1、植物组织培养技术考试复习题植物组织培养技术考试复习题一、填空题1、组织培养的理论依据是： 植物细胞的全能性。2、根据培养的外植体材料不同，可将植物组织培养分为以下几种类型： 愈伤组织培养 、 器官培养 、 胚培养 、 细胞培养 、 原生质体培养 、 遗传转化 。3、植物组织培养实验室一般划分为 洗涤室 、 培养基配置室 、 缓冲室 、 无菌接种室 、培养室、观察室、驯化室等分室，其中植物组织培养实验室对无菌条件要求最严格的区域是 无菌接种室 。4、培养基成分主要包 水分 、 无机盐类 、 有机营养成、植物生长调节物质 、 天然物 质 、 pH 、 凝固剂 。5、目前应用最广泛的组培基本培养基是
2、 MS培养基 。6、培养基最常用的碳源是 糖类物质 ，使用浓度在1%-5% 常用 3 %。7、培养基中加入活性炭的目的： 减少外植体的褐变 。8、生长素/细胞分裂素的高低决定着外植体的发育方向，其比值高则有利于 根 的形成； 其比值低则有利于 芽 的形成。9、一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象称为_脱分化_10、某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定，对其灭菌时不能进行 (高压蒸汽 )灭菌，而要进行 过滤方法灭菌 。11、确定花粉发育时期最简捷有效的方法是 压片镜检法 。12、液体培养基和固体培养基最主要的区别是：固体培养基中添加了 琼脂粉 ，而液体培养
3、基一般不添加。13、细胞悬浮培养的方法有 分批培养 和 连续培养 。14、外植体灭菌常用的消毒剂是 酒精 ，使用浓度一般为 7075 。15、具有防止褐变作用的维生素是 抗坏血酸维生素c 。16、常用防止褐变的试剂有 有机酸 、 硫代硫酸钠 。17、组培中按照污染的对象分，常见的污染类型有 细菌性污染 、 真菌性污染 。18、在使用超净工作台进行无菌操作前，应先将借种器械放进超净工作台，并打开 紫外线灯和风机组工作 进行消毒20分钟左右。19、配制培养基调节pH值时常用 氢氧化钠溶液 和 稀盐酸溶液 。20、某溶液在使用前已配制成100倍的母液，在使用时，假设需要配制1/2 L的培养基，则需要
4、吸取母液的量是 5ml 。21、 原球茎 是兰科植物特有的一种快繁方式。22、组织培养植株的再生途径有两条，分别是： 器官发生途径 和 胚胎发生途径 。23、一般进行外植体培养时，须诱导形成新的分生组织，即形成 愈伤组织 。24、在使用完移液枪后，应注意 调回至该移液枪最大量程 。25、植物组织培养快速繁殖技术的基本过程包括 材料的初代培养 、 继代培养 、 生根培养 、 驯化培养 。26、接种室每隔三个月会定期进行熏蒸消毒，一般使用 甲醛 和 高锰酸钾。二、选择题：1、20世纪30年代，植物组织培养领域有两大发现，一是 B 族维生素对植物生长的重要性，二是生长调节物质的发现。 A、A B、
5、B C、 C D、 E2、( B 以下哪种不是原生质体别离所用的酶_ _。 A、纤维素酶 B、淀粉酶 C、果胶酶 D、半纤维素酶3、( D )以下哪种在MS培养基中不起促进生长作用_。 A、氨基酸 B、肌醇 C、维生素 D、琼脂4、以下激素， D 是天然的A、 IBA B、 NAA C、 BA D 、 ZT5、以下不能作为植物组织培养的材料是： D A、秋海棠的叶 B、马铃薯的块茎 C、成熟的花粉 D、木质部中的导管细胞6、离体培养中，对温度的调控比对光照更为重要，培养室一般所用的温度是 CA、15-35 B、23-32 C、 252D、20-237、外植体外表灭菌可选择的外表灭菌剂的种类较多
6、，但灭菌效果最好的是 BA、2次氯酸钠 B、氯化汞 C、70酒精 D、吐温808、生根培养一般可采用12或者14MS培养基，并加入适量的 D。 A、2.4-D B、赤霉素 C、细胞分裂素D、生长素9、影响培养基凝固程度因素有 DA、琼脂的质量好坏 B、高压灭菌的时间与温度C、培养基的PH D、以上都是10、以下不属于大量元素的盐是CA、 NH4NO3 B、 KNO3 C、 ZnSO4.7H2O D、 MgSO4.7H2O11、接种操作中一方面要建立 A的概念，对可能有菌的地方进行严格消毒处理，另一方面操作时干净利落，不可拖泥带水。 A、无菌 B、 污染 C、科学 D、灭菌12、在组织培养中，月
7、季、菊花是通过 A方式快繁；蝴蝶兰是通过 方式快繁的。A、 无菌短技型，原球茎发生型 B、原球茎发生型，无菌短技型 C、 无菌短技型，器官发生型D、胚状体发生型，原球茎发生型13、为了诱导芽的形成，培养基中细胞分裂素与生长素的浓度AA 、比值大 B、 比值小C、 比值相等 D、 比值的大小没有关系14、为了诱导根的形成，培养基中细胞分裂素与生长素浓度BA 、比值大 B、 比值小 C、 比值相等 D、 比值的大小没有关系15、植物病毒病害防治上，植物病毒脱毒技术得到了广泛的应用，以下脱毒技术效果最好、应用最广泛的是C 。A、热处理脱毒法B、茎尖培养脱毒法C、热处理与茎尖培养相结合的脱毒法D、基因
8、工程技术脱毒法16、热处理法中，最主要的影响因素是D 。A、温度 B、时间C、湿度 D、温度和时间17、根据特异性的抗原抗体反应可检测植物病毒的存在，这种检测方法是 C。A、直接鉴定法 B、电子显微镜鉴定法C、血清学鉴定法 D、分子生物学鉴定法18、( B )大多数植物组织培养培养基最适pH为 。 A、 B、 C、3.0-4.0 D、19有一种植物经初代培养得到株无菌苗，以后按每天继代增殖一次，每次增殖倍数为倍，一年后繁殖苗有C A、 3410株 B 、4 312株 C 、 310株 D、 412株20、(D )以下哪种在MS培养基中不起促进生长作用_D_。 A、氨基酸 B、肌醇 C、维生素
9、D、琼脂21、植物病毒病害防治上，植物病毒脱毒技术得到了广泛的应用，以下脱毒技术效果最好、应用最广泛的是 C。A、热处理脱毒法B、茎尖培养脱毒法C、热处理与茎尖培养相结合的脱毒法D、基因工程技术脱毒法22、以下物质不能用高温蒸汽灭菌的是C A、镊子 B、滤纸 C、抗生素类 D、6-BA23、( A )以下那种不是无性繁殖的器官_。A、种子 B、枝条 C、块茎 D、块根22、( B ) 植物离体保存的主要步骤是 。离体培养物的保存离体培养与祛除病原物 种质离体收集遗传稳定性鉴定A、B、C、D、24、 ( C ) 原生质体纯化步骤大致有如下几步 。将收集到的滤液离心，转速以将原生质体沉淀而碎片等仍
10、悬浮在上清液中为准，一般以500rmin离心15min。用吸管谨慎地吸去上清液。将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中(除不含酶外，其他成分和酶液相同)，再次离心，去上清液，如此重复三次。将原生质体混合液经筛孔大小为40100um的滤网过滤，以除去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质，收集滤液。用培养基清洗一次，最后用培养基将原生质调到一定密度进行培养。一般原生质体的培养密度为104106ml。A、 B、 C、 D、25、( D )以下有关细胞全能性的含义，正确的选项是 。A、每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能 B、生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全部功能 C、生物体的每一个活细胞都具有
11、发育成完整个体的潜能 D、生物体的每个细胞都经过产生、分裂、分化、生长、衰老、死亡的全过程 26、( D )以下不属于活性炭在组织培养中的作用是_。A、吸附有毒物质 B、减少褐变，防止玻璃化 C、创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长 D、增加培养基中的养分三、名词解释1、植物组织培养：又称植物离体培养，是在无菌和人工控制的条件下，利用合适的培养基，完成对植物的器官，组织，细胞以及原生质体的培养，使其按人们的意愿生长，增殖或再生完整植株的一门生物技术。2、脱分化：是指一个成熟个体恢复分化状态，失去已分化组织，形成愈伤组织的过程。3、离体培养：在植物组织培养中，把植物体的组织或细胞离体在
12、一定条件下培养。4、愈伤组织：植物培养中，植物细胞表现其全能性，经过脱分化，形成的一团无序生长的薄壁组织。5、细胞悬浮培养：是指植物的细胞和细胞小聚体在液体培养基中进行培养，使之在体外繁殖，生长，发育，并在培养过程中保持很好的分散性的技术。6、玻璃化现象：是试管苗的一种生理失调症状，当植物材料进行离体培养时，有些组培苗的嫩茎，叶片往往会出现半透明状和水渍状的现象。7、外植体：进行植物组织培养中作为离体培养材料的器官或组织的片段。在继代培养时，将培养的组织切段移入新的培养基时，这种切段也称外植体。8、驯化现象：在植物组织培养的早期研究中，发现一些植物的组织经长期的继代培养发生了一些变化，在前期的
13、继代培养中需要生长调节物质的植物材料，其后加入少量或不加入生长调节物质就可以继续生长的现象。四、简答题：1.简述培养基配制的基本过程答：1取出母液并按顺序排好，并将有机营养物质贮液溶化待用。2再取出洁净各种的玻璃器皿如：烧杯，玻璃棒，移液管，移液枪，量筒放在指定位置。3取一个大烧杯，倒入三分之一的纯水，并依母液所需量按顺序加入，并不断搅拌。4再加入蔗糖，琼脂，并加热使其完全溶解。5加入植物生长调节剂，用纯水定容。6调节pH，用预先配制好的氢氧化钠溶液或稀盐酸溶液进行调节。7将培养基分装到各培养器皿，并封好瓶口。2.在植物组织培养实验中，造成污染的因素有哪些？答：1培养基和各种使用器具消毒不彻底
14、2外植体灭菌不彻底，杂菌残存外植体外表3超净工作区域污染4操作人为因素带入5环境不洁净3.简述外植体的消毒过程。清水清洗清洁精清洗吸干水分70酒精清洗升汞清洗无菌水清洗。4.简述缓解和减轻褐变的措施。1外植体和培养材料进行2040d的遮光或暗培养，可以减轻一些种类的褐变现象；2选择适宜的培养基，调节激素用量，控制温度和光照，降低温度，减少光照；3选择年龄适宜的外植体材料进行培养；4在培养基中，加入抗氧化剂和其他抑制剂如抗坏血素，可以有效地抑制褐变；5连续转移，对易褐变的材料可间隔1224h的培养后，再转移到新的培养基上，连续培养处理710d后，褐变现象便会得到控制或大为减轻；6添加活性炭等吸附
15、剂，这是生产上常用的降低褐变的有效方法。5.脱毒苗的鉴定方法有哪些？1指示植物病毒鉴定法；2抗血清鉴定法；3电子显微镜鉴定法；4分子生物学方法。6.植物细胞悬浮培养中单细胞别离的方法有哪些？1从培养愈伤组织中别离单细胞；2从植物器官中别离单细胞，机械研磨法，果胶酶别离法。7.如何提高试管苗移栽的成活率 ？1培育壮苗2适时移栽3加强移栽前炼苗4选择适宜的移栽基质5)防止菌类滋生6)加强移栽后的管理，控制好光照，温度和水分。8.电子分析天平使用时，应注意哪些方面？ 1确认天平是否处于水平状态。2打开电源，在载物盘上放置称量纸或称量容器，去皮归零。3用药匙分假设干次加入药品，直到液晶显示屏显示读数稳定且到达所要称取的量，然后取走药品。4清理天平，关闭电源。
