1、整理分子生物学11题库核酸的生物合成一、试题题目(一)名词解释 1中心法则 2半保留复制 3DNA聚合酶 4解旋酶 5拓扑异构酶 6单链DNA结合蛋白 7DNA连接酶 8引物酶及引物体 9复制叉 10复制眼、结构 11.前导链 12冈崎片段、后随链 13半不连续复制 14逆转录 15逆转录酶 16突变 17，点突变 18结构畸变 19诱变剂 20修复 21光裂合酶修复 22切除修复 23重组修复 24诱导修复和应急反应 25DNA重组 26基因工程 27转录 28模板链(反意义链) 29非模板链(编码链) 30不对称转录 31启动子 32转录单位 33内含子 34外显子 35转录后加工 36核
2、内不均一RNA 37RNA复制(二)问答题 1试述Meselson和Stahl关于DNA半保留复制的证明实验。 2描述大肠杆菌DNA聚合酶I在DNA生物合成过程中的作用。 3试述DNA复制过程，总结DNA复制的基本规律。 4什么是逆转录?病毒中的单链RNA如何利用逆转录酶合成双链DNA，并整合到寄主细胞的基因组中? 5DNA的损伤原因是什么? 6简述基因工程的基本操作步骤及其应用意义。7试比较转录与复制的区别。8. 试列表比较常染色质DNA与端粒DNA的复制。9. 将大肠杆菌从37度转移到42度时，其基因表达如何变化？10.简述原核生物转录作用的过程。11.试比较真核生物与原核生物mRNA转录
3、的主要区别。(三)填空题 1Meselson-Stahl的DNA半保留复制证实试验中，区别不同DNA用_方法。分离不同DNA用_方法，测定DNA含量用_方法， 2DNA聚合酶I(Ecoli)的生物功能有_、_和_作用。用蛋白水解酶作用DNA聚合酶I，可将其分为大、小两个片段，其中_片段叫Klenow片段，具有_和_作用，另外一个片段具有_活性。 3在Ecoli中，使DNA链延长的主要聚合酶是_，它由_亚基组成。DNA聚合酶主要负责DNA的_作用。 4真核生物DNA聚合酶有_，_，_，_。其中在DNA复制中起主要作用的是_和_。 5解旋酶的作用是_，反应需要提供能量，结合在后随链模板上的解旋酶，
4、移动方向_，结合在前导链的rep蛋白，移动方向_。 6在DNA复制过程中，改变DNA螺旋程度的酶叫_。 7SSB的中文名称_，功能特点是_。 8DNA连接酶只能催化_链DNA中的缺口形成3,5- 磷酸二酯键，不能催化两条链间形成3,5- 磷酸二酯键，真核生物DNA连接酶以_作为能源，大肠杆菌则以作为能源，DNA连接酶在DNA_、_、_中起作用。 9DNA生物合成的起始，需要一段_为引物，引物由_酶催化完成，该酶需与些特殊_结合形成_复合物才有活性。 10DNA生物合成的方向是_，冈奇片段合成方向是_。 11由逆转录酶所催化的核酸合成是以_为模板，以_为底物，产物是_。 12DNA突变主要分为_
5、和_两大类。 13诱变剂大致分为_、_、_三种类型。 14RNA生物合成中，RNA聚合酶的活性需要_模板，原料是_、_、_、_。 15大肠杆菌RNA聚合酶为多亚基酶，亚基组成_，称为_酶，其中_亚基组成称为核心酶，功能_；亚基的功能_。 16用于RNA生物合成的DNA模板链称为_或_。 17RNA聚合酶沿DNA模板_方向移动，RNA合成方向_。 18真核生物RNA聚合酶共三种_、_、_，它们分别催化_、_和 _的生物合成。 19某DNA双螺旋中，单链5 ATCGCTCGA 3为有意义链，若转录mRNA，其中碱其排列顺序为5 _ 3。 20；能形成DNA-RNA杂交分子的生物合成过程有_、_。形
6、成的分子基础是_。 21DNA复制中，_链的合成是_的，合成的方向和复制叉移动方向相同；_链的合成是_的，合成的方向与复制叉方向相反。 22一条单链DNA(+)的碱基组成A2l、G29，复制后，RNA聚合酶催化转录的产物的碱基组成是_。 23RNA聚合酶中能识别DNA模板上特定起始信号序列的亚基是_ ，该序列部位称_。 24在细菌细胞中，独立于染色体之外的遗传因子叫_。它是一种_状双链 DNA，在基因工程中，它做为_。 25hnRNA加工过程中，在mRNA上出现并代表蛋白质的DNA序列叫_。不在mRNA上出现，不代表蛋白质的DNA序列叫_。(四)选择题1DNA以半保留方式复制，如果一个具有放射
7、性标记的双链DNA分子，在无放射性标记的环境中经过两轮复制。其产物分子的放射性情况如何( )。其中一半没有放射性 都有放射性半数分子的两条链都有放射性 都不含放射性2关于DNA指导下的RNA合成的下列论述除了哪一项都是正确的( )。 只有存在DNA时，RNA聚合酶才能催化磷酸二酯键的形成。 在合成过程中，RNA聚合酶需要一个引物。 RNA链的延长方向是5 3。 在多数情况下，只有一条DNA链作为模板。 3下列关于DNA和RNA聚合酶的论述哪一种是正确的( ): RNA聚合酶用核苷二磷酸而不是核苷三磷酸来合成多核苷酸链 RNA聚合酶需要引物，并在生长的多核苷酸链的5端加上核苷酸 DNA聚合酶能在
8、核苷酸链的两端加上核苷酸 所有RNA和DNA聚合酶只能在生长的多核苷酸链的3端加上核苷酸。 4修补胸腺嘧啶有数种方法，其中之一是用DNA连接酶、DNA聚合酶等催化进行，试问这些酶按下列哪种顺序发挥作用( )： DNA连接酶DNA聚合酶核酸内切酶 DNA聚合酶核酸内切酶DNA连接酶 核酸内切酶DNA聚合酶DNA连接酶 核酸内切酶DNA连接酶DNA聚合酶 5DNA聚合酶在分类时属于六大酶类中的哪一种( )。 合成酶类 转移酶类 裂解酶类 氧化还原酶类 6催化真核生物mRNA生物合成的RNA聚合酶对-鹅膏蕈碱( )。 1不敏感 敏感 高度敏感 低度敏感 7DNA复制中RNA引物的主要作用是( )。
9、引导合成冈奇片段 作为合成冈奇片段的模板 为DNA合成原料dNTP提供附着点 激活DNA聚合酶 8下列关于单链结合蛋白的描述哪个是错误的( )。 与单链DNA结合防止碱基重新配对 保护复制中单链DNA不被核酸酶降解 与单链DNA结合，降低双链DNA Tm值 以上都不对 9紫外线对DNA的损伤主要是( )。 引起碱基置换 形成嘧啶二聚体 导致碱基缺失 发生碱基插入 l0有关转录的错误描述是( )。 只有在DNA存在时，RNA聚合酶方可催化RNA 需要NTP做原料 RNA链的延伸方向是3 5 RNA的碱基需要与DNA互补 11关于逆转录作用的错误叙述是( )。 以RNA为模板合成DNA 需要一个具
10、有3-OH末端的引物 以5 3方向合成，也能3 5方向合成 以dNTP为底物 12体内参与甲基化反应的直接甲基供体是( )。 Met S腺苷甲硫氨酸甲酰甲硫氨酸 Met-tRNA 13关于大肠杆菌DNA聚合酶I的下列论述哪些是正确的( )。 它是一个金属酶 它能从3-OH端逐步水解单股DNA链 它在双螺旋区有5 3核酸酶活性 它需要DNA模板上的游离5-OH ； 14试将下列DNA复制的有关步骤按正确的顺序排列( )。 DNA指导的RNA聚合酶合成RNA引物 解旋蛋白打开DNA双链 DNA指导的DNA聚合酶合成的DNA互补链 DNA连接酶连接DNA片段 核酸内切酶切除RNA引物 15下列关于核
11、不均一RNA(hnRNA)的论述哪些是正确的( )。 它们的寿命比大多数细胞液的RNA为短 在3端有一个多聚腺苷酸(polyA)长尾，是由DNA编码的 它们存在于细胞核的核仁外周部分 链内核苷酸不发生甲基化反应 有大约四分之三成份将被切除棹，以形成mRNA16DNA复制的精确性远高于RNA的合成，这是因为( )。 新合成的DNA链与模板链形成了双螺旋结构，而RNA链不能 DNA聚合酶有3 5外切酶活力，而RNA聚合酶无相应活力脱氧核苷酸之间的氢键配对精确性高于脱氧核苷酸与核苷酸之间的配对DNA聚合酶有5 3外切酶活力，RNA聚合酶无此活性17有关逆转录酶的论述哪些是正确的( )。具有依赖于RN
12、A的DNA聚合酶活性具有依赖于DNA的DNA聚合酶活性不具备5 3或3 5核酸外切酶活性催化合成反应时，需要模板及3-OH引物18下列哪几种突变最可能是致命的( )。腺嘌呤取代胞嘧啶 胞嘧啶取代尿嘧啶缺失三个核苷酸 插入二个核苷酸19Crick于1958年提出的中心法则包括( )。DNA复制 RNA复制 转录 逆转录 翻译20DNA生物合成中需要以下哪些酶参与( )。引物酶 解旋酶 解链酶 DNA连接酶 DNA聚合酶21RNA聚合酶的核心酶由以下哪些亚基组成( )。 22RNA生物合成的终止需要以下哪些成分( )。终止子 因子 因子 dna蛋白 亚基23RNA与DNA生物合成相同的是( )。需
13、RNA引物 以3 5方向DNA为模板 两条模板链同时合成新链生成方向53 形成3,5- 磷酸二酯键24DNA的切除修复需要以下哪几种酶参与( )光裂合酶 核酸内切酶 DNA聚合酶I DNA连接酶 RNA聚合酶25目的基因的制备方法有( )DNA复制 RNA转录 mRNA逆转录 化学合成法 限制性内切酶切取26真核细胞mRNA的加工修饰包括以下内容( )。切除内含子，连接外显子 5端接上“帽子” 3端接上CCA 3端添加多聚(A)尾 碱基甲基化27. 指导合成蛋白质的结构基因大多数是( )单考贝顺序 中度重复顺序高度重复顺序回文顺序 以上都正确 28.下面哪些因素可防止DNA上的一个点突变表现在
14、蛋白质的一级结构? ( )DNA的修复作用 密码的简并性 校正tRNA的作用核糖体对mRNA的校正 以上都正确 29.紫外线照射对DNA分子的损伤主要是( )碱基替换 磷酸酯键断裂 碱基丢失形成共价连接的嘧啶二聚体 碱基插入 30. 能编码多肽链的最小DNA单位是( )顺反子 操纵子 启动子 复制子 转录子 (五)是非题 1大肠杆菌DNA生物合成中，DNA聚合酶I主要起聚合作用。( ) 2原核生物DNA的合成是单点起始，真核生物为多点起始。( ) 3DNA生物合成不需要核糖核苷酸。( ) 4以一条亲代DNA(3 5)为模板时，子代链合成方向5 3，以另一条亲代DNA链 5 3)为模板时，子代链
15、合成方向3 5。( ) 5在DNA生物合成中，半保留复制与半不连续复制指相同概念。( ) 6在DNA合成终止阶段由DNA聚合酶切除引物。( ) 7目前发现的逆转录酶大部分来自于病毒粒子。( ) 8依赖DNA的RNA聚合酶由紧密结合的2亚基组成，其中因子具有识别起始部位和催化RNA合成的功能。( ) 9RNA的生物合成不需要引物。( ) 10大肠杆菌的mRNA在翻译蛋白质之前不需要加工。( ) 11DNA聚合酶I切除引物RNA属3 5外切酶作用，切除错配的核苷酸属5 3外切酶作用。( ) 12冈崎片段的合成需要RNA引物。( ) 13转录时，RNA聚合酶的核心酶沿模板DNA向其5端移动。( )
16、14RNA不能做为遗传物质。( ) 15以单链DNA为遗传载体的病毒，DNA合成时一般要经过双链的中间阶段。( ) 16亚硝酸做为一种有效诱变剂，是因为它直接作用于DNA，使碱基中的氨基氧化生成羰 (酮)基，造成碱基配对错误。( ) 17大肠杆菌DNA聚合酶只起聚合作用，不能校对错配碱基。( ) 18RNA也能以自身为模板合成一条互补的RNA链。( )19真核生物的各种RNA都必须经过剪切、修饰才能成熟。( )20.真核基因外显子是指保留在成熟RNA中的相对应的序列，不管它是否被翻译。( ) 二、参考答案(一)名词解释1中心法则(central dogma)：生物体遗传信息流动途径。最初由Cr
17、ick(1958)提出，经后人的不断补充和修改，现包括反转录和RNA复制等内容。 2半保留复制(简称复制)（semiconservative replication)：亲代双链DNA以每条链为模板，按碱基配对原则各合成一条互补链，这样一条亲代DNA双螺旋，形成两条完全相同的子代DNA螺旋，子代DNA分子中都有一条合成的“新”链和一条来自亲代的旧链，称为半保留复制。 3DNA聚合酶(DNA polymerase)：指以脱氧核苷三磷酸为底物，按5 3方向合成DNA的一类酶，反应条件：4种脱氧核苷三磷酸、Mg+、模板、引物。DNA聚合酶是多功能酶，除具有聚合作用外，还具有其它功能，不同DNA聚合酶所
18、具有的功能不同。 4解旋酶(helicase)：是一类通过水解ATP提供能量，使DNA双螺旋两条链分开的酶，每解开一对碱基，水解2分子ATP。 5拓扑异构酶(topoisomerase)：是一类引起DNA拓扑异构反应的酶，分为两类：类型I的酶能使DNA的一条链发生断裂和再连接，反应无需供给能量，类型的酶能使DNA的两条链同时发生断裂和再连接，当它引入超螺旋时，需要由ATP供给能量。 6单链DNA结合蛋白(single-strand binding protein ,SSB)：是一类特异性和单链区DNA结合的蛋白质。它的功能在于稳定DNA解开的单链，阻止复性和保护单链部分不被核酸酶降解。 7DN
19、A连接酶(DNA ligase)：是专门催化双链DNA中缺口共价连接的酶，不能催化两条游离的单链DNA链间形成磷酸二酯键。反应需要能量。 8引物酶及引发体(primase primosome)：以DNA为模板，以核糖核苷酸为底物，在DNA合成中，催化形成RNA引物的酶称为引物酶及引物体。大肠杆菌的引物酶单独没有活性，只有与其它蛋白质结合在一起，形成一个复合体，即引发体才有生物活性。 9复制叉(replication fork)：复制中的DNA分子，末复制的部分是亲代双螺旋，而复制好的部分是分开的，由两个子代双螺旋组成，复制正在进行的部分呈丫状叫做复制叉。 10复制眼结构：在一段DNA上，正在复
20、制的部分形成眼状结构。复制眼在环状DNA上形成的结构与希腊字母相象，所以叫结构。 11前导链(1eading strand)：在DNA复制过程中，以亲代链(3 5为模板时，子代链的合成 (5 3)是连续的这条能连续合成的链称前导链。 12冈崎片段(Okazaki fragment)、后随链(1agging strand)：在DNA复制过程中，以亲代链(5 3)为模板时，子代链的合成不能以3 5方向进行，而是按5 3方向合成出许多小片段，因为是冈崎等人研究发现，因此称冈崎片段。由许多冈崎片段连接而成的子代链称为后随链。 13半不连续复制(Semidiscontinuous replication
21、)：在DNA复制过程中，一条链的合成是连续的，另一条链的合成是不连续的，所以叫做半不连续复制。 14逆转录(reverse transcription)：以RNA为模板合成DNA的过程。 15逆转录酶(reverse transeriptase)：催化以RNA为模板合成DNA的逆转录过程的酶。 Temin(1960)首次从劳氏肉瘤病毒中发现。逆转录酶具有多种酶活性：依赖RNA的DNA聚合酶活性；依赖DNA的DNA聚合酶活性，RNA水解酶活性，DNA合成方向5 3。合成时需要引物与模板。 16突变(mutation)：基因组DNA顺序上的任何一种改变都叫做突变。分点突变和结构畸变。 17点突变(
22、Point mutation)： 是指一个或几个碱基对被置换(replacement)，这种置换又分两种形式：转换(transition)一-指用一个嘌呤碱置换另一个嘌呤碱，一个嘧啶碱置换另一个嘧啶碱；颠换(transversion)一-指用嘌呤碱置换嘧啶碱或用嘧啶碱置换嘌呤碱。 18结构畸变：基因中的缺口、或插入(insertion)或缺失(deletion)某些碱基造成移码突变使 DNA的模板链失去功能。 19诱变剂(mutagen)：使基因组发生突变的物理、化学、生物因素叫诱变剂。 20修复(repair)：除去DNA上的损伤，恢复DNA的正常结构和功能是生物机体的一种保护功能。 21光
23、裂合酶修复(又称光复活)(photoreactivation)：可见光将光裂合酶激活，它分解DNA上由紫外线照射而形成的嘧啶二聚体，使它们恢复成两个单独的嘧啶碱。 22切除修复(excision repair)：在一系列酶的作用下，将DNA分子中受损伤部分切除，以互补链为模板，合成出空缺的部分，使DNA恢复正常结构的过程。 23重组修复(recombination repair)：DNA在有损伤的情况下也可以复制，复制时子代链跃过损伤部位并留下缺口，通过分子间重组，从完整的另一条母链上将相应的核苷酸序列片段移至子链缺口处，然后用再合成的多核苷酸的序列补上母链的空缺，此过程称重组修复。 24诱导
24、修复和应急反应(induction repair and SOS response)(SOS修复)：由于DNA受到损伤或复制系统受到抑制所诱导引起的一系列复杂的应急效应，称为应急反应。 SOS反应主要包括两个方面：DNA损伤修复(SOS修复或称诱导修复)和诱变效应。SOS修复是一种易出差错的修复过程，虽能修复DNA的损伤而避免死亡。但却带来高的变异率。 25DNA重组(recombination)：DNA重组是指在真核生物减数分裂过程中，细菌细胞的转化中、病毒转导中等发生的DNA片段的交换或插入。 26基因工程(又称基因重组技术)(gene/genetic engineering)：是将外源基
25、因经过剪切加工，再插入到一个具有自我复制能力的载体DNA中，将新组合的DNA转移到一个寄主细胞中，外源基因就可以随着寄主细胞的分裂进行繁殖，寄主细胞也借此获得外源基因所携带的新特性。 27转录(transcription)：由依赖于DNA的RNA聚合酶催化，以DNA的一条链的一定区段为模板，按照碱基配对原则，合成一条与DNA链互补的RNA链的过程。 28模板链(template strand)又称负(-)链，反意义链(antisense strand)：转录过程中用作模板的这条DNA链，称模板链。 29非模板链(nontemplate strand)又称正(+)链，编码链(coding str
26、and)，有意义链(sense strand)：与模板链互补的那条DNA链，称非模板链。 30不对称转录(asymmetric transcription)：因为RNA的转录只在DNA的任一条链上进行，所以把RNA的合成叫做不对称转录。 31启动子(promoter)：DNA链上能指示RNA转录起始的DNA序列称启动子。 32转录单位(transcription unit)：RNA的转录只在DNA的一个片段上进行，这段DNA序列叫转录单位。 33内含子(intron)：真核生物基因中，不为蛋白质编码的、在mRNA加工过程中消失的DNA序列，称内含子。 34外显子(exon)：真核生物基因中，在
27、mRNA上出现并代表蛋白质的DNA序列，叫外显子。 35转录加工(post-transcriptional processing)：细菌中很多RNA分子和几乎全部真核生物的RNA在合成后都需要不同程度的加工，才能形成成熟的RNA分子，这个过程叫转录后加工。 36核内不均一RNA(hnRNA)：是真核生物细胞核内的mRNA前体分子，分子量较大，并且不均一，含有许多内含子。 37RNA的复制(RNA replication)：某些病毒RNA既可以做为模板合成病毒蛋白质又可在 RNA复制酶(RNA replicase)的催化下，以自身RNA为模板，合成互补的RNA新链，合成方向53，这一过程叫RNA
28、复制。(二)问答题 l提示：将Ecoli放入以15NH4Cl为唯一氮源的培养基中连续培养十几代，使所有DNA分子标记上15N；将15N标记的Ecoli再放入普通的14N培养基中培养，在细胞生长一代、二代 、 、n代的时间间隔内采样；采用氯化铯密度梯度离心分离DNA，并用紫外照相技术检测DNA所在位置；结果如下：其结果确切地证明DNA以半保留方式复制。 2Ecoli DNA聚合酶I是多功能酶，具有：DNA聚合酶活性，能按模板要求，以5 3方向合成DNA，在DNA复制中，常用以填补引物切除后留下的空隙；53外切酶活性，DNA复制后期，用于切除RNA引物；35外切酶活性，用以校对复制的正确性，当出现错配碱基时，切除错配碱基直到正确配对为止；DNA聚合酶I不是DNA复制和校正中的主要聚合酶，它的功能主要是修复。 3以Ecoli为例，DNA复制过程分三个阶段；起始：从DNA上控制复制起始的序列即起始点开始复制，形成复制叉，复制方向多为双向，也可以是单向，若以双向进行复制，两个方向的复制速度不一定相同。由于DNA聚合酶不能从无到有合成新链，所以DNA复制需要有含3
