1、5原生质体培养和植物细胞工程（1）植物原生质体的获取方法：酶解法即在0.50.6 mol/L的甘露醇溶液环境（较高渗透压）下用纤维素酶和果胶酶混合液处理，获得球形原生质体。（2）植物细胞工程的概念和操作过程：培养植物细胞（包括原生质体），借助基因工程方法，将外源遗传物质（DNA）导入受体细胞（包括原生质体受体）中，或通过一定的方法将不同来源的遗传物质重新组合，再通过对这些转基因细胞或重组细胞进行培养，获得特定性状的新植株。6多途径的植物克隆实践（1）开辟植物繁殖的新途径：如培养产生出遗传变异的新植株。（2）改良作物：如单倍体育种；突变体的利用。（3）细胞产物的工厂化生产。1细胞的全能性是指（）
2、A已经分化的细胞全部能进一步分化B已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能C细胞既能分化，也能恢复到分化前的状态D细胞具有全面的生理功能解析：选B细胞的全能性是指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。2植物组织培养的理论根据是（）A培养基中营养物质全面B细胞的全能性C细胞的分裂 D细胞的分化选B植物细胞只有保持其全能性，才能发育成完整的植株，因此，植物组织培养的理论根据是细胞的全能性。3植物组织培养过程中的脱分化是指（）A植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞的过程B未成熟的种子经过长期培养，长出幼苗的过程C植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生愈伤组织的过程D取植物的枝芽培育成一
3、株新个体的过程选C植物细胞的脱分化就是让已分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能，而转变为未分化的细胞愈伤组织的过程。1细胞具有全能性的原因一般生物体的每一个细胞都包含该物种所特有的全套遗传物质，都具有发育成为完整个体的潜能。2细胞全能性大小的比较（1）植物细胞动物细胞（动物细胞只有细胞核具有全能性）。（2）受精卵生殖细胞（精子、卵细胞）体细胞。（3）体细胞：分化程度低的分化程度高的；细胞分裂能力强的细胞分裂能力弱的；幼嫩的细胞衰老的细胞。3植物细胞表现全能性的条件（1）离体状态。（2）营养物质：种类齐全、比例合适。（3）植物激素：生长素、细胞分裂素。（4）外界条件：适宜的温度、pH和
4、光照（愈伤组织的形成和生长需要避光培养，分化培养需见光）等。（5）无菌操作。题组冲关1下列植物组织细胞，在条件适宜的情况下，最易表达其全能性的是（）A茎韧皮部细胞 B叶肉细胞C受精卵 D根尖分生区细胞选C细胞的全能性由大到小依次是受精卵、生殖细胞、体细胞。2下列有关细胞全能性的叙述，正确的是（）A植物体只有体细胞才具有发育成完整个体所必需的全套基因B高度分化的植物细胞只有处于离体状态时，才有可能表现出全能性C植物体内某些体细胞没有表现出全能性，其原因是所含基因不同D紫色糯性玉米种子培育成植株，这反映植物种子具有全能性选B细胞具有全能性的原因是细胞具有发育成完整个体所必需的全套基因，而配子也具有
5、这样的全套基因，同样具有全能性；植物体内细胞没有表现出全能性，这是细胞内基因在特定时间和空间条件下选择性表达的结果；种子是具有胚性结构的植物幼体，其发育成植株，不属于细胞全能性；细胞全能性的表达前提是离体培养的细胞、组织或器官。1植物组织培养的过程（1）过程图示： （2）分化、脱分化及再分化的比较：含义形成的结构条件分化基因在特定时间和空间条件下选择性表达形成不同组织或器官生物体生长发育中脱分化已经分化的细胞转变成未分化细胞形成排列疏松、高度液泡化的愈伤组织离体提供激素提供营养物质提供适宜的外界条件再分化由愈伤组织分化出胚状体（幼苗）形成具根、芽的胚状体2植物组织培养技术的注意事项（1）外植体
6、的选择与制备：外植体的选择：外植体脱分化的难易因植物种类、器官来源及生理状况的不同而不同。一般来说，植物的花和幼嫩的组织脱分化相对比较容易，而植物的茎、叶和成熟的组织较难。制备外植体首先要消毒，其次要选取有形成层的部分，因为形成层细胞易脱分化。（2）无菌操作：植物组织培养成功的关键是避免微生物的污染，所有实验用具要严格灭菌，接种过程要进行严格的无菌操作。（3）光照的控制、植物激素的使用、组织培养过程中使用的培养基对培养过程的影响等。3下列有关植物克隆的叙述中，正确的是（）A适宜条件下，花粉经再分化可产生愈伤组织B植物细胞经多次传代培养后全能性的表达程度不变C同一植物个体所有具细胞核的活细胞全能
7、性表达程度相同D可将愈伤组织移至液体培养基中并放在摇床上悬浮培养来获取单个植物细胞选D植物组织培养中，脱分化可以形成愈伤组织；植物细胞经多次细胞分裂后，可能会发生细胞分化，细胞全能性的表达程度会发生改变；同一植物个体不同分化程度的细胞全能性表达程度不同，分化程度低的细胞全能性较高。4下图为某二倍体植株花药中未成熟的花粉在适宜培养基上形成完整植株的过程。有关叙述正确的是（）A过程表示脱分化，过程表示再分化B过程需要避光，过程需要光照C过程说明花粉细胞具有全能性D过程获得的完整植株自交后代不会发生性状分离选C过程表示脱分化，过程表示再分化，过程表示诱导生根和细胞增殖；过程需要避光，过程需要光照，以
8、利于芽中形成叶绿素；过程获得的单倍体植株具有高度不育的特点。1植物组织、细胞、器官培养和原生质体培养的关系2原生质体培养过程 3植物细胞工程的操作流程5下列关于植物克隆的叙述，错误的是（）A通过花药离体培养可获得单倍体B通过平衡植物激素种类就能实现器官发生C可利用细胞培养生产人参皂甙等中药成分D对植物愈伤组织进行诱变、培育和筛选可获得新品种选B通过平衡植物激素的种类及配比可调控器官发生和形态建成。6苦荞富含黄酮类化合物等营养物质，在降血糖、降血脂等方面功效显著。查尔酮合成酶（CHS）是黄酮类化合物合成的关键酶，下图为将CHS基因导入苦荞，培育高产黄酮苦荞品系示意图。（1）基因工程的核心是_。（
9、2）可利用_、_方法获取CHS基因。（3）过程中切开质粒的酶是_。它能在质粒特定的部位切割的原因是_。（4）过程、分别是_。苦荞细胞能培养成植株的根本原因是_。（5）为培育转基因苦荞植物，还可将该植物幼叶消毒后，用_混合液处理，获得了原生质体。混合液中含有适宜浓度的甘露醇，其作用是_。将目的基因导入到原生质体，经培养形成愈伤组织，再通过_得到分散的胚性细胞，发育成_，生长发育后获得该转基因植株。（6）愈伤组织继代次数过多会丧失细胞全能性的表达能力，下列原因错误的是_。（填选项编号）A愈伤组织发生遗传变异B愈伤组织不能分散成单细胞C愈伤组织中激素平衡发生改变D愈伤组织对外源激素敏感性发生改变答案
10、：（1）构建重组DNA分子（2）从基因文库获取化学方法合成（或PCR合成）（3）限制性核酸内切酶（限制酶）能识别特定的核苷酸序列并在特定的切点上切割DNA分子（4）脱分化、再分化植物细胞的全能性（细胞中含冇发育成完整个体所必需的全部基因）（5）纤维素酶和果胶酶（写全才可）维持渗透压液体悬浮培养胚状体（6）B随堂基础巩固1植物细胞表现全能性的必要条件是（）A给予适宜的营养和外界条件B导入其他植物细胞的基因C脱离母体后，给予适宜的营养和外界条件D将成熟筛管的细胞核移植到去核的卵细胞内选C高度分化的植物细胞处于离体状态时，在一定的营养物质和外界条件下才能表现全能性。2下列说法错误的是（）A若要获得玫
11、瑰花的原生质体需用纤维素酶和果胶酶去掉细胞膜B利用植物细胞工程技术，可获得抗病虫害、抗干旱、抗盐碱和优质高产作物新品种C在植物细胞工程中运用了基因工程技术D原生质体的培养结合基因工程操作，为遗传学、植物生理学和细胞生物学问题提供了良好的研究系统选A原生质体的结构不包括细胞壁，故要获得玫瑰花的原生质体去掉的应为细胞壁，而非细胞膜。3下列有关植物细胞工程的叙述，错误的是（）A通过培养植物细胞，可获取大量的细胞代谢产物B在培养基中加入不同浓度的氯化钠溶液，可诱发和筛选出抗盐植株C原生质体培养结合基因工程技术，可获得具有特定性状的新植株D由于植物细胞具有全能性，同种植物的不同基因型个体，它们细胞全能性
12、的表达程度相同选D如果植物细胞培养仅培养到愈伤组织阶段，则可利用愈伤组织增殖能力强、种类单一等特点，生产细胞代谢产物；改变外界条件，既可进行筛选也可进行诱变；基因工程可以定向改造生物性状；对于同种植物的不同基因型的个体，它们的细胞会发生分化，而细胞分化的程度不同，直接导致细胞全能性的表达程度不同。4下图为将胡萝卜的离体组织在一定条件下培育形成试管苗的过程示意图。有关叙述错误的是（）A过程都会发生细胞的增殖和分化B这种技术利用了植物细胞全能性C适当配比的营养物质和生长调节剂会调节过程D过程需严格控制无菌无毒环境选A图示为植物组织培养的流程，过程表示脱分化，过程表示再分化，脱分化过程不存在细胞的分
13、化。5下列实例中能体现细胞全能性的是（）用培养基培养的胡萝卜单个细胞发育成可育的植株植物用种子进行繁殖烟草花药离体培养得到了单倍体植株A BC D选B用培养基培养的胡萝卜单个细胞发育成可育的植株及烟草花药离体培养得到了单倍体植株都采用植物组织培养技术，都体现了植物细胞的全能性。而种子是绿色开花植物的一种器官，是通过有性生殖形成的，因此，植物用种子进行繁殖没有体现植物细胞的全能性。课时跟踪检测1下列有关细胞全能性的叙述，错误的是（）A受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完整个体，因此全能性最高B生物体内的体细胞由于细胞分化，全能性不能表达C卵细胞与受精卵一样，细胞未分化，全能性最高D植物细胞在一定
14、条件下离体培养能表现出全能性选C受精卵是个体发育的起点，在自然条件下，通过细胞的分裂、分化形成完整的个体，所以受精卵的全能性最高；体细胞是由受精卵通过有丝分裂形成的，但由于细胞分化，基因在不同的细胞中进行选择性表达，因而体细胞并没有表现出全能性；卵细胞在一定条件下，全能性比体细胞高，但与受精卵不同，卵细胞的分化程度也很高；分化的植物细胞如果全能性要表达出来，需在一定条件下进行离体培养。2如图为植物组织培养过程，有关说法错误的是（）Ab试管中细胞全能性最高Bd试管中培育出的个体都是纯合子Cab的过程需要激素的刺激Dad的细胞分裂都是有丝分裂选B植物组织培养能保持亲本的优良性状。ab不需要光照，b
15、c则需要一定的光照。ad只发生有丝分裂，不发生减数分裂。d试管中是否为纯合子取决于亲本。3下列发生了细胞分化且能体现体细胞全能性的生物学过程是（）A玉米种子萌发长成新植株B小鼠骨髓造血干细胞形成各种血细胞C小麦花粉经离体培养发育成单倍体植株D胡萝卜根韧皮部细胞经组织培养发育成新植株选D种子萌发长成植株是由幼体到成体的正常生长发育过程，虽有细胞分化，但不能体现细胞的全能性；骨髓造血干细胞形成各种血细胞，仅仅是细胞分化的过程，没有形成完整的个体，不能体现细胞的全能性；花粉经离体培养发育成单倍体植株，经历了细胞分化，体现的是花粉（生殖细胞）的全能性，没有体现体细胞的全能性；胡萝卜根韧皮部细胞经植物组
16、织培养发育成新植株能体现出体细胞的全能性。4下图表示植物组织培养过程。据图分析下列叙述正确的是（）A植株根尖细胞的全能性比植株根尖细胞的强B试管的培养基中含有植物生长调节剂，不含有机物C试管中的细胞具有细胞质丰富、细胞核和液泡都大的特性D调节培养基中植物生长调节剂的比例可诱导产生不同的植物器官选D由于是由上的组织经培养形成的个体，故二者的全能性应该相同；由到的过程中植物细胞不能进行光合作用，因而试管中含有有机物如蔗糖等；试管中细胞为愈伤组织细胞，液泡小。5植物细胞培养是在植物组织培养技术的基础上发展起来的，下列有关植物细胞培养的叙述，错误的是（）A植物细胞培养技术的目的是为了获得大量有生理活性
17、的次级代谢产物B植物细胞培养技术快速、高效，不受季节、自然环境等条件的限制C利用生物反应器悬浮培养人参细胞，提取人参皂甙，用于生产保健药品和美容护肤用品D植物细胞培养需要在一定的温度、pH等条件下进行，但不需要进行无菌操作选D植物细胞培养和植物组织培养一样，整个培养过程必须在无菌条件下进行，否则培养基内将长出许多杂菌，与离体细胞争夺营养与生存空间，影响细胞增殖和细胞次级代谢产物的获得。6下图表示利用棉花叶肉细胞原生质体进行培养、遗传改良的过程，据图分析错误的是（）A过程需在适宜条件下用纤维素酶和果胶酶处理B过程能定向诱导原生质体产生优良性状的突变C过程中叶肉细胞失去了原来特有的结构和功能D过程
18、需用适宜浓度的生长素和细胞分裂素处理选B生物的变异是不定向的。7下图为将胡萝卜的离体组织在一定条件下培育形成试管苗的过程示意图。A利用此过程获得的试管苗可能为杂合子B过程所需的培养基成分相同C多倍体植株的培育需经过如图所示过程D此过程依据的生物学原理是细胞膜具有流动性选A植物的组织培养过程是无性繁殖的过程，如果离体的组织来自纯合子，将来得到的试管苗是纯合子，如果离体的组织来自杂合子，将来得到的试管苗是杂合子；为脱分化，为再分化，所需培养基成分不同；用秋水仙素处理萌发的种子和幼苗培养就可获得多倍体植株，不需组织培养过程；植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性而不是细胞膜的流动性。8用细胞工程技
19、术将天竺葵与香茅草杂交产生了驱蚊香草，使有驱蚊作用的香茅醛随天竺葵的蒸发作用散发到空气中，达到驱蚊的效果。有关驱蚊香草培育过程的叙述，错误的是（）A需要用酶解法制备原生质体B愈伤组织的代谢类型是自养需氧型C克服了远缘杂交不亲和的障碍D包含了有丝分裂和细胞分化的过程选B愈伤组织还没有形成叶绿体，它的代谢类型是异养需氧型。9下图所示为培育农作物新品种的一种方法。相关叙述正确的是（）A过程分别称为细胞分裂和细胞分化B该育种与传统杂交育种相比，最大的优点是繁殖速度快C该育种过程说明已分化细胞中不表达的基因仍具有表达的潜能D该育种方法只涉及细胞工程选C过程分别是脱分化和再分化；该育种方法最大优点是能定向
20、改变生物的遗传特性；该育种方法涉及的生物技术有基因工程和植物细胞工程。10将花药离体培养形成完整的植株，通常需要经过的两个阶段是（）A脱分化形成愈伤组织，再分化形成根、芽B分化形成愈伤组织，进一步分化形成根、芽C通过减数分裂形成配子，配子再发育形成根、芽D先用秋水仙素处理花粉，再进行花药离体培养选A花药离体培养应用了植物组织培养技术，植物组织培养包括脱分化和再分化两个过程。11下图为胡萝卜韧皮部细胞通过无菌操作接入试管后，在一定的条件下形成试管苗的培育过程。请据图回答下列问题：（1）要促进细胞分裂生长，培养基中应有一定的营养物质和植物激素，营养物质包括_和小分子有机物；植物激素主要包括细胞分裂
21、素和_两类。（2）此过程依据的原理是_。A和B阶段进行的分裂方式是_，B阶段除了细胞分裂外，还进行细胞_等。（3）此过程要求无菌操作，主要是指对_进行灭菌。B阶段需要光照，原因是_。（4）试管苗的根细胞中没有叶绿素，而叶的叶肉细胞中具有叶绿素，这是基因_的结果。植物组织培养是将离体的植物器官、组织或细胞接种到经灭菌的培养基上进行培养。培养基中含有供组织细胞生长发育所需要的无机物和小分子有机物，还有调节细胞脱分化和再分化的细胞分裂素和生长素。由外植体发育成试管苗的过程中，脱分化阶段细胞进行有丝分裂，再分化阶段愈伤组织细胞经细胞分裂和分化形成试管苗，再分化阶段需要光照，原因是叶肉细胞中叶绿素的合成
22、需要光照条件。（1）无机物生长素（2）植物细胞的全能性有丝分裂分化（3）培养基叶肉细胞中叶绿素的合成需要光照条件（4）选择性表达12基因型为AaBb的水稻（24条染色体）的花药通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下培养形成试管苗。据图回答下列问题：（1）愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成的不规则的细胞团，愈伤组织形成过程中，必须从培养基中获得_和小分子有机物等营养物质。（2）花药在培养基所提供的特定条件下发生多次细胞分裂，形成愈伤组织，此过程叫做_，细胞分裂的方式是_。（3）诱导愈伤组织分化出芽和根，最后长成植株。这一过程叫_。该植株是_植株，其特点是_，生产上没有推广应用的价值。（4）要促进花
23、粉细胞分裂生长，培养基中应有_和_两类激素。（5）愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和茎。这一过程中必须给予光照，其原因是：_。_。（6）试管苗的细胞核中含有个_DNA分子。（7）培养成的试管苗可能出现的基因型有_。如果要获得育种需要的植株，并能繁殖新品种，后面的育种步骤是_。（1）水、无机盐（2）脱分化有丝分裂（3）再分化单倍体长势弱小，高度不育（4）生长素细胞分裂素（5）光是叶绿素形成的必要条件光合作用需要光（6）12（7）ab、Ab、AB、aB用秋水仙素处理单倍体幼苗13红豆杉是濒危植物，其树皮产生的紫杉醇对癌症有一定的疗效。如图是红豆杉植株组织培养和细胞培养的流程图。（1）图中为愈伤组织，
24、通过B过程可最终产生新的植株，通过C过程可产生大量细胞，则图中A、B、C分别表示的过程为_。其中B过程的实质是_。（2）对的培养一般要采用_培养基，且要不断通入无菌空气并进行搅拌，其目的是_。（3）从生殖方式上分析属于_生殖。（4）若是红豆杉的花药，则得到的个体为（）A单倍体 B二倍体C单体 D多倍体图中为红豆杉离体的植物器官、组织或细胞（外植体），为愈伤组织，为试管苗（胚状体），为植物体，为大量的红豆杉细胞；再分化的实质是细胞内基因的选择性表达。的培养目的是使细胞快速增殖，一般采用液体培养基进行培养，在培养过程中通入无菌空气是为了保证细胞生长过程中氧气的供应，不断搅拌的目的是让细胞和培养液充
25、分接触。（1）脱分化、再分化、有丝分裂基因的选择性表达（2）液体保证氧气的供应、使细胞和培养液充分接触（3）无性（4）A14（2016浙江10月选考）某小组欲进行烟草原生质体分离与培养的研究。请回答：（1）原生质体的分离：在无菌条件下，取烟草无菌苗的叶片，放入含有0.5 mol/L甘露醇（维持较高渗透压）的_混合液处理，经过离心纯化后获得原生质体。（2）原生质体的培养：将原生质体进行培养，重新长出细胞壁，形成胚性细胞。此时，应该_培养基中甘露醇的浓度，以利于胚性细胞继续培养形成细胞团，然后经两条途径形成再生植株。途径一：细胞团经球形胚、_和胚状体，最后发育成植株。途径二：细胞团增殖为愈伤组织，然后在发芽培养基上诱导出芽，切割芽经过生根后形成完整植株。上述发芽培养基中含量相对较高的激素是_，胚性细胞的主要特点是_（A.液泡小、细胞核小B液泡大、细胞核
