1、涂膜是一种常见的修改药物释放特性的过程。当药物的释放能够得到良好的控制时，那么它可以在治疗范围内的很长一段时间内保持血药浓度，从而提高治疗效果。通过膜的厚度和组成可以调整薄膜包衣颗粒的释放率。迄今为止，这种新的多粒子系统产品的设计和开发已在很大程度上实行了经验的验证。不仅薄膜包衣微丸聚合物涂层增重相对非特异性尺寸，而且薄膜涂层厚度也会影响药物层的波动。在这项工作中，通过选择不同的涂层材料、辅料和涂层重量变化以调节药物释放率从而达到理想的缓释效果。在这项工作中，我们打算开发两种配方的口服给药文拉法辛缓释胶囊以确定药物释放性能的影响因素，并比较它们与市售产品的理化性质和药代动力学特征。2.材料和方
2、法2.1材料文拉法辛盐酸盐（ VH ）购自中国制药集团有限公司（中国河北） 。怡诺思 XR购自惠氏（中国沈阳）。微晶纤维素PH值101（MCC）购自朝日家政（东京，日本）。羟丙基甲基纤维素（HPMC ，ZhanWang药业有限公司）。吐温80 ，由巴斯夫（ Wasserburg德国）提供。丙烯酸树脂 NE30D ，由德固赛（ Esson ，德国）提供 。乙基纤维素由Colorcon（美国费城）所提供。PEG 6000的购自天津博迪化工股份（中国天津）化学试剂公司。色谱级甲醇和乙腈购自费舍尔（宾夕法尼亚州匹兹堡，美国） 。使用的水为easypureiirf /紫外超纯水系统（巴恩斯特德国际公司，
3、波士顿，美国）。其他所有材料均为分析纯试剂。2.2 方法2.2.1药物辅料相互作用的研究通过差示扫描量热（DSC ）法研究药物辅料相互作用的可能性。用差示扫描量热法记录药物、辅料和药物辅料的热分析图。将样品分别密封在铝电解槽中并设置好DSC-60热分析装置。2.2.2制备载药芯采用挤出/滚圆技术制备盐酸文拉法辛载药芯。表1给出了载药微丸的组成。将药物和辅料均匀的混合在一起并加入粘合剂。用挤压机以30 rpm（转/分）挤出制粒。挤出了球化100克量为5分钟1800转 在一个250毫米的径向板spheronizer使用交叉影线摩擦板3毫米3毫米间距和1.2毫米的深度。生产的载药芯在40摄氏度的干燥
4、炉中干燥12小时。2.2.3缓释微丸2.2.3.1 配方1的制备 将载药芯用流化床涂布机涂上丙烯酸树脂ne30d和少量的PEG 6000。涂料分散制备如下：丙烯酸树脂的 NE30D稀释至10的固相含量（ W / W ） 。加入含水的PEG 6000后搅拌30分钟之后涂层。工艺参数如下：进口温度= 20，产品温度= 202，喷雾率= 1毫升/分钟，雾化压力= 0.2兆帕，风压= 0.3兆帕，颗粒流化10分钟，随后在60C下固化24小时。所有的载药芯均使用流化床包衣机涂层直至增重了12%。2.2.3.2 配方2的制备 对于涂层过程，配方2的载药芯使用流化床底喷和底喷包衣机，涂上乙基纤维素和PEG
5、6000的共混物直到达到重量增加了9 。将乙基纤维素溶解于95乙醇和癸二酸二丁酯中塑化过夜。加入含水的PEG 6000，搅拌30分钟之后涂层。进口温度= 50，产品温度= 502，喷雾率= 1毫升/分钟，雾化压力= 0.2兆帕，风压= 0.3兆帕，颗粒流化10分钟，随后在40C下固化24小时。薄膜包衣组成的乙基纤维素和增塑剂总计为扩散颗粒重量的12%。涂层水平是可以通过喷散出来的重量计算出来的，但是没有HPMC（羟丙基甲基纤维素）的量。2.2.4药物释放的测量和比较用溶出仪在37下、在900毫升的6种溶出介质（ZRS-8G溶出仪，中国）进行释放测量。药典规定，测量的转速要在100 rpm（转/
6、分）。使用的6种溶出介质是水， pH 6.8的磷酸盐缓冲液， pH 7.2的磷酸盐缓冲液， 0.1 M盐酸， pH值4.5醋酸钠 - 醋酸缓冲溶液和pH梯度介质。将制备的缓释胶囊（配方1 ，配方2 ）和市售的相当于75毫克药物的怡诺思 XR加入到溶出仪中，分别在1 ， 2， 4 ， 8，12和24小时后取1毫升测试液进行测试。将测试液用0.45微米的微孔滤膜过滤并用高效液相色谱检测药物的浓度。使用pH梯度介质可以反映体内胃肠道的环境。在第2小时时，pH梯度介质为0.1 M盐酸，然后加入高浓度的磷酸盐缓冲液改变pH值至6.8 ，在4小时时，加入高浓度的磷酸盐缓冲液改变pH值至7.2。HPLC系统
7、包括一个L - 7110泵，用JASCO紫外可见检测器L - 1575设定在226纳米和ANASTAR接口（中国天津） 。使用ANASTAR HSM软件进行UV信号监测和峰集成。校准以前，它被证实，辅料在浓度范围内没有吸收波长信号。此外，在盐酸文拉法辛和这些辅料、胶囊壳之间。没有任何紫外吸收干扰，色谱分离是在室温下进行，使用C18柱）调整流速为1.0 mL / min。流动相为乙腈：用0.45 膜过滤器过滤0.01M三乙胺磷酸盐缓冲溶液（PH=3）（28:72=体积比），并在使用前超声脱气。这些情况导致盐酸文拉法辛的洗脱时间为5.5分钟。为了比较测试准备和销售缓释胶囊对各种溶媒的溶散概况，需模
8、拟不同的生理PH值，溶散在水中，PH值为6.8的磷酸缓冲溶液，PH值为7.2的磷酸缓冲溶液中，0.1M盐酸，PH值为4.5的醋酸钠醋酸缓冲溶液和梯度介质中进行。相似性指数是由穆尔和兰1996年提出的以确定两个剖面的相似性，并定义如下：其中， n为样本数， Rt和Tt是参照百分比和药物释放值，分别在不同的时间间隔t。 F2值在0100之间。当值是100时，随着差异性增加，测试和参考参数相同并接近于零。但由于F2是一个测程仪，即使在剖面上的微小差异也会导致在F2大降。如果溶解药物释放概况的f 2在50和100之间，那么这些药物释放概况类似。如果值在50以下，则表明释放概况不同。2.2.5扫描电子显
9、微镜和电子显微镜成像为了检查药物和薄膜包衣的形态，分别用扫描电子显微镜获得了配方1、配方2微囊和怡诺思 XR溶散后的扫描图像。在40放大倍率的电子显微镜下拍摄照片并分析药物释放机制。2.2.6药物释放机制通过各种数学模型对药物释放的数据进行了分析。七个动力学模型，包括零阶，一阶，ritgerpeppas，希克森， Crowel和贝克 - 代尔释放方程处理体外释放数据。表2所示的为公式。表2中Qt是药物在t时间的释放部分，K 0是零级释放速率常数，K是一阶释放速率常数，K h是希古挈释放速率常数，t是释放时间。n是参数，取决于释放机制和测试矩阵的形状。通过线性或非线性最小二乘拟合方法在每一个方程
10、确定最佳参数值。以R2为相关因素的基础上进行回归分析和最佳配合的计算。应用哈兰德方程进一步分析药物释放机制。其中Qt是药物在时间t释放的一小部分，是扩散速率常数，是弛豫速率常数，Fick扩散百分比（1）或松弛（2）由下列公式计算： 2.2.7体内研究2.2.7.1 .实验设计.这是一个开放式的、随机的、对狗进行三周期的交叉研究。对实验犬的药代动力学研究的评价通过沈阳药科大学动物实验伦理委员会的批准。研究中使用6个健康的雄性Beagle犬，禁食但进入实验的前12小时可以喂水。至少1周前这些实验狗的重量为（ 7-10公斤） 。实验包括禁食、单剂量与这三个不同的准备工作,洗掉期之间。将制剂（配方1、
11、配方2和参考药品）喂给已经吃完早食的Beagle犬，并在4小时之后正常进食午食。通过空心针从前腿抽取血液。血液样本在肝素导管（3毫升）收集，在剂量（零）给药和0.5，1，2，3，4，5，6，8，10，12，16，24，30和36小时后给药。在10分钟3000转离心血液血浆，然后保持在-20 C冻结，直到分析。超高效液相色谱 - 串联质谱法测定文拉法辛血浆中的浓度。2.2.7.2 .测定犬血浆中的文拉法辛采用选择性、快速、灵敏的液相色谱质谱/质谱法定量分析犬血浆中文拉法辛。样品预处理与格列吡嗪作为内部标准，利用简单的沉淀蛋白。将内标液（ 40ug/mL ）50 UL的甲醇溶液和50 UL流动相添
12、加到50l血浆中。涡旋混合1分钟后，将样品离心10分钟15000转。收集上清，并在同等条件下离心。用ACQUITY UPLCTM BEH C18柱进行分离。，水（含0.1甲酸）和乙腈作为流动相，流速0.2 mL / min。检测器（美国Waters ）进行检测。质谱仪的操作与电喷雾电离（离子）接口设置为正离子模式，多反应监测模式。文拉法辛选择反应监测（SRM）和内部标准分别为m / z 为278.1 58（文拉法辛） ， m / z为446.3 312.2 （格列吡嗪）。文拉法辛的浓度测定的标准线性校准曲线的浓度范围为25000毫微克/毫升。图一 空白辅料、药物和物理混合物的差示扫描量热曲线2
13、.2.7.3药代动力学数据分析分析非分割药代动力学036小时曲线面积（ AUC0 -36 ）的计算。通过观察实验数据，测定不同剂型的血浆浓度峰值（Cmax）和达到血浆峰浓度的最大时间（Tmax） 。根据线性梯形法则估计曲线下面积（AUC或血浆浓度时间）。显着性差异阈值P0.05 。配方1和配方2的相对生物利用度参考市售胶囊）使用下列公式计算：此外， 90CIs of Cmax ， AUC0 t ，和AUC0 -分别计算三种配方，和2 one-sided t检验被用来评估是否几何平均比率90 CIS （测试：参考）这些参数分别为80.00-125.00 （使用log转换后的数据）的范围内。2.2
14、.8 .体外体内的相关性分析（ IVIVC ）通过比较绘制三种配方的溶解百分比（F）和体内吸收百分比（Fa） 评估文拉法辛体内/外的相关性分析。溶解百分比值来自于不同溶出介质的体内释放数据，吸收百分比值可用瓦格纳 - 尼尔森公式确定：其中Fa是药物吸收的一小部分，Cp是t时间的血药浓度，k e是消除速率常数，AUC0t,和 AUC0 分别是0t 时间的曲线下面积和0 的曲线下面积，采用线性回归分析，以相应的数据和R计算评估IVIVC稳固性。3结果与讨论3.1差示扫描量热法（DSC）药物赋形剂的相互作用文拉法辛， 微晶纤维素（MCC） ， 羟丙基甲基纤维素（HPMC）和物理混合物得到的差示扫描量
15、热（DSC）曲线图。 如图1。DSC热谱图表明在212.3 C时文拉法辛产生一个急剧融化的吸热峰。个别辅料没有表现出任何特征峰。药物辅料的物理混合物中文拉法辛的吸热峰没有转变，这说明药物与辅料具有良好的生物相容性。3.2体外溶出度测试 配方1 、配方2和怡诺思Effexor XR （参照）的体外溶出度。如图2。图有丙烯酸树脂的配方一在不同的溶质中相似于药物的释放行为。而配方二和怡诺思Effexor XR （参照）在0.1 M HCl and pH 4.5 NaAcHAc缓冲液中要比在其他溶质中更加缓释。结果表明，配方2和怡诺思 XR药物在第4小时的释放速率比配方1的要慢得多。药物释放性能降低可
16、能与涂层技术有关。涂有乙基纤维素有机溶液的微丸（配方2和怡诺思 XR）在这种低PH的溶质中的可以延长释放速率并且范围较低。配方1之中的各种溶散质几乎没有释放行为的差异，这可能是因为 NE30D丙烯酸树脂的特点是中性的并且对pH是非敏感的。计算参照药和配方1 / 2之间的相似性因素（F 2）并列于表3。f2的结果表明，配方1与对照品大多相似，除了在pH=4.5的NaAc- HAc缓冲溶液外配方一的溶解速度和范围均优越于对照品。基于体外溶出性能，预计配方1 / 2和对照品可能具有生物等价性，但仍需要进一步的验证生物等效性。3.3扫描电镜实验溶解24小时后干微囊的扫描电镜图像，如图3所示。涂有丙烯酸
17、树脂ne30d的微丸表面粗糙、有小裂缝以及涂层薄膜表面分布有许多孔隙。相比之下，配方2的表面虽然带有小孔但却更加光滑。而怡诺斯Effexor XR 的表面平坦且不疏松。这可能是由于两种涂层技术具有不同的涂膜结构所致。作为以有机溶剂为基础的系统，聚合物溶液从溶胶过渡到凝胶要经过溶剂蒸发才能最终形成聚合物薄膜。然而，当喷涂聚合物水分散液时，固体剂型的表面上就会沉积该聚合物颗粒。由于水分蒸发及水和聚合物之间的界面张力，胶体粒子直接相互接触并形成紧密堆积的排布。毛细力驱动粒子凝聚在一起。因为高分子链在水分散中的渗透程度比在有机溶液中低，水分散系所制备的薄膜机械力比较弱而且由于药物释放期间微丸芯产生的静
18、水压力更容易产生裂纹。 NE30D（配方一）要比乙基纤维素（配方二 和怡诺斯 Effexor XR）有机溶液薄膜更容易形成，而这导致了较高的水渗透膜和薄膜溶胀性的形成。图三 （1）与水作用24小时后配方一的扫面电镜SEM图（2）与水作用24小时后配方二的SEM图（3）与水作用24小时后怡诺思Effexor XR （对照）的SEM图3.4释药机制的研究薄膜包衣配方释放药物模式进行了如下总结：（1）与水接触后膜开始吸水和膨胀。然后水快速穿过了控制药物释放的薄膜衣。水渗透高分子膜并溶解微丸芯内的药物。涂层聚合物的肿胀会继续下去，直到促进扩散的水合作用与聚合物弹性强度之间达到平衡状态。（2）通过溶出度
19、介质中的水使线性聚合物或足够的亲水性聚合物溶剂化。造孔剂的浸出从聚合物大衣到控制药物分子释放的分散介质成孔剂。由于水渗透到微丸的渗透压差将继续下去，直到其核心是水饱和的，通过细胞膜的运输过程成为控制在两个方向上的扩散。穿过细胞膜的转运过程形成两个方面的扩散控制。微丸肿胀引起的水涌入导致聚合物网状系统的膨胀并且因此进一步提高了薄膜衣的渗透性。EMS三种剂型的图片（图4）展出了溶出24小时后的不溶性膜，这可能会提高药物释放且部分受控于薄膜衣。和膜孔SEM照片（图3）显示表明，一些药物可能通过毛孔释放。图四与水接触24 h后， VH缓释微丸电子显微镜图： （一）配方1 ，（二）配方2， （三）怡诺思
20、 XR 。如表4所示，通过各类回归模型的参数和比较，第一阶模型选择了最好的回归拟合度。配方1、配方2和Effexor XR的数据表明， Ritger - Peppas模型中的“n”值在0.45和0.89之间，这可能是由于非Fick扩散所引起的（图5） 。图五 配方1 、配方2和怡诺思 XR的 Fick扩散和侵蚀机理的贡献百分比3.5生物利用度研究与市售（怡诺思 XR）胶囊相比，对文拉法辛两个优化配方的缓释微丸进行了生物利用度的研究，并对以下口服了75毫克药物的六个健康Beagle犬进行了调查。文拉法辛平均血药浓度与时间图，如图6所示。文拉法辛的主要药代动力学参数如表5所示。图六 口服试盐酸文拉
21、法辛胶囊后测试的平均浓度时间曲线。服用配方1、配方2和Effexor XR后，药物迅速达到血浆。1小时后，配方1、配方2和Effexor XR的平均血浆浓度分别为84.29 、159.88和106.33毫微克/毫升。 XR的平均峰值血药浓度分别为1922.19 ， 1090.24和1126.19 ng / mL且它们达到峰值的时间分别是在6.5h 、第11h和第11h。与参照药相比较来说，计算AUC0 -36 ，配方1中文拉法辛的相对生物利用度为119.6 ，而配方2为101.1 。配方1和怡诺思 XR在最高温度TMAX时有显着性差异。这可能是由于药物血浆浓度在个体间的差异和较少的实验对象所引
22、起。这需要进一步研究使人信服。3.6药物体内外相关性研究本实验对体内外相关性IVIVC水平A进行了研究，其整个体内时间过程与体外数据有关。使用了其在六种溶媒介质中的数据和体内吸收。回归分析结果汇总于表68，三种配方的F与Fa之间的非线性关系如图7所示。数据表明，三种文拉法辛配方在 6种溶媒介质的中溶出度均在体内吸收和体外释放之间均具有良好的相关性。尽管配方一在不同释放介质中的体内外相关性几乎没有变化，但还是观察到了配方二和宜诺思Effexor XR在不同溶媒之间的体内外相关性IVIVC具有显著性差异。结果表明，配方1 ，配方2和Effexor XR最好的的体外溶出相关性和体内吸收分别是水、0.
23、1 M盐酸和0.1 M盐酸。图 7 配方一、配方二和宜诺思Effexor XR.体内吸收和体外溶出关系图。虽然涂有不同配方的技术可以通过配方和工艺参数的优化达到类似的药物体外释放行为， 固体分散体涂层的配方1在体内口服吸收与涂有有机溶剂的配方2 具有很大的不同。这可能是由于在薄膜微结构和体内外环境之间的显着性差异所造成。水悬浮液所形成的薄膜具有较弱机械功能，低密度的聚合物结构和表面粗糙，然后大分子的流动性和通透性增加。虽然我们调查了药物在6种溶媒中的药物释放行为，体内药物释放过程强烈的被胃肠道表面活性剂所影响，运输和收缩，水分含量和流体粘度等，但是这些并不能通过体外条件反应真是的体内状况。可以
24、得出结论，尽管在体外释放行为相似，但是水分散性和有机溶剂的涂料技术在薄膜微结构和表面粗糙度的差异性强烈的影响了其在体内的吸收性能。4结论要确定不同的成膜方法对体外释放和体内药代动力学性能的影响，对两种不同的涂层技术，包括水分散体和有机溶剂型涂料进行了这项研究。推出了两种被发现遵循一级动力学、在体内吸收性能上有良好的相关性的制剂。应当指出，在薄膜微结构和表面粗糙度的变化对于药物的释放行为和其在体内的药代动力学性能上具有重要意义。有机溶剂涂层技术所形成的薄膜有较好的可塑性、更高的密度和更均匀的表面。通过优化配方和制备方法，我们成功的制备了涂丙烯酸树脂 NE30D或乙基纤维素有机溶液的两个配方，它们在体外的释放行为相类似。然而，他们在体内的吸收性能有显着性差异，因为体外释放条件想要模拟复杂的体内环境是很难的，结果就导致了药物在体内释放行为产生了变化。
