1、细胞生物学实验教案大全细胞生物学实验教案【经典学习资料，收藏必备】实验一、细胞形态结构与几种细胞器的观察 【实 验 目 的】 在普通光学显微镜下识别细胞和细胞器的形态结构，掌握生物绘图的方法。 【实 验 原 理】 细胞在形态上是多种多样的，有球形、椭圆形、扁平形、立方形、梭形、星形等。虽然细胞的形状各异，但是它们却有共同的基本结构特点，都由细胞膜（动物）、细胞壁（植物）、细胞质和细胞核组成。细胞中的各种细胞器，如线粒体、高尔基体、中心体、核仁、染色体等，一般经过一定固定染色处理后，大多数在光学显微镜下是可以看见的（图）。细胞器的形态结构在普通光学显微镜下与电子显微镜下所看到的结构有很大的差别。
2、 （自拍图） （a） （b） （c） （d） 图 1 细 胞 形 态 结 构 a. 柿胚乳细胞示胞间连丝；b. 马蛔虫受精卵分裂中期示中心粒 ；c. 兔的神经细胞中高尔基体；d.小鼠肝细胞线粒体 【实验仪器、材料和试剂】 1. 仪器：复式显微镜、擦镜纸2材料：洋葱根尖切片、小白鼠肝切片、兔神经节切片、马蛔虫受精卵切片 3香柏油或石蜡油、二甲苯 【方法与步骤】 一、洋葱根尖切片细胞的观察 先用低倍镜观察根尖的纵切面，注意分生区、伸长区、成熟区细胞的异同，然后再仔细观察细胞的形态结构，特别注意细胞的形状、大小，以及细胞壁、细胞核、核仁、细胞质、液泡的形态结构。 二、兔神经节细胞切片高尔基体的观察
3、先在低倍镜下找到兔神经节细胞，然后转用高倍镜观察，可看到细胞内淡黄色的背景上有黄褐色的细胞核，核的周围分布着许多深褐色的（硝酸银镀染）高尔基体，呈弯曲的线状，颗粒状，少量分散在细胞质。 三、小白鼠肝细胞切片线粒体的观察 先用低倍镜后用高倍镜观察，可见到许多肝小叶，每小叶有许多紧密排列成索状的多角形的肝细胞，细胞中央有大而圆的细胞核。这时，转用油镜观察，可见到细胞质内分布着许多被苏木精染成深紫色的线粒体，呈颗粒状和线状。 四、马蛔虫受精卵切片中心体的观察 1取马蛔虫受精卵切片，在显微镜下找到充满子宫腔的受精卵，每个马蛔虫受精卵外围有一层较厚的卵膜，膜内有宽大的围卵腔，各围卵腔内有处在不同分裂期的
4、卵细胞。找到分裂中期的细胞，在细胞中央被染成蓝色条状或棒状的结构，这就是染色体。在染色体两侧可见各有一个较小的，亦被染成蓝色的小粒，称中心粒。在中心粒的周围可见呈放射状的星丝。实验一、细胞的显微测量 【实 验 目 的】 掌握显微测微计的基本原理及使用方法。 【实 验 原 理】 细胞长度、面积、体积的测量是研究正常的或病理组织细胞的基本方法之一。 在显微镜下用来测量细胞长度的工具叫显微测量计，由目镜测微尺（ocular micrometer）和镜台测微尺（stage micrometer）组成，两尺要配合使用。目镜测微尺是放在目镜内的一直径为2cm圆形玻片上，里面有100等分格的刻度尺。每一小格
5、表示的实际长度随不同的显微镜、不同放大倍数的物镜而不同。镜台测微尺是一块特制的载玻片，在它的中央由一片圆形盖片封固着一具有精细刻度的标尺，标尺全长为lmm，分为100等份的小格，每小格的长度为0.01 mm（10m），标尺的外围有一小黑环，便于找到标尺的位置。显微测量时，先用镜台测微尺标定目镜测微尺每小格所表示的实际长度。在测量细胞时，移去镜台测微尺，换上被测标本，用目镜测微尺即可测得观察标本的实际长度。 【实验仪器、材料和试剂】 （一）仪器：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、解剖剪、解剖镊、注射器、载玻片、盖玻片、试管、无菌采血针 （二）材料：血涂片 （三）试剂：生理盐水、瑞氏（Wright）
6、染色液 【方法与步骤】 1制片 （1）人血涂片：用采血针刺取耳垂血，制成薄血涂片，晾干后瑞氏染色。 （2）蟾蜍血装片：用注射器直接取蟾蜍心脏血，用生理盐水稀释后制成细胞悬液，制成装片。 2长度测量 （1）取下目镜，将目镜测微尺的刻度面向下放入目镜内的视场光阑上，再旋上上透镜。 （2）将镜台测微尺盖片面朝上放在载物台上，用低倍镜观察，调节焦距看清镜台测微尺的刻度。 （3）移动镜台测微尺，同时转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺平行靠近，并将两尺的“0”点刻度线或某刻度线对齐。然后从左向右查看两尺刻度线另一重合处，分别记录重合线间目镜测微尺和镜台测微尺的格数。以下式计算目镜测微尺每小格表示的实际长度
7、： 台镜测微尺格数10m 目镜测微尺每小格实际长度 目镜测微尺格数 （4）移去镜台测微尺，换上血涂片，用目镜测微尺测量细胞所占小格数并乘以目镜测微尺每小格代表的实际长度，即为被测细胞的实际长度 3厚度测量法 测量细胞的厚度，最简便的方法是利用显微镜上的微调焦轮上的标尺对细胞厚度进行测量。先将焦点面与被测物体的上端对齐一致，记下轮上的度数，然后旋转微调轮，使焦点面与下端对齐一致，再记下度数，两者之差，便是所测物体的厚度。此法简单但不精确。 【注 意 事 项】 1如果需换用高倍镜或油镜测量时，要用同样的方法重新计算高倍镜或油镜下目镜测微尺每小格的实际长度。 2在测量时要注意将被测物体放在视野中央，
8、因为这个位置镜像最清晰，相差最小。 3每一种被测物体（细胞）需反复测量数个或数十个，采用其平均值。 【作 业】 1测量十个红细胞长的长度，求其平均值。 2根据测量结果写实验报告。 附1：根据长度测量结果计算细胞、细胞核的体积及核质比 椭圆形 43ab2 （a、b分别为长短半径） 圆球形 43R3 （R为半径） 核质比 NPVnVc一Vn（Vn为核体积，Vc为细胞体积） 附2：镜台移动尺的使用 一些较精细的显微镜的镜台上装有标本推进器，它有纵横可移动的游标尺，既可测量标本的长度，又可确定标本的位置。游标尺由主标尺和副标尺组成，主标尺刻有lmm的刻度，副标尺刻有910刻度，读数精度为0.1mm，读
9、数时先看副标尺的位置，再看副标尺和主标尺的重合点即可读出。 实验二、细胞中多糖和过氧化物酶的定位 【实 验 目 的】 掌握显示细胞中多糖和过氧化物酶反应的原理和方法。 【实 验 原 理】 高碘酸雪夫试剂反应，简称PAS反应。主要是利用高碘酸作为强氧化剂，这种强氧化剂能打开C-C键，使多糖分子中的乙二醇变成乙二醛，氧化所得到的醛基与Schiff试剂反应形成紫红色化合物。颜色的深浅与糖类的多少有关。 细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色或棕色络合物，根据蓝色或棕色的出现来表示过氧化物酶的存在。 【实验仪器、材料和试剂】 （一）仪器 显微镜、镊子、染色钵、刀片、载玻片、盖玻片、吸水纸等 （二）材料
10、 马铃薯块茎、洋葱根尖或洋葱鳞茎 （三）试剂 1高碘酸溶液： 高碘酸（HIO42H2O） 0.4g， 95%乙醇 35ml， M/5醋酸钠溶液（2.72g醋酸钠溶于100ml H2O） 5ml， 蒸馏水 10ml 2Schiff试剂（配法见 Feulgen反应） 3亚硫酸水溶液（配法见 Feulgen反应） 470%乙醇 5联苯胺溶液： 在0.85%盐水内加入联苯胺至饱和为止，临用前加入20%体积的H2O2 ，每2ml加一滴。 60.1%钼酸铵溶液： 称取0.1g钼酸铵溶于100ml 0.85%盐水 【方 法 与 步 骤】 （一）细胞中多糖的测定：高碘酸雪夫（PAS）反应 1把马铃薯块茎用刀片
11、徒手切成薄片。 2浸于高碘酸溶液515min 。 3移入70%乙醇中浸片刻。 4Schiff试剂染色15min 。 5亚硫酸溶液洗三次，每次1 min。 6蒸馏水洗片刻。 7装片镜检。 （二）细胞中过氧化物酶的测定：联苯胺反应 1把洋葱根尖徒手切成2040m厚的薄片或用镊子撕取洋葱鳞茎内表皮一小块。 2浸在溶有0.1%钼酸铵的0.85%盐水溶液中5min（钼酸铵的作用是催化剂）。 3浸在联苯胺溶液内2min至切片出现蓝色。 4在0.85%盐水溶液中洗1min 。 5将薄片置于载玻片上展开，盖上盖玻片，显微镜检查。 【作 业】 1简述PAS反应及联苯胺反应的原理。 2绘图示细胞中多糖及过氧化物酶
12、的分布。 实验三、细胞融合（一）原理 细胞融合（cell fusion）是在自然条件下或利用人工法 (生物的、物理的、化学的)，使两个或两个以上的细胞合并成一个具有双核或多核细胞的过程，又称细胞杂交（cell hybridization）。人工诱导细胞融合始于20世纪50年代，并迅速成为一门新兴技术。不仅同种细胞可以融合，种间远缘细胞也能融合，甚至于动植细胞之间也能融合。因此，细胞融合技术目前广泛应用于细胞生物学、遗传学和医学研究等各个领域。 诱导细胞融合的方法有三种：生物方法（病毒）、化学方法（聚乙二醇PEG）、物理方法（电激或激光）。某些病毒如：仙台病毒、副流感病毒和新城鸡瘟病毒的被膜中有
13、融合蛋白（fusion protein），可介导病毒同宿主细胞融合，也可介导细胞与细胞的融合。紫外线灭活此类病毒后可用于诱导细胞融合。化学和物理方法可引起细胞膜上膜脂分子结构的改变和重排。去掉作用因素之后，质膜恢复原有的有序结构，在恢复过程中便可诱导相接触的细胞发生融合。 聚乙二醇(polyethyleneglycol，PEG)法是目前最常用的细胞融合方法。此法的优点操作简单，融合效果稳定。PEG诱导融合的机制尚不完全清楚。一般认为PEG（化学结构为HOH 2C (CH20CH2)nCH2OH）含有非常丰富的羟基，亲水性非常好，能引起细胞膜上脂质分子的酯键与极性基团的重排，使两细胞接触点处脂类
14、分子发生疏散和重组，从而使细胞发生融合。相对分子质量在200-6000的PEG 均可用作细胞融合剂。(二)材料 1仪器: 光学显微镜,离心机,恒温水浴锅。 2材料 新鲜鸡红细胞,无菌注射器,6号针头,刻度离心管,试管,载玻片,盖玻片。 3试剂 PEG4000,Hanks液,甲基蓝染液,75%乙醇 D-hanks液是一种平衡盐溶液 主要用于洗涤细胞和组织的 也是合成培养基的基础液。如果含有钙镁离子的话 当用消化液消化细胞时 钙镁离子会破坏消化液的活力 影响消化作用（三）方法 1. 取新鲜鸡血以0.85%生理盐水制成5-10%的悬液 2. 称取 0.5克 PEG4000(MW=4,000)放入试管
15、内,在酒精灯上融化之,迅速加入0.5ml 37 预热的Hanks液，混匀制成50%的PEG溶液.放入 37 水浴中待用。 3. 取上述5-10%的鸡红细胞悬液1ml放入离心管中,再加入5ml Hanks液混匀,室温1,000rpm离心5分钟,小心弃去上清液，用指弹法将细胞团块弹散。 4. 取上述50%PEG溶液0.5ml,在1分钟内滴加到鸡红细胞悬液,边加边轻轻摇动混匀。待PEG全部加入后静置1分钟左右。此全部过程都要求在 37 水浴内进行。 5. 缓慢滴加9ml Hanks液以终止PEG的作用,在 37 水浴内静置5分钟。 6. 离心弃上清后,取一滴融合后的细胞悬液滴片,加一滴甲基蓝染液染色
16、，加盖玻片后镜检。 7. 在高倍镜下计数200个细胞（包括融合细胞与非融合细胞），计算细胞融合率。 （四）结果 在高倍镜下可以看到两个或两个以上鸡红细胞融合在一起，形成一个异核体。融合细胞体积增大，细胞内可见2个或2个以上细胞核。要注意辨别融合细胞与重叠的鸡红细胞。 细胞融合率：指在显微镜的几个视野内，已发生融合的细胞核总数与该视野内所有细胞(包括已融合的细胞)的细胞核总数之比，通常以百分比表示。融合率（P） (融合细胞核数/细胞核总数)100 【作 业】 1. 绘制高倍镜下所见细胞融合图像；2. 计算细胞融合率。 实验四、细胞膜的通透性【实验目的】了解分子量、脂溶性大小、电解质和非电解质溶液
17、对细胞膜透性的影响。【实验原理】 细胞膜在不断变化的环境中，必须保持自身的稳恒状态，才能生存。细胞膜允许一些物质通透，又能降低甚至阻挡另一些物质的通透，所以细胞膜具有选择通透性。水分子可以自由通过细胞膜，当细胞处于低渗液环境时，水分子大量渗到细胞内，使细胞膨胀，进而破裂，血红蛋白释放到介质中，由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这就是溶血现象。 溶血现象可作为测量物质进入红血细胞速度的一种指标。 红细胞置于乙二醇、丙三醇（甘油）、葡萄糖等摩尔浓度的高渗液中，乙二醇等分子进入红血细胞，使细胞内的渗透性活性分子的浓度大为增加，继而导致水的摄入，使细胞膨胀，细胞膜破裂，发生溶血。溶血现象
18、发生的快慢与进入细胞的物质的分子量大小有关。分子量大的进入细胞慢，发生溶血所需时间也长。 非极性化合物易溶于脂溶剂，但在水中溶解度甚小。碳链越长，脂溶性越大。一种化合物在脂溶剂中的溶解度与其在水中溶解度之比，叫分配系数。 各种非电解质溶液，只要单位面积中所含的分子数相同，就具有相同的渗透压。电解质溶液，如氯化钠与葡萄糖分子数相等时，氯化钠产生的渗透压要大的多。具有相同渗透压的某非电解溶液与某电解质溶液浓度之比，叫等渗系数。用来表示。 = 葡萄糖的等渗摩尔浓度/ 氯化钠的等渗摩尔浓度 发生溶血者为低渗液，所以把发生溶血的前一管溶液的浓度近似视为红细胞等渗。 【实验仪器、材料和试剂】 （一）仪器、
19、用具 小烧杯、试管、试管架、刻度吸管、注射器、秒表 （二）材料 含适量肝素的兔血或鸡血 （三）试剂 1M乙二醇水溶液、1M丙三醇水溶液、1M葡萄糖水溶液、3M甲醇、3M乙醇、3M丙 醇、M/8、M/9、M/10、M/12、M/14葡萄糖溶液、M/12、M/13、M/14、M/16、M/18氯化钠溶液 【方法与步骤】 （一）分子量大小对膜通透性的影响 1在编号的三支试管中，分别用吸管吸入2ml 1M乙二醇，1M丙三醇，1M葡萄糖高渗液。 2先后分别用注射器滴加两滴血液，用手指按住管口，倒置一次。 3观察溶血时间，最长延至10min。 4将实验结果列入如下所示的表格中。溶液 分子量 溶血时间 1M
20、乙二醇 62 1M丙三醇 92 1M葡萄糖 180 （二）脂溶性大小对细胞膜透性的影响 1编号的三支试管分别加入2ml 3M的甲醇、乙醇、丙醇溶液。 2分别先后加入两滴血液，按住管口倒置一次。 3观察溶血时间。4将实验结果记入如下所示的表格中。 溶液 分子量 分配系数 溶血时间 3M甲醇 32.04 0.0097 3M乙醇 46.07 0.0357 3M丙醇 58.0 0.156 （三）电解质和非电解质溶液对细胞膜透性的影响 1将试管编号，注明溶质名称及摩尔浓度。 2按编号分别加入不同浓度的葡萄糖及氯化钠溶液 2ml。 3每管各加入两滴血液，按住管口，倒置一次。 4室温放置15min ，观察发
21、生溶血的浓度，确定等渗浓度。5按下表记录实验结果。 溶液摩尔浓度 M/8 M/9 M/10M/12M/13M/14M/16 M/18 葡萄糖 氯化钠 6计算等渗摩尔系数。实验五、植物细胞骨架的光学显微镜观察 【实 验 目 的】 了解细胞骨架的结构特征及其制备技术。 【实 验 原 理】 细胞骨架（cytoskeleton）是由蛋白质丝组成的复杂网状结构，根据其组成成分和形态结构可分为微管、微丝和中间纤维。它们对细胞形态的维持，细胞的生长、运动、分裂、分化，物质运输，能量转换，信息传递，基因表达的起到重要作用。当用适当浓度的TritonX-100处理细胞时，可将细胞质膜中和细胞质中的蛋白质和全部脂
22、质被溶解抽提，但细胞骨架系统的蛋白质不受破坏而被保存，经用戊二醛固定，考马斯亮蓝R250染色后，可在光学显微镜下观察到由微丝组成的微丝束为网状结构（图），这就是细胞骨架。 自摄图片： 洋葱细胞骨架 【实验仪器、材料和试剂】 （一）仪器 普通光学显微镜、50ml烧杯、玻璃滴管、容量瓶、试剂瓶、载玻片、盖玻片、镊子、小剪刀、吸水纸、擦镜纸 （二）材料 洋葱鳞茎 （三）试剂 lM-缓冲液：50mM 咪唑、50mM KCl、0.5mM MgCl2、lmM EGTA乙二醇四乙酸、0.lmM EDTA、lmM琉基乙醇或DTT（二硫苏糖醇） 26mM （pH6.8）磷酸缓冲液（用NaHCO3调pH ） 31
23、%TritonX-100，用M-缓冲液配制 40.2%考马斯亮蓝R250，其溶剂为：甲醇46.5ml、冰醋酸7ml、蒸馏水46.5ml 53%戊二醛，用2液 配650%、70%、95%乙醇 7叔丁醇 8正丁醇 9二甲苯 10中性树胶 咪唑：稳定PH值，缓冲作用。KCL：提供离子，对骨架起聚合作用。MgCL2:提供离子，对骨架起聚合作用。EGTA：螯合Ca离子 Ca离子对聚合不利。EDTA：螯合Ca离子 Ca离子对聚合不利。巯基乙醇：起还原作用，稳定骨架结构【方法与步骤】 l. 撕取洋葱鳞茎内表皮 （约lcm2大小若干片）置于装有pH6.8磷酸缓冲液的50ml烧杯中，使其下沉。 2. 吸去磷酸缓
24、冲液，用l%TritonX-100处理2030分钟。 3. 吸去Triton-100，用M-缓冲液洗三次，每次10分钟。 4. 3%戊二醛固定0.51小时。 5. pH6.8磷酸缓冲液洗三次，每次10分钟。 6. 0.2%考马斯亮蓝R250染色2030分钟。 7. 用蒸馏水洗l2次，细胞置于载玻片上，加盖玻片，于普通光学显微镜下观察。 8. 如观察效果好，可制作成永久切片： 在有样品的50ml烧杯中，顺序通过如下药物：50%乙醇、70%乙醇、95%乙醇、1/2 V 95%乙醇 + 1/2 V叔丁醇、叔丁醇（每级510分钟）；或正丁醇正丁醇二甲苯二甲苯（每级510分钟），然后捞取样品，平展于载玻
25、片上，经镜检，效果好的，可加一滴中性树胶，盖上盖玻片，即成永久片。 【作 业】 1. 绘出植物细胞骨架微丝结构图。 2. 分析和论述在光学显微镜下观察到的细胞骨架的形态特征。 实验六、细胞核与线粒体的分级分离 【实 验 目 的】了解差速离心法分离细胞器的原理，以及练习使用差速离心法分离哺乳动物的细胞核与线粒体。 【实 验 原 理】 用组织匀浆的方法在悬浮介质中进行差速离心制备线粒体。在一给定的离心场中，球形颗粒的沉降速度取决于它的密度、半径和悬浮介质的黏度。在一均匀悬浮介质中离心一段时间后，组织匀浆中的各种细胞器及其它内含物由于沉降速度不同而停留在高低不同的位置。依次增加离心力和离心时间，就能
26、够使这些颗粒按其大小、轻重分批沉降在离心管底部，从而分批收集。细胞器中最先沉淀的是细胞核，其次是线粒体，其它更轻的细胞器和大分子可依次再分离。 悬浮介质通常用缓冲的蔗糖溶液，它属于等渗溶液，比较接近细胞质的分散相，在一定程度上能保持细胞器结构和酶的活性，有利于分离，此外，该方法中采用的氯化钙有稳定核膜的作用。整个操作应注意使样品保持4，避免酶失活。线粒体的鉴定用詹纳斯绿B（Janus green B）活性染色法。 【实验仪器、材料和试剂】 （一）仪器、用具 高速冷冻离心机、显微镜、天平、玻璃匀浆器、解剖刀剪、烧杯、量筒、离心管、高速离心管、玻璃漏斗、尼龙布、载玻片、盖玻片 （二）材料 大白鼠
27、（三）试剂 10.9%生理盐水， 20.25 M蔗糖3 mM氯化钙匀浆液， 31%甲苯胺蓝溶液， 40.02%詹纳斯绿B染液 【方法与步骤】 一、细胞核的分离提取 1实验前大鼠空腹12小时，击头处死，迅速剖腹取肝，在冰浴的小烧杯中剪成小块（去除结缔组织），尽快置于冰冷的生理盐水中，反复洗涤，尽量除去血液，用滤纸吸去表面的液体。 2剪碎的肝组织移入玻璃匀浆管中，加入适量匀浆液，进行匀浆（注意保持冰浴状态），快速匀浆2030次后，用蔗糖氯化钙预湿的尼龙布过滤于离心管中。 3将装有滤液的离心管以2000rpm/min，4离心10min，取上清液，移入高速离心管中，并保存于冰浴中，待分离线粒体用。 4
28、收集的沉淀以少量蔗糖氯化钙溶液重新悬浮，以3000rpm/min离心10min，取上清液，移入高速离心管中，并保存于冰浴中，待分离线粒体用。 5. 收集的沉淀以少量蔗糖氯化钙溶液重新悬浮，以4000rpm/min离心15min，弃上清。5洗涤过的沉淀以少量溶液重新悬浮，制备成细胞核悬液，滴一滴于干净的载玻片上，作涂片，自然干燥。 6涂片用1%甲苯胺蓝染色，在光镜下观察。二、差速离心分离提取线粒体 1将装有上清液的高速离心管配平衡后，5000rpm/min离心10min，弃上清，收集沉淀。 2加入0.25 M蔗糖3 mM氯化钙溶液1ml，用吸管吹打成悬液，10000rpm/min，4离心10mi
29、n，将上清液吸入另一试管中，沉淀加入0.1ml 蔗糖氯化钙溶液制成悬液。 3取上清液和沉淀物悬液，分别滴一滴于干净载玻片上，各滴一滴0.02%詹纳斯绿B染液，染色20min，镜检（为利于线粒体的有氧呼吸，不必加盖玻片）。可见有活性的线粒体进行活跃的运动，并且着色成蓝绿色。 【注 意 事 项】 1动物材料实验前可空腹过夜，以降低肝脏组织中的脂肪含量，便于实验操作。 2实验中必须注意保持细胞器的完整性，避免过于剧烈的机械操作。尤其是线粒体在保持了呼吸氧化功能时才能经活性染色法检测。 3由于核沉淀中可能依然存在大量因为粘连或缠绕而沉淀的线粒体，所以可酌情将步骤4中洗涤核沉淀后离心得到的上清，与步骤3
30、的上清合并加以利用。 4由于线粒体进行活性染色法的检测，所以样品制备好后应尽快染色，不要放置过久。 【作 业】 光镜或油镜下观察制备的细胞核与线粒体样本。实验七、液泡系和线粒体的活体染色 【实 验 目 的】 掌握动、植物细胞活体染色的原理和有关的技术。【实 验 原 理】 活体染色是指对生活有机体的细胞或组织能着色，但又无毒害的一种染色方法。目的在于显示生活细胞内的某些天然结构，而不影响细胞的生命活动和产生任何物理、化学变化以致引起细胞的死亡。活体染色技术可用来研究生活状态下的细胞结构和生理、病理状态。 液泡是细胞内浓缩产物的主要场所，有十分重要的功能。中性红（neutral red）是液泡的特殊染色剂，只将液泡染成红色。在细胞处于生活状态时，细胞质和细胞核不被中性红染色。 线粒体是细胞内的一个重要细胞器，是细胞进行呼吸作用的场所。詹纳斯绿B（Janus green B）对线粒体具有专一性的染色，是毒性最小的碱性染料。Janus green B染色是由于线粒体中的细胞色素氧化酶系的作用，使染料始终保持氧化状态，呈蓝绿色，而周围的细胞质被还原成无色的色基（图）。 图洋葱鳞茎表皮细胞线粒体 【实验仪器、材料和试剂】 （一）仪器：显微镜、解剖
