1、兽药培训讲义 第一章 基础知识 第一节 允许相对偏差1.1相对平均偏差例1：四次测定值分别为1.0113、1.0096、1.0095和1.0106计算其相对平均偏差。解：1.2两次平行测定的相对(平均)偏差=例1：两次测定值分别为97.15和96.17计算其相对偏差。解： 其中：xi表示测得值，表示平均值，n表示测定次数，d表示绝对偏差，dr表示相对偏差，表示相对平均偏差。若两份平行操作，设A、B为两次测得值，则其相对偏差如下式计算： 相对偏差=100%1.3允许相对偏差 用来表示测定结果的精密度，根据对分析工作的要求不同而制定的最大值。根据中监所兽药检验操作规程部分分析方法的允许相对偏差见表
2、1。根据表1可知为了比较相对偏差和允许相对偏差的大小，相对偏差计算时应保留一位小数。当两次平行测定结果一样时相对偏差写为0；当两次平行测定结果相对偏差修约到一位小数时为0.0时写为“小于0.1%”，例如如果两次平行测定结果相对偏差为0.042%，则写为“小于0.1%”。表1含量测定不同方法允许相对偏差分析方法原料注射液其他制剂紫外分光光度法0.5%1.0%1.0%中和法0.3%0.5%0.8%碘量法0.3%0.5%0.8%高锰酸钾法0.3%0.5%0.8%络合滴定法0.3%0.5%0.8%银量法0.3%0.5%0.8%非水溶液滴定法0.3%制剂需提取或蒸干测定不得过0.5,如提取洗涤操作步骤繁
3、杂时不得过1.0永停滴定法0.3%0.5%0.8%氮测定法1.0%1.5%1.5%重量法0.5%0.5%0.8%第二节 有效数字的处理2.1有效数字 在分析工作中实际能测量到的数字就称为有效数字。2.2有效数字修约规则为“四舍六入五成双”。即4时，则舍；6时，则入；等于5时，若5前面为偶数（0、2、4、6、8）则舍，为奇数（1、3、5、7、9）时则入。当5后面还有不是零的任何数时，无论5前面是偶或奇皆入。 例如：将下面左边的数字修约为三位有效数字。 2.3242.32 2.3262.33 2.3252.32 2.3352.34 2.325012.332.3检验结果的写法应与药典规定相一致，中间
4、的计算结果的小数位数应比药典规定值多一位。例如药典规定某原料按干燥品计算不少于99.0%，则两次平行测定结果应保留两位小数如99.32%和99.42%，检验结果保留一位小数为99.4%；再如某溶液药典规定应为1.80%2.20%（g/ml），则两次平行测定结果应保留三位小数如1.891%和1.911%，检验结果保留两位位小数为1.90%。第二部分 化学分析法第一节 重量法1.1 沉淀重量法原理 被测成分与试剂作用，生成组成固定的难溶性化合物沉淀出来，称定沉淀的质量，计算该成分在样品中的含量。1.2 实例说明例1 氯化氨甲酰甲胆碱注射液（0.25%）含量测定。操作方法：精密量取20ml，加盐酸溶
5、液（1500）20ml，在搅拌下加新配制的0.6%四苯硼钠溶液20ml，放置10分钟，用105干燥至恒重的垂熔玻璃坩埚滤过，沉淀用水洗涤4次，每次5ml。在105干燥至恒重，精密称定，所得沉淀重量与0.4094相乘，即得供试量中含有C7H17ClN2O2的重量。编 号12空坩锅第一次干燥后重(g)21.134520.4519空坩锅第二次干燥后重m1(g)21.134420.4517取样量V (ml)20.0020.00坩锅供试品第一次干燥后重(g)21.254720.5714坩锅供试品第二次干燥后重m2(g)21.254520.5713计算公式1 (%)2 (%)相对偏差(%)0.2允许相对偏
6、差0.5%检验结果 (%)98.1标准规定应为标示量的95.0105.0结 论符合规定1.3其他类似样品：复合维生素B可溶性粉和复合维生素B注射液中维生素B1含量测定。第二节 滴定分析法（容量分析法）概述 2.1原理 滴定分析法是将一种已知准确浓度的试剂溶液，滴加到被测物质的溶液中，直到所加的试剂与被测物质按化学计量定量反应为止，根据试剂溶液的浓度和消耗的体积，计算被测物质的含量。 2.2滴定分析的种类 2.2.1直接滴定法 用滴定液直接滴定待测物质，以达终点。 2.2.2间接滴定法 直接滴定有困难时常采用以下两种间接滴定法来测定： 2.2.2.1置换法 利用适当的试剂与被测物反应产生被测物的
7、置换物，然后用滴定液滴定这个置换物。例如：铜盐测定 Cu2+2KICu2K+I2 用Na2S2O3滴定液滴定，以淀粉指示液指示终点。再如Na2S2O3滴定液的标定方法。2.2.2.2回滴定法（剩余滴定法） 用定量过量的滴定液（或试剂）和被测物反应完全后，再用另一种滴定液来滴定剩余的前一种滴定液（或试剂）。例如，硫酸小檗碱注射液、盐酸吖啶黄注射液、戊二醛溶液等的含量测定。2.3滴定液 滴定液系指已知准确浓度的溶液，它是用来滴定被测物质的。滴定液的浓度用“XXX滴定液（YYYmol/L）”表示。2.3.1配制2.3.1.1直接法 根据所需滴定液的浓度，计算出基准物质的重量。准确称取并溶解后，置于量
8、瓶中稀释至一定的体积。 如配制滴定液的物质很纯（基准物质），且有恒定的分子式，称取时及配制后性质稳定等，可直接配制，根据基准物质的重量和溶液体积，计算溶液的浓度，但在多数情况是不可能的。例如兽药典中只有重铬酸钾滴定液和碘酸钾滴定液采用直接法配置。2.3.1.2间接法 根据所需滴定液的浓度，计算并称取或量取一定量试剂，溶解或稀释成一定体积，并进行标定，计算滴定液的浓度。2.3.2标定份数 标定份数系指同一操作者，在同一实验室，用同一测定方法对同一滴定液，在正常和正确的分析操作下进行测定的份数。不得少于4份。2.3.3复标 复标系指滴定液经第一人标定后，必须由第二人进行再标定。其标定份数也不得少于
9、4份。2.3.4允许相对平均偏差2.3.4.1标定和复标 标定和复标的相对平均偏差均不得超过0.1%。标定值和复标值的相对偏差不得超过0.1%2.3.4.2结果表示 如果标定与复标结果满足相对平均偏差的要求，则将二者的算术平均值作为结果。取4位有效数字。2.3.5使用期限 滴定液必须规定使用期。除特殊情况另有规定外，一般规定为一到三个月，过期必须复标。出现异常情况必须重新标定。2.3.6浓度范围 滴定液浓度的标定值应与名义值相一致，其最大与最小标定值应在名义值的5%之间。例如名义值为0.1mol/L的某滴定液标定值应在0.095mol/L0.105mol/L的范围内。2.3.7有关基本概念及公
10、式2.3.7.1物质的量 2.3.7.2物质的摩尔浓度 2.4校正因子（F）2.4.1含义 校正因子 表示滴定液的标定浓度与名义浓度之比。 由于药典中滴定度是以滴定液的名义浓度来计算的，而在实际工作中所用滴定液的实测浓度不一定与规定浓度恰恰符合。所以在计算含量时，必须用校正因子（F）将滴定液名义浓度时的滴定度校正为实测浓度时的滴定度。2.4.2计算公式2.5容量仪器的使用方法2.5.1滴定管的使用方法（操作演示）2.5.1.1滴定管的构造及其准确度（1）构造 滴定管是容量分析中最基本的测量仪器，它是由具有准确刻度的细长玻璃管及开关组成。滴定管是容量分析中最基本的测量仪器，是在滴定时用来测定自管
11、内流出溶液的体积。（2）准确度 a 常量分析用的滴定管为50ml或25ml，刻度小至0.1ml，读数可估计到0.01ml，一般有0.02ml的读数误差，所以每次滴定所用滴定液体积最好在20ml以上，若滴定所用体积过小，则滴定管刻度读数误差影响增大。b 10ml滴定管一般刻度可区分到0.05ml，读数可估计到0.01ml。 c 在容量分析滴定时，若消耗滴定液在25ml以上，可选用50ml滴定管；10ml以上者，可用25ml滴定管；在10ml以下，宜用10ml或10ml以下滴定管。以减少滴定时体积测量的误差。一般标定时用50ml滴定管；常量分析用25ml滴定管；非水滴定用10ml滴定管。2.5.1
12、.2滴定管的种类 （1）酸式滴定管（玻塞滴定管） 酸式滴定管的玻璃活塞是固定配合该滴定管的，所以不能任意更换。要注意玻塞是否旋转自如，通常是取出活塞，拭干，在活塞两端沿圆周抹一薄层凡士林作润滑剂（或真空活塞油脂），然后将活塞插入，顶紧，旋转几下使凡士林分布均匀（几乎透明）即可，再在活塞尾端套一橡皮圈，使之固定。注意凡士林不要涂得太多，否则易使活塞中的小孔或滴定管下端管尖堵塞。在使用前应试漏。 一般的滴定液均可用酸式滴定管，但因碱性滴定液常使玻塞与玻孔粘合，以至难以转动，故碱性滴定液宜用碱式滴定管。但碱性滴定液只要使用时间不长，用毕后立即用水冲洗，亦可使用酸式滴定管。 （2）碱式滴定管 碱式滴定
13、管的管端下部连有橡皮管，管内装一玻璃珠控制开关，一般用做碱性滴定液的滴定。其准确度不如酸式滴定管，只要由于橡皮管的弹性会造成液面的变动。具有氧化性的溶液或其他易与橡皮起作用的溶液，如高锰酸钾、碘、硝酸银等不能使用碱式滴定管。在使用前，应检查橡皮管是否破裂或老化及玻璃珠大小是否合适，无渗漏后才可使用。 （3）使用前的准备 a 在装滴定液前，须将滴定管洗净，使水自然沥干（内壁应不挂水珠），先用少量滴定液荡洗三次，（每次约510ml），除去残留在管壁和下端管尖内的水，以防装入滴定液被水稀释。 b 滴定液装入滴定管应超过标线刻度零以上，这时滴定管尖端会有气泡，必须排除，否则将造成体积误差。如为酸式滴定
14、管可转动活塞，使溶液的急流逐去气泡；如为碱式滴定管，则可将橡皮管弯曲向上，然后捏开玻珠，气泡即可被溶液排除。 c 最后，再调整溶液的液面至刻度零处，即可进行滴定。 （4）操作注意事项 a 滴定管在装满滴定液后，管外壁的溶液要擦干，以免流下或溶液挥发而使管内溶液降温（在夏季影响尤大）。手持滴定管时，也要避免手心紧握装有溶液部分的管壁，以免手温高于室温（尤其在冬季）而使溶液的体积膨胀（特别是在非水溶液滴定时），造成读数误差。 b 使用酸式滴定管时，应将滴定管固定在滴定管夹上，活塞柄向右，左手从中间向右伸出，拇指在管前，食指及中指在管后，三指平行地轻轻拿住活塞柄，无名指及小指向手心弯曲，食指及中指由
15、下向上顶住活塞柄一端，拇指在上面配合动作。在转动时，中指及食指不要伸直，应该微微弯曲，轻轻向左扣住，这样既容易操作，又可防止把活塞顶出。 c 每次滴定须从刻度零开始，以使每次测定结果能抵消滴定管的刻度误差。 d 在装满滴定液后，滴定前“初读”零点，应静置12分钟再读一次，如液面读数无改变，仍为零，才能滴定。滴定时不应太快，每秒钟放出34滴为宜，更不应成液柱流下，尤其在接近计量点时，更应一滴一滴逐滴加入（在计量点前可适当加快些滴定）。滴定至终点后，须等12分钟，使附着在内壁的滴定液流下来以后再读数，如果放出滴定液速度相当慢时，等半分钟后读数亦可，“终读”也至少读两次。 e 滴定管读数可垂直夹在滴
16、定管架上或手持滴定管上端使自由地垂直读取刻度，读数时还应该注意眼睛的位置与液面处在同一水平面上，否则将会引起误差。 读数应该在弯月面下缘最低点，但遇滴定液颜色太深，不能观察下缘时，可以读液面两侧最高点，“初读”与“终读”应用同一标准。 f 滴定管有无色、棕色两种，一般需避光的滴定液（如硝酸银滴定液、碘滴定液、高锰酸钾滴定液、亚硝酸钠滴定液、溴滴定液等），需用棕色滴定管。2.5.2量瓶的使用方法（操作演示）2.5.2.1量瓶具有细长的颈和磨口玻塞（亦有塑料塞）的瓶子，塞与瓶应编号配套或用绳子相连接，以免条错，在瓶颈上有环状刻度。量瓶是用来精密配制一定体积的溶液的。2.5.2.2向量瓶中加入溶液时
17、，必须注意弯月面最低处要恰与瓶颈上的刻度相切，观察时眼睛位置也应与液面和刻度同水平面上，否则会引起测量体积不准确。量瓶有无色、棕色两种，应注意选用。2.5.2.3量瓶是用来精密配制一定体积的溶液的，配好后的溶液如需保存，应转移到试剂瓶中，不要用于贮存溶液。量瓶不能在烘箱中烘烤。2.5.3移液管的使用方法（操作演示） 移液管有各种形状，最普通的是中部吹成圆柱形，圆柱形以上及以下为较细的管颈，下部的管颈拉尖，上部的管颈刻有一环状刻度。移液管为精密转移一定体积溶液时用的。 1.使用时，应先将移液管洗净，自然沥干，并用待量取的溶液少许荡洗3次。 2.然后以右手拇指及中指捏住管颈标线以上的地方，将移液管
18、插入供试品溶液液面下约1cm，不应伸入太多，以免管尖外壁粘有溶液过多，也不应伸入太少，以免液面下降后而吸空。这时，左手拿橡皮吸球（一般用60ml洗耳球）轻轻将溶液吸上，眼睛注意正在上升的液面位置，移液管应随容器内液面下降而下降，当液面上升到刻度标线以上约1cm时，迅速用右手食指堵住管口，取出移液管，用滤纸条拭干移液管下端外壁，并使与地面垂直，稍微松开右手食指，使液面缓缓下降，此时视线应平视标线，直到弯月面与标线相切，立即按紧食指，使液体不再流出，并使出口尖端接触容器外壁，以除去尖端外残留溶液。 3.再将移液管移入准备接受溶液的容器中，使其出口尖端接触器壁，使容器微倾斜，而使移液管直立，然后放松
19、右手食指，使溶液自由地顺壁流下，待溶液停止流出后，一般等待15秒钟拿出。 4.注意此时移液管尖端仍残留有一滴液体，不可吹出。2.5.4刻度吸管的使用方法（操作演示） 1.刻度吸管是由上而下（或由下而上）刻有容量数字，下端拉尖的圆形玻璃管。用于量取体积不需要十分准确的溶液。 2.刻度吸管有“吹”、“快”两种形式。使用标有“吹”字的刻度吸管时，溶液停止流出后，应将管内剩余的溶液吹出；使用标有“快”字的刻度吸管时，待溶液停止流出后，一般等待15秒钟拿出。 3.量取时，最好选用略大于量取量的刻度吸管，这样溶液可以不放至尖端，而是放到一定的刻度（读数的方法与移液管相同）。2.5.5容量仪器使用的注意事项
20、 1.移液管及刻度吸管一定用橡皮吸球（洗耳球）吸取溶液，不可用嘴吸取。 2.滴定管、量瓶、移液管及刻度吸管均不可用毛刷或其他粗糙物品擦洗内壁，以免造成内壁划痕，容量不准而损坏。每次用毕应及时用自来水冲洗，再用洗衣粉水洗涤（不能用毛刷刷洗），用自来水冲洗干净，再用纯化水冲洗3次，倒挂，自然沥干，不能在烘箱中烘烤。如内壁挂水珠，先用自来水冲洗，沥干后，再用重铬酸钾洗液洗涤，用自来水冲洗干净，再用纯化水冲洗3次，倒挂，自然沥干。 3.需精密量取5、10、20、25、50ml等整数体积的溶液，应选用相应大小的移液管，不能用两个或多个移液管分取相加的方法来精密量取整数体积的溶液。 4.使用同一移液管量取
21、不同浓度溶液时要充分注意荡洗（3次），应先量取较稀的一份，然后量取较浓的。在吸取第一份溶液时，高于标线的距离最好不超过1cm，这样吸取第二份不同浓度的溶液时，可以吸得再高一些荡洗管内壁，以消除第一份的影响。5.容量仪器（滴定管、量瓶、移液管及刻度吸管等）需校正后再使用，以确保测量体积的准确性。2.6容量分析法含量测定计算公式主要根据药典等标准所提供的方法测定出来某一药物的量，然后与标准比较以确定其含量是否合格；或者用所测得的量与药物所标示的量比较求得相当于标示量的百分比，然后与标准比较以确定其含量是否合格。注: V样品标准滴定液消耗体积（ml） V0空白标准滴定液消耗体积（ml） F标准滴定液
22、校正系数V1/m取样量（取固体样品时用m，单位为g；取液体样品时用V1，单位为ml）稀释倍数含意：1）V1/mV2（第一步稀释体积） 2）V3（第二步取样体积）稀释倍数 V2 / V3 1不用空白校正 a 液体制剂（维生素C注射液、复方氨基比林注射液中巴比妥含量）：右旋糖酐铁注射液：b 固体制剂：2需要空白校正2.1空白体积很小a液体制剂1 复方氨基比林注射液中氨基比林含量、痢菌净注射液 2 盐酸左旋咪唑注射液： b 固体制剂：c原料药（高氯酸滴定）3 空白体积大于样品滴定体积（回滴定法）a硫酸小檗碱注射液（样品稀释倍数：）b 盐酸吖啶黄注射液 第三节 水溶液酸碱中和法（中和法）3.1定义 以
23、酸碱中和反应为基础的容量分析法称为酸碱中和法（亦称酸碱滴定法）。3.2原理 以酸（碱）滴定液，滴定被测物质，以指示剂或仪器指示终点，根据消耗滴定液的浓度和毫升数，可计算出被测药物的含量。 反应式： H+ OH- H2O3.3滴定液的配制、标定3.3.1盐酸滴定液3.3.1.1配制 间接法配制3.3.1.2标定 用基准无水碳酸钠标定，以甲基红-溴甲酚绿混合指示液指示终点。3.3.2硫酸滴定液3.3.2.1配制 间接法配制3.3.2.2标定 照盐酸滴定液项下的方法标定。3.3.3氢氧化钠滴定液3.3.3.1配制 间接法配制3.3.3.2标定 用基准邻苯二甲酸氢钾标定，以酚酞指示液指示终点。3.3.
24、3.3贮藏 置聚乙烯塑料瓶中，密封保存；塞中有2孔，孔内各插入玻璃管1支，1管与钠石灰管相连，1管供吸出本液使用。3.4举例说明例1安痛定注射液中氨基比林含量测定。测定方法：精密量取本品5ml，加水20ml，加甲基橙-亚甲蓝混合指示液34滴，用盐酸液（0.1mol/L）滴定至溶液显出颜色与对照液取水30ml，加上述混合指示液34滴与盐酸液（0.1mol/L）0.2ml制成的颜色一致，自消耗盐酸滴定液（0.1mol/L）的毫升数中减去0.2ml。每1ml盐酸液（0.1mol/L）相当于23.13mg的C13H17N3O。编 号12取样量V1 ( ml ) 5.005.00滴定管初读数(ml)0.
25、000.00滴定管终读数V(ml)10.8510.90空白滴定管初读数(ml)0.000.00空白滴定管终读数V0(ml)/计 算 公 式1(%)2(%)相对偏差(%)0.2相对偏差不得大于 0.5检验结果(%)99.9标准规定应为标示量的94.0106.0结 论本品氨基比林含量符合规定。其他药物：复方氨基比林注射液中氨基比林含量测定、樟脑磺酸钠注射液含量测定等。第四节 氧化还原滴定法4.1定义 氧化还原法 以氧化还原反应为基础的容量分析法。4.2碘量法4.2.1滴定方式（1）直接碘量法，例如安乃近、维生素C含量测定；碘酊和碘甘油中碘含量测定。 （2）置换滴定法。（3）剩余滴定法，有些还原性物
26、质可与过量氧化剂反应，待反应完全后，用Na2S2O3滴定液滴定剩余的I2量，例如硫酸小檗碱注射液和盐酸吖啶黄注射液含量测定。4.2.2指示剂 1. I2自身指示剂 在100ml水中加1滴碘滴定液（0.1mol/L），即显能够辨别得出的黄色。 2. 淀粉指示剂 淀粉溶液遇I2即显深蓝色，反应可逆并极灵敏。4.3滴定液的配制与标定 1.碘滴定液 （1）配制 间接法配制（2）标定，精密量取本液25ml，置碘瓶中，加水100ml与盐酸溶液（9100）1ml，轻摇混匀，用硫代硫酸钠（0.1mol/L）滴定至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失。根据硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）的消耗量
27、，算出本液的浓度，即得。标定 用基准三氧化二砷标定，以淀粉指示液指示终点。公式 （3）贮藏 置玻璃塞的棕色玻璃瓶中，密闭，在凉处保存。 2.硫代硫酸钠滴定液 （1）配制 间接法配制 （2）标定 用基准重铬酸钾标定，以淀粉指示液指示终点。4.4注意事项1.碘在水中很难溶解，加入碘化钾不但能增加其溶解度，而且能降低其挥发性。 2.为了使碘中的微量碘酸盐杂质作用掉，配制碘滴定液时常加入少许盐酸。 3.为防止有少量未溶解的碘存在于碘液中，故配好后的碘液用34号垂熔玻璃漏斗过滤，不得用滤纸过滤。 4.碘滴定液应贮存于棕色具玻塞玻璃瓶中，在暗凉处避光保存。碘滴定液不可与软木塞、橡胶管或其他有机物接触，以防
28、碘浓度改变。 5.配制硫代硫酸钠滴定液所用的纯化水须煮沸并冷却，可驱除水中残留的二氧化碳和氧，杀死嗜硫菌等微生物，然后加入少量无水碳酸钠，使溶液呈弱碱性。 6.硫代硫酸钠液应放置1个月后再过滤和标化，因硫代硫酸钠中常含有多硫酸盐，可与OH-反应生成硫代硫酸盐使硫代硫酸钠液浓度改变。 7.发现硫代硫酸钠滴定液混浊或有硫析出时，不得使用。4.5实例说明例1安乃近注射液（30%）含量测定。测定方法：精密量取本品10ml，置100ml量瓶中，加乙醇80ml，用水稀释至刻度，摇匀，立即精密量取10ml，加乙醇2ml 、水6.5ml与甲醛溶液0.5 ml，放置1分钟，加盐酸溶液(91000)1.0 ml摇
29、匀，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定(控制滴定速度为每分钟35 ml)至溶液所显的淡黄色在30秒钟内不褪。每1ml碘滴定液(0.05mol/L)相当于17.57mg的安乃近。编 号12取样量V1 (ml) 10.0010.00滴定管初读数（ml）0.000.00滴定管终读数V2（ml）16.7516.82计 算 公 式1（）2（）相对偏差 (%)0.2相对偏差不得大于0.5检验结果 (%)99.9应为标示量的95.0105.0结 论符合规定例2硫酸小檗碱注射液（2%）含量测定测定方法：精密量取本品10ml，置250ml量瓶中，加水150ml，精密加重铬酸钾液（0.01667mol/L）50
30、ml，加水至刻度，振摇5分钟，用干燥滤纸滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液100ml，置250ml碘瓶中，加碘化钾3g，振摇使溶解，加盐酸溶液（12）10ml，密塞，摇匀，在暗处放置10分钟，用硫代硫酸钠液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml，继续滴定至蓝色消失，溶液显亮绿色，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的重铬酸钾液（0.01667mol/L）相当于13.71mg的（C20H18NO4）2SO43H2O.编 号12取样量V1 (ml) 10.0010.00滴定管初读数(ml)0.000.00滴定管终读数V(ml)15.3015.28空白滴定管初读数(ml)0.000.00空白滴定管终读数(ml)21.1521.21空白消耗体积V0(ml)21.18计 算 公 式1(%)2(%)相对偏差(%)0.2相对偏差不得大于 0.5 检验结果(%)104.1标准规定应为标示量的93.0107.0结 论
