1、药典分析方法验证和确认usp资料药典分析方法验证和确认 usp37 1225 1226药典分析方法验证 用于评价药物质量的检验方法应符合一定要求。根据联邦食品、药品、化妆品 第501条的规定，在美国药典(USP)和国家处方集(NF)的正文检验方法和规定为法 定标准。按照现行药品生产管理规范有关条文 21 CFR 211.194(a) 要求，用于评 价药品是否符合既定标准规定的分析方法应具有一定准确性和可靠性。按照该要求 21 CFR 211.194(a)(2) ，USP和NF分析方法使用者不必验证方法的准确性和可靠性，但要确认在实际使用条件下的适用性。考虑到 USP和NF标准法定地位这一基本情
2、况，所以，药典品种新方法或修订方法得建议，应由充分实验室数据支持， 以说明方法有效。本指导通则内容尽可能与三方国际协调会(ICH)关于在欧盟、日本和美国注册 申报资料要求中与分析方法部分有关的分析方法验证和方法学文本一致。药典申报 新的或修订的分析方法得药典申报，应报送充分的资料，以便美国药典委员会 专家理事会及其专家委员会建议的方法是否清晰完整，需要建立该方法的结论，以 及方法验证文本。方法类型不同，申报要求可能不同，一般包括下列内容 :理由 写明需要本方法的理由、用途以及与其他方法比较的优点。修订的方法 应写明现行药典方法的局限性以及建议方法得优点。建议的分析方法 应完整详细地写明建议的分
3、析方法，以便他人依法操作。文 字应包括全部重要的操作参数和有关事项以及明确的试验结果计算公式。数据元素 本部分要求提供详细、完整的分析方法验证文件，文件应包括实验 数据及各适用的分析方法运行特性计算结果。运行特性在下文中叙述。验证分析方法验证是通过实验室研究证明该分析方法的运行特性符合其分析应用要 求的过程。表 1 中列出了本文分析方法验证需考虑的典型分析运行特性。由于对术 语有不同的理解和用法，本通则以下部分包括各运行特性的定义以及衡量特性的方 法描述。定义与“测定结果”有关。分析方法的叙述应写清该方法得测定结果是什 么。ISO5725-1和3534-1指出，“测定结果是用特定测定方法得到的
4、特性值。分 析方法应规定进行一次还是数次单独测定，作为测定结果报告的平均值，或其他适 宜函数 （ 如，中位数或标准偏差 ） 。可能要求做标准校正，如气体体积校正到标准温 度和压力时的体积。所以测定结果可以是数个观察值的计算结果。简单试验时，测 定结果就是观察值本身”。测定结果是用于与标准规定限度比较的最终报告值，但 偶有例外。物理性质测定方法验证可能包括化学计量模型。方法验证中用到的典型 分析特性可用于基于化学计量模型的方法。表 1 分析方法验证用典型分析特性准确度精密度专属性检测限定量限线性范围耐用性用代表性样品进行分析方法验证时，应考虑工艺条件和物料差异的影响。下列情况下，药典分析方法应进
5、行再验证：报送USP的修订分析方法；或将已有 通用方法用于新产品或新物料制成的产品 （ 见下文方法所需数据元素部分 ）国际协调会 （ICH） 有关文本建议下列情况下需在验证 : 原料药合成工艺改变 ; 药 物制剂组方改变 ; 分析方法改变。通则1225提供适于大多数药典分析方法得验证要求信息。药典分析方法验证 可按照表 1 中列出的部分或全部分析特性，以及表 2 中分析方法分类进行。有的药 典分析方法验证要求超出通则 1225的特性。则可按各有关方法通则规定的分析验 证特性或特殊验证要求进行。分析运行特性准确度定义 分析方法得准确度系指该方法所得测试结果与真值的接近程度。分析方法的准确度应在一
6、定范围内测定。关于术语：通则1225和ICH Q2中准确度定义 为不偏离程度 （真实度）。但在国际计量学词汇 International Vocabulary of Metrology（VIM） 和国际标准组织 the International Organization forSta ndardizati on （ISO） 的文件中，“准确度”有不同的意思。ISO准确度的定义把不偏离程度 （真实度）与精密度的概念合在一起 。测定 对于原料药含量测定，用分析方法测定已知纯度的供试品 （如对照品） ， 或用被验证方法测定结果与其他已知准确度的方法测定结果进行比较，测得准确 度。对于制剂中药物的含
7、量测定，用分析方法测定制剂成分混合物中按照方法范围 加入的已知量被测物，测得准确度。如不能获得全部制剂成分，可向制剂中加入已 知量被测物 （加样法）进行测定，或用被验证方法测定结果与其他已知准确度的方法 测定结果进行比较。对于杂质定量分析，原料药或制剂中加入已知量杂质，测得准确度。如不可能 得到某些杂质或降解产物，可以将测定结果与另一方法测得结果进行比对。如没有其他方法，可比较杂质和被测物质的响应值，即等量杂质和被测物响应值比值 （ 相 对响应因子 ） ，如果已知该比值，可用于计算杂质含量。准确度为样品中被测物已知加入量含量测定的百分回收率，或平均值与可接受 真值的偏差，同时报告置信区间。IC
8、H有关文件建议在规定范围至少 3个浓度至少测定9次的结果确定准确度（即 3个浓度，每个浓度重复测定 3次）。准确度的确定可以用不同方法，包括在含量测定范围内测定被测物回收率 （百 分回收率 ），或测定估计浓度与真实浓度的线性关系。建议统计判断标准为斜率的 置信区间应在约 1.0 区间内，或斜率应接近 1.0 。在验证文件中均应规定区间或接 近程度的定义。判断标准取决于含量测定方法和变异以及结果。不建议在斜率为 1.0 时用零假设检验没有统计意义地确定判断标准。物理性质测定方法的准确度可通过标准物质分析确定，或根据具体情况对上述 方法得适用性进行具体分析来确定。精密度定义 分析方法的精密度系指均
9、匀样品多次取样用该分析方法测定各结果的一 致程度。分析方法的精密度常用一系列测定结果的标准偏差或相对标准偏差 （变异 系数） 表示。精密度衡量在正常操作条件下分析方法的重现性和重复性。重复性系 指不同实验室用该分析方法测定，如协同研究。中间精密度 （ 也称耐用性 ） 为实验室 内差异，即在同一实验室在不同日期，或用不同分析人员，或用不同设备用该分析 方法进行测定。重复性系指在一个实验室由一个分析人员用相同设备在短时间内用 该分析方法进行测定。测定 分析方法的精密度是对足够份数的一个均匀样品进行测定，以便计算标 准偏差或相对标准偏差 （ 变异系数 ） 统计有效的估计数。本测定为各份样品从样品制
10、备得到最终结果进行的全部分析过程。ICH有关文件建议在规定范围至少 3个浓度至少测定9次的结果确定准确度（即3个浓度，每个浓度重复测定 3 次） ，或用 100%测试浓度至少 6 次测定结果。专属性定义 ICH 定义专属性在杂质、降解产物以及辅料存在下分析方法能准确确定被 测物质存在的能力。如果缺乏专属性，可用其他分析方法弥补。 注: 国际专业权威机构（IUPSC,AOAC-I）采用“选择性”这个术语，对选择性极高的分析方法保留“专 属性”这个术语 。对于下面讨论的分析方法，以上定义具有以下含义 :鉴别试验 : 鉴定被分析物特性纯度检查 :采用的所有分析方法能给出被测物质中杂质的准确含量 （如
11、有关物质检查、重金属限度检查、有机挥发性杂质检查 ）。含量测定 : 给出正确结果，样品中被分析物含量或效价的准确结果。测定 定性分析 （鉴别试验）方法。应能显示区分可能存在的结构十分相关的化 合物的能力。用含有被分析物质的阳性反应 （与已知对照品对照 ）加上不含被测物质 样品的阴性反应进行确证，并确证阳性反应不是与被分析物结构相似或十分相关的 物质产生的。杂质分析方法，向原料药或制剂中加入适量杂质，应能显示这些杂质的测定结 果具有一定准确度和精密度。含量测定分析方法，其专属性应能显示该分析方法不受杂质或辅料存在的影 响。实际做法可向原料药或制剂中加入适量杂质或辅料，确定测定结果不受这些外 来物
12、质的影响。如果杂质或降解产物得不到，可将含有杂质或降解产物的样品测定结果与用另 一确证了的方法测定结果比较 （如药典方法，或其他经验证了的方法 ） ，以说明其专 属性。应包括对贮存在相应苛刻条件下的样品测定比较 （如:光、热、湿度、酸或碱 水解、以及氧化 ） 。含量测定分析方法，应比较这些结果 ; 色潜纯度检査应比较杂质 的检出情况 .ICH有关文件说明，当使用色谱分析方法时，验证资料中应附代表性色谱图， 以显示其选择性好坏，应标明每个色谱个峰。峰纯度检査 （ 如用二极管阵列或质谱 法检测 ）可用于显示被测定物色谱峰仅为一个成分。用波谱法的定性定量测定方法验证，应参考有关通法，如近红外光谱法、
13、拉曼 光谱法、 X 射线粉末衍射法等。检测限定义 检测限是限度检查的特性。检测限系指在规定试验条件下样品中被分析 物能被检出的最低量，不一定要求定量。因此，限度检查只要说明被分析物的量髙 于或低于一定限度。检测限通常以样品中被分析物的浓度表示 （如百分浓度，十亿 分之几）。测定 非仪器分析方法，一般用已知浓度被分析物的样品进行分析，求得该被 分析物能被可靠检出的最低浓度。仪器分析方法，可用与非仪器分析方法相同方法求得检测限。分析方法推荐作 为药典方法时，不必要测定实际的检测限。实际上，用含高于和低于规定检测浓度 的已知浓度被分析物样品求得的检测限是非常低的。例如，要求检査浓度为 0.1% 的杂
14、质，应表明，用本法能可靠地检出该浓度的杂质。具有基线噪音的仪器分析方法，ICH有关文件叙述了一个常用方法，即将含已 知低浓度被分析物样品测得的信号与空白样品信号比较。可以确定可靠检出被分析 物的最低浓度。 一般可接受的信噪比为 2:1 或 3:1。其他方法如按照标准曲线的 斜率和响应值的标准偏差计算检测限的。无论用那种方法，必须用接近检测限或制 备成检测限浓度的数个样品，对检测限进行最后验证。定量限定义 定量限是样品基质中低浓度化合物定量测定的特性，如原料药中的杂质 和最终药物制剂中的降解产物。定量限系指在规定试验条件下样品中被分析物能被 测定的最低量，且具有可接受的精密度和准确度。定量限通常
15、以样品中被分析物的浓度表示 （ 如百分浓度，十亿分之几 ） 。测定 非仪器分析方法，一般用已知浓度被分析物的样品进行分析，求得该被 分析物能被测定且具有可接受准确度和精密度的最低浓度。仪器分析方法，可用与非仪器分析方法相同方法求得定量限。分析方法推荐作 为药典方法时，不必要测定实际的定量限。实际上，用含高于和低于规定定量浓度 的已知浓度被分析物样品求得的定量限是非常低的。例如，要求测定被分析物的浓 度为每片 0.lmg, 应表明，用本法能可靠地定量测定该浓度的被分析物。具有基线噪音的仪器分析方法， ICH 有关文件叙述了一个常用方法，即将含已 知低浓度被分析物样品测得的信号与空白样品信号比较。
16、可以确定可靠测定被分析 物的最低浓度。一般可接受的信噪比为 10:1 。其他方法如按照标准曲线的斜率和 响应值的标准偏差计算定量限的。无论用那种方法，必须用接近定量限或制备成定 量限浓度的数个样品，对定量限进行最后验证。线性和范围线性的定义 分析方法的线性系指在一定范围内样品中被分析物测定结果与其 浓度直接或经适当数学转换呈正比关系，所以，在本段中“线件”就是浓度和测定 结果关系的线性。有时，浓度和 /或测定结果需经转换方能求得线性结果。 （注: 用 转换方法时，回归分析用的权重因子可能会改变 ） 。常用的转换如对数转换、平方 根转换或倒数转换，或其他适宜的转换方法。如果无法得到线性关系，可用
17、非线性 模型。无论是线性还是非线性，目的是求得浓度与响应值的关系。范围的定义 分析方法的范围系指用该方法测定得到具一定精密度、准确度和 线性关系结果的被分析物高浓度和低浓度区间 （含这两个浓度 ） 。范围常以用该分析 方法测定结果相同的单位表示 （ 如百分浓度，百万分之几 ） 。线性和范围的测定 线性应在分析方法范围内确定。线性的确定应先用直观方 法，用响应值作为被分析物浓度的函数作图进行判断。如有线性关系，再用统计方 法处理 （如用最小二乘法进行回归计算 ） 。回归线有关的数据可作为线性程度的数学 估计。应报送相关系数、 y 截距、回归线的斜率以及残差平方和。应确认用范围内和范围两端浓度被测
18、物的样品测定结果是否具有可接受精密 度、准确度和线性，来验证分析方法的范围。ICH建议一般应至少用5个浓度确定线性。ICH还建议下列应考虑的最小规定 范围:原料药（或最终制剂）的含量测定:测试浓度的 80%?120%。杂质的测定 : 可接受限度的 50%?120%。含量均勻度测定 : 除证明剂型特性需要更宽或更适宜范围外 （如具剂量阀的吸入 剂） ，一般至少为测试浓度的 70%?130%。溶出度测定 : 应覆盖规定范围的士 20% （例如，一个控释制剂的可接受限度覆盖 为 1 小时的 30%至 24 小时的 90%,则验证范围应为标示量的 10%?110%。）习用的线性定义，即线性的确定方法，
19、或样品浓度与响应值之间数学关系的确 定方法，不适用于粒度分析。粒度分析中，测定浓度范围 （仪器-粒度相关 ）的规定 应为，测定的粒度分布不受规定浓度范围内浓度变化的影响。浓度低于规定浓度范 围时，由于信噪比差而带来误差，浓度超出规定浓度范围时，会由于多重散射而引 入误差。耐用性定义 分析方法的耐用性系指分析方法文件所列测定参数有小的并合理的变动 时，测定结果不受影响的能力，说明正常使用该法的适用性。耐用性可在建立分析 方法时确定。系统适用性如果测定结果易受分析条件的影响，则应适当控制分析条件，或在分析方法中 写明注意事项。分析方法耐用性和重现性评价可用确定一系列系统适用性参数的方 法，以保证应
20、用时方法的有效性。典型变动有 : 分析溶液的稳定性、不同仪器和不 同分析人员。液相色谱情况下，典型变动有：流动相的pH值、流动相的组成比例、 不同批号的色谱柱或不同牌号的色谱柱、柱温和流速。气相色谱情况下，典型变动 有： 不同批号的色谱柱或不同牌号的色谱柱、温度和流速。系统适用性试验应把仪器、电子系统、分析操作、被分析样品作为整体考虑来 进行评价。特定分析方法的系统适用性参数应按照被评价分析方法的类型确定。系 统适用性参数对色谱法特别重要。向 USP申报有关资料时，请参看通则色谱法 中系统适用性这一节的具体要求。验证所需数据元素 药典测定从非常严格的分析测定到主观特性评价，有着不同的要求。考虑
21、到这 么大的变数，合理的做法是不同分析方法要求不同的验证方案。本通法仅包括要求 验证数据的最常用测定法类别。这些类别如下 ：类别? 用于原料药主成分或最终药物制剂有效成分 （包括防腐剂 ）含量测定的分 析方法。这些分析方法包括定量测定和限度检查。类别? 用于原料药中的杂质或最终药物制剂中降解产物测定的分析方法。这些 分析方法包括定量测定和限度检查。类别? 测定性能特点的分析方法 （如溶出度，药物释放等 ）。别? 鉴别试验。 类每个类别需要不同分析资料。表 2 为各类别一般所需的数据元素。表2 验证所需数据元素类别 ? 分析运行特性 类别 I 类别 ? 类别? 定量 限度检查准确度 要 要 不要
22、 * *精密度 要 要 不要 要 不要专属性 要 要 要 要 *检测限 不要 不要 要 不要 *定量限 不要 要 不要 不要 *线性 要 要 不要 不要 *范围 要 要 不要 * * 根据特定分析方法的特性，可能需要。已有测定通用方法 （ 如水分测定法，细菌内毒素检查法 ） ，当用于新产品或新原 料检查时，应确认其适用性，如准确度 （和没有干扰 ） 。验证物理特性方法时，可用任一分析方法所需的相同运行特性，根据具体情况 来具体评价运行特性的使用，以确认该分析方法是否适用于其既定目的。各验证参 数可接受限度应与其既定用途一致。物理分析方法也可分成 4 种验证类别。例如，光谱定量方法的验证，按照方
23、法 的要求，可用类别 ?或类别 ?的分析运行特性进行评价。物理性质定性试验，如粒 度、表面积、堆积密度和敲密度，可能与运行特性有关，常用类别 ?的特性，类别 ? 分析运行特性常用语光谱定性鉴别试验的验证。然而，不同分析目的要用到各种技 术，选择类别验证各个方法时，应考虑方法的特殊用途以及被分析物性质。分析方法的有效性只能用实验研究进行确认。因此，做好这类研究的总结是确 定分析方法是否适合于既定用途的基本要求。法规要求 ( 见药典分析方法确认 中 药典分析方法确认有关原则 ) ，应显示在实际应用条件下现行药典分析方法的适用 性。总结中最好附有对新的或修订的药典分析方法的建议。药典分析方法确认 本
24、通则目的是为用已有人员、已有设备和试剂首次按药典分析方法检验并要得 到可接受结果提供确认方法。本通则并非为了对已经成功建立好的实验室分析方法 追溯其实用性。通则药典分析方法验证 对递交拟收载入USP-NF勺分析方法 列出了各种试验类别和所附文件需考虑的一般验证特性。确认方法包括对选定分析 运行特性勺评估，如通则 所列分析运行特性，以确认适宜勺相关参数，不是 重复验证过程。药典分析方法首次使用者不要求对该方法进行验证，但应有文件确定在实际应 用条件下该方法勺适用性。在美国，此项要求规定在 21 CFR 211.194(a)? 现行药 品生产质量管理规范中，规范规定 : “采用勺所有检验方法勺适用
25、性均应在实际应 用条件下进行确认”。本通则不包括微生物检验方法的确认，因 USP有关通则已经包含，如抗菌效力 检测51、非无菌制剂勺微生物限度检查法 :微生物计数法 61、非无菌制剂 的微生物限度检查法 : 控制菌检查法 62、无菌检查法 71、药典品种微生物 回收的验证 1227。确认过程能正确理解并照药典分析方法依法检验的人员，应具有一定经验和知识并受过 培训。检验人员对药典分析方法应进行确认，确认结果应确保药典分析方法能按既 定要求进行。如果药典分析方法确认不成功，并且美国药典会人员的协助也不能解决问题， 则说明该方法不适用于该单位供试品种的检验。可按凡例与要求规定研究和验证替 代方法。
26、该替代方法应递交 USP并附必要数据，以便该替代方法作为现行药典方 法收载或替换现行药典方法。确认要求药典分析方法确认的要求应基于对该方法以及用该该方法检验品种复杂程度的 评价。虽然在实际应用条件下确认适用性不需要做全部的再验证，但通则 表2 所列某些分析运行特性可选用于确认过程。只需要评价适合于特定方法确认的那 些特性。确认过程的程度和深度取决于检验人员的培训水平和经验、分析方法的类 型及相关设备或仪器。特定的分析步骤以及被测定品种。举例说明，药典分析方法用于原料药和制剂含量测定适用性的确认，专属性评 价就是关键项目。例如，用系统适应性分离度是否符合要求来确认色谱法的可接受 专属性 （ 如果
27、方法中有规定 ） 。但是，原料药来源不同，含有的杂质情况可能不同， 拟采用的药典分析方法不一定适用。同样，对于药物制剂所用辅料，不同生产厂生 产的辅料质量差异十分大，可能直接干扰分析方法或形成杂质，使拟采用方法不一 定适用。另外，药物制剂中含有的不同辅料、抗氧剂、缓冲剂、或容器本身的溶出 物，均可能对测定方法产生干扰。在这种情况下，对特定原料药或药物制剂，应进 行更充分的专属性评价，以显示拟采用分析方法对特定原料药或药物制剂的适用 性。其他分析运行特性，如检测限或定量限，以及精密度评价，对杂质分析可能有 用，可显示在实际应用条件下拟采用药典方法的适用性。常规进行的基本药典检验方法不必进行确认，
28、除非该药典方法不适用于供试品 种。基本药典检验方法例如但不限于，干燥失重测定法、炽灼残渣测定法、各种容 量分析法，如酸值测定，以及简单仪器分析法，如 PH值测定。但是，首次将已经 建立的常规方法用于药典品种测定时，对于新的或不同的样品处理和溶液制备要 求，建议考虑方法确认的必要性。下面是赠送的合同范本，不需要的可以编辑删除教育机构劳动合同范本 为大家整理提供，希望对大家有一定帮助。一、 培训学校聘请 籍 （外文姓名 ） （ 中文姓名 ） 先生 / 女士 / 小姐为 语教师，双方本着友好合作精神，自愿签订本合同并保证认真履行合同中约定的各项义务。二、合同期自 年 月 日起 年 月 日止。三、受聘
29、方的工作任务 （另附件 1 ）四、受聘方的薪金按小时计，全部以人民币支付。五、社会保险和福利 :1.聘方向受聘方提供意外保险。 （另附 2 ）2.每年聘方向受聘期满的教师提供一张 至 的来回机票（金额不超过人民币 元整）或教师凭机票报销 元人民币。六、聘方的义务 :1.向受聘方介绍中国有关法律、法规和聘方有关工作制度以及有关外国专家的 管理规定。2.对受聘方提供必要的工作条件。3.对受聘方的工作进行指导、检查和评估。4.按时支付受聘方的报酬。七、受聘方的义务 :1.遵守中国的法律、法规，不干预中国的内部事务。2.遵守聘方的工作制度和有关外国专家的管理规定，接受聘方的工作安排、业 务指导、检查和
30、评估。未经聘方同意，不得兼任与聘方无关的其他劳务3.按期完成工作任务，保证工作质量。4.遵守中国的宗教政策，不从事与专家身份不符的活动。5.遵守中国人民的道德规范和风俗习惯。八、合同的变更、解除和终止 :1. 双方应信守合同，未经双方一致同意，任何一方不得擅自更改、解除和终止 合同。2. 经当事人双方协商同意后，可以变更、解除和终止合同。在未达成一致意见 前，仍应当严格履行合同。3.聘放在下述条件下，有权以书面形式通知受聘方解除合同 :a 、受聘方不履行合同或者履行合同义务不符合约定条件，经聘方指出后，仍 不改正的。b 、根据医生诊断，受聘放在病假连续 30 天不能恢复正常工作的。4.受聘方在
31、下述条件下，有权以书面形式通知聘方解除合同 :a 、聘方未经合同约定提供受聘方必要的工作条件。b 、聘方未按时支付受聘方报酬。九、本合同自双方签字之日起生效，合同期满后即自行失效。当事人以方要求 签订新合同，必须在本合同期满 90 天前向另一方提出，经双方协商同意后签订新 合同。受聘方合同期满后，在华逗留期间的一切费用自理。十、仲裁 :当事人双方发生纠纷时，尽可能通过协商或者调解解决。若协商、调解无效， 可向国家外国专家局设立的外国文教专案局申请仲裁。本合同于 年 月 日在 签订，一式两份，每份都用中文和 文写成，双方各执一份，两种文本同时有效。聘方（ 签章） 受聘方 （签章） 签订时间 : 年 月 日 二手房屋买卖合同范本由应届毕业生合同范本 卖方: （简称甲方 ）身份证号码 : 买方: （简称乙方）身份证号码 : 根据中华人民共和国经济合同法、中华人民共和国城市房地产管理法 及其他有关法律、法规之规定，甲、乙双方在平等、自愿、协商一致的基础上，就 乙方向甲方购买房产签订本合同，以资共同信守执行。第一条 乙方同意购买甲方拥有的座落在 市 区拥有的房产 （ 别墅、写字楼、公寓、住宅、厂房、店面 ） ，建筑面积为 平方米。 （ 详见土地房屋权证第 号 ） 。第二条 上述房产的交易价格为 :单价:人民币 元/平方米，总价 :人民币 元整（ 大写: 佰
