1、T100中文操作指引T100 Thermal Cycler中文操作手册BIOHAD手册内容1工作环境2T100 Thermal Cycler 的介绍3T100 Thermal Cycler 创建、编辑和储存程序4运行程序5管理文件夹和反应程序文件6工具7仪器日常维护1工作环境1.1工作温度15-31 r1.2工作和存储湿度20-80%1.3工作电源100 - 240 VAC ( 10%), 50 - 60HZ.1.4PCR许可证有2 T100 Thermal Cycler 的介绍2.1 T100 Thermal Cycler 各部分简介LED指示灯触屏USE 淒口T100 Thermal Cy
2、cler 前面T100 Thermal Cycler具有96孔的反应模块，可以使用标准 96孔板、联管或单管等多种耗材。仪器支持的样品反应体积为 1-100ul,推荐的反应体积为15-50ul。仪器主要包括以下几个部分：加热模块：放置装有样品的标准 96孔板、联管或单管热盖：加热样品管的顶部，防止样品蒸发和冷凝触屏：用于反应程序的编辑、修改和运行，实时显示运行程序USB接口 ：外接USB，导出数据LED指示灯：仪器正常运行时，指示灯亮散热口：提供通风，用于仪器的快速升温和降温2.2触屏T1OO，J Thermal CycEerHow Proloeol 丹MK：* IteK窗M*MYTIQOF3
3、 01.2011 10 50仪器开机后，显示触屏界面，界面提供仪器的名字，日期和时间，触屏上的 四个按键分别代表的意义如下：New Protocol：创建一个新的反应程序Saved Protocols查看、编辑、运行储存的程序Incubate：可长时间运行一个恒定的温度，与水浴锅功能相似Tools：设置、仪器自检、仪器信息、软件升级2.3放置样品向上打开仪器热盖，将样品管放到相应的位置，合上热盖。热盖的主要功 能是在程序运行时，加热样品管的顶部，防止样品蒸发和冷凝。放置样品管时，要确保管子与反应模块完全接触，且反应模块必须完全干净。3 T100 Thermal Cycler创建、编辑和储存程序
4、3.1创建新的程序，点击触屏界面的“ New Protocol”按钮，进入编辑界面。3.2也可选择编辑储存的程序，点击触屏界面的“ Saved Protocols”按钮，选择一个程序，点击“ Edite”，进入编辑界面。jSSaved Protocols,点击EditPCR反应的模扳3.4按照需要的实验程序，首先设置反应体积，在 Volume中输入体积数，可输 入范围为1-100ul,推荐反应体积为15-50ul。其次设置热盖的温度，在 Lid中输 入温度，可输入范围为40-110C，推荐温度为105C。最后，点击反应程序的每一步时，显示为绿色，分别设置该步反应的温度和时间。点击温度按钮，如9
5、5 C, 出现数字键盘，输入需要的温度，点击“ 0K”，确认。同样的操作编辑时间。使用数字键盘编辑温度“ GOTO ”可以设置反应的循环数，如“ 34X”，即共35个循环，也可设置循环 的起始反应步骤，如“ Step2 ”，即循环反应从第2步开始至第4步结束，箭头指 示的过程。3.5插入新的反应步骤，点击一个步骤，显示为绿色，点击“ Insert”将在该步骤后面插入新的反应步骤。在“ Insert Step ”界面选择需要插入反应步骤的类型，“ Temperature ”即可插入温度反应 ,“ Gradient ”即可插入温度梯度反应“GOTO”即可插入PCR循环反应。点击“ Delete ”
6、 ,即可删除选择的步骤ffiStepI后面插入新的反应步骤3.6添加或删除温度梯度。选择一个反应步骤，点击“ Options ” ,进入步骤优化窗口。步骤优化窗口选择“ Gradie nt ”，在“ Back row ”输入温度梯度的最高温度，在“ Front row输入温度梯度的最低温度，右边会显示从 A到H每一行的温度值。注意：该仪器温度梯度跨度范围为1-25 C。步骤优化窗口显示温度梯度点击“0K”，返回程序主界面，最低和最高温度的温度梯度显示在反应步骤中，可以点击温度，直接修改温度梯度，不用再进入“ Option显示的温度梯度3.7温度的递增、时间的延伸和改变升温速率。选择一个反应步骤
7、，点击“ Opti ons ” ,进入步骤优化窗口。每一个实验步骤都包括“ In creme nt ”、“ Exte nd ”、“ Ramp Rate ” , “ In creme nt ”输入 X，即每个循环后温度增加 XC ,“ Extend ”输入Y，即每个循环后时间延长 Y秒，“Ramp Rate”输入Z,即 升温速率为Z。点击“OK”，确认。Step4设置了温度递增，每循环增加193.8改变“ GOTO ”参数。“GOTO Step ”表示多个步骤的重复循环反应。选择 一个“ GOTO Step ”，点击“ Step”按钮，进入数字键盘，修改数字为 X，即可 决定循环反应的起始步骤为
8、 X，如“ Step2 ”，即循环反应从第2步开始至第4步 结束，箭头指示的过程。点击“ X”按钮，进入数字键盘，修改数字为 丫，即表 示再重复丫个循环，总循环数为丫+1,女口“ 34X ”，即共35个循环。反应程序中GOTO Step2和34个循环3.9点击“ Run”，无需储存，直接运行编辑好的反应程序。也可点击“ Save” 按钮,进入储存界面，在Folder后输入或选择储存程序的文件，在 Name后输入 反应程序命称，点击“ Save ”，返回程序主界面。然后点击 “Run ”，运行程序。New Proto col 悒朋命名为STDGRADM应程序储存在EWK文件中4运行程序4.1开始
9、运行程序，有如下方法：创建新的程序，点击“ Run ”从“ Saved Protocols ”中选择程序，点击“ Run ”从“Saved Protocols ”中选择程序，点击“ Edite” ,修改后，点击“ Run”前面已经详细介绍了创建和编辑新的反应程序，下面介绍从“ SavedProtocols ”中选择程序，运行。首先从开机界面中，点击“ Saved Protocols ”, 进入选择界面。其次从“ Folders ”文件夹中选择文件，如“ MAIN ”。再次选择“Files”文件中的反应程序，如“ ISCRIPT”，“Preview”中会显示所选程序的 详细设置，包括每一步的反应
10、温度和时间等信息。-Saved Protocol中选择VSCRIRT程序选择好程序后，点击“ Run ”，出现对话框，询问是否修改反应体积，点击OK”直接运行程序，或者点击“ Volume ”修改体积后，再运行程序。运行确认对话框程序运行后，运行进程可以通过两种状态显示，分别是“ Status ”和“ Clock ”。“Status ”状态显示整个实验程序的每个步骤，以及正在进行的步骤。 “ Clock ”状态显示整个实验程序的剩余时间。点击“ View Status ”和“ View Clock”，可在二者之间进行自由切换4.2暂停和恢复程序运行一个PCR反应程序允许暂停的，暂停时，加热模块
11、会维持在当前实验步骤的反应温度，热盖也维持原本的温度，直到反应程序恢复继续运行。当正在升温或降温时，程序暂停，仪器会继续升温或降温，直到到达设定的温度，才会保持 不变。在“Status ”状态时，点击“Pause ”按钮，反应程序暂停。点击“Resume 按钮，反应程序继续运行。反应程序在Step 4时暂停4.3跳过反应程序中的某一步，可以缩短反应时间。在在“ Status”状态时，点 击“ Skip Step ”按钮，即可跳过当前步骤，多次点击“ Skip Step ”按钮，即可 跳过多个步骤。4.4取消反应程序。当程序取消时，加热模块立刻停止温度加热。不要立即关闭 仪器电源，仪器需要时间使
12、加热模块降温。在在“Status ”状态时，点击“Cancel ” 按钮,选择“ Yes ”确认。4.5孵育功能。开机主界面，点击“ Incubate ”按钮，进入孵育功能界面。编辑“ Block temperature ”，输入温度值，即设置孵育温度。编辑“ Hold time”，输 入时间，即设置孵育时间，也可设为无穷时间。编辑“ Lid temperature ”，输 入温度值，推荐105 C保持热该温度，防止样品蒸发或冷凝。点击“ Run ”，运 行孵育程序。结束孵育功能时，点击“ Can cel”。孵育功能界面5管理文件夹和反应程序文件开机进入主界面，点击“Saved Protoco
13、ls ”，进入选择界面，包括以下文件夹:T100的 Saved Protocols 界面MAIN folder :仪器自带的一些标准反应程序，可以编辑、删除和重命名RECENT folder:储存的是最近使用过的20个程序CUSTOM folder :可以设置为实验室成员的个人文件夹USB folder :外接SUB里的反应程序5.1 新建文件夹，从“ Saved Protocols ”选择界面，点击“ Folder Options ”,选择“ New”，输入8个字节的名称，点击“ OK”，完成。新建文件夹界而5.2复制文件夹或文件，从“ Saved Protocols ”选择界面，选择文件夹
14、或文件， 点击“ Folder Options ”或“ File Option ”，选择“ Copy ”，最后选择文件或文件 夹新的储存位置，点击“ Save”，即可完成。5.3删除文件夹或文件，从“ Saved Protocols ”选择界面，选择文件夹或文件， 点击“ Folder Options ”或“ File Option ”，选择“ Delete ”，即可完成完整的文 件夹或单个文件的删除。5.4重命名文件夹或文件，从“ Saved Protocols ”选择界面，选择文件夹或文 件，点击“ Folder Optio ns ”或“ File Optio n ”，选择“ Re nam
15、e ”，输入新的名 称，点击“ OK”，确认。6工具开机进入主界面，点击“ Tools”，进入选择界面，包括以下文件夹:工具界面Sett in gs:仪器的系统设置Self-Test:仪器自检设置，检测各部件的功能Logs :观察反应运行程序界面，可以被拷贝到 USBAbout :观察软件的版本和仪器的机身号Update Firmware :升级仪器的版本Service Login :可以从Bio-Rad厂家获得帮助服务6.1仪器的系统设置，从“ Tools”界面，选择“ Settings ”，进入界面，会看到 仪器的系统设置，包括“ Cycler name”设置仪器的名称，“Date”设置日
16、期年 月曰等信息，“Time”设置详细时间信息，“Display brightness ”设置显示屏亮 度，“sample volume ”设置默认的样反应体积，“Standby delay ”设置一段时间 后，为了节约电资源，仪器会进入待机状态， “ End of run beep ”设置运行结束 后，仪器会发出声音，提醒用户。系统设置界而6.2仪器自检功能，从“ Tools ”界面，选择“ Self-Test ”，点击“ Start ”，仪器 运行自检程序，检测仪器各部件的性能。仪器自检界面Start”，6.3升级仪器版本，从“Tools”界面，选择“Update Firmware ”，点
17、击 仪器运行升级程序，可升级到最新版本。仪器升级，即可6.4观察软件的版本和仪器的机身号，从“ Tools”界面，选择“ About看到仪器版本，机身号和仪器运行的总时间。About界面7仪器日常维护本机适用于实验室任何部位使用，应远离易燃易爆物品，远离水源和离心机等，避免将液体渗入仪器内部，保持仪器工作环境的稳定性由于本机采用半导体双向控温技术，由机器内风机散热，故不得堵塞仪器两 侧及底部的通风口，并应远离热源，保持良好的通风。正确的使用环境温度 4 C 32 C,相对湿度20%80%，尽量避免使用 4C 过夜，以免影响仪器的寿命。本机采用开关电源，适用电压范围宽，交流电压 100240V之间均可正常工作，频率为 50/60Hz，电源线为三线制，必须有可靠接地。 日常使用应避免液体溅入加热模块，如果不慎渐入液体时，应用棉签蘸取无 水乙醇，擦拭仪器模块3-5便，自然晾干，即可。
