1、化验基础知识培训化验室基本常识培训资料2011年7月化验室常识化验室工作是科学实践的重要手段之一。只有严肃认真地进行实验，才能获得可靠的结果，并从中引出反映客观实际的规律来。随随便便、粗心大意是做不出正确的实验结果的。因此，必须养成良好的化验室工作习惯。下面的问题希望引起大家注意：1：挪动干净玻璃仪器时，勿使手指接触仪器内壁。拿吸管时切勿用手触及其尖端需放入液体中的部位。2：洗净的仪器要放在架上或干净纱布上晾干，不能用抹布擦拭，更不能用抹布擦拭仪器的内壁。吸管、搅拌等用后要放在架上或底部垫有干净纱布的烧杯内，切勿乱放在实验台上，实验台要保持清洁整齐。3：移液管、温度计不能代替玻璃棒使用，容量瓶
2、是量器，不要用作盛器。4：容量瓶等带有磨口玻璃塞的仪器塞子，不要盖错。洗涤时塞子和仪器本身要放在一起，以免弄混。不用时要用纸条把塞子和瓶口隔开。抹过凡士林的磨口玻塞要用有机溶剂将凡士林洗净后，再用纸条隔开放置。5：不要用滤纸称量药品，也不要用滤纸作记录。6：从烘箱内取物品时，须带上手套以防烧伤；精确称量时，务必带上手套。7：标签纸的大小应与容器相称，贴在试剂瓶或烧杯的上2/3处，试管等则贴在上部。标签上应写明物质的名称、浓度、配制的日期和配制人。8：标准试剂烘干后，应放在干燥器中，称量瓶称取后立即放回干燥器备用。9：取用试剂和标准溶液后，需立即将试剂瓶塞严，放回原处。取出的试剂和标准溶液如未用
3、尽，切勿倒回瓶内，以免掺混。取标准溶液时，应根据需要倒出一定量于干净烧杯内，再用移液管由烧杯中量取。不能用移液管直接由试剂瓶量取。10：凡是发生烟雾、有毒气体和有臭味气体的实验，均应在通风橱内进行。橱门应关闭，非必要时不能打开。11：在化验室工作时要紧张严肃。不许谈天说笑，更不许大声喧哗或互相打闹。12：化验室的药品器材，未经允许不得带出化验室。13：在实验过程中，要将实验的结果及时如实地记录下来，数据要记在一定的记录本中，不要随便记在纸条上，以免丢失。记录不能随意涂改，必要时可在错误数据上划横线，并在右上角签名。14：要爱护仪器和节省药品。贵重仪器在使用前应熟知使用方法，使用时，要严格遵守操
4、作规程。发生故障时，应立即停止仪器的运转，告知管理维护人员，切勿擅自拆修。使用后应按规定登记。化验室常用器皿与用具仪器规格主要用途注意事项试管、离心试管分为硬质试管、软质试管、离心试管普通试管用作少量试剂的反应器，便于操作和观察，离心试管可用于定性的沉淀分离可加热至高温（硬质）但不能骤冷、加热时不能对人，且要不断移动试管，使其受热均匀，反应液体不能超过其容量的1/2。试剂瓶有无色、棕色之分用于盛少量液体试剂或溶剂见光易分解的或不太稳定的试剂用棕色试剂瓶盛装，碱性试剂要用带橡皮塞的滴瓶，但不能长期盛放浓碱液广口瓶细口瓶分玻璃和塑料，有无色和棕色，磨口和不磨口广口瓶盛装固体试剂，细口瓶盛装液体试剂
5、不能加热，取试剂时瓶盖倒放在桌上，不能弄脏弄乱，碱性物质要用橡皮塞，稳定性差的要用棕色瓶量筒烧杯以其最大容积（ml）表示，如：100、50量取一定体积的液体用不能直接加热称量瓶分扁形和高形扁形用作测定水分和干燥基准物质，高形用作盛量基准物质或样品不可盖紧磨口、烘烤，磨口塞要原配套，不得互换。容量瓶以刻度下的容积（ml）表示，如1000，500等用来配制准确浓度的溶液不能受热，不得贮存溶液，不能在其中溶解固体，瓶塞与瓶是配套的，不得互换。移液管吸量管以其最大容积（ml）表示；如5，10，20，50等精确量取一定量的液体移液管与容量瓶配合使用，为了减少测量误差，吸量管每次都应从最上面刻度起往下放出
6、所需液体滴定管滴定管分为酸式（下部为活塞）和碱式（下部为橡皮管）、无色或棕色滴定或量取准确体积的溶液时使用碱式滴定管盛放碱性溶液或还原性溶液，酸式滴定管盛放酸性溶液或氧化性溶液，见光易分解的滴定液宜用棕色管锥形瓶（三角瓶）以容积（ml）表示，如500、250等反应容器、振荡方便，适用于滴定操作或做接受器盛液体不能太多，加热时应放在石棉网上研钵以铁、瓷、玻璃、玛瑙制作，以口径大小表示用于研磨固体物质，大块物质不能敲，只能压碎。不能用于加热，按固体的性质和硬度选用不同的研钵，放入量不能超过容积的1/3。干燥器以外径（mm）表示大小，分为普通干燥器和真空干燥器，内放干燥剂。保持物品干燥防止盖子滑动打
7、碎，热的物品待稍冷后才能放入，盖的磨口处涂适量的凡士林，干燥剂要及时更换。漏斗以口径（mm）大小表示用于过滤操作不能用火加热分液漏斗以容积（ml）和形状(球形、梨形)表示用于分离互不相溶的液体不得加热，漏斗塞子、活塞不得互换水浴锅用于间接加热所选择的圈环正好使加热器皿浸入锅中2/3，不要让锅里的水低于电热丝坩埚材质有瓷、石英、铁、镍、铝等用于灼烧试剂一般忌骤冷、骤热，依试剂性质选用不同材质的坩埚烧杯玻璃和塑料的以容积(ml)表示，50、100、250、1000常温或加热条件下用作反应物量大的反应容器，反应物易混合均匀，也可用来配制溶液加热前将烧杯外壁擦干，受热要均匀，可以加热至高温实验基本操作
8、一：容量瓶 凡要求准确配制一定浓度的溶液时必须使用容量瓶。容量瓶的容量有大有小，均在瓶上标出（如50ml、500ml等）。瓶颈上有一刻度线，表示当液体加到此刻度时就相当于瓶上所标容量。瓶上并标有温度，通常为20，表示瓶上所标容量是在20时的容量。室温不在20时，容量将会有所增减。配制溶液时，先将溶质在烧杯中用少量溶剂溶解，再把溶液沿玻璃棒引入容量瓶；用少量溶剂冲液烧杯后倒入容量瓶，最后再添加溶剂到刻度线。加溶剂时在接近刻度线前，应改用滴管吸取溶剂添加，以免超过刻度线。装透明溶液时应使液体凹面下线与瓶上刻度线重叠；非透明溶液则应使液体凹面上线与刻度线重叠。混匀时，一手握瓶颈并按住瓶塞；一手托瓶底
9、，反复颠倒、摇动数次。为了保证容量瓶的准确度，容量瓶中所装溶液温度应在20左右，不可过高或过低，切不可直接加热；用后只能以水冲洗或用铬酸洗液浸泡，切不可放入毛刷直接刷洗；洗净后倒置放干而不能烘干；容量瓶与其瓶塞是成套固定的，不可任意更换，以免不严而漏出液体；二：吸量管 是精密的卸量容器。化验室常用的分三种：1：刻度吸管 这类吸管的管壁上刻印有多个刻度。刻度分为刻到尖端的及刻度不到尖端的；刻度读数有从上而下及从下而上的，用前必须分清楚。用刻度吸量管量取液体时，若使用刻度不到尖端的，只要小心将液体放至下端最后刻度处即可。若使用刻度到尖端的吸管则要注意使用规则。1ml（包括1ml）以上的刻度管，在放
10、出液体后，尖端遗留的液体不应吹出，只要使管尖紧靠容器内壁转动几秒钟即可；1ml以下（不包括1ml）的刻度管则必须把尖端遗留的液体吹入容器内。这类管上一般都印有“吹”字。2：移液管 此类管中部有一圆柱状空泡，只有一个刻度。由于卸出量已经固定，所以准确性比刻度吸管大。使用时，将所量取的液体慢慢放出，尖端所余少量液体不应吹出，只须在最后将管尖触及容器内壁转动几秒钟即可。这类管主要作量卸液体之用。3：奥氏（Ostwald）吸管 这是一类特殊吸管。管下端有一卵形空泡，上端有一容量刻度。量取液体时，当所量取的液体自行流出后，必须将遗留在管尖内的少量液体吹入容器内。该管的特点是每单位容器所占管壁的面积最小，
11、而且管内无凹凸处阻碍液体的流出，因此精确度较高。生物化学实验中常用它吸取血液、组织液和组织匀浆等黏度较大的样品。三：吸量管的使用方法1：一般使用吸管是用拇指和中指握着管身，刻度数字对着自己，并使管与地面垂直；以食指堵塞吸管上端开口，用以控制液体的放出速度。2：吸取液体时，应用橡皮球（洗耳球）吸取，尽量不用嘴吸。特别是浓酸、浓碱及有毒物质，严禁用嘴吸。吸时，应把吸管插入液体的适当深度，以免发生空吸现象。吸取液体的量应超过最高刻度少许。3：当吸管从所吸取的液体中取出后，均须用滤纸片将管外壁抹干净以免影响取量。4：吸管用滤纸抹净后，将液体放至起始刻度，弃去多余液体，然后再放至所需刻度。读取刻度时，眼
12、睛要与所读取的刻度平行。刻度一般为圆圈或弧形，平行时只能看到一条线，液体应流至液体的凹面底部正好与该条线重叠。释放液体速度要慢，不可放开食指自由下落，以免液体在管壁内附着过多而造成误差。5：为减少误差。要选用恰当的吸管，如量取1.5ml时应选用2ml的刻度吸管，而不可选用5ml或10ml的，以1ml吸管吸取两次代替2ml也会产生误差。6：吸管用毕，应立即用水冲洗，特别吸血液、组织匀浆等含蛋白质溶液的吸管，因蛋白质干固后将堵塞吸管的尖端。水冲后，晾干，再泡入铬酸洗液中1h以上，最后取出洗净烘干。7：使用过程中要防止吸管尖端和上口碰破，尖端碰破残缺，则吸量不准；上口破残，则不易控制流量。均不能使用
13、。四：玻璃仪器的洗涤方法玻璃仪器的清洁与否，直接影响实验的结果，如因为仪器的不清洁或污染造成错误的实验结果。因此玻璃仪器的洗涤清洁工作是非常重要的。在实验的过程中每个人都要逐步养成保持所用玻璃仪器清洁、放置整齐的良好习惯。其清洗方法如下：1：一般玻璃仪器 如试管、烧杯、量筒和锥形瓶等。先用自来水冲去污物，浸于洗衣粉或肥皂水内，用毛刷细心地刷洗内外（也可用毛刷抹肥皂或洗衣粉刷洗）务使多生泡沫，再用自来水冲洗，察看器壁上是否沾有水珠，沾有小水球表示未洗干净，应重复洗涤，直至不沾水珠为止。最后用蒸馏水少量冲洗23次。洗净后器皿倒置干净处晾干或烘干（量筒不可烘烤）。2：量度玻璃仪器 如吸管、滴定管和容
14、量瓶等。使用后，应立即用清水冲洗除去试剂等残留物（千万勿使干固），晾干后，再浸泡于铬酸清洁液中46h或过夜。然后用水充分冲洗，并察看是否洗净（方法同前），如已洗净再用少量蒸馏水冲洗23次，除吸管可烘干外，其它只能倒置晾干。五：洗涤液化验室中除用水、洗衣粉和肥皂外，还使用一些化合物的溶液洗涤玻璃仪器。这些溶液称为洗涤液，其种类很多。先介绍几种：1：铬酸洗液（重铬酸钾-硫酸洗液，简称洗液）这是化验室中使用最广泛的一种洗液。配方很多，可根据情况选用。如：（1）称取重铬酸钾50g，溶于100ml水中，再慢慢边加边搅动地加入浓硫酸（工业用）400ml，若中途温度过高，则暂停待稍冷后再加。冷却后即可使用。
15、（2）称取重铬酸钾5g，加水5ml，搅拌，使其溶解，慢慢加入浓硫酸（工业用）100ml。待冷却后即可使用。铬酸洗液具有强烈的腐蚀性。皮肤、衣物等要避免与之接触。洗液应保存在密闭容器中，以防吸水。良好的洗液应呈褐红色，如溶液变成黑绿色表示已失效，无氧化能力，应更换。2：硝酸洗涤液 用水和浓硝酸按11配成的硝酸溶液，可用以洗涤二氧化碳测定仪等。实验的准确度与精密度在化学分析工作中，无论怎样谨慎地操作，测定结果总会产生误差，因此，掌握精确度与精密度实验，是进行分析工作的基础。一：实验误差 在实际的分析工作中，由于仪器的性能，实验的技巧以及化学反应是否完全等原因，使测得的结果往往不是客观的真实值，只能
16、是与真实值接近，所以称测得值为近似值。测得的近似值与真实值之间的差别称为误差。近似值比真实值大时误差为正，比真实值小时误差为负。表示误差的方法有绝对误差和相对误差。1：绝对误差 测得值与真实值的差值称为绝对误差。以A表示真实值，a表示近似值，r表示绝对误差，则 r=a-A如，滴定读数为20.24ml，而其真实体积为20.23ml，则绝对误差为：r=20.24-20.23=+0.01ml；而另一滴定读数为2.033ml，其真实体积为2.023ml，其绝对误差为：r=2.033-2.023=+0.01ml。两份测定的绝对误差均为0.01，但两份测定的体积相差10倍，可见r不能反映问题的全面，因此有
17、另一种表示误差的方式。2：相对误差 绝对误差占真实值的百分数为相对误差。相对误差用R表示，即：R（%）= (a-A)/ A 100= r A 100如上例滴定读数的相对误差为：0.05%；0.5%。由此可见，两份滴定读数的绝对误差虽然相等，但当用相对误差表示时，第一份滴定比第二份滴定的准确度大10倍。显然，当被测定的量较大时，R就越小，测定的准确度也就越高。所以应该用相对误差来表示分析结果的准确度。二：系统误差与回收率实验根据误差产生的原因和性质，可分为系统误差和偶然误差。1：系统误差 系统误差是有分析过程中经常性的原因造成的，在每次测定中都比较稳定的重复出现，它与分析结果的准确度有关，主要产
18、生的原因有：方法误差 由于分析方法本身所造成的，如容量分析中等当点与滴定终点不完全符合等。仪器误差 由于仪器不够精密，或未进行校正所造成的。试剂误差 试剂或蒸馏水不纯。操作误差 每个人对实验条件控制不同而造成，如不同造作者对滴定终点颜色变化的判断不同等。同时在操作中尚存在一些不可避免的损耗及污染，如奥氏吸管，用的再精心，也免不了有少量的样品沾壁而损耗，用滤纸滤过也是如此。由于上述种种原因引起的系统误差，其特点是无论重复做多少次试验，都是经常反复出现，同真实数值之间的差距是比较一定的，并有相同的符号，（+）或（-）。为了检验系统误差的大小，衡量测定的准确度，常用回收率实验来表达。2：回收率实验
19、回收率实验是在要测定的溶液中添加已知量的标准被测物，与待测的未知样品同时做平行测定，测得的添加标准物量与所添加的标准物量之比的百分率就称为回收率。回收率（%）= （样品+标准物）测定值-样品测定值 添加标准物量 100系统误差越大，回收率越低；回收率越接近100%，系统误差越小。由于系统误差对分析结果的影响比较稳定，重复测定可以重复出现，因而可以设法减少或校正。3：系统误差的减免或校正 为了减免系统误差常采用下列措施：仪器的校正 对所用的测量仪器（如砝码、容量仪器）进行校正，以减少误差。做空白实验 由于试剂中含有影响测定结果的杂质或侵蚀器皿等而发生误差，可用空白实验来校正。其方法是用空白样品（
20、即不含被测物的试剂溶液）与被测样品在完全相同的条件下进行测定，最后将被测样品所得的测定值，减去空白实验的测得值，可以得到比较准确的结果。用回收率实验对测得值进行校正，按上述方法求出回收率之后，对测得值可用下式进行校正：被测样品的实际含量= 样品的分析结果（含量）/回收率应该指出，由于真实值是无法知道的，因此在实际工作中无法求出真正的准确度，只得用精密度来评价分析的结果。三：偶然误差与精密度1：偶然误差 偶然误差是指在某项测定中由于偶然的一些因素引起的误差，这些因素时隐时现，如仪器的临时故障，天平两侧温度不一，电压不稳定，取样不均匀等，另外，操作者不小心也是产生偶然误差的原因，偶然误差的大小通常
21、用精密度来衡量。2：精密度 精密度是指对同一样品在同一条件下多次测定结果之间接近的程度。同一样品的一系列测值越是接近，精密度越高，表明偶然误差越小。若测定高低不一，表明偶然误差很大，精密度很低。精密度一般用偏差来表示。偏差也分为绝对偏差和相对偏差：绝对偏差= 个别测定值测定值的算术平均值（不计正负号）相对偏差（%）= 绝对偏差 算术平均值 100精密度的表示方法和误差的表示方法一样，用相对偏差表示比绝对偏差更有意义。在实验中，对某一样品通常须进行多次平行测定，求得其算术平均值，作为该样品的分析结果。对于该结果的精密度则有多种表示方法。平均绝对偏差和平均相对偏差的表示法：如 一份血样共作4次血氯
22、测定，其结果如下： 测定结果（t） 算术平均值 个别测值的绝对偏差（d） 566mg% 9mg% 584mg% 575mg% 9mg% 570mg% 5mg% 580mg% 5mg% 平均绝对偏差（d）=（9+9+5+5）4 =7mg%平均相对偏差= 7/ 575 =1.2%在实验中，有时只做两次测定，精确度可用下式计算： 两次分析结果的差值平均值 100%不同的实验方法，允许误差的要求不相同。如用滴定法对同一样品进行平行测定时，其各测值之间的允许误差不应超过0.2%。标准偏差或均方根偏差：利用绝对偏差（d）和测定次数（n）可计算出标准偏差（S.D）： S.D=d2 n-1 标准偏差表示所测定
23、的这些样品中待测物的含量变化范围。这是从生物统计推导来的一种精密度表示法，标准偏差越小表示样品中各个测值的变异度（集中或分散的程度）越小。表示越精确。其结果可以用平均值（x）标准偏差（S.D）来表示。3：偶然误差的减免及校正 偶然误差与分析结果的精密度有关，它来源于难以预料和不固定的因素。或是由于取样不均匀，或是由于测定过程中某些不易控制的外界因素的影响等。为了减少偶然误差，一般采取的措施是：均匀取样 动、植物新鲜组织可制成匀浆后取样；细菌通常制成悬液，经玻璃球打散摇匀后，再量取一定体积的菌体样品进行分析；固体样品极不均匀，应于取样前先进行粉碎、混匀。多次取样 根据偶然误差出现的规律，如果进行
24、多次平行测定，然后取其算术平均值，就可以减少偶然误差。平行测定的次数愈多，其平均偶然误差就愈少。关于上述的系统误差，偶然误差及准确度和精密度的问题，有几个问题再进一步说明。1：除系统误差、偶然误差之外，还有因错误操作引起的“过失误差”，如读错刻度、溶液溅出，加错试剂等。这时可能出现一个很大的误差值，此种数值应弃去不用。2：误差与偏差具有不同的含义，误差以真实值为标准，而偏差是以平均值为标准。由于物质的真实值一般是无法知道的，所以我们平时所说的真实值实际上只是采用了各种方法进行多次平行分析所得到的相对正确的平均值。用这一平均值代替真实值来计算误差，得到结果仍然只是偏差。3：用精密度来评价分析的结
25、果也有一定局限性。如分析结果的精密度很高（即平均相对偏差很小），并不一定说明实验的准确度也很高。因为如果分析过程中存在有系统误差，可能并不影响每次测定数值之间的重合程度，即不影响精密度。但此分析结果却必然偏离真实值较大，也就是分析的准确度并不一定很高。当然若是精密度也不高，则无准确度可言。4：在实际的分析工作中，应根据需要的准确度选择测量手段（仪器及方法）。如分析样品时，要求准确度到0.1g，只需使用台秤，不必使用分析天平。如果需要较高的准确度，又无适宜的仪器设备，则可用提高样品用量的方法来达到。有效数字修约管理规程1有效数字的基本概念1.1有效数字系指在检验工作中所能得到有实际意义的数值。其
26、最后一位数字欠准是允许的，这种由可靠数字和最后一位不确定数字组成的数值，即为有效数字。1.2有效位数1.2.1在没有小数位且以若干个零结尾的数值中，有效位数系指从非零数字最左一位向右数得到的位数减去无效零（即仅为定位用的零）的个数。例如35000中若有两个无效零，则为三位有效位数，应写作350102；若有三个无效零，则为两位有效位数，应写作35103。1.2.2在其它十进位数中，有效数字系指从非零数字最左一位向右数而得到的位数。例如3.2、0.32、0.032和0.0032均为二位有效数字、10.00为四位有效数字，12.490为五位有效数字。1.2.3非连续型数值（如个数、分数、倍数）是没有
27、欠准数字的，其有效位数可视为无限多位；例如分子式“H2SO4”中的“2”和“4”是个数；含量测定项下“每1ml的XXXX滴定液（0.1mol/L）”中的“0.1”为名义浓度，规格项下的“0.3g”、和“25”为标示量，其有效位数也均为无限多位；即在计算中，其有效位数应根据其他数值的最少有效位数而定。1.2.4pH值等对数值，其有效位数是由其小数点后的位数决定的，其有效数字只有两位。如：pH=2.08,为两位有效数字，因它是由H+=8.310-3mol/L取对数而来。2数值修约及进舍规则。2.1数值修约是指对拟修约数值中超出需要保留位数来保留最后一位数或最后几位数。2.2进舍规则2.2.1规则一
28、：四舍六入五成双四舍：即当尾数（测量值中需要保留的后一位）4时舍去；六入：尾数6时进位；五成双:等于5且5后无数字时，则应看需要保留的这位数（5前面的数）是奇数还是偶数，5前是奇数则进位，5前是偶数则舍去5。若5后还有非零数，说明修约数比5大，应进位。例如：将以下的测量值修约为三位有效数字，则：2.0149为2.01；5.2386为5.24；3.125001为3.13；1.755为1.76；4.105为4.102.2.2规则二：一次修约只允许对原测量值一次修约至所需位数，不论数字多少位，都要一次修约成，不能分次修约(也叫连续修约)。例如将2.15491修约为三位数，不能先修约成2.155再修约
29、为2.16，只能一次修约为2.15。3运算规则在进行数学运算时，对加减法和乘除法中有效数字的处理是不同的：3.1许多数值相加减时，所得和或差的绝对误差必较任何一个数值的绝对误差大，因此相加减时应以诸数值中绝对误差最大（即欠准数字的数位最大）的数值为准，以确定其它数值在运算中保留的数位和决定计算结果的有效数位。例13.65+0.00823+1.633=?本例是数值相加减，在三个数值中13.65的绝对误差最大，其最末一位数为百分位（小数点后二位），因此将其它各数均暂先保留至千分位，即把0.00823修约成0.008，1.633不变，进行运算：13.65+0.008+1.633=15.291最后对计
30、算结果进行修约，15.291应只保留到百分位，而修约成15.29。3.2许多数值相乘除时，所得积或商的相对误差必较任何一个数值的相对误差大。因此相乘除时应以诸数值中绝对误差最大（即有效位数最少）的数值为准，确定其它数值在运算中保留的位数和决定计算结果的有效位数。3.3在运算过程中，为减少舍入误差，其它数值的修约可以暂时多保留一位，等运算得到结果时，再根据有效位数弃去多余的数字。例1：14.1310.076540.78=14.10.07650.78=1.080.78=1.38=1.4例2：计算氧氟沙星(C18H20FN3O4)分子量。由于中国药典规定分子量的数值保留到小数点后二位（百分位），因此应将各元素的乘积修约到千分位（小数点后三位）后进行相加；再将计算结果修约到百分位，即得。12.01118+1.0079420+18.9984032+14.0067473+15.99944=216.20+20.1588+18.9984032+42.020241+63.9976=216.20+20.159+18.998+42.020+63.998=361.375=361.384正确记录检测所得的数值，应根据取样量、量具的精度、检
