1、食品生物技术基因工程复习题复习题一、 名词解释基因重组 (gene recombination)：是指DNA片段在细胞内、细胞间，甚至在不同物种之间进行交换，交换后的片段仍然具有复制和表达的功能。克 隆：来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合。限制性内切酶：限制酶是在生物体(主要是微生物)内的一种酶，能将外来的DNA切断，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性内切酶。黏性末端：被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。质粒：是染色体外能够进行自主复制的遗传单位，包括真核生物的细胞器和细菌细胞中核区外的DNA分子。基 因：是一
2、切生物体内储存遗传信息的，有自我复制能力的遗传功能单位。CDNA ：以RNA为模板，在逆转录酶的作用下，生成的RNA-DNA中的DNA为CDNA。CCCDNA：绝大多数的天然DNA质粒具有共价、封闭、环状的分子结构，即CCCDNA。 生物技术：是在细胞水平上，特别是在分子水平上对生物体遗传性实现巨大的接近定向改造的一套内容繁多和复杂的技术。DNA克隆（分子克隆、基因克隆、重组DNA）：应用酶学方法，在体外将外源性遗传性物质与载体结合成重组DNA分子，继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子细胞，再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子的过程。回文结构：在切割部位，一条链正向读的碱基
3、顺序与另一条链反向读的顺序完全一致。同尾酶：来源各异，识别的靶子序列也各不相同，但都产生出相同的粘性末端。目的基因：是人们所需要转移或改造的基因。序列分析：是指对某一段分子或片段的核苷酸排列顺序测定，测得组成分子的、 、的排列顺序基因转移（transgenosis）：是借助于物理、化学或生物的手段将外源基因导入受体细胞，并检查其在该细胞内表达情况的一种技术，是细胞工程中一项重要而应用广泛的技术。 报告基因：系指其编码产物能够被快速地测定，常用来判断外源基因是否已经成功地导入寄主细胞（器官或组织）并检测其表达活性的一类特殊用途的基因选择标记基因：简称选择基因，是指可使被转化的细胞获得其亲本细胞所
4、不具备的新的遗传特性，从而使得人们能够使用特定的选择培养基，将转化的新细胞从亲本细胞群体中选择出来的一类特殊的基因基因探针：是一段与目的基因互补的核酸序列，可以是，也可以是，用它与待测样品或进行核酸分子杂交，可以判断两者的同源程度原位杂交：将标记的核酸探针与固定在细胞或组织中的核酸进行杂交，Dot印迹杂交：将待测或的细胞裂解物变性后直接点在硝酸纤维素膜上，不需要限制性酶进行酶切，既可与探针进行杂交反应基因的转移技术：就是将外源目的基因或DNA片段引人受体生物或细胞并检查其在转化细胞中表达结果的一种技术。cDNA文库：是指某生物某一发育时期所转录形成的cDNA片段与某种载体连接而成的克隆的集合。
5、RT-PCR:先用逆转录酶作用于mRNA，以寡聚dT为引物合成cDNA第一链，然后用已知一对引物，扩增嵌合分子，这种方法称为逆转录PCR二、填空题1.1972年斯坦福大学的_ Berg _等人完成了首次体外重组实验，并首次用限制性内切酶切割SV40的DNA片断与噬菌体的DNA片断，经过连接，组成重组DNA分子，他是第一个实现DNA重组的人。 2.1973年斯坦福大学的 Cohen 将伤寒沙门氏抗链霉素质粒与含有四环素抗性基因的大肠杆菌质粒pSC101连接成重组质粒，具有双重抗药性。标志着基因工程的诞生。3.基因工程的意义 大规模的生产生物分子， 设计构建新物种， 搜寻、分离和鉴定生物体尤其是人
6、体内的遗传信息。4.基因工程的特征 跨物种性 ， 无性扩增 。5.限制性内切酶分为 I ， II _， III _。6.我国青年科学家陈炬成功地把人的干扰素基因嫁接到烟草的DNA分子上，使烟草获得了抗病毒的能力，试分析：烟草有了抗病毒的能力，这表明，烟草体内产生了人的干扰素。这说明人和烟草共用一套遗传密码；蛋白质合成的方法_ 相同 _（填“相同”或“不同”）；也说明了DNA是_遗传物质_。7. 基因工程中的运载体必须具备A 能够在宿主细胞中复制并稳定地保存B 具多个限制酶切点，以便与外源基因连接C 具有某些标记基因，便于进行筛选。8.限制酶是一类专门切割 DNA 的酶，它能特异性识别切割 双
7、链（单、双）DNA。9.限制酶命名采用Smith和A thens提议的方案，第一个字母大写取自来源细菌的属名_；第二、三个字母取自来源细菌的_种名_；第四个字母（如果有）取自来源菌的_株 系。10.自然界的基因转移与重组有_接合作用_，_转化_，_转导_，_转染_ _。11.基因工程的基本步骤_切、接、转、增、检 。12.目的基因的提取方法 鸟枪法 ，_反转录法 ， _根据已知的氨基酸序列合成DNA 。13.聚合酶链反应（PCR）的基本步骤 变性 _，_ 退火_， _延伸。 所用的酶为 TaqDNA聚合酶 ， 酶 耐热的 特性。14.常用的报告基因 基因_， 基因_， 基因_ ， 基因 _ ，
8、 基因和基因_ 。15.DNA序列测定常用方法有末端终止，化学裂解法，DNA测序自动化。16.运载体的作用_将外源基因转移到受体细胞中去_， 利用运载体在受体细胞内，对外源基因进行大量复制_ 。17.目的基因导入受体细胞常用的受体，微生物用 大肠杆菌 ，植物用 拟南芥 _ 18.Maxam-Gilbert化学裂解法中使戊糖脱落，用于嘌呤环的试剂是 硫酸二甲酯 ，而 联氨 可用于肼解嘧啶环。19.基因工程的两个基本特点是：(1)分子水平上的操作_，(2) 细胞水平上的表达_。 20.核酸杂交探针可分为两大类：DNA探针和RNA探针。其中DNA探针又分为基因组DNA探针和cDNA探针。 21.如果
9、用限制性内切核酸酶切割双链DNA产生5突出的黏性末端，则可以用Klenow酶填补的方法3末端标记。如果用限制性内切核酸酶切割DNA产生的是3突出的黏性末端，可以用T4DNA聚合酶进行3末端标记。 22.单链DNA探针的标记可以采用下列方法：(1) 用M13噬菌体载体合成单链DNA探针；(2)从mRNA反转录合成单链cDNA探针；(3)用不对称PCR合成单链DNA探针 。 23.根据Northern杂交的结果可以说明：外源基因是否进行了转录。 24.RNA分子经凝胶电泳后按大小不同分开，然后被转移到一张硝酸纤维素膜(尼龙膜) 上，同一放射DNA探针杂交的技术称Northern印迹。 25.在So
10、uthern印迹技术中，DNA限制性片段经凝胶电泳分离后，被转移到硝酸纤维素膜(或尼龙膜)上，然后与放射性的DNA探针杂交。 26.可用T4DNA聚合酶进行平末端的DNA标记，因为这种酶具有5-3合成酶；和3-5外切核酸酶的活性。 27.根据外源片段提供的遗传表型筛选重组体，必需考虑三种因素：(1)_克隆的是完整的基因；(2)_ 使用的是表达载体； (3) 不含内含子。 28.Northern印迹和Southern印迹有两点根本的区别： (1)_ 印迹的对象不同：Northern是RNA，Southern是DNA (2)_ 电泳条件不同，前者是变性条件，后者是非变性条件29.放射免疫筛选的原理
11、基于以下三点：(1)_ 抗体能够被吸附到固体支持物上；(2)_ 同一个抗原可以同几种抗体结合；(3)_ 抗体能够被标记_30. 番茄在运输和贮藏过程中，由于过早成熟而易腐烂。应用基因工程技术，通过抑制某种促进果实成熟激素的合成能力，可使番茄贮藏时间延长，培育成耐贮藏的番茄新品种，这种转基因番茄已于1993年在美国上市。请回答： （1）促进果实成熟的重要激素是乙烯。 （2）在培育转基因番茄的基因操作中，所用的基因的“剪刀”是限制性内切酶，基因的“针线”是DNA连接酶，基因的“运输工具”是运载体。 （3）与杂交育种、诱变育种相比，通过基因工程来培育新品种的主要优点是目的性强、育种周期短和克服远缘杂
12、交的障碍。31. 科学家通过基因工程培育抗虫棉时，需要从苏云金芽孢杆菌中提取出抗虫基因，“放入”棉的细胞中与棉的DNA结合起来并发挥作用，请回答下列有关问题： （1）从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用的工具是限制性内切酶，此工具主要存在于微生物中，其特点是一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的位点切割。 （2）苏云金芽孢杆菌一个DNA分子上有许多基因，获得抗虫基因常采用的方法是“鸟枪法”。具体做法是：用限制性内切酶将苏云金芽孢杆菌的DNA切成许多片段，然后将这些片段分别与运载体结合，再通过运载体转入不同的受体细胞，让它们在各个受体细胞中大量复制，从中找出含有目的基因的细胞，再用一定
13、的方法把带有目的基因的DNA片断分离出来。 （3）进行基因操作一般要经过的四个步骤是：提取目的基因、目的基因与载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达。32、在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答：A过程需要的酶有(同一种)限制酶、DNA连接酶(缺一不可)。要把重组质粒导入土壤农杆菌，首先必须用Ca2+处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为感受态；然后将将重组质粒和感受态细胞在缓冲液中混合培养完成转化过程。含有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉花叶片组织后，将离体棉
14、花叶片组织培养成再生植株要经过C 脱分化和E 再分化。如要确保再生植株中含有抗虫基因，可在C过程的培养基中加入卡那霉素。如想利用分子杂交技术检测再生植株中的抗虫基因是否转录，应该用放射性同位素标记的目的基因作为探针与mRNA三、选择题1、下列目的基因的获取过程中不宜用“鸟枪法” 获取的是 （ ） A胰岛素基因 B.抗虫基因 C抗病毒基因 D.固氮基因2、英国科学家维尔莫特首次用羊的体细胞(乳腺细胞)成功地培育出一只小母羊，取名“多利”，这一方法被称之为“克隆”，以下四项中与此方法在本质上最相近的是（ ） A将兔的早期胚胎分割后，分别植入两只母兔子宫内，并最终发育成两只一样的兔B将人的抗病毒基因
15、嫁接到烟草的DNA分子上，培育出具有抗病能力的烟草新品种C将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞D将人的精子与卵细胞在体外受精，受精卵在试管内发育3、用大肠杆菌生产胰岛素需应用的生物工程不包括（ ）A.基因工程 B.细胞工程C.发酵工程 D.酶工程4、细菌的某个基因发生突变，导致该基因编码的蛋白质肽链中一个氨基酸替换成了另一个氨基酸，该突变发生在基因的（ ）A. 外显子 B. 编码区C. RNA聚合酶结合的位点 D. 非编码区5、以下有关基因工程的叙述，正确的是（ ）A. 基因工程是细胞水平上的生物工程B. 基因工程的产物对人类都是有益的C. 基因工程产生的变异属于人工诱变D. 基因
16、工程育种的优点之一是目的性强6、为了培育节水高产品种，科学家将大麦中与抗旱节水有关的基因导入小麦，得到转基因小麦，其水分利用率提高了20%。这项技术的遗传学原理是（ ）A基因重组 B基因突变 C基因复制 D基因分离7、利用苏云金芽孢杆菌的抗虫基因培育的抗虫棉是否成功，最好检测（ ）A是否有抗生素产生 B是否有目的基因表达C是否有抗虫的性状出现 D是否能分离到目的基因8、在人类染色体DNA不表达的碱基对中，有一部分是串联重复的短序列，它们在个体之间有显著的差异性，这种短序列可用于（ ）A生产基因工程药物 B侦查罪犯C遗传病的产前诊断 D基因治疗9.下列DAN片段中具有回文结构的是（ ）AGCAG
17、TCGACTTG. BTAGTTCGCAATCCCGATGGTACTTC DACAATTCGCCTA10. 伊拉克战争加剧了海洋石油污染。基因工程创造的“超级细菌”能提高降解石油的效率。这是因为（ ） A.多种基因目的的表达 B.不消耗O2 C.提供动物幼体的食物 D.以石油成分作为生长因子 11. 下列关于生物工程中，人们对所需的对象进行筛选的叙述不正确的是（ ） A.在基因工程中可依标记基因对工程细菌进行筛选 B.在基因工程中利用病菌侵染对所育植物品种的抗病性进行筛选 C.微生物培养中利用无氮培养基可筛选出共生固氮菌 D.在细胞工程中利用双亲细胞的特性可对杂种细胞进行筛选 12. 2000
18、年6月26日，6国科学家向全世界宣布：“人类基因组草图”的绘制工作已经全部完成。“人类基因组草图”是指（ ） A.人类所有基因控制蛋白质合成的机制 B.人类所有基因的功能 C.人类所有基因的数目 D.人类DNA中全部的遗传信息 13. 现在人们已经实现了分子水平上遗传物质的人工重组，下列实例中属于分子水平上人工重组基因的是（ ） A.利用杂交技术培育出新的高品质水稻品种 B.科学工作者将猪的胰岛素转变成人的胰岛素 C.能产生抗体的小鼠B淋巴细胞和骨髓细胞的融合 D.将人的抗胰蛋白酶基因导入到羊的DNA分子中 14. 在基因工程中用来完成基因的剪切和拼接的工具是( ) A限制酶和连接酶 B限制酶
19、和水解酶 C限制酶和运载体 D连接酶和运载体 15. 1993年，我国科学工作者培育成的抗棉铃虫的最新转基因抗虫棉，其抗虫基因来源于（ ） A普通棉花的基因突变 B棉铃虫变异形成的致死基因 C在棉铃虫体内寄生的线虫基因 D苏云金芽孢杆菌体内的抗虫基因 16. 能有效地打破物种的界限、定向地改造生物的遗传性状，培育新的农作物优良品种的生物技术是（ ） A. 杂交育种技术 B诱变育种技术 C基因工程技术 D组织培养技术 17. 下列关于基因工程的叙述正确的是（ ） A所有的限制酶都能识别同一种特定的核苷酸序列 B基因工程技术是唯一能冲破远源杂交不亲和的障碍培育生物新品种的方法 C质粒是基因工程中唯
20、一用作运载目的基因的工具 D对目的基因进行大量复制的过程称为分子“克隆” 18. “科技奥运”是2008年北京奥运会的三大理念之一，而基因兴奋剂的检测是其中一个重要课题。一些运动员和教练员将能提高身体素质的基因植入体内，借助基因疗法进行不公平的竞赛，这就是基因的兴奋剂。比如说EPO(促红细胞生成素)是一种传统的兴奋剂，这种兴奋剂可增加血液中红细胞含量，从而提高运动成绩，许多运动员因冒险服用而遭禁赛。若借助于基因治疗手段，将这种兴奋剂的基因注入人体，在身体里形成一个局部的EPO制造基地，那么传统的尿样和血样检测都无法查出。下列有关基因兴奋剂的说法，错误的是 A运动员注入的能改善运动员各种运动能力
21、和耐力的基因称为基因兴奋剂 BEPO(促红细胞生成素)可增加血液中红细胞含量，提高运输氧气的能力 C通过DNA检测，可以查出运动员体内是否加入了基因兴奋剂 D基因兴奋剂引起的变异属于可遗传变异，产生的物质对人体无副作用 19.我国科学家在利用基因工程培育抗虫棉的过程中，经提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞这三个步骤后，在全部受体细胞中，能够摄入抗虫棉基因的受体细胞占（ ）A.全部 B.大部分 C.一半 D.很少20.质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点是：能自主复制不能自主复制结构很小蛋白质环状RNA环状DNA能“友好”地“借居”（ ）A. B. C. D. 21
22、.下列含有内含子的生物是（ ）A.大肠杆菌 B. 青霉C. 放线菌D.蓝藻22.基因工程的设计施工是在什么水平上进行的（ ）A.细胞 B.细胞器 C.分子 D.原子23.细菌抗药性基因存在于（ ）A.核DNA B.质粒 CRNA D.小的直线型DNA24. 下列关于转基因植物的叙述，正确的是()A转入到油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传入环境中B转抗虫基因的植物，不会导致昆虫群体抗性基因频率增加C动物的生长激素基因转入植物后不能表达D如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题25. 下列叙述符合基因工程概念的是()AB淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因B
23、将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株C用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株D自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上26. 下列关于基因工程应用的叙述，正确的是()A基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B基因诊断的基本原理是DNA分子杂交C一种基因探针能检测水体中的各种病毒D利用基因工程生产乙肝疫苗时，目的基因存在于人体B淋巴细胞的DNA中27. 近年来基因工程的发展非常迅猛，科学家可以用DNA探针和外源基因导入的方法进行遗传病的诊断和治疗，下列做法中不正确的是()A用DNA探针检测镰刀型细胞贫血症B用DNA探
24、针检测病毒性肝炎C用导入外源基因的方法治疗半乳糖血症D用基因替换的方法治疗21三体综合征（21三体综合征是由于患者多了一条21号染色体，不能用基因替换的方法治疗）28. 下列有关基因工程的叙述，正确的是：（）ADNA连接酶的作用是将两个黏性末端的碱基连接起来B目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变C目的基因与运载体结合的过程发生在细胞外D常使用的运载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等29.下列关于基因工程的叙述，正确的是：（）A基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因B细菌质粒是基因工程常用的运载体C通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理运载体DNAD为育成抗除草剂的
25、作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体30.与“限制性内切酶”作用部位完全相同的酶是：（）A反转录酶BRNA聚合酶CDNA连接酶D解旋酶31.限制性内切酶的作用实际上就是把DNA上某些化学键打断，一种能对GAATTC专一识别的限制酶，打断的化学键是：（）AG与A之间的键BG与C之间的键CA与T之间的键D磷酸与脱氧核糖之间的键32.下列技术中不能获得抗锈高产小麦新品种的是()A诱变育种B细胞融合 C花粉离体培养 D转基因 33下列能说明目的基因完成了表达的是()A棉株中含有杀虫蛋白基因B大肠杆菌中具有胰岛素基因C土豆含有抗病毒的基因D酵母菌中提取到了干扰素34基因工程的叙述，正确的是(
26、)A基因工程经常以抗生素抗性基因为目的基因B细菌质粒是基因工程常用的运载体C通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理运载体DNAD为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体35基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的，在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是()A人工合成基因B目的基因与运载体结合C将目的基因导入受体细胞D目的基因的表达和检测36. 科学家们经过多年的努力，创立了一种新兴的生物技术基因工程，实施该工程的最终目的是（ ） A定向提取生物体DNA分子 B定向对DNA分子进行人工“剪切” C定向改造生物的遗传性状 D在生物体外对DN
27、A分子进行改造37.下列哪项不是基因工程中用来运载目的基因的载体？（ ） A细菌质粒 B噬菌体 C、动植物病毒 D细菌核区的DNA38基因工程中，常用的细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，原因是（ ） A结构简单，操作方便 B繁殖速度快 C遗传物质含量少 D性状稳定，变异少39在基因工程中用来修饰改造生物基因的工具是（ ） A限制酶和连接酶 B限制酶和水解酶 C限制酶和运载体 D连接酶和运载体40有关基因工程的叙述正确的是（ ） A限制性内切酶只在获得目的基因时才用 B重组质粒的形成在细胞内完成 C质粒都可作运载体 D蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料41不属于目的基因与运载体结合过程的是（
28、） A用一定的限制酶切割质粒露出黏性末端 B用同种限制酶切割目的基因露出黏性末端 C将切下的目的基因的片段插入到质粒切口处 D将重组DNA导入受体细胞中进行扩增42科学家将含有人的抗胰蛋白酶基因的DNA片段注射到羊的受精卵中，该受精卵发育的羊能分泌含抗胰蛋白酶的奶。这一过程涉及（ ） DNA按照碱基互补配对原则自我复制 DNA以其一条链为模板合成RNA RNA以自身为模板自我复制 按照RNA密码子的排列顺序合成蛋白质 A B C D43实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。从大肠杆菌中提取的一种限制性内切酶ECORI，能识别DNA分子中的GAAT
29、TC序列，切点在G与A之间。这是应用了酶的（ ） A高效性 B专一性 C多样性 D催化活性受外界条件影响44下列有关基因工程技术的叙述中正确的是（ ） A重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 B所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 C选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快 D只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达45下列说法正确的是（ ） ADNA连接酶最初是从人体细胞中发现的 B限制酶的切口一定是GAATTC碱基序列 C质粒是基因工程中惟一用作运载目的基因的运载体 D利用运载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程可称为“克隆”46下列关于限制酶的说法不正确的是（ ） A限制酶广泛存在于各种生物中，微生物中很少分布 B一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 C不同的限制酶切割DNA的切点不同 D限制酶的作用是用来提取目的基因47、
