1、高考生物四海八荒易错集专题 生物技术实践专题16 生物技术实践1下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。成分蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4指示剂琼脂含量(g)10.05.05.02.00.212.0将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL(1)从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于_。(2)若根据用途划分，该培养基属于_(填“选择”或“鉴别”)培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌，培养基的营养成分必需怎样更改？_，并用_作为指示剂。(3)在微生物培养的过程中，为防止杂菌污染，需要对培养基和培养皿进行_；操作者的双手需要进行清洗和_
2、。(4)图1和图2是培养某细菌的结果图，其对应的接种方法分别是：_和_，这两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细胞繁殖所形成的_。图1所用的接种方法可用来对活菌进行计数。此外，测定微生物数目的另一种方法是_。 (3)培养微生物时，培养基和培养皿需要灭菌，操作者双手需要进行消毒。(4)图1采用的是稀释涂布平板法，图2采用的是平板划线法。单个微生物细胞繁殖所形成的细胞群叫菌落。【答案】(1)分解者 (2)鉴别将蛋白胨改成尿素酚红(3)灭菌消毒 (4)稀释涂布平板法平板划线法菌落显微镜直接计数法2纤维素是自然界分布最广、含量最多的一种多糖，马、牛等食草动物具有消化纤维素的能力，请回答有关问题。(1
3、)与培养土壤中分离的纤维素分解菌相比，培养马胃中分离出的纤维素分解菌要调整培养基的pH，还要保证_条件。配制好的培养基培养前应采用_法进行灭菌处理。从功能上看，该培养基是_培养基。(2)给锥形瓶内的培养液接种时应在酒精灯火焰附近进行，防止_污染培养基。对无菌操作时用到的玻璃器皿要用_的方法彻底灭菌。(3)某同学使用划线法分离纯化菌株，经一段时间培养，发现有的线上长满了菌，有的线上无菌落，造成这种情况的原因可能是划线操作时_。(4)将筛选培养的纤维素分解菌破碎后，用_的方法可将纤维素酶溶液与其他细胞成分分离开。纤维素酶能催化纤维素分解为还原性的葡萄糖，根据这一特性，可用_试剂判断提取物是否起到了
4、降解纤维素的作用。【答案】(1)无氧高压蒸汽灭菌选择(2)杂菌干热灭菌 (3)接种环灼烧后未冷却(4)离心斐林3微生物在人们的生活中无处不在，请结合所学知识回答下列问题：(1)在制作果酒过程中，发挥作用的微生物是酵母菌。在制作果酒前期，装置中的酵母菌应该处于_(填“有氧”或“无氧”)条件下，同时将温度控制在_ 左右，有利于酵母菌的繁殖。(2)制作果醋所需要的微生物是_，在制作果酒的酒精发酵旺盛阶段，加入该微生物能否将果汁中的糖转化为醋酸？_，请说明理由：_。(3)泡菜的制作离不开乳酸菌，可用培养基培养大量纯净的乳酸菌菌种。培养乳酸菌的培养基一般含有_、_、水和无机盐等营养物质，同时还要满足_等
5、培养条件。若对获得的乳酸菌菌种进行临时保存，可将菌种接种到试管的_培养基上，在合适的温度下保存。 (3)培养微生物的培养基成分一般含有碳源、氮源、水和无机盐。【答案】(1)有氧20(2)醋酸菌不能醋酸菌是好氧细菌，而果酒发酵是无氧环境(醋酸菌在有氧、温度为3035 条件下才能将糖转化为醋酸，而酒精发酵条件为无氧、温度为1825 )(合理即可)(3)碳源氮源适宜的pH和温度、无氧固体斜面4丁香油是从丁香花中提取的一种挥发性较强的植物芳香油。下图是制备丁香油的流程图，请据图回答下列相关问题。(1)提取丁香油采用的方法是_。丁香花作为提取丁香油的原料时，选用_(填“鲜”或“干”)丁香花更佳。(2)过
6、程中加入的物质是_，作用是增加盐的浓度，使分层更明显。然后用_分离油层。(3)过程中加入的是_，目的是吸收油层中的水分，再通过_除去固体Na2SO4得到丁香油。(4)欲实现丁香种苗的快速繁殖，可采用_技术，该技术所用的MS培养基中通常含有_，以启动细胞分裂、脱分化和再分化。【解析】(1)丁香油有很强的挥发性，因此采用水蒸气蒸馏法提取。丁香油易挥发，鲜丁香花含有丁香油更多，故选用鲜丁香花提取丁香油更佳。(2)加入NaCl可以增加盐的浓度，使分层更明显，然后用分液漏斗将油层和水层分开。(3)加入无水Na2SO4，吸收油层中的水分，放置过夜，再通过过滤除去固体Na2SO4，从而得到丁香油。(4)利用
7、植物组织培养技术可达到种苗快速繁殖的目的，植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。【答案】(1)水蒸气蒸馏法鲜(2)NaCl分液漏斗(3)无水Na2SO4过滤(4)植物组织培养植物激素(生长素和细胞分裂素)易错起源1、微生物的利用和传统发酵技术例1(2016全国乙卷)空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：配制培养基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；制作无菌平板；设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；将各组平板置于37 恒温箱中培养一段
8、时间，统计各组平板上菌落的平均数。回答下列问题：(1)该培养基中微生物所需的氮来源于_。若要完成步骤，该培养基中的成分X通常是_。(2)步骤中，实验组的操作是_。(3)若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了_现象。若将30(即366)个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法_(填“正确”或“不正确”)。【答案】(1)牛肉膏、蛋白胨琼脂(2)将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间(3)污染不正确【变式探究】(2016全国丙卷)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用
9、固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题： (1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用_对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是_。(2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有_和_。分离纯化时应挑选出_的菌落作为候选菌。(3)乳酸菌在20 长期保存时，菌液中常需要加入一定量的_(填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”)。【答案】(1)无菌水泡菜滤液中菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落(2)鉴别乳酸菌中和产生的乳酸(或酸)具有透明圈(3)甘油【变式探究】(2016全国甲卷)苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的。回答下列问题：(1)酵母菌的呼吸代谢途
10、径如图所示。图中过程和是苹果醋生产的第一阶段，在酵母菌细胞的_中进行，其产物乙醇与_试剂反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验；过程在酵母菌细胞的_中进行。与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度_。(2)第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，根据醋酸杆菌的呼吸作用类型，该过程需要在_条件下才能完成。(3)在生产过程中，第一阶段和第二阶段的发酵温度不同，第一阶段的温度_(填“低于”或“高于”)第二阶段的。(4)醋酸杆菌属于_核生物，其细胞结构中_(填“含有”或“不含有”)线粒体。【解析】(1)图中过程和是酵母菌无氧呼吸产生乙醇的过程，无氧呼吸的场所是细胞质基
11、质。乙醇可用酸性重铬酸钾试剂检测，颜色由橙色变为灰绿色。过程为有氧呼吸的第二和第三阶段，场所为线粒体。在有氧条件下酵母菌进行有氧呼吸，产生更多的能量供酵母菌繁殖利用，故有氧条件下酵母菌的繁殖速度更快。(2)醋酸杆菌是好氧型细菌，因此，在醋酸杆菌作用下，将乙醇转变为醋酸的过程需要在有氧条件下才能完成。(3)在生产过程中，第一阶段酵母菌产生乙醇的适宜温度为1825 ，第二阶段醋酸杆菌产生醋酸的适宜温度为3035 ，第一阶段的温度低于第二阶段的。(4)醋酸杆菌属于原核生物，原核细胞中的细胞器只有核糖体一种，不含线粒体。【答案】(1)细胞质基质重铬酸钾线粒体快(2)有氧(3)低于(4)原不含有【名师点
12、睛】1理清微生物的培养的基本技术(1)培养基的制备计算称量溶化灭菌倒平板(2)无菌技术消毒：煮沸消毒法、巴氏消毒法以及使用化学试剂进行消毒。灭菌：对培养基进行灭菌，常采取高压蒸汽灭菌；对接种环灭菌采取灼烧灭菌；对玻璃器皿灭菌采取干热灭菌。(3)微生物的纯化技术平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将其分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而在培养基表面形成单个菌落。(4)倒平板操作：待培养基冷却至50_左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。【锦囊妙计，战胜自我】识
13、记传统发酵食品技术的有关知识点食品菌种呼吸类型原理温度果酒酵母菌无氧无氧呼吸产生酒精1825_果醋醋酸菌需氧糖(酒精)醋酸3035_腐乳毛霉等需氧蛋白酶、脂肪酶水解蛋白质、脂肪1518 泡菜乳酸菌无氧无氧呼吸产生乳酸易错起源2、生物材料中有效成分的提取例2回答与胡萝卜素有关的问题：(1)胡萝卜含有的胡萝卜素中，最主要的是_(填“胡萝卜素”、“胡萝卜素”或“胡萝卜素”)，该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子_，后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症，该疾病称为_，胡萝卜素是_(填“挥发性”或“非挥发性”)物质。(2)工业生产上，用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时，_(填“需要”或“不需要”)将新鲜
14、的岩藻干燥。(3)现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的_作为胡萝卜素的萃取剂，不选用另外一种的理由是_。【答案】(15分)(1)胡萝卜素维生素A夜盲症非挥发性(每空2分，共8分)(2)需要(2分)(3)乙酸乙酯(2分)萃取胡萝卜素的有机溶剂应不与水混溶，而乙醇为水溶性有机溶剂(3分，其他合理答案也给分)【名师点睛】1植物有效成分提取的3种方法的比较提取方法实验原理适用范围水蒸气蒸馏法利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油压榨法通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料中芳
15、香油的提取有机溶剂萃取使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发溶剂后就可获得芳香油适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分溶解在有机溶剂中【锦囊妙计，战胜自我】识记植物有效成分提取的实验流程(1)提取玫瑰精油的实验流程鲜玫瑰花清水(14)水蒸气蒸馏油水混合物分离油层除水玫瑰油。(2)提取橘皮精油的实验流程石灰水浸泡橘皮漂洗压榨过滤静置再次过滤橘皮油。(3)提取胡萝卜素的实验流程胡萝卜粉碎干燥萃取过滤浓缩胡萝卜素。1已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：(1)显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用_染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用
16、_(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以_为碳源的固体培养基进行培养。(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用_直接计数；若要测定其活菌数量，可选用_法进行计数。(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35 、40 、45 温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg，则上述三个温度中，_条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕_设计后续实验。 (4)降解等量的油脂，需要的酶量越多，说明此温度下的酶的
17、活力越小。所以三种温度中45 下酶的活力最小。从三种温度下的实验结果可知，40 下酶的活力最大，所以要想测定该酶的最适温度，应围绕该温度设计不同温度梯度，进行后续实验。【答案】(1)苏丹(或苏丹)萃取法(2)油脂(3)血细胞计数板稀释涂布平板(4)45402受中医古籍肘后备急方中将青蒿“绞汁”用药的启发，屠呦呦采用低温提取的方法，从黄花蒿中直接提取得到青蒿素，是治疗疟疾的特效药。青蒿素易溶于有机溶剂，不溶于水，不易挥发，对热不稳定。回答下列问题：(1)青蒿素的提取_(填“适宜”或“不宜”)采用水蒸气蒸馏法提取，原因是_。(2)屠呦呦采用乙醚浸提法提取青蒿素，其提取流程与胡萝卜素的提取具有相似之
18、处。在用乙醚浸泡提取前，要对黄花素茎叶进行_和干燥，以提高萃取效率；干燥过程应控制好_和干燥时间，以防止_。(3)青蒿素是从野生植物黄花蒿中提取，曾被世界卫生组织称作是“世界上唯一有效的疟疾治疗药物”，这一实例表明了生物多样性的_价值。青蒿素还对癌细胞的生长具有显著抑制作用，它能诱导多种癌细胞的凋亡。细胞凋亡是由_所决定的细胞_的过程。【答案】(1)不宜青蒿素不易挥发，且对热不稳定(2)粉碎干燥温度青蒿素分解(3)直接基因自动结束生命3回答下列有关泡菜制作的问题： (1)制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是_。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的作用是 _
19、。(2)泡菜制作过程中，乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行_的过程。该过程发生在乳酸菌细胞的_中。(3)泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有_、_和_等。(4)从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸。这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是_，原因是_。【解析】结合泡菜制作过程的相关知识回答问题。(1)制作泡菜时需要先形成无菌环境，所用盐水需煮沸，以杀灭盐水中的杂菌。想要缩短制作时间，应该缩短菌株的生长时间，陈泡菜液中含有一定量的乳酸菌，这样菌体数量扩增速度会加快。【答案】(1)杀灭杂菌增加乳酸菌数量(2)无氧呼吸细胞质(3)温度腌制时间食盐用量(4)乳酸菌数量增多，杂菌数量减少
20、乳酸菌比杂菌更为耐酸4利用紫外线诱变选育高产胡萝卜素的三孢布拉霉负菌，未突变菌不能在含有一定浓度的紫罗酮的培养基上生长，菌体随胡萝卜素含量增加从黄色加深至3橙红色。图甲为选育及提取获得胡萝卜素流程，请回答下列问题：图甲图乙(1)用紫外线照射三孢布拉霉负菌的目的是_。为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加_，在接入菌种前，应对培养基进行_，以避免杂菌污染。(2)某同学进行正确的接种操作后，平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_(填“稀释涂布平板法”或“平板划线法”)；由于_，所以培养基上只有少数菌能生长形成菌落。(3)进行过程时，应选取_色的菌落接种至液体培养基。过程是_，用纸层
21、析法鉴定提取的胡萝卜素粗品。(4)将萃取的胡萝卜素样品与胡萝卜素标准样品层析后进行比对，结果如图，从图中分析可知，色带_为胡萝卜素。 (4)分析图示可知，通过与标准样品层析结果对比可判断色带为胡萝卜素。【答案】(1)诱导其发生基因突变一定浓度的紫罗酮高压蒸汽灭菌(2)稀释涂布平板法基因突变频率低，只有少数基因突变的菌才能生长、繁殖(3)橙红浓缩(4)5薄荷叶富含维生素、蛋白质和薄荷油，具有疏散风热、清利咽喉、消炎镇痛的作用。请回答下列问题：(1)植物芳香油的提取方法有蒸馏法、压榨法和_等。提取薄荷油可以用水蒸气蒸馏法，该方法能利用水蒸气将_的薄荷油携带出来。(2)在提取薄荷油的过程中，向得到的
22、油水混合物加入NaCl后，薄荷油将分布于液体的_(填“上层”或“下层”)，然后用_将这两层分开。分离得到的薄荷油油层中含有一定量的水分，可用_吸水。(3)可用植物组织培养的方法对薄荷进行扩大培养，在接种前工作台需用_擦拭一遍。之后所有的接种操作都必须在_旁进行。培养基中的生长素用量与细胞分裂素用量的比值_(填“低”“高”或“相当”)时，有利于芽的分化。【解析】(1)植物芳香油的提取方法有蒸馏法、压榨法和萃取法等。薄荷油具有挥发性强的特点，可用水蒸气蒸馏法提取。(2)在提取薄荷油的过程中，向得到的油水混合物加入NaCl后薄荷油将分布在上层。可用分液漏斗将两层分开。用无水Na2SO4将薄荷油中的水
23、除去。(3)接种前工作台需用体积分数70%的酒精擦拭一遍，接种操作需要在酒精灯火焰旁进行。培养基中生长素用量与细胞分裂素用量的比值低，有利于芽的分化。【答案】(1)萃取法挥发性较强(2)上层分液漏斗无水Na2SO4(3)体积分数70%的酒精酒精灯火焰低6牛奶中富含蛋白质，长期饮用有助于增强体质，但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30 000个。以下是牛奶消毒及细菌检测实验。(1)图中步骤称为_消毒法。步骤是_。(2)培养基中的蛋白胨可以为微生物提供_。进行步骤操作时，应选用下列中的哪种工具？_。为了避免杂菌污染，此步骤应在_附近进行。(3)将接种后的培养基和作为
24、对照的_同时放入37 恒温培养箱中，培养36小时。取出后统计各平板的菌落数，结果如下表所示。应该选择其中稀释倍数为_的平板进行计数，经过消毒后的牛奶中，细菌数大约是_/mL。牛奶稀释倍数102105104平板1菌落数87101平板2菌落数83121平板3菌落数85100【答案】(1)巴氏系列稀释(或梯度稀释)(2)碳源、氮源(和维生素)B酒精灯火焰(3)一个未接种的培养基1028 500个7红方是腐乳的一种。请回答与其制作有关的问题： (1)补充制作红方的实验流程：_加盐腌制_密封腌制。(2)在实验流程中，首先将豆腐块平放在笼屉内，笼屉中的温度应控制在_ ，并保持在一定的_。5天后豆腐块表面布
25、满毛霉菌丝，这些毛霉来自空气中的_。(3)在实验流程操作中，向长满毛霉的豆腐块加盐，其作用是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬。同时，盐还能_，避免豆腐块腐败变质。(4)在实验流程用到的辅料中，卤汤是由_及各种_配制而成的。此外，红方因加入了_而呈深红色。 (3)加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期的制作过程中不会过早酥烂。同时，盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。(4)卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的，红方因加入红曲而呈深红色。【答案】(1)豆腐上长出毛霉加卤汤装瓶(2)1518湿度毛霉孢子(3)抑制微生物的生长(4)酒香辛料红曲8蓝莓富含花青素等营养成分，具有保护视力、软化血管、增强人体免疫力等功能。某同学尝试用蓝莓来制作蓝莓果酒和蓝莓果醋。(1)制酒中利用的微生物是_，取样后可用_观察该微生物。发酵时一般要先通气，通气的目的是_。制酒过程中可在酸性条件下用橙色的重铬酸钾检验酒精的存在，检验后颜色变成_。(2)酿制成功的蓝莓果酒如果暴露在空气中酒味会逐渐消失而出现醋酸味，尤其是气温高的夏天更易如此，分析其原因是_。醋酸菌将乙醇变为醋酸的
