1、细胞工程作业细胞工程作业 班级：姓名：学号： 日期 ：魔芋的脱毒及组培快繁技术研究论文提纲1项目背景1.1该植物的生物学知识、特性1.1.1魔芋块茎的主要化学成分1.1.2魔芋知识1.2该植物的功能及经济价值1.2.1魔芋的保健功能1.2.2经济价值(药用价值,食用价值,农用地膜生产和新型水性建筑涂料生产等方面的应用)1.3该植物生产中存在的主要问题和解决途径1.3.1我国目前魔芋产业发展现状、面临的问题1.3.2对策与前景1.4针对存在问题提出本项目的研究必要性2本项目的主要内容和需要解决的关键问题2.1主要研究的内容2.2前人在该领域内已经取得研究成就和最新进展2.2.1前人在魔芋组织培养
2、的实验及科研状况2.2.2优质魔芋组培快繁技术研究进展2.3项目的关键技术或难点2.4研究的实验设计方案3项目所需要条件3.1魔芋组织培养所需营养3.2环境条件3.3常用组织培养仪器设备及必要器皿4实验研究实施方案的技术规程4.1实验准备4.2实施研究的操做方法与过程4.2.1材料与方法 4.2.2材料处理与脱毒5项目的优点与预期结果5.1魔芋植物组织培养的特点5.2研究项目会取得那些结果6成果的推广及应用前景魔芋的脱毒及组培快繁技术的研究摘要：以魔芋的根状茎为外植体，用正交试验法研究了不同氮素含量的基本培养基、不同浓度的 BA以及 NAA 对魔芋根状茎愈伤组织诱导的影响；不同激素组合对不定芽
3、分化 、组培苗生根诱导的影响，并针对魔芋组织培养 中的褐变现象采取了有效措施。魔芋幼芽和幼嫩芽鞘,经0.1%升汞灭菌20分钟后,接种在附加BA.NA(均为0.6m/1)的MS培养基上,在室温25土1,每天照光9小时的条件下培养三周,形成愈伤组织。愈伤组织转入附加4(mg/1)BA、0.25(mg/1)IBA,3(mg/1)GA_3的MS分化培养基上,四周后分化出芽和白色地下茎,其分化颖率为40%,再转移至附加2(mg/1)BA、1(mg/1)IBA、0.3%活性炭的MS培养基中,幼茎和叶片从芽鞘中抽出,茎基部分化出根,形成完整的小植株。关键词：魔芋；根状茎；脱毒；组织培养 ；褐变。1项目背景1
4、.1该植物的生物学知识、特性。魔芋为天南星科(Araceae)刺芋亚科刺芋族(Lasieae)魔芋属(Amorphophallus)，多年生草本植物的地下块茎，其主要成分为魔芋的葡甘露聚糖。魔芋属于被子植物门、单子叶植物纲，是具有球茎的多年生草本植物，已有学名的魔芋属种不少于163个。绝大多数魔芋生长于平均温度16，海拔800m以上的亚热带山区或丘陵地区。魔芋是典型的无性繁殖植物,目前生产上采用块茎繁殖的播种方式,每亩用种量高达1000公斤,而且种芋贮藏、播种后容易感病腐烂,成为发展生产和优良品种推广、使用的重要限制因子。1.1.1魔芋块茎的主要化学成分：1）糖类葡甘露聚糖是魔芋块茎特有的主要
5、成分，分子式为（C6H10O5）n，是由d-葡萄糖和d-甘露聚糖按1：1.6摩尔比以-1，4糖甘键连接的杂多糖，其含量约为44%64%，另一类是淀粉和其他多糖。2） 蛋白质和氨基酸魔芋块茎中的粗蛋白含量为5%10%，16种氨基酸总量为6.8%8.0%（有7种必需氨基酸）。花魔芋有18种氨基酸，总量为6.283%，其中人体必需的为2.634%，白魔芋片含量分别为5.14%和2.137%。3） 矿物质魔芋含有多种矿物质，块茎中K、Ca、Mg、Fe、Mn、Cu、Co等含量高，据崔熙等报道，人体必需的多种微量元素和常量元素魔芋中的含量相当多。4 ）其他成分生物碱含量为1%2%，有毒，还含较多的草酸钙结
6、晶，故魔芋必须处理后方可食用。另外，魔芋经加工可分离出桦木酸、-谷甾醇、蜂花烷、木糖以及胡萝卜素、硫胺素、核黄素、抗坏血酸等多种物质。1.1.2魔芋知识1、魔芋球茎是茎的短缩变态组织，球茎中的葡甘聚糖是魔芋的经济成分。小球茎和根状茎是魔芋的种芋，对于芋的保护应象保护鸡蛋一样，方能保证芋无伤，减少发病。 2、魔芋根为弦状不定根，并在上面发生须根及根毛。魔芋根数量少，具嫩、脆的特点、特别容易受伤。因此保护根系对防病及高 产有重要作用。 3、魔芋植株有种芋顶芽长出，约5月中下旬，鳞片较早出土。随后复叶出土，逐渐长大并展开。魔芋出土及展叶时需氮肥壮叶。魔芋种芋一般一年只长一片复叶，保护这一片复叶不损伤
7、对保证产量非常重要。 4、魔芋花为佛焰花序，由花葶、花序和佛焰苞组成。魔芋花的颜色有白、绿、红或紫色，形状和色泽变异大、艳丽夺目。 5、中低海拔山区由于光照较强，温度较高，一般宜与高杆作物间套作，最常见的模式为魔芋蜓玉米间作。1.2该植物的功能及经济价值魔芋是一种新兴的经济作物，有着巨大的经济开发潜力和产业比较优势。当前魔芋生产正处于栽培扩大、产业升级的发展时期，要求魔芋有优良的品种种质。我国已记载的魔芋属种有30种，药食兼用的魔芋有8种，最具有研究开发价值的魔芋品种为花魔芋和白魔芋。1.2.1魔芋的保健功能 1）减肥 魔芋的主要成分为KGM，是一种可食用植物纤维，不易被消化。KGM热量极低，
8、且具有吸水性强、黏度大、膨胀率高的特点，进入胃中吸收胃液后可膨胀20100倍，产生饱腹感，在充分满足人们的饮食快感的同时不会增肥，无须刻意节食，便能达到均衡饮食，从而实现理想减肥的效果。 2）降压抗癌魔芋在胃肠存留期间可吸收肠、胃内的胆固醇，并促进其排泄。KGM对胆汁分泌有一定的影响，在一程度上可防止人体对胆固醇的吸收，还能有效地干扰癌细胞的代谢功能。魔芋凝胶进入人体肠道后就形成孔径大小不等的半透膜附着于肠壁，能阻碍包括致癌物质在内的有害物质的侵袭，从而起到解毒，防治如甲状腺癌、胃贲门癌、结肠癌、鼻咽癌等癌肿的作用。3）补钙实验表明，魔芋食品中的钙比较容易洗脱出来，特别是在酸性溶液中钙的洗脱率
9、更高。人们在食用魔芋时，嚼烂的魔芋与酸性胃液接触，钙便开始溶化，再从肠胃吸收，从而达到补钙的作用。 4) 洁胃魔芋食用后消化吸收慢，大量可溶性植物纤维促进胃肠蠕动，可减少有害物质在胃、肠、胆囊中的滞留时间，有效地保护胃粘膜，清洁胃壁。5 )排毒通便其丰富的植物纤维素，帮助活跃肠道功能，加快排泄体内有害毒素，预防和减少肠道系统疾病病变发生。一程度上可防止人体对胆固醇的吸收，还能有效地干扰癌细胞的代谢功能。魔芋凝胶进入人体肠道后就形成孔径大小不等的半透膜附着于肠壁，能阻碍包括致癌物质在内的有害物质的侵袭，从而起到解毒，防治如甲状腺癌、胃贲门癌、结肠癌、鼻咽癌等癌肿的作用。1.2.2魔芋的经济价值1
10、）药用价值 魔芋葡甘露聚糖可降低胆固醇，是抑制人体肥胖的理想保健品。它的膨胀系数达80倍-1000倍，消化吸收慢，很易给人吃饱的感觉，又没有过多的热量，这就帮助食量大的肥胖者和糖尿病人控制饮食，是理想的低热低脂的保健食物。魔芋能清除肠壁上的废物，对防治便秘很有效。 在国外，魔芋被称为“胃肠清道夫”、“血清净化剂”。为膳食纤维食品。在我国中医学著作中都记载魔芋能去积化痰、消肿、扩张末稍血管、降血脂。现代医学专家研究表明，魔芋的主要成分葡甘露聚糖对防止消化道、心血管系统的许多疾病都有主要作用。如清洁血液、调节血清、降低胆固醇、防治糖尿病、减肥等均有显著功效。 由西北农林科技大学研制的魔芋精粉国家标
11、准2000年已发布实施。由西北农林科技大学承担、西安医科大学协作完成的“魔芋甘露聚糖提取技术及药用研究”，已通过了陕西省科技成果鉴定，总体水平达国家先进水平，并获得了国家发明专利。发明的魔芋甘露聚糖提取工艺专利和研究提出的魔芋减肥降脂胶囊处方和生产工艺技术，为植物多糖的开发和纯天然减肥药品的研制开发提供了科学依据和应用技术，具有潜在的经济效益和广阔的前景。2)食用价值 魔芋碳水化合物，蛋白质含量也高于马铃薯和甘薯，还含有铁、钙、磷、脂肪、维生素A和B等。更主要的是魔芋富含葡甘露聚糖的少数几种块茎作物之一。魔芋块茎及其干制品耐贮藏运输，其各种加工品对调节和增加副食品的花色品种具有一定的作用。魔芋
12、的食用部分是膨大的地下块茎，其含水量为78%-89%。干品含葡甘露聚糖45.7%-54.7%，魔芋葡甘露聚糖具有很强的溶涨能力，吸水量是葡甘露聚糖自身重量的80倍-120倍，其水溶液具有强大的粘结性和凝胶性，溶于冷水可以形成粘稠的溶液。魔芋葡甘露聚糖还具有成膜性、可塑性、结构性、赋形性、乳化性、增稠性、保水性，从而被广泛用作食品添加剂、被膜剂、崩解剂、悬浮剂、乳化剂和保水剂，可制成各种保健食品，如魔芋面条、魔芋豆腐等。另外，魔芋葡甘露聚糖被证明是优良的膳食纤维，将它添加到其他食品中，可制成非常流行的功能食品。魔芋精粉中含脂肪很少，其葡甘露聚糖对果蔬、肉食具有优良的防腐、防霉和保鲜作用。魔芋是食
13、品工业上难得的优质原料。3）农用地膜生产武汉大学在魔芋深度开发上也获得了重大突破，研究的生物全降解农地膜成果属世界首创，处于国内先进水平。以魔芋为原料研制的种子包良剂，可以防止病害侵袭种子，有效促进生产。以魔芋为原料研制的化肥缓释剂、土壤保墒剂等，都具有很大的市场潜力。4）新型水性建筑涂料生产 由华中农业大学承担的“魔芋深加工研究”、“WKC魔芋水性内墙涂料”，首次将通常作为食品用的魔芋用于建筑行业，研制出一种新型涂料，这种魔芋装饰涂料有较强的抗微生物和耐寒能力，同时克服了常用水溶性涂料的不足。该项研究属国内外首创。课题组通过对魔芋葡甘露聚糖进行物理化学改性并结合生物技术对其降解后，引入疏水基
14、因的原理，将魔芋精粉经过无有机溶剂的双改性和交联后，成为一种新型建筑涂料的成膜物质。该研究中魔芋葡甘露聚糖的改性达到国际先进水平。WKC魔芋水性内墙涂料有着优良的附着力、成膜性、耐寒性、抗水性、抗微生物性及耐擦性能，其性能指标为：魔芋降解产物收得率大于或等于95%；以魔芋为基料的两种水溶性内墙涂料分别符合建材部行业标准和国家标准。魔芋葡甘露聚糖是一种可用于涂料工业的新型天然高分子材料，整个改性过程无环境污染，可代替现有水性涂料和乳胶漆在建筑、装饰、防锈等多种领域应用，其成本低，性能优于苯丙乳胶漆，且无污染挥发物质产生。将魔芋加工成涂料，其增值比为1:10-1:30。随着人们对环保水型内墙涂料需
15、求量的日益增大，这种新型的环保型内墙涂料将有着广阔的市场前景。以魔芋精粉为原谅的“KDB干燥剂”由华中农业大学食品系研制成功。 魔芋加工过程中产生的具有辛辣刺鼻味的大量飞粉，长期未能得到利用。该研究就是利用魔芋精粉粗加工的废弃物飞粉为原料，通过相转变原去除飞粉中的异型成分后，与配位剂结合，形成吸水、保水容量大、性能优良的新型干燥剂，使占魔芋精加工中30%-40%的废弃物得到利用，从而节省了资源，保护了环境。“DKB干燥剂”中魔芋飞粉（或精粉）含量在41%-50%；吸水容量大于等于10；碳水化合物含量大于等于20%，其干燥效果优于氯化钙和硅胶，吸水量分别为二者的2倍-5倍，可以应用于化工、食品、
16、医药、服饰、光学仪器等多种领域的物品干燥、贮存。国外对类似成果有过报道，但其配方不同，且未对魔芋飞粉进行处理，不能在食品中应用。1.3该植物生产中存在的主要问题和解决途径1.3.1我国目前魔芋产业发展现状、面临的问题 我国魔芋的种植面积约43万亩，鲜芋产量约20万吨，魔芋精粉1万吨左右，但魔芋精粉产量占总产量的20%左右。现在魔芋的烘烤可以实现机械化，精粉加工设备已经国产化。 我国魔芋产品开发目前还是以食品为主，如凝胶食品、增稠剂、乳化剂。葡甘露聚糖是可溶性膳食纤维，开发魔芋保健食品、药品将是今后方向之一。 魔芋葡甘露聚糖具有良好的粘弹性和保湿性能，因此还可以用来生产化妆品，如面膜、香乳、膏霜
17、等，产品已在国内外上市。湖北省竹溪县1999年种植魔芋近2000公顷，总产量可达4万t以上，与日签2130t魔芋精粉的购销合同。2000年国家技术监督局已经正式颁布了魔芋精粉产品的国家标准（由西北农林科技大学研制）。据业内专家估算，当前我国魔芋产值10亿元左右，企业有100家。种种迹象显示：开发魔芋，正成为西部开发的“热点”。一些科技单位和厂商，以及一些港台客商正西进川鄂地带，争发“魔芋财”。我国魔芋产业存在的问题：（1）抗逆性、抗病虫害的优良品种较少，相关的研究工作不多，投入也不足。（2）魔芋精粉品质不高。少数小型加工企业没按国际标准加工生产，影响我国外贸销售。（3）国内市场产品花样不丰富，
18、产品及相关技术开发工作还没有受到重视和加强。1.3.2对策与前景 加大科技投入，增加科技含量，鼓励技术创新和产业化，应用现代生物技术，继续培育魔芋优良品种，并搞好种植规范化的实验、示范和推广工作。白魔芋葡甘聚糖含量为46.8%-48.1%，近几年来，白魔芋因品质优良而被广泛引种。魔芋宜在海拔500米-2500米的山区及丘陵地区发展，在海拔500米左右的浅丘地区，魔芋的适宜日照强度约为一般作物的65%，宜选向东或向北倾斜的坡地种植。在海拔800米以上的半山区，宜选向西南倾斜的坡地种植。由于遮荫适度时魔芋发病少，可以选择幼树林或森林植被较好的山坡地块种植，也可选择在稀疏的未成林果园、茶园、桐园间作
19、，或与玉米、高粱、搭架蔬菜间作，还可采用遮阳网覆盖栽培。我们应借鉴国外成功的经验，加强魔芋葡甘露聚糖新产品开发，扩大国际市场。魔芋是一种很有开发前景的食品原料。目前，日本是魔芋消费最大的国家，常年缺口1万吨精粉，需要从中国、印尼进口。日本将成为我国魔芋原料及产品的主要外销市场。对外贸易不能压价外销。 国际上魔芋的兴起也刚刚起步，美国食品医药局1989年通过了魔芋食品的注册，为魔芋食品打入美国市场扫除了障碍。欧洲人不种魔芋，但对魔芋的减肥保健功能很感兴趣，欧洲人已着手魔芋食品的研究和开发。总之，随着联合国食品卫生组织对魔芋作为合格食品在全世界自由销售的法案深入讨论和通过，欧洲市场将被开放。可以相
20、信，不久的将来魔芋产品的世界市场将非常巨大。 魔芋是种植用工少、效益高，但投资较大的特种经济作物，适宜于山区荒坡梯田种植。如四川每公顷需投资1.8万元，毛收入可达4.5万元以上。建议组建我国的魔芋食品行业协会，以统筹安排国内魔芋生产、销售，统一经营国际市场，发展我国的魔芋产业。1.4针对存在问题提出本项目的研究必要性魔芋是典型的无性繁殖植物,目前生产上采用块茎繁殖的播种方式,每亩用种量高达1000公斤,而且种芋贮藏、播种后容易感病腐烂,成为发展生产和优良品种推广、使用的重要限制因子。本实验以花魔芋、白魔芋的营养器官为组培材料,针对魔芋组培器官分化困难、成苗率低、培养周期长等限制因素进行了生理代
21、谢、培养条件等方面的综合研究,设计魔芋组培快繁技术的优化方案,在理论和实践上解决了魔芋组织培养过程中的技术问题。2本项目的主要内容和需要解决的关键问题2.1主要研究的内容魔芋幼芽和幼嫩芽鞘,经0.1%升汞灭菌20分钟后,接种在附加BA.NA(均为0.6m/1)的MS培养基上,在室温25土1,每天照光9小时的条件下培养三周,形成愈伤组织。愈伤组织转入附加4(mg/1)BA、0.25(mg/1)IBA,3(mg/1)GA_3的MS分化培养基上,四周后分化出芽和白色地下茎,其分化颖率为40%,再转移至附加2(mg/1)BA、1(mg/1)IBA、0.3%活性炭的MS培养基中,幼茎和叶片从芽鞘中抽出,
22、茎基部分化出根,形成完整的小植株。针对魔芋组织培养过程中存在的污染,外植体褐变,玻璃化现象,组培苗的遗传变异,移栽成活率低等问题进行了综述并探讨了相应的解决对策,为魔芋组培工厂化提供了一定理论依据。从魔芋组织培养中褐变发生的原因,发生的条件和现象分析了魔芋组织培养中褐变产生的机理.并结合研究总结褐变的防控措施。魔芋产品器官是球茎，富含的葡甘露聚糖是目前公认最好的膳食纤维之一。但在生产种植中，魔芋的用种量大，这样不仅耗费大量的种芋，而且其表皮极易损伤，易感病和种芋腐烂。另外，魔芋由于长期采用无性繁殖，种芋常带病毒、种性退化，通过茎尖的脱毒培养可获得无病毒种苗。为逐步实现魔芋生产良种化的目标，从根
23、本上解决魔芋良种退化，品种繁殖系数低等问题，利用细胞组织培养技术进行快速繁殖，生产出优质种苗，是解决魔芋规模化，规范化栽培种苗问题的有效方法。虽然针对魔芋组织培养技术的研究在国内外已经有一些报道，但是魔芋组培中仍然存在组培苗成苗率低，培期长，培养过程中细胞的褐变，组培苗玻璃化现象突出问题。本实验对魔芋组培快繁过程中存在的问及解决方法作了深入的分析论述，为解决魔芋组培养过程中的技术难题，快速魔芋种芋繁育速度供了相关理论依据。2.2前人在该领域内已经取得研究成就和最新进展2.2.1前人在魔芋组织培养的实验及科研状况据不完全统计，自80年代以来，日本报道魔芋的科技文献有332篇，其中速报86篇；实用
24、新型公报17篇；公开特许公报145篇；特许公报84篇；国防专利29项。这些科技成果涉及了魔芋的栽培管理、育种、病虫害防治、物化性能、普粉加工、精粉分离、葡甘聚糖纯化、分析测试技术以及各种有关魔芋产品的加工、设计及机械设备等。可见，日本国魔芋资源开发如日中天。而我国在栽培、利用魔芋资源方面均先于日本，我国是魔芋原产国之一，栽培利用历史悠久，进入80年代以来，随着魔芋各种新用途的不断开拓，魔芋大面积人工栽培与加工利用逐步兴盛。只是时至今日，中国魔芋资源的开发仍以外销产品为主，国内对魔芋产品的消费水平较低，但随着人们生活水平的不断提高，国内对魔芋产品的消费量将与日俱增。国外迄今为止，魔芋的栽培利用主
25、要集中于热带地区的亚洲国家，欧美国家仅有少量研究。80年代以来，国内外对魔芋开创性地研究，使魔芋的食用、药用、工业价值大为提高，经济效益也越来越显著。但纵观全局，随着植物组织培养技术的不断成熟，这一技术已越来越广泛地应用到许多植物的快速繁殖中，有关魔芋组织培养研究也时有报道。然而，利用这一技术进行魔芋种芋快速繁殖的相关研究还比较少。关于魔芋组织培养的报道还仅限于实验阶段，许多单位已顺利地从不同的外植体诱导出了魔芋试管苗，试管苗通过移栽也获得了小批量的原原种，原原种下大田的技术也正处在研究阶段。目前已有许多科研机构、大专院校及大型企业开始致力于如何将这一科研成果运用于工厂化生产的研究，我们天池山
26、魔芋研究中心正集中大批人力物力进行这一项目的科研攻关，另外也将今后魔芋研究和开发利用的重点集中在高产优质（KMG含量高）品种的选育和快速繁殖以及种源繁殖体系的建立。有望近期取更大的进展。2.2.2优质魔芋组培快繁技术研究进展1魔芋无菌无性系的建立。2 魔芋组织的增殖培养。3 魔芋的生根培养与植株再生。4 魔芋的瓶苗移栽。2.3项目的关键技术或难点1）初代培养物的建立魔芋组织培养的成功，首先在于初代培养，亦即能否建立起无菌外植体。在一个周围严重污染的环境中，要千方百计保证培养材料和培养基的无菌状态及培养室的良好清洁条件，这也是最基本的前提。要成功地建立初代培养，首先，一定要选择好合适的作物种类、
27、品种及培养的部位；其次，一定要选择好合适的培养基，激素及其他添加物；还要注意掌握适宜的培养条件。要建立初代培养，操作技术也是十分重要的，因此在接种时，动作要熟练，操作要快，所用时间缩短也可能就避免了污染。2）污染的防止 魔芋接种材料的选择及防止污染：选用的魔芋材料要是健康不带病斑的，在接种之前先用冷藏的方法使部分细菌冻死，组织培养中对材料只能进行表面灭菌，而对材料内部所带的细菌和霉菌等杂菌往往难以对付，为此可在培养基中添加抗生素来解决。 人为污染的防止：在培养过程中，培养材料附近经常会出现粘液关液体或混浊的水迹状痕迹、或有泡沫的发酵状情况。这大多是细菌性污染，主要是由于使用了未消毒好的工具及人
28、们呼吸时排出的细菌所引起的，有时也因人们用手接触了材料或器皿边缘所致。为此，接种前应很好地将手用肥皂洗净后，再用70%洒精擦洗双手，并需及时剪除指甲。在工作中特别要注意避免交叉感染，用具被手污染后，又接着使材料污染，因此双手必须清洁，工具则用一次即需消毒一次。工作人员呼吸所产生的污染，主要是接种是说话或咳嗽所引起的，因此，操作时严禁谈话，并应戴上口罩，穿工作服，戴工作帽。有时在培养基上还会出现黄、白、黑等不同颜色的霉菌，这是真菌性污染，主要是由于接种室空气污染造成的，故也应做好这方面的消毒灭菌工作。污染中特别注意一种呈乳白色细菌的污染，这种细菌为芽孢杆菌。它外被荚膜，耐高温，一般消毒剂难以杀死
29、，若出现应严格灭菌，清洗用具，更换消毒酒精等。3)防止外植体褐变：魔芋材料很容易褐变，甚至接种后会使培养基变褐，严重影响外植体的生长、分化、成为组织培养中的一大障碍。（1）褐变是由于组织中的多酚氧化酶被激活，使细胞的代谢发生变化，酚类物质被氧化后产生醌类物质，这类物质呈棕褐色，它们会逐渐扩散至培养基中，抑制其他酶的活性，毒害培养的外植体材料：褐变的因素是复杂的，随植物种类、基因型、外植体部位培养基成分、培养时间过长及生理状况等的不同而危害的程度也有区。（2）褐变的防止：、选择适当的外植体和培养条件：外植体应有较强的分生能力，在最适宜的细胞脱分化和再分化的培养条件下，使外植体处于旺盛的生长状态，
30、便可大大减轻褐变。选择适宜的无机盐成分、蔗糖浓度和激素水平也是十分重要的。适宜的温度和及时转接培养也可显著减少材料的褐变。初期暗培养也有降低褐变的作用。、抗氧化剂的作用：在培养基中加入抗坏血酸、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）、半胱氨酸、柠檬酸、活性炭等抗氧化剂，或用抗氧化剂进行材料的预处理或预培养，可预防醌类物质的确良形成。、连续转移：对于易褐变的材料，进行连续转移，可以减轻醌类物质对培养物的毒害作用。2.4研究的实验设计方案取材配置培养基灭菌材料处理与脱毒组织培养病毒检测驯化移栽3项目所需要条件3.1魔芋组织培养所需营养分为四大类：无机营养、有机营养、植物生长调节物质、能源和渗透压。无机营养中又分
31、为大量元素和微量元素两类，其中大量元素除碳（C）、氢（H）、氧（O）、外，还有氮（N）、磷（P）、钾（K）、钙（Ca）、镁（Mg）和硫（S）等元素。它们影响着植物组织培养中酶的活性和方向，决定着新陈代谢的过程，微量元素包括铁(Fe)、铜(Cu)、钼(Mo)、锌(Zn)、钠(Na)、锰(Mn)、钴(Co)、硼(B)和碘(I)等。有机营养包括维生素类、氨基酸、有机添加物、琼脂、活性炭五类。其中维生素在植物材料的生长中起着重要作用，因为它们以辅酶的形式参与生物催化剂酶系的活动，参与细胞的蛋白质、脂肪、糖代谢等重要生命活动。氨基酸：有甘氨酸、丝氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、水解酷蛋白（CH）和水解乳蛋白（
32、LH）等，为重要的有机氨源。植物生长调节物质：是培养基中的关键物质，对植物组织培养起着重要而明显的调节作用。植物生长调节物质包括生长素（如：2,4-D、NAA、IBA、IAA等）、细胞分裂素（如：KT、6-BA、ZT、2ip、ABA、CEDP等）及赤霉素等。通常认为生长素和细胞分裂素的比值大时有利于根的形成；比值小时，则有利于芽的形成。能源和渗透压：通常植物本身能进行光合作用，产生糖类，不需要从外部供给糖，但在植物组织培养进行异养的状况下，大多不能进行光合作用来合成糖类，因此必须在培养基中添加糖，作为碳素来源和能量物质，同时糖对保持培养基的渗透压也有一定的作用。3.2环境条件1)温度温度是植物组织培养中成功的重要条件。在植物组织培养中大多采用最适温
