1、新课标全国卷，40）根据基因工程的有关知识，回答下列问题：（1）限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有_和_。（2）质粒运载体用EcoR切割后产生的片段如下：AATTCGGCTTAA为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoR切割外，还可用另一种限制性核酸内切酶切割，该酶必须具有的特点是_。（3）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即_DNA连接酶和_DNA连接酶。（4）反转录作用的模板是_，产物是_。若要在体外获得大量反转录产物，常采用_技术。（5）基因工程中除质粒外，_和_也可作为载体。（6）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处
2、理的大肠杆菌作为受体细胞_。答案（1）黏性末端平末端（2）切割产生的DNA片段末端与EcoR切割产生的末端相同（其他合理答案也可）（3）EcoliT4（4）mRNA（或RNA）cDNA（或DNA）PCR（5）噬菌体动植物病毒（其他合理答案也可）（6）未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱（其他合理答案也可）4 如图是从酵母菌中获取某植物需要的某种酶的基因的流程，结合所学知识及相关信息回答下列问题：（1）图中cDNA文库_基因组文库（大于、等于、小于）。（2）过程提取的DNA需要_的切割，B过程是_过程。（3）为在短时间内大量获得目的基因，可用的技术是_，其原理_。（4）目的基因获取之
3、后，需要进行_，其组成必须有_及标记基因等，此步骤是基因工程的核心。（5）将该目的基因导入某双子叶植物细胞，常采用的方法是_，其能否在此植物体内稳定遗传的关键是_，可以用_技术进行检测。答案（1）小于（2）限制酶逆转录（3）PCRDNA复制（4）基因表达载体的构建启动子、终止子、目的基因（复制原点可不答）（5）农杆菌转化法目的基因是否整合到植物细胞的染色体上DNA分子杂交5.在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因afp对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值。如图所示是获得转基因莴苣的技术流程，请据图回答下列问题：（1）获取目的基因的主要途径包括从自然界已有的物种中分离和_。（2）过程需要的酶有_、_
4、。（3）重组质粒除了带有抗冻蛋白基因afp，还必须含有启动子、终止子和_，这样才能构成一个完整的基因表达载体。（4）如果受体细胞C1是土壤农杆菌，则将目的基因导入它的目的是利用农杆菌的_，使目的基因进入受体细胞C2，并将其插入到受体细胞C2中_上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达，形成转基因莴苣。经过程获得的转基因莴苣中的目的基因是否表达，在分子水平上可用_法进行检测，如果出现杂交带，说明目的基因已经表达蛋白质产品，转基因莴苣培育成功。答案（1）（用逆转录等方法进行）人工合成（2）限制酶DNA连接酶（3）标记基因（4）转化作用染色体的DNA抗原抗体杂交6 科学家从预期人的生长激素的功能出
5、发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了双链DNA片段，获得双链DNA。科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的质粒进行重组，并使其成功地在大肠杆菌中表达。已知限制酶的识别序列和切点是G GATCC，限制酶的识别序列和切点是 GATC。据图回答：（1）为了精确地获取图中的重组质粒，应用_切割质粒，用_切割目的基因。（2）将基因表达载体导入大肠杆菌B之前，要将大肠杆菌B放入一定浓度的_溶液中处理，使之成为感受态的大肠杆菌。（3）人的基因之所以能与大肠杆菌的质粒进行重组并发挥其功能，是因为二者都是_。人的生长激素基因能在细菌体内成功表达是因为_。（4）将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养
6、基上能够生长，说明该菌已导入了_，反之则没有导入。（5）上述方法制备人的生长激素，运用的现代生物技术是_。答案（1）限制酶限制酶（2）CaCl2（3）规则的双螺旋结构二者共用一套（遗传）密码子（4）普通质粒或重组质粒（5）蛋白质工程专题二 细胞工程4 如图是利用基因型为AaBb的某二倍体植物作为实验材料所做的一些实验示意图，请分析回答：（1）途径1、2、3中过程所采用的生物技术是_。（2）由途径1形成的植株B的基因型有_，植株B成熟时不可育的原因是_。使植株B可育的方法是_。（3）从植株A到植株C的培育过程，需要发挥调控作用的植物激素至少有_和_。（4）一般情况下，相同发育程度的植株C与植株D
7、的性状_（“相同”“不相同”或“不一定相同”）。（5）在相同条件和相同发育程度的情况下，植株D的表现型与植株A相同的可能性为_。答案（1）植物组织培养（2）AB、Ab、aB、ab减数分裂时染色体联会紊乱，不能形成正常的生殖细胞幼苗期用秋水仙素处理，使染色体数目加倍（3）细胞分裂素生长素（4）相同（5）100%6 科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆（如下图所示），请结合图示回答下列问题：（1）在进行细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分散处理，形成单个细胞，这个过程中需要利用_酶处理。（2）用于核移植的供体细胞，一般
8、都选用传代10代以内的细胞，原因是_ _（3）在进行原代培养时，细胞增殖的方式是_，此外，细胞增殖还表现出_和接触抑制等特点。（4）将进行培养的供体细胞注入去核的卵母细胞中，去除卵母细胞细胞核的目的是_。（5）将重组细胞在培养液中培养成的重组胚胎移入受体母牛后，该母牛就会生出与供体奶牛遗传物质相同的犊牛，但也不是100%的复制，原因最可能是_ _。（6）上述动物细胞工程中涉及的技术有_ _。转基因奶牛的克隆成功，说明了动物_具有全能性。答案（1）胰蛋白（2）该种细胞代谢旺盛、分裂能力强，且遗传物质没有发生改变（3）有丝分裂贴壁生长（4）使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞（5）生物
9、的性状受细胞核基因和细胞质基因共同控制；生物的性状还受环境因素的影响（6）核移植、细胞培养、胚胎移植技术体细胞的细胞核8 如图表示单克隆抗体的制备过程，据图回答下列问题：（1）制备单克隆抗体的步骤：a将_注入小鼠体内，从小鼠脾脏中获得B淋巴细胞，若要生产预防SARS的疫苗，则应用_感染小鼠。b通过图中过程获得的细胞为_，它除了具有无限增殖的特点外，还有哪些特征？ _。c将诱导融合后的细胞，放在_培养基的多孔培养板上培养、筛选，筛选得到的细胞中的染色体数正好是小鼠体细胞中的二倍吗？_，原因是_。（2）单克隆抗体与一般的血清抗体相比，优点是_；将该抗体制成生物导弹，则生物导弹的组成是_；为了便于了
10、解生物导弹的作用部位，常要对生物导弹中的成分进行_。（3）单克隆抗体的制备过程中需要两次筛选，请写出图中的编号和筛选目的。第一次筛选：_；第二次筛选：_ _。答案（1） a抗原SARS病毒b骨髓瘤细胞形态结构发生显著变化、细胞膜上糖蛋白等物质减少c选择是B淋巴细胞和骨髓瘤细胞都来自同一种小鼠（2）灵敏度高、特异性强（纯度高）单克隆抗体药物同位素标记（3）筛选出杂交瘤细胞筛选出能产生特定抗体并能大量增殖的细胞群9.（2010福建卷，32）红细胞生成素（EPO）是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限，目前临床上使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技
11、术生产的重组人红细胞生成素（rhEPO），其简要生产流程如图。请回答：（1）图中所指的是_技术。（2）图中所指的物质是_，所指的物质是_。（3）培养重组CHO细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞产物积累对细胞自身造成危害，应定期更换_。（4）检测rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的_细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。答案（1）PCR（2）mRNArhEPO（3）培养液（4）杂交瘤10 将胚状体包埋在一个能提供营养的胶质中，便成了所谓的人工种子。其培育过程如图所示，请回答：（1）人工种子依据的原理是_，是经过_技术培育而成的。（2
12、）包埋胚状体的胶质可以看作种子的哪部分结构？_ （3）如果外植体为植物的茎尖，通过的处理使细胞彼此分离，可加入_。A蛋白酶 B淀粉酶C纤维素酶和果胶酶 D胰蛋白酶（4）表示脱分化过程，其实质是_；表示再分化过程，其实质是_。（5）从上面所述胚状体的类型分析，人工种子萌发长成的植株是否都可育？_。答案（1）细胞的全能性植物组织培养（2）种皮及提供营养的胚乳或子叶（3）C（4）使细胞恢复分裂能力基因的选择性表达（5）若是由花粉（或三倍体植物的营养器官）发育而来的则不可育，若是由茎尖、根尖等营养器官发育而来的则可育5 科学家用植物体细胞杂交方法，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育出了
13、“番茄马铃薯”杂种植株（如图所示），其中表示过程，英文字母表示细胞、组织或植株。据图回答下列问题：（1）在实现过程的技术之前使用_酶处理细胞以除去细胞壁。（2）在将杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，依据的原理是_，其中过程相当于_过程，过程涉及的分裂方式为_。（3）若番茄细胞含m条染色体，马铃薯细胞含n条染色体，则“番茄马铃薯”细胞含_条染色体；若杂种细胞培育成的“番茄马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培养得到的植株属于_倍体植株。答案（1）纤维素酶和果胶（2）细胞的全能性脱分化有丝分裂（3）mn单6 回答下列有关动物细胞培养的问题：（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到
14、细胞表面_时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的_。此时，瓶壁上形成的细胞是_层。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是_。（2）随着细胞传代次数的增多，大部分细胞分裂停止，进而出现_现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成_细胞，该种细胞的黏着性_，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量_。（3）现用某种大分子染料对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不被染色，原因是_。（4）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用分裂_期的细胞在显微镜下进行观察。（5）在细胞培养过程中，通常在_条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中_的活性降低
15、，细胞_速率降低。答案（1）相互接触接触抑制单（或一）胰蛋白酶（2）衰老甚至死亡不死性降低减少（3）活细胞的细胞膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内（或死细胞的细胞膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）（4）中（5）冷冻（或超低温、液氮）酶新陈代谢7 人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备的抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答下列问题。（1）制备单克隆抗体过程中要用到_和_技术。（2）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于_，使小鼠产生能分泌相应_的淋巴细胞，此过程属于特异性
16、免疫中的_免疫。（3）在细胞内DNA合成一般有两条途径。主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基喋呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。利用两条DNA合成途径的不同特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的_成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_。（4）此过程生产的单克隆抗体可以与_特异性结合，从而诊断早孕。答案（1）动物细胞培养动物细胞融合（2）抗原抗体体液（3）氨基喋呤能无限增殖并分泌特异性抗体（4）人绒毛膜促性腺激素（或HCG）专题三 胚胎工程
17、1.牛胚胎移植的基本程序如图，请据图回答：（1）图中a、b、c过程分别是指_、_、_。（2）供体母牛的主要职能是_；受体母牛必须具备_ _。（3）为了提高牛胚胎的利用率，常采取的方法是_；处理的时期是_。答案（1）超数排卵冲卵胚胎移植（2）只产生具有优良遗传特性的胚胎健康的体质和健康的繁殖能力 （3）胚胎分割桑椹胚或囊胚期2.（2012山东卷，35）毛角蛋白型中间丝（KIF ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIF 基因的高绒质绒山羊的简单流程如下图。（1）过程中最常用的运载工具是_，所需要的酶是限制酶和_。（2）在过程中，用_处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维
18、细胞置于5% CO2的气体环境中，CO2的作用是_。（3）在过程中，用_处理以获取更多的卵（母）细胞。成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行_处理。（4）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是_。在胚胎移植前，通过_技术可获得较多胚胎。答案（1）质粒DNA连接酶（2）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）维持培养基（液）的pH（3）促性腺激素（或促滤泡素、孕马血清）去核（4）（早期）胚胎培养胚胎分割（2010山东卷，35）胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术，可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。（1）从良种母牛采集的卵母细胞，都需要进行体外培养，其目的是_；从良种公牛
19、采集的精子需_后才能进行受精作用。（2）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还需要提供_气体以维持_。（3）图中过程A称为_，它在胚胎工程中的意义在于_。（4）研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的的基因导入牛受精卵，最常用的导入方法是_；获得转基因母牛后，如果_即说明目的基因已经表达。答案（1）使卵母细胞成熟（或：使卵母细胞获得受精能力）获能（2）CO2 培养液（基）的pH（3）胚胎移植提高优良母畜的繁殖率（4）显微注射法牛奶中含有人类白细胞介素（或：牛乳腺细胞已合成人类白细胞介素）5.胚胎移植是胚胎工程技术的最后一道“工序”。如图是胚胎移植的基本程序，
20、请分析并回答下列问题：（1）图中超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射_。（2）配种时，卵子在输卵管内进一步成熟，当卵子达到_时，才具备与精子受精的能力。（3）“冲卵”实质上是用特定装置，将供体母牛子宫内的_冲洗出来。（4）冲卵后，对胚胎进行质量检查，这里培养的胚胎应发育到_阶段才能进行胚胎移植。（5）在此基础之上，通过_技术可以提高胚胎利用率，获得更多遗传物质相同的犊牛。答案（1）促性腺激素（2）减数第二次分裂中期（3）早期胚胎（4）桑椹胚或囊胚（5）胚胎分割7. 人的血清白蛋白在临床上的需求量很大。将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，就可以利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白。大致过程如图所示：（1）要实现过程超数排卵，应在性成熟母牛发情期的某一阶段用_处理，然后在恰当时期进行胚胎收集，即_。通过过程采集的精子不能直接与成熟的卵细胞受精，原因是_。（2）要使人的血清白蛋白基因在奶牛乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、_、标记基因等部分。在过程之前要检测早期胚胎细胞是否已经导入人的血清白蛋白基因，宜采用_技术。（3）过程要选择“雌性奶牛胚胎”的原因是_
