1、牛奶中硫氰酸盐的测定最全word资料牛奶中硫氰酸盐的测定滕根发，虞雄华摘 要：本实验采用离子色谱方法，通过沉淀蛋白，离心等分离方法测定牛奶中的硫氰酸盐含量。通过前处理，牛奶中的杂质不影响硫氰酸盐的定量。测试浓度分为0.510ug/mL标样，标准曲线的相关系数为0.99935。5次样品重复测试硫氰酸盐的标准偏差为3.1%，测试加标回收率在96103%之间。 关键词：离子色谱，硫氰酸盐测定 1 前言 硫氰酸盐对人体的危害主要表现在和血液中的细胞色素氧化酶中的三价铁离子结合，抑制该酶的活性，使组织发生缺氧。在原料奶和奶制品中加入硫氰酸钠可以有效抑制细菌的生长，保鲜。食用该食品会对人体造成伤害。 20
2、21年12月 卫生部发布的食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单（第一批）中明确规定乳及乳制品中硫氰酸钠属于违法添加物。 我们采用离子色谱电导检测器，用碳酸盐为淋洗液，采用恒流系统检测牛奶中的硫氰酸盐的含量获得了比较满意的结果。2 实验部分 2.1 仪器与试剂 天美 IC1010离子色谱仪（电导检测器），天美 CT15RT高速冷冻离心机，超滤器：millipore microcon YM-10,截流分子量10000，样品杯容量1.5mL。硫氰酸钠（分析纯），上海国药集团；牛奶样品，市售鲜奶。所使用的水均为电阻率18.3Mcm的去离子水。 2.2 样品制备 提取 取2mL新鲜
3、牛奶，置于10mL离心管中，加3mL丙酮混合均匀。以4500转/min离心20min。取上清液备用。 净化 取2mL上清液置于试管中，60氮气吹干（或近干）。残渣用水稀释到2mL，用截止分子量为10000道尔顿的超滤管过滤，离心转速10000转/min，离心时间20min。超滤液直接用于分析。 2.3 实验条件 色谱条件：仪器：IC1010 色谱柱：分析柱SI-90 4E；保护柱：SI 90G 淋洗液：1mmoL/LNa2CO3+4mmoL/LNaHCO3+5%丙酮 流量：1.5mL/min 抑制器: DS-Plus自动再生抑制器（专利去除CO2技术） 检测器：电导检测器、室温条件 进样量：2
4、00uL 3 结果 31线性范围 仪器线性范围：配制SCN- 标准曲线的浓度为0.5、1、5、10mg/L，直接进样测定相应的峰面积，作SCN-浓度/对应峰面积曲线。在给定的范围内，浓度/电导响应值呈线性，其线性方程和相关系数； w=0.000120049+3.65558E-9A，相关系数r=0.99935。 3.2 重复性 取市售鲜奶，按上述方法进行处理，测定每个样品峰面积。结果见表 3.3 加标回收 取2mL空白奶样，加1mL 10mg/L的标样，按同样的方法进行处理测定，测定结果如下 4 结论 采用离子色谱等度法分析牛奶中的硫氰酸盐，其方法简单，准确，检测限低。可以满足 的检测要求。 牛
5、奶中三聚氰胺的含量测定一样品分子结构中文名英文名分子结构三聚氰胺Melamine二. 样品来源记录样品商品名：样品测定描述：主成分含量测定生产厂家：三. 液相方法条件方法来源：自主开发；具体方法： 色谱柱：AQ-C18，5um，4.6250mm流动相：10mmol/L辛烷磺酸钠和20mmol/L磷酸氢二铵（用磷酸调节pH3.3）：乙腈90：10；检测波长：236nm；温度：室温29度；流速：1.0ml/min；进样量：20ul；流动相的配制：准确称取10mmol的辛烷磺酸钠和20mmol的磷酸氢二铵溶于1000ml水中，用磷酸调节pH至3.3准确量取该溶液450ml与50ml乙腈混合均匀，超声
6、脱气；样品处理方法：标准品处理：准确称量250mg三聚氰胺标准品加入250ml容量瓶中，用一定量的水：乙腈50：50超声溶解，然后用水：乙腈50：50溶液稀释至刻度，配制成1000ug/ml的三聚氰胺溶液，得溶液BZ1；量取BZ1标准溶液1.0ml，加入100ml容量品中，用乙腈：水50：50稀释至刻度，摇匀的标准溶液BZ2(此时浓度为10ug/ml)； 样品处理：准确称取2.000g奶粉，加入到10ml容量瓶中，加入乙腈：水50：50至刻度以下，摇匀，超声20min；用乙腈：水50：50溶液稀释至刻度；离心或静置分层，取上层清夜用纯水稀释至原来浓度的1/5倍，针筒过滤，进样20ul；注意事项
7、： 1. 分析前，先用纯水以1.0ml/min流速冲洗色谱柱30min；分析完成后，先用纯水以1.0ml/min流速反向冲洗色谱柱45min，然后再用乙腈：水90：10以1.0ml/min流速反向冲洗色谱柱45min；反向冲洗，正向使用； 2. 缓冲溶液，隔天需重新配制。四. 谱图及数据处理1. 标准曲线的绘制： 1）标准溶液的配制：准确量取标准品溶液BZ2 0.25ml、0.5ml、2.0ml、4.0ml、6.0ml、8.0ml、10.0ml分别加入到10ml的容量瓶中，用乙腈：水50：50稀释至刻度，摇匀； 2）标准曲线：三聚氰胺标准曲线线性回归方程：y = 174175x + 14323
8、R2 = 0.9994 样品编号1234567浓度（ug/ml）0.250.5246810吸光度（mAU）2655251402180649370150538627716436878381 3)结论：本方法中三聚氰胺浓度在0.25ug/ml10ug/ml范围内线性良好，可以作为外标法定量使用；2 谱图1）标准品谱图2）样品谱图大气中甲醛的测定方法 【D-JQ】甲醛(HCHO又名蚁醛)为无色液体，分子量30.03，有刺激性气味。对空气比重为1.04。易溶于水、醇和醚。其35%40%的水溶液称福尔马林，此溶液在室温下极易挥发，加热更甚。甲醛易聚合成多聚甲醛，这是甲醛水溶液混浊的原因。甲醛的聚合物受热
9、易发生解聚作用，在室温下能放出微量气态甲醛。甲醛污染主要来源于工业上制造树脂(酚醛树脂，脲醛树脂等)、塑料、皮革、造纸、人造纤维、胶合板等。另外用作消毒、防腐和熏蒸剂等时，由于直接使用污染空气。接触甲醛后对皮肤和粘膜有强烈刺激作用。长期接触低浓度甲醛蒸汽，可有头痛、软弱无力等。在甲醛浓度达到2070mg/m3的车间内工作，工人有丧失食欲、体重减轻、持久性头痛、心悸和失眠等现象。甲醛的嗅觉阈在0.061.2mg/m3，眼刺激阈低至0.011.9mg/m3，并个体间的差异也很大。家具用的颗粒板、聚合板、碎料板等多以脲甲醛树脂做粘合剂，当遇热、潮解时释放甲醛，此外地毯、烟草、除臭剂、消毒剂等也释放甲
10、醛，因此甲醛是室内最广泛的空气污染物之一，已引起严重的环境卫生问题。甲醛对人体危害除引起刺激性慢性疾病外，还能与空气中的离子性氯化物反应生成致癌物二氯甲基醚，已引起人们的关注。甲醛的测定方法有酚试剂比色法1、乙酰丙酮比色法1、变色酸比色法1、盐酸副玫瑰苯胺比色法、4氨基3联氨5巯基1，2，4三氮杂茂(简称AHMT)比色法3等化学方法。仪器法有微分脉冲极谱法、高效液相色谱法和气相色谱法4。乙酰丙酮比色法对共存的酚和乙醛等无干扰，操作简易、重现性好。变色酸比色法显色稳定，但需使用浓硫酸，操作不便，且共存的酚有干扰测定。两方法的灵敏度相同，均需在沸水浴中加热显色，变色酸加热时间较长些。酚试剂比色法在
11、常温下显色，且灵敏度比上述两个方法都好，已被推荐为公共场所空气中甲醛卫生检验标准方法，( 标准报批稿)2。AHMT法在室温下就能显色，且SO32、NO2共存时不干扰测定，灵敏度比上述比色法均好，已被推荐为室内空气中甲醛卫生检验标准方法(报批稿)3。气相色谱法选择性好，干扰因素小，也被推荐为公共场所中空气中甲醛卫生检验标准方法(报批稿)4。扩散法被动式个体监测器由于不用采样泵，体积小重量轻等优点对室内空气中甲醛和个体接触量监测是很有用的。一、酚试剂比色法1、2 (一)原理空气中甲醛被酚试剂溶液吸收，反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化形成蓝绿色化合物，比色定量。(二)仪器(1)气泡吸收管普通
12、型，有10ml刻度线。(2)空气采样器流量范围0.11L/min，流量稳定。使用时，用皂膜流量计校准采样系列在采样前和采样后的流量，流量误差应小于5%。(3)具塞比色管10ml。(4)分光光度计用10mm比色皿，在波长630nm下，测定吸光度。(三)试剂(1)吸收原液称量0.1g酚试剂盐酸3甲基2苯并噻唑酮腙，C6H4SN(CH3)C：NNH2HCl，简称MBTH加水溶解，倾于100ml具塞量筒中，加水至刻度。放冰箱保存。可稳定三天。(2)吸收液吸量5ml吸收原液，加95ml水。混匀，即为吸收液。采样时，临用现配。(3)0.1mol/L盐酸溶液量取8.2ml盐酸加水稀释至lL。(4)10g/L
13、硫酸铁铵溶液称量1.0g硫酸铁铵NH4Fe(SO4)212H2O优级纯，用0.1mol/L盐酸溶液溶解，并稀释至100ml。(5)碘溶液称量12.7g升华碘和30g碘化钾，加水溶解，稀释至1L。(6)碘酸钾标准溶液准确称量3.5668g，经105烘干2h的碘酸钾(优级纯)，溶解于水，移入1L容量瓶中，再用水稀释至刻度。(7)5g/L淀粉溶液称量0.5g可溶性淀粉，用少量水调成糊状后，再加刚煮沸的水至100ml，冷却后，加入0.1g水杨酸保存。(8)硫代硫酸钠标准溶液C(Na2S2O3)0.1000mol/L称量26g硫代硫酸钠(Na2S2O35H2O)，溶于新煮沸冷却的水中，加入0.2g无水碳
14、酸钠，再用水稀释至1L。贮于棕色瓶中，如混浊应过滤。放置一周后，标定其准确浓度。标定方法：准确量取25.00ml 0.1000mol/L碘酸钾标准溶液，于250ml碘量瓶中，加入75ml新煮沸冷却的水，加3g碘化钾及10ml冰乙酸溶液，摇匀后，暗处放置3min，用待标定的0.1mol/L硫代硫酸钠标准溶液滴定析出的碘，至淡黄色。加入1ml 0.5%淀粉溶液，呈蓝色。再继续滴定至蓝色刚刚褪去，即为终点。记录所用硫代硫酸钠溶液体积(V，ml)。重复滴定两次，两次所用硫代硫酸钠溶液体积误差不超过0.05ml。其准确浓度用下式计算：(9)甲醛标准溶液贮备溶液：量取2.8ml含量为36%38%甲醛溶液，
15、放入1L容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液1ml约含1mg甲醛。其准确浓度用下述碘量法标定。此液可稳定三个月。标定方法：准确量取20.00ml待标定的甲醛贮备溶液，于250ml碘量瓶中，加入20.00ml碘标准溶液，15ml 1mol/L氢氧化钠溶液，放置15min。加入20ml 0.5mol/L硫酸溶液，再放置15min，用0.1000mol/L硫代硫酸钠标准溶液滴定，直至溶液呈现淡黄色时，加入1ml 5%淀粉溶液，继续滴定至恰使蓝色褪尽为止。记录所用硫代硫酸钠标准溶液体积(V2，ml)。同时，用水作试剂空白滴定，记录空白滴定所用硫代硫酸钠溶液的体积(V1，ml)。样品滴定和空白滴定各重复两次
16、，两次滴定所用硫代硫酸钠的体积误差不超过0.05ml。甲醛溶液的浓度用下式计算：式中M硫代硫酸钠溶液的浓度，mol/L；15甲醛的摩尔质量的1/220标定时所取甲醛标准贮备溶液体积的毫升数。工作溶液：临用时，将甲醛标准贮备溶液用水稀释成1.00ml含10g甲醛。立即再取此溶液10.00ml，加入100ml容量瓶中，加入5ml吸收原液，用水稀释至刻度。此溶液1.0ml含1g甲醛。放置30min后，用于配制标准色列管。此标准溶液可稳定24h。(四)采样用一个内装10ml吸收液的气泡吸收管，以0.5L/min流量，采气10L。并记录采样时的温度和大气压力。采样后应在24h内分析。(五)分析步骤1.标
17、准曲线的绘制按下表制备标准色列管。于标准色列各管中，加入0.4ml 1%硫酸铁铵溶液，混匀，放置15min，用10mm比色皿，以水作参比，在波长630nm下，测定各管溶液的吸光度。以甲醛含量(g)为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，并计算回归线的斜率。以斜率的倒数作为样品测定的计算因子Bs(g)。2.样品测定采样后，用水补充到采样前吸收液的体积。准确取5ml样品溶液于比色管中。然后，按绘制标准曲线的操作步骤，测定吸光度。在每批样品测定的同时，用5ml未采样的吸收液，按相同操作步骤作试剂空白的测定。(六)计算式中c空气中甲醛浓度，mg/m3；A样品溶液的吸光度；A0试剂空白溶液的吸光度；Bs
18、用标准溶液绘制标准曲线得到的计算因子，g；V0换算成标准状况下的采样体积，L。(七)说明(1)灵敏度和检出限5ml吸收液中含有0.2g甲醛应有0.0790.012吸光度，检出限为0.05g/5ml。当采样10L时，最低检出浓度为0.01mg/m3。(2)方法的重现性当甲醛含量为0.11.5g/5ml时，重复测定的相对标准差为5%3%。(3)方法的准确度当甲醛含量在0，41.0g/5ml时，样品加标准的回收率为93%101%。(4)测定范围若用5ml样品溶液，其测定范围为0.12g甲醛。当采样体积为10L时，则可测浓度范围为0.020.4mg/m3。(5)室温低于15时，显色不完全。应在25水浴
19、中保温操作。(6)干扰及排除20g酚、2g乙醛以及二氧化氮在一般情况下，对本法无干扰；但乙醛(2g)和丙醛与MBTH反应也产生蓝色染料。此时所测得样品溶液中醛的含量，是以甲醛表示的总醛量。二氧化硫的干扰，可将气样先通过硫酸锰滤纸过滤，予以排除。硫酸锰滤纸的制法：取10ml浓度为100g/l的硫酸锰(MnSO4)水溶液，滴加到250cm2玻璃纤维滤纸上，风干后切成25mm碎片，装入15150mm的U形玻璃管中，采样时，将此管接在甲醛吸收管之前。此法制成的硫酸锰滤纸，吸收二氧化硫的效能受大气湿度影响很大。当相对湿度大于88%，采气速度1L/min，二氧化硫浓度为1mg/m3时，能消除95%以上的二
20、氧化硫，此滤纸可维持50h有效。当相对湿度为15%30%时，吸收二氧化硫的效能逐渐降低。所以相对湿度很低时，应换用新制备的硫酸锰滤纸。(7)本法显色反应是甲醛与酚试剂缩合生成吖嗪，适宜pH值范围37，而以pH45最好，见图645。(8)甲醛标定的原理甲醛在碱性介质中被碘氧化成甲酸，剩余的碘在酸性条件下用Na2S2O3滴定，从而计算甲醛的量。其反应式(9)甲醛标准液及样品溶液的稳定性。甲醛如直接吸收在纯水中，则很不稳定。放置34h降低约10%；放置24h将降低约68%。当在0.005%酚试剂作吸收液中，则放置24h都是稳定的，见表628故甲醛标准稀溶液宜用含0.005%酚试剂的吸收液配制。表62
21、8甲醛在水及酚试剂中稳定性比较(10)酚试剂用量与显色关系见表629，以加入0.20.4mg为宜(即5ml吸收液中酚试剂质量)。表629酚试剂用量与显色关系(11)本法氧化剂选用硫酸铁铵，但硫酸铁铵水溶液易水解而形成Fe(OH)3乳浊现象，影响比色，故改用酸性溶剂配制。但酸度也不宜过大，否则原色太深。经试验选用0.1mol/L HCl作溶剂为宜。用1%三氯化铁与1.6%氨基磺酸的混合液作氧化剂，并可防止氮氧化物的干扰。但因试剂原色太深影响比色。本反应加入硫酸铁铵的量不宜过多，否则空白管吸光度值高，影响比色，以加1%硫酸铁铵0.4ml为好。(12)标准曲线根据本法所规定的条件，在分光光度计上，用
22、1cm比色皿，波长630nm下，甲醛浓度与吸光度的关系见图646。(13)显色温度低于15时反应慢，显色不完全。2035时15min显色达最完全，放置时间4h稳定不变。(14)采样效率在现场用双管采样，浓度范围在0.381.35mg/m3，采样效率为92.3%97.7%。二、AHMT比色法(一)原理空气中甲醛被吸收液吸收，在碱性溶液中与4氨基3联氨5巯基三氮杂茂(AHMT)发生反应，经高碘酸钾氧化形成红色化合物，比色定量。(二)仪器(1)气泡吸收管普通型，有10ml刻度线。(2)空气采样器流量范围0.11Lmin，流量稳定。使用时，用皂膜流量计校准采样系列在采样前和采样后的流量，流量误差应小于
23、5%。(3)具塞比色管10ml。(4)分光光度计用20mm比色皿，在波长550nm下，测定吸光度。(三)试剂(2)5mol/L氢氧化钠溶液取20g氢氧化钠溶于适量蒸馏水中，稍冷后，加蒸馏水至100ml。(3)AHMT溶液取0.5gAHMT溶于100ml 0.2mol/L盐酸溶液中，此溶液置于暗处保存。(4)高碘酸钾溶液取0.75gKIO4于100ml 0.2mol/L氢氧化钠溶液中，置于水浴上加热使其溶解。(5)标准溶液配制及标定方法同一法。临用时，用吸收液稀释成1.00ml含1g甲醛的标准溶液。(四)采样用一个内装10ml吸收液的气泡吸收管，以0.5L/min流量，采气20L。记录采样时的温
24、度和大气压力。(五)分析步骤1.标准曲线的绘制按下表制备标准色列管。于标准色列各管中，加2ml 5mol/L氢氧化钠溶液和2mlAHMT溶液，轻轻摇动数次，混匀，在室温下静置20min，加入2ml高碘酸钾溶液，轻轻振摇5min，用20mm比色皿，以水作参比，在波长550nm下，测定各管溶液吸光度。以甲醛含量(g)为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，并计算回归线的斜率。以斜率倒数作为样品测定的计算因子Bs(g)。2.样品测定采样后，用少量吸收液补充至采样前吸收液的体积。准确量取2ml样品溶液于比色管中，按标准曲线绘制的操作步骤，测定样品溶液吸光度。在每批样品测定的同时，用未采样的吸收液，按相
25、同的操作步骤作试剂空白测定。(六)计算式中c空气中甲醛浓度，mg/m3A样品溶液的吸光度；A0试剂空白溶液的吸光度；Bs用标准溶液绘制标准曲线得到的计算因子，g；V0换算成标准状况下的采样体积，L。(七)说明(1)方法灵敏度2ml样品溶液中含有1g甲醛应有0.175吸光度。(2)检出限和测定范围本法检出限为0.13g/2ml，当采气体积为20L时，最低检出浓度为0.032mg/m3；若用2ml样品溶液，其测定范围为0.22.0g甲醛。当采气体积为20L时，吸收液总量为10ml，则可测浓度范围为0.050.8mg/m3。(3)精密度当甲醛含量为1.0g/2ml、2.0g/2ml和3.0g/2ml
26、时，三个实验室重复测定的相对标准差的平均值分别为3.3%、3.0%和2.6%。(4)准确度4个实验室加标量在0.53.0g范围时，其回收率范围为93%99%，平均回收率为97%。(5)乙醛、丙醛、正丁醛、丙烯醛、丁烯醛、乙二醛、苯(甲)醛、甲醇、乙醇、正丙醇、正丁醇、仲丁醇、异丁醇、异戊醇、乙酸乙酯对本法无影响；大气中共存的二氧化氮和二氧化硫对测定无干扰。(6)本法显色反应式三、气相色谱法4(一)原理空气中甲醛在酸性条件下吸附在涂有2，4二硝基苯肼的6201担体上，生成稳定的甲醛腙。用二氧化碳洗脱后，经OV-1色谱柱分离，用氢焰离子化检测器测定，以保留时间定性，峰高定量。(二)仪器(1)采样管
27、用长100mm，内径5mm的玻璃管，内装150mg吸附剂，两端用玻璃棉堵塞，采样管两端套上塑料帽密封备用。(2)空气采样器流量范围0.21.0L/min，流量稳定。使用时，用皂膜流量计校准采样系列在采样前和采样后的流量，流量误差应小于5%。(3)具塞比色管5ml。(4)微量注射器10l，体积刻度应校正。(5)气相色谱仪附氢焰离子化检测器。(三)试剂(1)二硫化碳需重新蒸馏进行纯化，处理方法见第六章第三节中“一、溶剂洗脱气相色谱法”。(2)2，4二硝基苯肼溶液称取0.5g 2，4二硝基苯肼于250ml容量瓶中，用二氯甲烷稀释至刻度。(3)吸附剂称量10g 6201担体(6080目)，用40ml
28、2，4二硝基苯肼二氯甲烷溶液分二次涂敷，减压，干燥，备用。(4)2mol/L盐酸溶液。(5)甲醛标准溶液配制和标定方法同一法(533页)。(6)色谱固定液OV1。(7)色谱担体Shimalitew(80100目)。(四)采样采样时，取下采样管两端的塑料密封帽。将采样管的进气口玻璃棉取出，向管内吸附剂上加一滴(约50l)2mol/L盐酸溶液，然后，再用玻璃棉堵好，将加入盐酸溶液的一端垂直朝下，另一端连接空气采样器上。以0.5L/min的流量，采气50L，采样后，将管的两端套上塑料帽，并记录采样时的温度和大气压力。(五)分析步骤1.气相色谱测试条件分析时，应根据气相色谱仪的型号和性能，制定能分析甲
29、醛的最佳测试条件。色谱柱：柱长2m，内径3mm的玻璃管，内装OV-1+Shimalitew担体1.5100。柱温：230。检测室温度：260。汽化室温度：260。载气(N2)流量：70ml/min。氢气流量：40ml/min。空气流量：450ml/min。2.绘制标准曲线和测定校正因子。在作样品测定的同时，绘制标准曲线或测定校正因子。(1)标准曲线的绘制取5支采样管，各管取下一端玻璃棉，直接向吸附剂表面滴加一滴(约50l)2mol/L盐酸溶液。然后，用微量注射器分别准确加入甲醛标准溶液(1.00ml含1mg甲醛)，制成在采样管中的吸附剂上甲醛含量在120g范围内有4个浓度点标准管，另一支采样管不加甲醛作为零浓度点，再填上玻璃棉，反应10min。再将各管内吸附剂分别移入5个5ml具塞比色管中，各加入1.0ml二硫化碳，稍加振摇，浸泡30min进行洗脱，即为甲醛洗脱溶液标准系列管。然后准确量取5.0l各个浓度点的标准洗脱液，进色谱柱，得色谱峰和保留时间。每个浓度点得重复做三次，测量峰高的平均值。以甲醛的浓度(g/ml)为横坐标，平均峰高(mm)为纵坐标，绘制标准曲线，并计算回归线的斜率。以斜率的倒数作为样品测定的计算因子Bsg/(mlmm)。(2)测定校正因子在测定范围内，可用
