1、是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。,一、微生物,微生物,病毒细菌放线菌真菌原生动物,原核生物界,原生生物界,真菌界,病毒界,是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。,一、微生物,1.分类,特点：小 简 低,微生物,病毒细菌放线菌真菌原生动物,原核生物界,原生生物界,真菌界,病毒界,是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。,1.分类,一、微生物,病毒的结构,2.病毒,病 毒,SARS冠状病毒、禽流感病毒,朊病毒（蛋白质病毒）,病毒的增殖,细菌的外形与大小,3.细菌,A.球菌 B.杆菌 C.弧菌 常见的细菌三种典型形态,A,B,C,细菌的结构,芽孢：细菌形成的椭圆形的休眠体,芽孢
2、的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌。,异养菌：腐生菌寄生菌 大部分病原菌,细菌的营养类型,根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。自养菌：,异养菌：腐生菌寄生菌 大部分病原菌,光能自养型：光合细菌,细菌的营养类型,根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。自养菌：,异养菌：腐生菌寄生菌 大部分病原菌,光能自养型：光合细菌化能自养型：硝化细菌，铁细菌，硫细菌,细菌的营养类型,根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。自养菌：,菌落,
3、单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。,细菌的菌落特征因种而异,菌落,4.放线菌,结构：单细胞原核生物分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）,（2）繁殖,孢子丝|孢子,链霉素、土霉素、四环素、氯霉素、红霉素、庆大霉素,微生物中发现了几千种抗生素，其中2/3是由放线菌产生的,应用:,5.真菌,酵母菌,酵母菌和霉菌,青霉,生 殖,腐生生活,孢子生殖,6.营养及功能,微生物化学元素组成：,6.营养及功能,微生物化学元素组成：,C、H、O、N、P、S,6.营养及功能,五大营养物质,碳源,氮源,生长因子,水,无机盐,
4、微生物化学元素组成：,C、H、O、N、P、S,二、培养基,培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。,（1）按物理状态分：固体培养基和液体培养基、半固体培养基。（2）按功能分：选择培养基和鉴别培养基。（3）按成分分：天然培养基和合成培养基。,1.培养基的类型,固体培养基：菌落,液体培养基：,表面生长,均匀混浊生长,沉淀生长,半固体培养基：,2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方,2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方,3.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和氮源、无机盐等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。,10
5、00mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成,4.培养基的用途,4.培养基的用途,液体培养基：增菌、工业生产固体培养基：纯化（分离），鉴定、活菌计数、保藏菌种,三、无菌技术,三、无菌技术,1.无菌技术的概念,无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。,1.无菌技术的概念,无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。,成功地培养微生物的关键。,三、无菌技术,（1）消毒定义：,2.消毒与灭菌的概念及两者的区别,（2）灭菌的定义：,（1）消毒定义：,2.消毒与灭菌的概念及两者的区别,（2）灭菌的定义：,3.常用的消毒与灭菌的方法,灭菌的方法：,1.灼烧灭菌,灭菌的方法：,1.灼
6、烧灭菌,灭菌的方法：,2.干热灭菌：160-170 下加热1-2h。3.高压蒸气灭菌100kPa、121 下维持15-30min.,1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？,旁栏思考,1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？,答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。,旁栏思考,2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。（1）培养细菌用的培养基与培养皿（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管（3）实验操作者的双手,2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。（1）培养
7、细菌用的培养基与培养皿（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管（3）实验操作者的双手,答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。,微生物实验室培养的基本操作程序,1.器具的灭菌2.培养基的配制3.培养基的灭菌4.倒平板5.微生物接种6.恒温箱中培养7.菌种的保存,四、实验操作,(一)制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌),四、实验操作,(一)制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌),1计算、称量2溶化3调pH：pH764过滤：这一步可以省去。5分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。6加塞7包扎,操作步骤,8灭菌:将50ml
8、培养基用玻棒转移至三角锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121，灭菌1530min。将培养基用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在160170 下灭菌2h。,倒平板技术,1.将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拨出棉塞。,1,2,3,4,倒平板技术,2.右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰。,1,2,3,4,倒平板技术,1,2,3,4,3.用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基(约1020mL)倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。,倒平板技术,1,2,3,4,4.等待平板冷却凝固，大约需
9、510min。然后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上。,9倒平板:待培养基冷却到50 左右时，在酒精灯附近倒平板。（倒平板操作见课本）2d后观察平板，无杂菌污染才可用来接种.10无菌检查：将灭菌的培养基放入37的温室中培养2448小时，以检查灭菌是否彻底。,1.培养基灭菌后，需要冷却到50 左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？,问题讨论,1.培养基灭菌后，需要冷却到50 左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？,答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。,问题讨论,2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
10、,2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？,答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。,3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？,3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？,答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。,4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？,4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？,答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。,
