molL NaOH（水田）或1.8molLNaOH（旱土）处理土壤，使易水解态氮（潜在有效氮）碱解转化为NH3，NH3扩散后为硼酸所吸收，再用标准酸液滴定，计算出土壤中碱解氮的含量。水田土壤中硝态氮极少，不需加硫酸亚铁粉，用1.2molLNaOH碱解即可。但测定旱地土壤中碱解氮的含量时，必需加硫酸亚铁，使硝态氮还原成铵态氮。同时，由于硫酸亚铁本身能中和部分NaOH，因此需用1.8molLNaOH。三、仪器试剂（一）仪器：扩散皿、半微量滴定管（或医用注射器）、恒温箱、天平（0001g）、2ml吸管、橡皮筋。（二）试剂配制1. 2的硼酸溶液 称取2.0g硼酸（分析纯），用
16、约60的热蒸馏水溶解，冷却后稀释至100ml，最后用稀盐酸或氢氧化钠调节pH至45（滴加定氮混合指示剂显淡红色）。2. 定氮混合指示剂 分别称取0.1g甲基红和0.5g溴甲酚绿指示剂，放入玛瑙研钵中，并加95酒精100ml研磨溶解，然后用稀盐酸或氢氧化钠调节pH至4.5。3. 1.2molLNaOH 称取化学纯NaOH48.0g溶于蒸馏水，冷却后稀释至1L。4. 1.8molLNaOH 称取化学纯NaOH72.0g溶于蒸馏水，冷却后稀释至1L。5. 硫酸亚铁粉 将FeS047H2O（三级）磨细，装入密闭瓶中，存于阴凉处。6. 特制胶水 阿拉伯胶水溶液（称取10g阿拉伯树酯溶于15ml蒸馏水中）
17、10份，甘油10份，饱和K2CO3溶液5份混合即成（最好放在盛浓H2SO4的干燥器中，以除去氨）。7. 0.01molL盐酸标准溶液 取密度为119kgL的浓盐酸859ml加蒸馏水至100ml，然后用蒸馏水稀释10倍，用标准碱或硼砂标定其准确浓度。四、操作步骤1. 称取通过1.00mm筛的风干土样2.00g；硫酸亚铁粉1g混合均匀，置于洁净的扩散皿外室，轻轻旋转扩散皿，使土样均匀地铺平。2. 在扩散皿内室加2硼酸2ml，再加1滴定氮混合指示剂（显微红色）。3. 在扩散皿外缘涂上特别胶水，盖上毛玻璃片，旋转数次，使周边与毛玻璃完全黏合。 4. 慢慢推开毛玻璃一边，使扩散皿外室露出一条狭缝，迅速加
18、入10ml 1.8molL NaOH溶液，立即盖严毛玻璃，水平轻轻旋转扩散皿，使碱液与土壤充分混匀。5. 用橡皮筋固定毛玻璃，随后放入40恒温箱中，碱解扩散24h后取出（可以观察到内室溶液为蓝色）。6. 以0.01molL盐酸标准溶液，用半微量滴定管（或医用注射器）滴定内室溶液，溶液由蓝色至微红即为滴定终点，记下标准酸消耗的体积。在样品测定的同时做空白实验。 土壤碱解氮（mgkg）= C（VV0）14103W 式中：V土样滴定时消耗盐酸的体积（m1）； V0空白试验滴定消耗盐酸的体积（ml）； C标准盐酸的摩尔浓度； 14lmol氮的克数； 103换成每千克样品中氮的毫克数； W烘干样品重。六
19、、注意事项 1. 扩散皿内室加入2硼酸和1滴定氮混合指示剂后，溶液必须显微红色，否则需要重做。2. 由于特制胶水的碱性很强，在涂胶水和洗涤扩散皿时，必须特别小心，慎防污染内室，造成错误。3. 滴定时要用干净玻璃棒小心搅动吸收液，切不可摇动扩散皿。4. 扩散皿外室加入碱液后，操作必须小心，慎防碱液溅入内室。七、思考题1. 碱解扩散法测定的土壤碱解氮包括哪些形态的氮素?2. 测定旱地土壤中碱解氮含量时，为什么必需加硫酸亚铁粉？实验七 石灰性土壤速效磷含量的测定土壤速效磷也称为土壤有效磷，包括水溶性磷和弱酸溶性磷，其含量是判断土壤供磷能力的一项重要指标。测定土壤速效磷的含量，可为合理分配和施用磷肥提
20、供理论依据。通过实验，要求学生了解测定土壤速效磷的基本原理，掌握其测定方法。用pH8.5的0.5 molL NaHCO3作浸提剂处理土壤，由于碳酸氢根的存在抑制了土壤中碳酸钙的溶解，降低了溶液中Ca2+浓度，相应地提高了磷酸钙的溶解度。由于浸提剂的pH较高，抑制了Fe3+和A13+的活性，有利于磷酸铁和磷酸铝的提取。此外，溶液中存在着OH、HCO3、CO32等阴离子，也有利于吸附态磷的置换。用NaHCO3作浸提剂提取的有效磷与作物吸收磷有良好的相关性。浸出液中的磷，在一定酸度下，用硫酸钼锑抗还原显色生成磷钼蓝，蓝色的深浅在一定浓度范围与磷的含量成正比，因此，可用比色法测定其含量。（一）仪器 振
21、荡机、分光光度计、天平（0.01g）、三角瓶、容量瓶（50m1）、漏斗、无磷滤纸、移液管（10m1）。105mo1L NaHCO3（pH8.5）浸提液 称取化学纯NaHCO3 42.0g溶于800ml蒸馏水中，以4molLNaOH溶液调节pH至8.5，然后稀释至1000ml，保存于试剂瓶中。如果贮存超过1个月，使用时应重新调整pH。27.5molL硫酸钼锑抗贮存液 在l000ml烧杯中加入400ml蒸馏水，将烧杯浸在冷水中，然后缓慢注入208.3m1浓硫酸 （分析纯），并不断搅拌，冷却至室温。另称取分析纯钼酸铵20g溶于约60的150ml蒸馏水中，冷却。再将硫酸溶液慢慢倒入钼酸铵溶液，不断搅拌
22、，最后加入100m1 05酒石酸锑钾溶液，用蒸馏水稀释至l000ml，摇匀，贮于棕色试剂瓶中避光保存。3钼锑抗混合显色剂 称取1.50g抗坏血酸（左旋，旋光度+120+220，分析纯）溶于100m1钼锑抗贮存液中，混匀。此试剂有效期为24h，宜用前配制，随配随用。4 磷标准液 准确称取1050C烘箱中烘干2h的分析纯磷酸二氢钾02195g，溶于400ml蒸馏水中。加浓硫酸5m1，移入1000ml容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，摇匀，此溶液为50mgL磷标准溶液。吸取上述磷标准液25ml，稀释至250ml，即为5mgL磷标准液，此溶液不宜久贮。磷标准曲线的绘制：分别吸取5mgL磷标准液0、1、2、
23、3、4、5（m1）于50ml容量瓶中，各加入05mgLNaHCO3浸提剂l0ml和钼锑抗显色剂5ml，除尽气泡后定容，充分摇匀，即为0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mgL的磷的系列标准液。30min后与待测液同时进行比色，读取吸光度值。在方格坐标纸上以吸光度值为纵坐标，磷mgL为横坐标，便可绘制成磷标准曲线。四、操作步骤 1待测液的制备 称取通过1.00mm筛孔的风干土样2.50g置于150ml三角瓶中，加入05mgLNaHCO3浸提剂50ml，塞紧瓶塞，在振荡机上振荡30min，取出后立即用干燥漏斗和无磷滤纸过滤，滤液用另一只三角瓶承接。2测定吸取滤液10m1（对含P2O51以下的
24、样品吸取10ml，含磷高时可改为5ml或2m1，但必须用05mgLNaHCO3补足至10m1），于50ml容量瓶中，加钼锑抗混合显色剂5m1，小心摇动，排净二氧化碳后加水定容至刻度，摇匀。30min后在721或722型分光光度计上用波长660mm比色，以空白液的吸收值为0，读出待测的吸光度值。五、结果计算土壤速效磷（mgkg）= 待测液（mgkg）待测定液体积分取倍数烘干土重（g）待测液mgkg从标准曲线上查得待测液的浓度（mgkg）； 待测定液体积50ml； 分取倍数浸提液总体积（ml）除以吸取浸出液体积（ml），即5010； 烘干土重风干土重除以（1+水分%）。六、注意事项1. 钼锑抗混合显色剂的加入量要准确。2. 加入混合显色剂后，即产生大量二氧化碳气体，由于容量瓶口小，二氧化碳气体不易逸出，在混匀过程中易造成试液外溢，造成测定误差，因此必须小心慢慢加入，同时充分摇动排出CO2，以避免CO2的存在影响比色结果。3. 此法温度影响很大，一般测定应在2025的温度下进行。如室温低于20，可将容量瓶放入3040热水中保温20min，取出冷却后比色。1为什么0.5 molL NaHCO3是石灰性土壤速效磷的较好浸提剂?2测定过程中，如果要获得比较准确的结果，应注意哪些问题?
